唐瑋瑋，林玉才，盧延旭（.廈門市公安局刑偵支隊(duì)，福建廈門3600；.中國刑事警察學(xué)院法醫(yī)學(xué)系，遼寧沈陽0854）

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甲維鹽中毒死亡小鼠體內(nèi)的分布及死后再分布

唐瑋瑋1，林玉才1，盧延旭2
（1.廈門市公安局刑偵支隊(duì)，福建廈門361001；2.中國刑事警察學(xué)院法醫(yī)學(xué)系，遼寧沈陽110854）

摘要：目的研究甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（簡稱甲維鹽）中毒死亡小鼠的致死血濃度、靶器官組織、毒物蓄積庫和死后毒物再分布的特征。方法采用灌胃法建立中毒小鼠模型，動(dòng)態(tài)觀察急性中毒組、亞急性中毒組小鼠的主要中毒癥狀和臨床死亡時(shí)間。觀察中毒死后小鼠各器官組織病理形態(tài)學(xué)改變，應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測定死后0、24、48、72h甲維鹽體內(nèi)分布及死后再分布，采用高效液相色譜法測定中毒小鼠的致死血濃度和死后各時(shí)間點(diǎn)的血中甲維鹽濃度。結(jié)果中毒小鼠均在灌胃后15～30min內(nèi)依次出現(xiàn)神經(jīng)、呼吸系統(tǒng)癥狀。急性中毒組小鼠的臨床死亡時(shí)間為（45.8±7.9）min，亞急性中毒組為（8.0±1.4）d。甲維鹽的急性致死血濃度范圍為447.1640～524.4635mg/L。光鏡及熒光顯微鏡下各器官組織均見明顯的病理改變；小鼠中毒死后72h內(nèi)，血、心、肝、脾、肺、腎及腦甲維鹽濃度變化具有規(guī)律性（P＜0.05）。結(jié)論甲維鹽中毒作用的主要靶器官為心、肝、腎、肺、腦和接觸部位（胃），其主要蓄積庫為腎、肝，甲維鹽在小鼠體內(nèi)存在死后再分布現(xiàn)象。

關(guān)鍵詞：法醫(yī)病理學(xué)；法醫(yī)毒理學(xué)；中毒；甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽；死后再分布；小鼠

甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽（簡稱甲維鹽）是阿維菌素的甲氨基化產(chǎn)物，是繼有機(jī)磷酸酯類、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類和新煙堿類殺蟲劑之后的第五代抗生素類殺蟲劑[1]。

近年來各地陸續(xù)出現(xiàn)甲維鹽引起人畜急性中毒的資料報(bào)告[2－3]，給公安系統(tǒng)法醫(yī)辦理此類中毒案件帶來了新的課題。為了協(xié)助公、檢、法、司等系統(tǒng)法醫(yī)積極做好相關(guān)案件的檢驗(yàn)與鑒定工作，本實(shí)驗(yàn)以小鼠為動(dòng)物模型，通過病理組織形態(tài)學(xué)觀察，結(jié)合免疫熒光、免疫組織化學(xué)技術(shù)和高效液相色譜法（HPLC），系統(tǒng)研究甲維鹽中毒死亡后的靶器官、靶組織、毒物蓄積庫、致死血濃度和死后毒物分布與再分布的特點(diǎn)，初步探討甲維鹽的毒理作用及其體內(nèi)分布與死后再分布的基本規(guī)律和特征，為甲維鹽中毒案件的法醫(yī)學(xué)鑒定提供理論與實(shí)驗(yàn)依據(jù)，同時(shí)為探討此類抗生物類殺蟲劑人類中毒死亡的法醫(yī)學(xué)與毒物分析檢驗(yàn)鑒定提供參考資料。

1材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料與分組

選擇體質(zhì)量18～22 g的清潔遠(yuǎn)交系昆明種小鼠（由中國醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供）120只，隨機(jī)分為12組，每組10只：取3組進(jìn)行中毒癥狀和臨床死亡時(shí)間觀察，分別為正常對(duì)照組、急性中毒組、亞急性中毒組；取4組（不同灌胃劑量）進(jìn)行致死血濃度測定；取5組進(jìn)行體內(nèi)分布及死后再分布檢測，分別為正常對(duì)照組、死后0h組、死后24h組、死后48h組、死后72h組。

甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽原藥，純度≥99.99%，購于上海安譜科學(xué)儀器有限公司；3.2%甲氨基阿維菌素乳油劑（沈陽化工研究院）；熒光抗體（抗體二）液（丹麥DAKO公司）；酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（含抗體一，中國農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)藥研究所）。

D-7000高效液相分析色譜儀（日本HITACHI公司），RF-540型熒光顯微鏡（日本島津產(chǎn)品公司），Bio-Rad550型酶聯(lián)免疫檢測儀（美國Bio-Rad公司）。

1.2中毒癥狀和死亡時(shí)間的觀察

取正常對(duì)照組、急性中毒組、亞急性中毒組小鼠，急性中毒組按照157.4mg/kg（雌雄小鼠灌胃LD50均值109.3 mg/kg，1.44倍LD50劑量接近100%致死量[4]）一次性灌胃給藥；亞急性中毒組采用56 mg/kg （0.512倍LD50劑量，按劑量遞增中毒系數(shù)推算[5]）每日灌胃一次，直至死亡。給藥容積0.4mL/20g。所有小鼠中毒后均動(dòng)態(tài)觀察，記錄死亡時(shí)間。正常對(duì)照組小鼠斷頸處死。

1.3組織病理形態(tài)學(xué)觀察

取正常對(duì)照組、急性中毒組和亞急性中毒組小鼠，實(shí)驗(yàn)小鼠中毒死亡后，迅速解剖小鼠心、肝、脾、肺、腎、腦及胃組織，2.5%甲醛溶液固定12～24 h，70%、80%、90%、95%、100%系列梯度乙醇溶液脫水，每種乙醇溶液浸泡1次，每次4～6h，二甲苯透明，石蠟包埋，切片，常規(guī)HE染色，光鏡下觀察。

1.4免疫熒光染色

取急性中毒組和正常對(duì)照組小鼠心、肝、脾、肺、腎、腦，立即置入-20℃恒冷切片機(jī)，制成5 μm冰凍切片，切片后標(biāo)本置于4℃丙酮溶液固定10min，PBS溶液（pH=7.4）沖洗，5min×3次，被檢標(biāo)本滴加未標(biāo)記的抗體液（抗體一），并將其放入帶有濕紗布的搪瓷盒中，在37℃下作用30 min，傾去作用液，PBS溶液沖洗，5min×3次，標(biāo)本滴加熒光抗體（抗體Ⅱ）液，再放入濕搪瓷盒中，在37℃下作用30 min，傾去作用液，PBS溶液沖洗，5 min×3次，標(biāo)本晾干，熒光顯微鏡下觀察。

1.5致死血濃度測定

根據(jù)毒理學(xué)方法，最小致死量小鼠以0.512倍LD50劑量（56 mg/kg）遞增（公比1.25）開始灌胃，設(shè)56.0、70.0、87.5和109.4 mg/kg 4個(gè)灌胃給藥組，給藥容積0.4mL/20g。取各組中甲維鹽中毒死亡小鼠，頸動(dòng)脈采血，HPLC測定甲維鹽的致死血濃度范圍。

1.6 HPLC檢測血中甲維鹽質(zhì)量濃度[6]

1.6.1樣品采集和檢材處理

體內(nèi)分布及死后再分布檢測實(shí)驗(yàn)中的每只小鼠采頸動(dòng)脈血1 mL（采血不足1 mL的小鼠，取四肢血補(bǔ)充至1mL），加2mL甲醇，渦旋混合，15℃下，以離心半徑6.0 cm，8 000 r/min，離心10 min，取上清液過有機(jī)系微孔濾膜，進(jìn)樣20 μL供HPLC檢驗(yàn)，每個(gè)檢材在12h內(nèi)完成檢測。

1.6.2標(biāo)準(zhǔn)溶液和血樣本溶液配制及處理

精密稱取甲維鹽標(biāo)準(zhǔn)品50mg，置于50mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，從此溶液中分別吸取6、4、3、2、1mL濃度溶液于5個(gè)10mL容量瓶中，依次分別加入4、6、7、8、9 mL甲醇溶液，得到溶液終質(zhì)量濃度依次為0.6、0.4、0.3、0.2、0.1 mg/mL的甲維鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液。取1mL全血，加甲維鹽樣本標(biāo)準(zhǔn)溶液，配制成終質(zhì)量濃度依次為6、10、20、30、60、100 μg/mL的血添加樣本溶液。依照樣本提取方法提取血添加樣本溶液。

1.6.3色譜條件

色譜柱：25 cm×4.6 mm不銹鋼柱，內(nèi)填Kromasil C18；粒徑：5 μm；檢測波長：245 nm；柱溫：29℃；流動(dòng)相：V（甲醇）∶V（水）=92∶8；流速：1.0 mL/min；量程：0.04 AUFS；進(jìn)樣量：20μL。

1.7酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測定體內(nèi)分布及死后再分布

取5組進(jìn)行體內(nèi)分布及死后再分布檢測，按急性中毒（157.4mg/kg）一次性灌胃給藥。取急性中毒死后0、24、48、72h小鼠心、肝、脾、肺、腎、腦，均質(zhì)器均漿組織樣本，稱取1.0 g（精確至0.01 g）均質(zhì)物至10 mL聚苯乙烯離心管中，加入6mL甲醇，渦旋振動(dòng)10min，15℃下，以離心半徑6cm，4000r/min，離心10min；取上清液移至10mL玻璃試管中，于50～60℃水浴氮?dú)饬飨麓蹈桑蝗?mL復(fù)溶工作液溶解干燥的殘留物，用渦動(dòng)儀渦動(dòng)1min，超聲波溶解10min，再渦動(dòng)1min；取20μL用于分析。

將酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒內(nèi)試劑置于室溫平衡30min以上，將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔編號(hào)記錄。在酶標(biāo)板中分別加入20 μL不同濃度的甲維鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液和樣品待測液，在每個(gè)孔中加入80μL抗體工作液，輕拍混勻，用蓋板膜蓋板后，置培養(yǎng)箱中37℃避光反應(yīng)30min。揭開蓋板膜，棄掉酶標(biāo)板孔中的液體，用洗滌液250 μL/孔，充分洗板4～5次，最后一次用吸水紙拍干。加入酶標(biāo)二抗100 μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置溫育培養(yǎng)箱中37℃避光反應(yīng)30min，取出棄掉酶標(biāo)板中液體，用洗滌液250 μL/孔洗板4～5次，加入底物液A 50μL/孔，再加入底物液B 50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板置37℃避光環(huán)境中顯色15min。每孔加入50μL的終止液，輕輕振蕩混勻，設(shè)定酶聯(lián)免疫檢測儀于波長450nm/630nm處檢測，在5 min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)，測定光密度值。用樣本的平均光密度值與標(biāo)準(zhǔn)品光密度值計(jì)算樣本實(shí)際濃度。

1.8統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 12.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，定量和半定量指標(biāo)采用多重比較與方差齊性檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)采用x±s表示，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2結(jié)　果

2.1甲維鹽中毒小鼠的癥狀和臨床死亡時(shí)間

2.1.1中毒癥狀

急性中毒組小鼠早期表現(xiàn)為自發(fā)活動(dòng)減少、口鼻分泌物增多、收腹、惡心、乏力、肌肉震顫等；15～30min后出現(xiàn)不同程度肌肉震顫、易激惹、躁動(dòng)、呼吸急促、陣發(fā)性抽搐；死亡前均出現(xiàn)陣發(fā)性扭曲性抽搐、昏迷、張口呼吸、面部和眼部節(jié)律性抽動(dòng)、軀體波動(dòng)樣扭曲性痙攣、臀部上翹，軀體向一側(cè)翻轉(zhuǎn)、仰翻位、全身強(qiáng)直性痙攣發(fā)作，隨劑量加大而加重；抽搐期可見驚恐、弓背抬高、尾部及體毛偶有豎立。

亞急性中毒組小鼠早期有食欲減退、運(yùn)動(dòng)減少；3～6d后出現(xiàn)不同程度精神萎靡、被毛蓬松、口鼻有白色分泌物及輕微的肌肉震顫、體質(zhì)量減少等；死亡前均有不同程度的陣發(fā)性抽搐、肌肉震顫、呼吸困難等。2.1.2死亡時(shí)間

急性中毒組（n=10）小鼠均在30～60min內(nèi)死亡，平均（45.8±7.9）min。

亞急性中毒組（n=10）小鼠均在6～10 d內(nèi)死亡，平均（8.0±1.4）d。

2.2組織病理形態(tài)學(xué)表現(xiàn)

中毒小鼠死后即刻進(jìn)行解剖，肉眼觀察中毒死亡小鼠的胃壁變薄、胃黏膜有灰白色假膜形成，局部區(qū)域壞死脫落，肌層可見散在出血點(diǎn)，心、肝、脾、肺、腎和腦輕度淤血、水腫。

光鏡下可見胃黏膜局部壞死、脫落和散在點(diǎn)片狀出血，固有層有少量散在灶狀淋巴細(xì)胞及單核細(xì)胞（圖1A）；心肌細(xì)胞體積增大，心肌纖維增粗，肌束間隙增寬，部分心肌纖維收縮呈波浪樣改變，間質(zhì)內(nèi)小靜脈及毛細(xì)血管高度擴(kuò)張充血，有淋巴細(xì)胞浸潤（圖1B）；肝細(xì)胞腫脹，中央靜脈及肝小葉高度擴(kuò)張充血，部分肝小葉有壞死形成；脾小體增大、白髓增多、紅髓血竇擴(kuò)張充血（圖1C）；肺泡囊及肺泡均膨脹、擴(kuò)張，肺膜下可見多個(gè)灶狀淋巴細(xì)胞浸潤（圖1D）；腎近曲小管管腔變小，遠(yuǎn)曲小管管腔變大，腎小球及間質(zhì)內(nèi)有炎癥細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞浸潤，間質(zhì)及髓質(zhì)內(nèi)血管高度擴(kuò)張充血（圖1E）；腦神經(jīng)細(xì)胞和髓質(zhì)水腫，腦干血管周隙與細(xì)胞周隙增寬。

2.3免疫熒光染色結(jié)果

正常對(duì)照組有少數(shù)細(xì)胞胞核呈微弱綠光，而急性中毒組小鼠熒光染色后鏡下細(xì)胞核呈黃綠色光，部分胞質(zhì)和胞膜少量呈黃綠光。急性中毒組小鼠各器官的熒光強(qiáng)度均高于正常對(duì)照組，其中心、腦、肝的熒光強(qiáng)度較其余器官明顯增高（圖2）。

2.4致死血濃度測定

HPLC測得甲維鹽的致死血濃度范圍為447.1640～524.4635mg/L（n=40）。

2.5各器官甲維鹽含量分布與死后再分布

如表1所示，小鼠急性中毒死后0h甲維鹽含量由高至低依次為：腎、脾、肺、腦、肝、心；死后24 h組由高至低依次為：肝、腦、心、腎、肺、脾；死后48 h組由高至低依次為：腎、肺、肝、腦、脾、心；死后72 h組從高至低依次為：肝、肺、心、腎、腦、脾。

多重方差分析結(jié)果顯示，心臟中甲維鹽含量隨死亡時(shí)間延長而增加，0 h最低，72 h最高（P＜0.05）；肝中甲維鹽含量呈先升高后下降趨勢，24 h達(dá)到最高峰，與0h相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；肺、腎、脾呈先下降再升高趨勢，48h達(dá)最高峰，72h稍下降，與0h相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表1甲維鹽中毒死后72h內(nèi)各器官中甲維鹽含量　?。╪=10，±s，μg/kg）

表1甲維鹽中毒死后72h內(nèi)各器官中甲維鹽含量　?。╪=10，±s，μg/kg）

注：1）與對(duì)照組比較，P＜0.05；2）與死后0h組比較，P＜0.05

組別　心　　肝　　脾　　肺　　腎　　腦正常對(duì)照　0.295±0.015　 0.202±0.006　 0.256±0.012　 0.264±0.010　 0.213±0.012　 0.285±0.018死后0h　 29.222±1.8041）　87.496±5.6151）　98.337±8.2021）　98.053±9.4111）108.199±7.7001）　95.346±6.5291）死后24h　 84.182±5.1131）2）174.821±13.5341）2）30.905±1.2641）2）51.800±2.4411）2）82.891±4.2631）2）110.096±6.6361）2）死后48h　 93.703±4.4661）2）152.132±9.3601）2）98.736±4.7271）2）152.426±8.9591）2）194.407±21.5231）2）110.522±7.3601）2）死后72h 111.378±8.5451）2）136.541±9.3131）2）25.950±0.9911）2）119.857±9.2321）2）88.858±4.7981）2）　61.512±3.5971）2）

2.6小鼠死后72h內(nèi)血中甲維鹽質(zhì)量濃度變化

急性中毒小鼠死后各時(shí)間點(diǎn)血中甲維鹽的質(zhì)量濃度見表2，各樣本中甲維鹽濃度呈先均衡變化后升高趨勢，死后24 h較0 h質(zhì)量濃度稍下降，48 h質(zhì)量濃度達(dá)到最高，72 h又下降，各時(shí)間點(diǎn)血質(zhì)量濃度與死后0h相比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表2急性中毒小鼠死后72h內(nèi)血中甲維鹽質(zhì)量濃度變化　?。╪=10，±s，mg/L）

表2急性中毒小鼠死后72h內(nèi)血中甲維鹽質(zhì)量濃度變化　　（n=10，±s，mg/L）

注：1）與急性中毒死后0h比較，P＜0.05

組別　　死后0h　　死后24h　　死后48h　　死后72h正常對(duì)照　0.006±0.026　0.033±0.017　0.023±0.015　0.019±0.011急性中毒　520.308±2.078　497.588±1.0081）　1483.898±1.9271）　476.193±1.3731）

3討　論

近年來對(duì)死后毒物再分布機(jī)制的研究，主要集中在死后毒物從毒物蓄積庫逐漸釋放擴(kuò)散至周圍組織、死后血液流動(dòng)、生前吸收分布不均、毒物的降解和破壞、微生物的作用以及各種毒物之間的相互作用等方面[7]。死后毒物再分布研究成為毒物學(xué)家及法醫(yī)毒理學(xué)家的一項(xiàng)重點(diǎn)研究課題。根據(jù)甲維鹽的染毒途徑、染毒量、主要中毒癥狀、主要尸檢所見和病理學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果，結(jié)合檢測體液及組織中的甲維鹽濃度進(jìn)行綜合分析，并充分排除機(jī)械性損傷、機(jī)械性窒息、猝死和其他毒（藥）物中毒的可能性，才能夠準(zhǔn)確判定是否為甲維鹽中毒死。因此，深入研究甲維鹽中毒死機(jī)體的致死血濃度、毒物蓄積庫、主要靶器官組織及其死后再分布規(guī)律特征，具有重要的法醫(yī)學(xué)意義。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，血流灌注豐富的器官，甲維鹽含量較高；組織器官的濃度高于血液。影響藥物在機(jī)體中分布的因素很多，如藥物的脂溶性、毛細(xì)血管通透性、器官和組織的血流量、與血漿蛋白和組織蛋白的結(jié)合率等。甲維鹽在腎的蓄積作用，可能與甲維鹽的排泄途徑、與腎的親和力、腎小管的重吸收等因素相關(guān)；甲維鹽主要在肝代謝，所以肝中甲維鹽的濃度較高；甲維鹽具有神經(jīng)毒性，通過增強(qiáng)抑制性神經(jīng)遞質(zhì)如谷氨酸鹽和γ-氨基丁酸（gamma-amino butyric acid，GABA），使大量氯離子進(jìn)入神經(jīng)細(xì)胞，使細(xì)胞功能喪失，最終擾亂正常的神經(jīng)傳導(dǎo)[8]。而人體內(nèi)的GABA主要存在于中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的大腦皮質(zhì)、小腦皮層的浦肯野細(xì)胞、紋狀體和黑質(zhì)纖維中，由于哺乳動(dòng)物對(duì)較低親和力的GABA受體非常不敏感，相對(duì)不易透過血腦屏障，所以這可能是中毒死后即刻檢測腦中含量較低的原因。心臟中甲維鹽殘留濃度隨時(shí)間增長而增加，0 h最低，72 h最高（P＜0.05）；肝中甲維鹽濃度呈0～24 h升高、48～72 h后又下降趨勢，以24 h最高（P＜0.05）；肺、腎、脾、腦均呈先下降再升高趨勢，48 h達(dá)高峰，72 h后再降低（P＜0.05）；血液中甲維鹽濃度于死后48h內(nèi)隨時(shí)間延長呈上升趨勢，48h達(dá)到最高（P＜0.05），接近0h的3倍。由于死后血液流動(dòng)和順濃度梯度擴(kuò)散等作用，肺及心肌中高濃度的甲維鹽可能通過血管內(nèi)流動(dòng)、擴(kuò)散，透過細(xì)胞壁順濃度梯度擴(kuò)散至血液，而導(dǎo)致血液中濃度增高。以上結(jié)果說明，小鼠甲維鹽中毒死亡后，甲維鹽組織器官濃度沒有維持死亡當(dāng)時(shí)的濃度，而是呈動(dòng)態(tài)變化。血液中甲維鹽濃度在死后48h含量比其他時(shí)間點(diǎn)含量高。因此，甲維鹽中毒死后即刻提取腎，死后24h提取肝，死后48h提取肝、腎及血液為最佳毒物分析檢材；甲維鹽在小鼠體內(nèi)存在死后再分布現(xiàn)象，實(shí)驗(yàn)結(jié)果可應(yīng)用于甲維鹽中毒案件的法醫(yī)學(xué)研究。

本實(shí)驗(yàn)研究對(duì)象僅局限于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，未能涉及人類中毒及中毒死亡案例，有待進(jìn)一步開展人類的相關(guān)法醫(yī)毒理學(xué)研究；在實(shí)驗(yàn)方法上尚需引入細(xì)胞培養(yǎng)、基因蛋白表達(dá)、PCR技術(shù)、共聚焦激光掃描顯微鏡等先進(jìn)的技術(shù)手段和儀器設(shè)備，從分子和基因水平全面系統(tǒng)地闡述和完善甲維鹽等抗生素類殺蟲劑的毒理學(xué)作用、作用機(jī)制及主要尸檢特征、體內(nèi)代謝規(guī)律，為客觀、公正地做好今后可能出現(xiàn)的針對(duì)人類甲維鹽中毒死亡案件的現(xiàn)場勘驗(yàn)、法醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)和毒物分析的法醫(yī)學(xué)鑒定提供科學(xué)依據(jù)。

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（本文編輯：劉寧國）

Biodistribution and Postmortem Redistribution of Emamectin Benzoate in Intoxicated Mice

TANG Wei-wei1, LIN Yu-cai1, LU Yan-xu2
（1. Criminal Investigation Detachment, Xiamen Public Security Bureau, Xiamen 361001, China; 2. Department of Forensic Medicine, China Criminal Police College, Shenyang 110854, China）

Abstract：Objective To investigate the lethal blood level, the target organs and tissues, the toxicant storage depots and the postmortem redistribution in mice died of emamectin benzoate poisoning. Methods The mice model of emamectin benzoate poisoning was established via intragastric injection. The main poisoning symptoms and the clinical death times of mice were observed and recorded dynamically in the acute poisoning group as well as the sub－acute poisoning death group. The pathological and histomorphological changes of organs and tissues were observed after poisoning death. The biodistribution and postmortem redistribution of emamectin benzoate in the organs and tissues of mice were assayed by the enzymelinked immunosorbent assay（ELISA）at 0h, 24h, 48h and 72h after death. The lethal blood concentrations and the concentrations of emamectin benzoate were detected by high performance liquid chromatography（HPLC）at different time points after death. Results The symptoms of nervous and respiratory system were observed within 15－30min after intragastric injection. The average time of death was（45.8± 7.9）min in the acute poisoning group and（8.0±1.4）d in the sub－acute poisoning group, respectively. The range of acute lethal blood level was 447.164 0－524.463 5 mg/L. The pathological changes of the organs and tissues were observed via light microscope and immunofluorescence microscope. The changes of emamectin benzoate content in the blood, heart, liver, spleen, lung, kidney and brain of poisoning mice showed regularity within 72h after death（P＜0.05）. Conclusion The target organs of emamectin benzoate poisoning include heart, liver, kidney, lung, brain and contact position（stomach）. The toxicant storage depots are kidney and liver. There is emamectin benzoate postmortem redistribution in mice.

Key words：forensic pathology; forensic toxicology; poisoning; emamectin benzoate; postmortem redistribution; mice

收稿日期：（2015-10-28）

通信作者：盧延旭，男，教授，博士研究生導(dǎo)師，主要從事法醫(yī)毒理學(xué)研究；E－mail：yanxulu4689@sina.com

項(xiàng)目基金：公安部科技應(yīng)用創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目（2010YYCXXJXY112）

作者簡介：唐瑋瑋（1981—），女，碩士研究生，主要從事法醫(yī)毒理學(xué)研究；E－mail：31314622@qq.com

文章編號(hào)：1004－5619（2016）01－0026－05

中圖分類號(hào)：DF795.1

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

doi：10.3969/j.issn.1004－5619.2016.01.006