李軍擴(kuò)楊海軍張靜芳

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Ki-67和p53在三陰乳腺癌中的表達(dá)及意義

李軍擴(kuò)①楊海軍①張靜芳①

【摘要】目的：探討三陰性乳腺癌患者Ki-67和p53表達(dá)的臨床病理特征。方法：采用免疫組織化學(xué)染色法檢測(cè)111例三陰性乳腺癌（TNBC）組織和111例非三陰性乳腺癌（NTNBC）組織中Ki-67和p53的表達(dá)情況，分析其與各臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果：TNBC組Ki-67的陽性表達(dá)率高于NTNBC組，Ki-67強(qiáng)陽性表達(dá)患者明顯多于NTNBC組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；兩組p53表達(dá)情況比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；不同年齡、腫瘤大小、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的患者Ki-67、p53表達(dá)情況比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；不同病理組織類型患者的Ki-67表達(dá)情況比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），而p53表達(dá)情況比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；伴髓樣特征的癌Ki-67強(qiáng)陽性表達(dá)率高于非特殊型浸潤性癌及其他類型癌，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論：Ki-67在TNBC中呈明顯高表達(dá)，在TNBC中Ki-67表達(dá)與病理組織類型相關(guān)。

【關(guān)鍵詞】三陰性乳腺癌； Ki-67； p53

①河南省安陽市腫瘤醫(yī)院 河南 安陽 455000

First-author’s address：The Cancer Hospital of Anyang City，Anyang 455000，China

三陰乳腺癌（TNBC）是指經(jīng)過免疫組化檢測(cè)雌激素受體（estrogen receptor，ER）、孕激素受體（progesterone receptor，PR）、人表皮生長因子受體2 （human epidermal growth factor receptor 2，HER-2）均為陰性的乳腺癌，占乳腺癌的10％～15％[1-2]。臨床表現(xiàn)為腫物生長快、侵襲性強(qiáng)、復(fù)發(fā)率高、預(yù)后差等特點(diǎn)。Ki-67抗原作為評(píng)估細(xì)胞增殖活性的標(biāo)志物，與乳腺癌分化程度、浸潤和轉(zhuǎn)移等相關(guān)[3]。 p53是一種抑癌基因，是細(xì)胞增殖和分化的重要調(diào)控因子，與乳腺癌的發(fā)生和發(fā)展有著重要的聯(lián)系。Ki-67、p53的表達(dá)與TNBC臨床病理特點(diǎn)三者之間的關(guān)系還不明確，本研究運(yùn)用免疫組化方法檢測(cè)p53 和Ki-67在三陰性乳腺癌中的表達(dá)情況并探討其與三陰性乳腺癌臨床病理特征的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料 選取2012年6月-2014年4月行乳腺癌根治術(shù)或保乳根治術(shù)的資料完整的三陰性乳腺癌患者111例作為TNBC組，隨機(jī)選取同期非三陰性乳腺癌（NTNBC）患者111例作為NTNBC組。所有患者術(shù)前均無化療、放療及內(nèi)分泌治療史，均經(jīng)病理檢查確診。術(shù)后根據(jù)實(shí)際情況均進(jìn)行輔助放化療，療程一般為4～8個(gè)周期。

1.2方法 Ki-67與p53表達(dá)情況采用免疫組化法測(cè)定，試劑為福州邁新生物制劑有限公司工作試劑，所有標(biāo)本均經(jīng)4％中性甲醛固定，徠卡自動(dòng)免疫組化機(jī)染色。染色結(jié)果判讀：Ki-67與p53陽性均定位于細(xì)胞核，癌細(xì)胞核中出現(xiàn)棕黃色顆粒即為陽性細(xì)胞。計(jì)算Ki-67高倍視野，隨機(jī)計(jì)數(shù)1000個(gè)腫瘤細(xì)胞中的陽性細(xì)胞所占比例，將結(jié)果分為4個(gè)等級(jí)，即陽性細(xì)胞＜5％（-）、5％～25％（＋）、36％～50％（＋＋）、＞50％（＋＋＋），以陽性細(xì)胞＞50％為強(qiáng)陽性表達(dá)；p53陽性細(xì)胞數(shù)＞10％定義為p53陽性。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料比較采用 χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1兩組Ki-67、p53表達(dá)情況比較 Ki-67在TNBC組中的陽性表達(dá)率為97.30％（108/111），高于Ki-67在NTNBC組中的陽性表達(dá)率84.68％ （94/111），比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；TNBC組Ki-67強(qiáng)陽性表達(dá)患者明顯多于NTNBC組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ χ2＝42.466，P＜0.01）；兩組p53表達(dá)情況比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ χ2＝2.206，P＞0.05），見表1。

表1　兩組Ki-67、p53表達(dá)情況比較　例

2.2Ki-67、p53與各臨床病理特征的關(guān)系 不同年齡、腫瘤大小、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況的患者Ki-67、p53表達(dá)情況比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；不同病理組織類型患者的Ki-67表達(dá)情況比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），而p53表達(dá)情況比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；伴髓樣特征的癌Ki-67強(qiáng)陽性表達(dá)率高于非特殊型浸潤性癌及其他類型癌，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2　111例TNBC患者臨床病理指標(biāo)與Ki-67及p53表達(dá)的關(guān)系　例

3　討論

作為特殊類型的TNBC由于惡性度高、預(yù)后差的特點(diǎn)引起了越來越多的研究者注意，也是目前乳腺癌研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。隨著對(duì)乳腺癌認(rèn)識(shí)的深入，從臨床、病理到分子生物學(xué)表現(xiàn)都顯示出其獨(dú)特的特點(diǎn)，根據(jù)免疫組化特征可將乳腺癌分為多種病理亞型，其中ER、PR及HER-2均為陰性的乳腺癌稱為TNBC[4-7]。TNBC具有發(fā)病年齡較輕，腫瘤侵襲性強(qiáng)，易于局部復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移，預(yù)后較差等特點(diǎn)。

Ki-67是存在于增殖胞核的一種核蛋白，其基因定位于第10號(hào)染色體長臂2區(qū)5帶，有長型和短型2個(gè)亞型。其功能與有絲分裂密切相關(guān)，Ki-67抗原能夠反映細(xì)胞群體增殖活性，陽性表達(dá)說明癌細(xì)胞增殖活躍。Ki-67表達(dá)的高低對(duì)評(píng)價(jià)細(xì)胞的增殖狀態(tài)、研究腫瘤的生物學(xué)行為及判斷預(yù)后具有重要意義[8-10]。

p53是一種抑癌基因，是迄今發(fā)現(xiàn)的與人類腫瘤關(guān)系最密切的基因，它位于17號(hào)染色體短臂，是細(xì)胞增殖和分化的重要調(diào)控因子，野生型p53在細(xì)胞周期的G1期參與重要的調(diào)控，可以保護(hù)細(xì)胞DNA免受射線和藥物的攻擊，并通過抑制增殖和促進(jìn)凋亡來保持細(xì)胞正常生長[11]。

本研究中Ki-67在TNBC組中的陽性表達(dá)率高于NTNBC組，TNBC組Ki-67強(qiáng)陽性表達(dá)患者明顯多于NTNBC組，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），說明Ki-67在TNBC中呈高表達(dá)狀態(tài)，提示TNBC腫瘤增殖活性更高，可能有更高的侵襲性生物學(xué)行為。

目前普遍認(rèn)為乳腺癌中Ki-67高表達(dá)的患者預(yù)后更差[12]。但乳腺癌患者的臨床病理特征之間的相關(guān)性研究方面，文獻(xiàn)報(bào)道存在爭議。有報(bào)道認(rèn)為乳腺癌中Ki-67表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER、PR表達(dá)、組織學(xué)分級(jí)、腫物大小及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目有關(guān)，與患者的年齡、臨床分期無相關(guān)性[13-14]。本研究結(jié)果顯示Ki-67的表達(dá)與TNBC患者的年齡、腫物大小、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)（P＞0.05）；與TNBC的病理類型相關(guān)（P＜0.05），伴髓樣特征的癌Ki-67強(qiáng)陽性表達(dá)率高于非特殊型浸潤性癌及其他類型癌，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。伴髓樣特征的癌病理形態(tài)特點(diǎn)為瘤細(xì)胞彌漫片狀分布、細(xì)胞體積大、異型明顯、核分裂多見、伴間質(zhì)淋巴細(xì)胞浸潤。

本研究顯示不同年齡、腫瘤大小、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況及病理組織類型的患者p53表達(dá)情況比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），此外本研究中p53在三陰性與非三陰性乳腺癌中表達(dá)情況比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），說明p53在鑒別、判定TNBC與NTNBC方面作用有限。有研究結(jié)果顯示p53在TNBC中表達(dá)高于NTNBC，p53可以作為TNBC患者無瘤生存率的獨(dú)立預(yù)后因素[15]。p53在鑒別、判定TNBC與NTNBC方面的作用可以通過在后續(xù)的研究中擴(kuò)大樣本數(shù)量進(jìn)一步驗(yàn)證，p53與患者的預(yù)后關(guān)系也將在后續(xù)的研究中繼續(xù)。

有研究通過對(duì)乳腺癌基因表達(dá)譜分析將乳腺癌分為5個(gè)亞型：其中基底細(xì)胞樣型起源于導(dǎo)管基底層細(xì)胞，并且ER、PR、HER-2均表達(dá)缺失，與絕大多數(shù)TNBC的基因表達(dá)特征相同[16]。分子檢測(cè)技術(shù)的不斷成熟，為深入對(duì)TNBC的研究提供了更多幫助。

參考文獻(xiàn)

[1] Perou C M，Sorlie T，Eisen M B，et al.Molecular portraits of human breast tumours[J].Nature，2000，406（6797）：747-752.

[2] Sorlie T，Tibshirani R，Parker J，et al.Repeated observation of breast tumour subtypes in independent gene expression data sets[J]. Proc Natl Acad Sci USA，2003，100（14）：8418-8423.

[3] Kabawat S E，Bast R C Jr，Bhan A K，et al.Tissua distribution of a coelomic epithelial-related antigen recognized by the monoclonal antibody OC125[J].Int J Gynecol Pathol，1983，2（3）：275-285.

[4] Vrdojak E，Mise B P，Luki B，et al.Long-lasting control of triple-negative metastatic breast cancer with the novel drug combination ixabepilone and capecitabine-case report[J]. Onkologie，2010，33（1-2）：53-56.

[5]李曉青，馮玉梅.基于多基因表達(dá)水平的乳腺癌預(yù)后預(yù)測(cè)研究進(jìn)展[J].中國腫瘤臨床，2013，40（13）：807-810，814.

[6] Wojcinski S，Soliman A A，Schmidt J，et al.Sonographic features of triple-negative and non-triple-negative breast cancer[J].Ultrasound Med，2012，31（10）：1531-1541.

[7]張萍，徐兵河，馬飛，等.晚期三陰性乳腺癌的臨床特征及生存分析[J].中華腫瘤雜志，2011，33（5）：381-384.

[8]李寶江，朱志華，王軍業(yè)，等.Ki-67、P53、VEGF和C-erbB-2在乳腺癌組織中表達(dá)的相關(guān)性研究及其臨床意義[J].癌癥，2004，23（10）：1176-1179.

[9]蘇書娟.EGFR和VEGF在三陰乳腺癌中的表達(dá)及意義[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2012，9（33）：8-10.

[10]羅湘，史艷俠，李志銘，等.三陰乳腺癌的臨床病理特征和預(yù)后分析[J].中國癌癥雜志，2009，19（7）：517-522.

[11] Bidard F C，Matthieu M C，Chollet P，et al.p53 status and efficacy of primary anthracyclines/alkylating agent-based regimen according to breast cancer molecular classes[J].Ann Oncol，2008，19（7）：1261-1265.

[12] Weikel W，Brumm C，Wiikens C，et al.Growth fractions （Ki-67）in primary breast cancers，with particular reference to nodenegative tumors[J].Cancer Detect Prev，1995，19（5）：446-450.

[13] Mohno A，Pedersini R，Mieeialo R，et al.Relationship between the thymidine labeling and Ki-67 proliferative indices in 126 breast cancer patients[J].Appl Immunohistochem Mol Morhol，2002，10（4）：304-309.

[14]何振宇，李彪，胡英，等.Ki-67在乳腺癌組織中的表達(dá)及臨床病理分析[J].中國初級(jí)衛(wèi)生保健，2005，19（12）：94-95.

[15]張勤，劉紅.P53在三陰性乳腺癌中的表達(dá)及臨床意義[J].中國腫瘤臨床，2011，38（4）：214-217.

[16] Rhee J，Han S W，Oh D Y，et al.The clinicopathologic characteristics and prognostic significance of triple-negativity in node-negative breast cancer[J].BMC Cancer，2008，8（5）：307.

Expression and Significance of Ki-67 and p53 in Triple Negative Breast Cancer

/LI Jun-kuo，YANG Hai-jun，ZHANG Jing-fang.//Medical Innovation of China，2016，13（02）：012-014

【Abstract】Objective：To investigate the clinicopathologic feature of Ki-67 and p53 expressions in patients with triple negative breast cancer（TNBC）.Method：Ki-67 and p53 expressions of breast cancer samples collected from 111 cases of breast cancer and 111 cases of non-triple-negative breast cancer were detected by immunohistochemical staining.Result：The positive expression rate of Ki-67 in the TNBC group was higher than that in the NTNBC group，the number of patients with strongly positive expression of Ki-67 in the TNBC group was more than that in the NTNBC group，the differences were statistically significant（P＜0.01）.The difference in p53 expression of the two groups were not statistically significant（P＞0.05）.The differences in the expression situation of Ki-67 and p53 in different ages，different tumor sizes，different TNM stages，different situation of lymphatic metastasis were not statistically significant（P＞0.05）.The expression situation of Ki-67 in different nosology types was statistically significant（P＜0.01）.The difference in the expression situation of p53 in different nosology types was not statistically significant（P＞0.05）.The strongly positive expression rate of Ki-67 in medullary carcinoma was higher than non-special type invasive carcinoma and other types of cancer，the differences were statistically significant（P＜0.05）.Conclusion：Ki-67 is highly expressed in TNBC and its expression is closely related with histological types.

【Key words】Triple negative breast cancer（TNBC）； Ki-67； p53

收稿日期：（2015-06-18） （本文編輯：王利）

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2016.02.004

通信作者：楊海軍