李文硯，孔方南，韋 優(yōu)，趙 靜，徐冬英，馬仙花，周 婧

(廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，廣西 龍州 532415)

草莓種子萌發(fā)成苗及高效離體再生體系的建立

李文硯，孔方南，韋 優(yōu)，趙 靜，徐冬英，馬仙花，周 婧*

(廣西南亞熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所，廣西 龍州 532415)

通過研究不同培養(yǎng)方式對(duì)森林草莓種子萌發(fā)成苗的影響及不同基因型“Ruegen”(RE)和“Yellow Wonder”(YW)、不同外植體類型對(duì)離體再生頻率的影響；另以八倍體鳳梨草莓優(yōu)系及2個(gè)鳳梨草莓雜交組合種子建立試管苗無性系為試材，同等培養(yǎng)條件下進(jìn)行葉片離體再生，比較離體再生能力，以篩選離體再生能力高于“全明星”的基因型，優(yōu)化草莓離體再生體系。結(jié)果表明，在相同的水培條件下，RE發(fā)芽率高于YW，但兩者后期成苗速度和成苗質(zhì)量均差異不顯著。葉片的離體再生效率和再生芽數(shù)顯著高于葉柄。兩種基因型RE和YW在相同類型外植體上，其再生效率差異不顯著。篩選出5個(gè)11-3-2、11-4-2、YA-1、SB-8和SB-9等5個(gè)鳳梨草莓基因型的再生能力比均顯著高于離體再生能力高的基因型“全明星”品種，且葉片正面接觸培養(yǎng)基的外植體不定芽再生率和平均再生芽數(shù)均高于背面接觸培養(yǎng)基的外植體。

草莓；種子萌發(fā)；離體再生；高效；體系建立

草莓屬于薔薇科草莓屬，因其果實(shí)味道酸甜、香氣濃郁和顏色艷麗而深受廣大消費(fèi)者的喜愛[1]，具有較高的營養(yǎng)和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。全世界范圍內(nèi)草莓屬植物分布較為廣泛，包括不同倍性的草莓屬約50 個(gè)種，20 個(gè)常見種，我國有著豐富野生草莓資源，約7～9 個(gè)種[2]，在世界上屬于野生草莓種質(zhì)資源最豐富的國家之一[3-4]。

由于草莓的高雜合性和多倍性等特點(diǎn)，其新品種培育存在培育周期長(zhǎng)、效率低下、工作量加大等問題[5]，生產(chǎn)上也仍缺乏抗病蟲、抗逆境等的優(yōu)良品種。國內(nèi)外針對(duì)草莓相繼開展轉(zhuǎn)基因研究的時(shí)間是在20世紀(jì)80年代末[6-12]。James等[13]獲得的第一株草莓轉(zhuǎn)基因植株標(biāo)志草莓基因工程真正開始，隨著研究的不斷深入，多種有價(jià)值的外源目的基因相繼被轉(zhuǎn)入草莓中?；蛐褪怯绊懖葺z傳轉(zhuǎn)化是否成功的關(guān)鍵，廣泛收集草莓品種的不同基因型，探索更有利于草莓遺傳轉(zhuǎn)化的再生條件仍是目前研究熱點(diǎn)[14]。近些年來草莓已經(jīng)成為薔薇科果樹分子生物學(xué)研究的模式植物。建立高效的再生體系是遺傳轉(zhuǎn)化體系的基礎(chǔ)，而高效的遺傳轉(zhuǎn)化體系是基因功能驗(yàn)證的基礎(chǔ)。因此，以二倍體森林草莓(F.vesca)和八倍體鳳梨草莓(F.×ananassa)為試材，篩選離體再生能力強(qiáng)且對(duì)農(nóng)桿菌敏感的基因型，可為草莓功能基因驗(yàn)證提供參考。

1 材料與方法

1.1 植物材料

供試二倍體森林草莓資源RE和YW的自交種子由于沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)果樹分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。用于建立試管苗無性系的八倍體鳳梨草莓共有2個(gè)雜交組合，分別為：SB(甜查理×紅顏)、YA(艷麗×甘王)。鳳梨草莓品種“全明星”和優(yōu)系試管苗由沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)室提供。培養(yǎng)基的配方均由本研究團(tuán)隊(duì)提供。

1.2 森林草莓種子滅菌處理及培養(yǎng)方法

在超凈工作臺(tái)上將保存的草莓種子在75 %酒精中浸泡10 s，用無菌水沖洗1次，用滅菌后的濾紙吸干水分后轉(zhuǎn)入0.1 %的HgCl2中消毒8 min，然后用無菌水沖洗1次，靜置30 min后再用無菌水沖洗3次，每次30 s，最后將種子接種到已滅菌的培養(yǎng)皿中。

森林草莓種子培養(yǎng)方式有3種處理：①無菌水培養(yǎng)：用報(bào)紙將濾紙包好后在121 ℃下滅菌1 h，鋪2 張于培養(yǎng)皿內(nèi)，用無菌水潤(rùn)濕后接種，最后用封口膜把培養(yǎng)皿封上。每個(gè)基因型共接種120粒種子，平均分裝在2個(gè)培養(yǎng)皿中。無菌水培養(yǎng)21 d 后轉(zhuǎn)移至無激素固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)。②無激素固體培養(yǎng)基培養(yǎng)：將種子接種到該培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基成分為：1/2 MS(蔗糖不減半)，每個(gè)培養(yǎng)皿裝有約25 mL 培養(yǎng)基。③有激素固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，培養(yǎng)基成分為：MS+0.2 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1GA3+0.02 mg·L-1IBA。每種方式每個(gè)資源各接種120 粒種子，平均分裝在2個(gè)培養(yǎng)皿中。然后室溫培養(yǎng)。

本試驗(yàn)研究了相同無菌水培養(yǎng)條件下不同的濾紙層厚度(2、3、4和5層)對(duì)RE和YW種子萌發(fā)的影響，每個(gè)處理分別接種30粒種子，培養(yǎng)7和21 d后分別觀察RE和YW發(fā)芽率。

經(jīng)過低溫處理后的鳳梨草莓雜交種子首先在清水中浸種24 h，種子表面消毒后用鋒利的手術(shù)刀片切去部分種皮[15]，然后接種在無激素1/2 MS固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，每個(gè)組合各接種約150粒種子。7～14 d出芽后轉(zhuǎn)移至分化培養(yǎng)基 (MS+0.5 mg·L-16-BA + 0.2 mg·L-1GA3)上培養(yǎng)。之后再轉(zhuǎn)移至繼代培養(yǎng)基(MS+0.2 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1GA3+0.02 mg·L-1IBA)中培養(yǎng)。

1.3 草莓離體再生試驗(yàn)方法

1.3.1 森林草莓離體再生試驗(yàn) 外植體類型比較研究。以森林草莓RE為試材，在同一種再生培養(yǎng)基(MS+2.0 mg·L-1TDZ+0.2 mg·L-1IBA)、同樣培養(yǎng)條件下分析比較了葉片和葉柄的離體再生效率，不同類型外植體分別接2個(gè)培養(yǎng)皿，每個(gè)培養(yǎng)皿接種30個(gè)外植體，接種后8周調(diào)查再生率和平均再生芽數(shù)。

基因型比較研究。以2個(gè)基因型RE和YW為試材，在同一種再生培養(yǎng)基(MS+2.0 mg·L-1TDZ+0.2 mg·L-1IBA)、同樣培養(yǎng)條件下分析比較了葉片和葉柄的離體再生效率，接種后8周調(diào)查再生率和平均再生芽數(shù)。

1.3.2 具有高離體再生能力的八倍體鳳梨草莓基因型的篩選 鳳梨草莓優(yōu)系葉片離體再生能力的比較研究。以實(shí)驗(yàn)室保存的鳳梨草莓品種/優(yōu)系為試材，在同一種再生培養(yǎng)基(MS+2.0 mg·L-1TDZ+0.2 mg·L-1IBA)、同樣培養(yǎng)條件下進(jìn)行葉片離體再生培養(yǎng)，每份試材各接種60個(gè)外植體，平均分裝在2個(gè)培養(yǎng)皿中。接種8周后調(diào)查再生率和平均再生芽數(shù)。

鳳梨草莓試管苗無性系葉片離體再生能力的比較研究。以2個(gè)鳳梨草莓雜交組合種子為試材，首先在無激素的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，7～14 d后將萌發(fā)的小苗轉(zhuǎn)移至分化培養(yǎng)基上培養(yǎng)。2周后從每個(gè)雜交組合中挑選9株生長(zhǎng)健壯的單株，建立試管苗無性系。再以建立的鳳梨草莓無性系為試材，在同一種再生培養(yǎng)基(MS+2.0 mg·L-1TDZ+0.2 mg·L-1IBA)、同樣培養(yǎng)條件下進(jìn)行葉片離體再生培養(yǎng)，每份試材接種60個(gè)外植體，平均分裝在2個(gè)培養(yǎng)皿中。接種8周后調(diào)查再生率和平均再生芽數(shù)。

不同鳳梨草莓基因型葉片離體再生能力的比較研究。將篩選出的具有高離體再生能力的鳳梨草莓基因型與鳳梨草莓品種“全明星”(CK)進(jìn)行對(duì)比分析離體再生能力。

1.3.3 不同放置方式對(duì)葉片離體再生能力的比較研究 以鳳梨草莓為試材，在同一種再生培養(yǎng)基(MS+2.0 mg·L-1TDZ+0.2 mg·L-1IBA)、同樣培養(yǎng)條件下，分別采取葉片正面接觸培養(yǎng)基和葉片背面接觸培養(yǎng)基兩種方式培養(yǎng)。每種放置方式各接種60個(gè)外植體，平均分裝在2個(gè)培養(yǎng)皿中。接種8周后調(diào)查再生率和平均再生芽數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及計(jì)算方法

種子發(fā)芽率( %)=發(fā)芽種子粒數(shù)/培養(yǎng)種子總粒數(shù)×100

離體再生試驗(yàn)中外植體轉(zhuǎn)入草莓再生培養(yǎng)基8周后調(diào)查再生芽狀況，統(tǒng)計(jì)高度在 2 mm以上的再生芽，并計(jì)算再生效率和平均再生芽數(shù)。

再生效率( %)=再生芽的外植體數(shù)/調(diào)查外植體數(shù)×100

平均再生芽數(shù)=再生芽總數(shù)/再生芽的外植體數(shù)

分化率( %)= 出芽的外植體數(shù)/接種外植體數(shù)×100

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用 SPSS 17.0 等軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 二倍體森林草莓離體再生體系的建立

2.1.1 不同因素對(duì)二倍體森林草莓種子萌發(fā)成苗的影響 培養(yǎng)方式和基因型對(duì)種子發(fā)芽成苗的影響。選取成熟飽滿的二倍體森林草莓RE和YW的種子，消毒后分別進(jìn)行無菌水培養(yǎng)、無激素固體培養(yǎng)基培養(yǎng)和有激素固體培養(yǎng)基。接種7 d后，在無菌水上培養(yǎng)的種子首先發(fā)芽，培養(yǎng)21 d 后，RE種子的發(fā)芽率為76.7 %，YW的發(fā)芽率為70.0 %；在無激素培養(yǎng)基上的種子發(fā)芽較慢，培養(yǎng)21 d后，RE種子的發(fā)芽率為36.7 %，YW的發(fā)芽率為33.3 %；在有激素培養(yǎng)基上培養(yǎng)的種子發(fā)芽最慢，萌發(fā)所需時(shí)間21 d以上，RE種子的發(fā)芽率為10.0 %，YW的發(fā)芽率為8.3 %，與其他2種培養(yǎng)方式相比其發(fā)芽率較低，幼苗成苗速度也較緩慢(圖1)，根據(jù)上述試驗(yàn)內(nèi)容得出，無論無菌水培養(yǎng)還是固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，兩種基因型RE和YW之間的種子發(fā)芽率差異均不顯著(P>0.05，下同)。

濾紙層厚度對(duì)森林草莓種子萌發(fā)成苗的影響。

a:無菌水培養(yǎng); b:無激素固體培養(yǎng)基中培養(yǎng); c:添加激素固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)圖1 培養(yǎng)方式對(duì)森林草莓種子萌發(fā)成苗的影響Fig.1 Effect of cultivition methods on F. vesca seeds germination

基因型Genotype濾紙層數(shù)Layernumberoffilterpaper發(fā)芽率(%)Germinationrate7d21dRE213.3a76.7a310.0a80.0a43.3c63.3b50d46.7cYW26.7b70.0ab36.7b66.7ab43.3c50.0c50d53.3c

注：同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示差異達(dá)顯著水平(P<0.05)，下同。

Note:The different small letters within the same column mean significant difference(P<0.05). The same as below.

圖2 鳳梨草莓部分優(yōu)系葉片離體再生能力的比較Fig.2 In vitro adventitious buds regeneration from leaves of good strains of F. ×ananassa

基因型Genotypes再生效率(%)Regenerationrate平均再生芽數(shù)No.ofregeneratebudsperexplant再生芽玻璃化率(%)Regenerationbudvitrificationrate08-4-291.7a5.5bc011-2-135.0c3.7c1.811-2-225.0c2.8c011-2-328.3c3.2c011-2-723.3c4.1c011-3-150.0bc4.1c2.011-3-2100.0a11.4a011-4-163.3b2.3c011-4-293.3a11.5a3.711-4-355.0bc3.0c011-4-755.0bc4.7bc011-4-930.0c1.0c011-4-1066.7b2.9c011-5-235.0c4.0c0

續(xù)表2 Continued table 2

基因型Genotypes再生效率(%)Regenerationrate平均再生芽數(shù)No.ofregeneratebudsperexplant再生芽玻璃化率(%)Regenerationbudvitrificationrate11-5-1351.6bc3.0c2.911-5-1430.0c3.1c1.911-6-40c0c011-8-965.0b5.1bc011-8-1641.7bc4.7bc011-8-1768.3b1.1c011-9-338.3c1.4c011-9-661.6b3.4c2.611-9-1363.3b1.0c2.111-9-1671.7b4.4c011-9-2371.7b5.3bc011-9-2690.3a7.3b011-9-2861.6b2.1c011-9-2966.7b5.0bc011-10-30c0c011-10-90c0c0

從表1可以看出，7 d時(shí)，RE和YE種子萌發(fā)率均隨著濾紙層數(shù)增加呈減少趨勢(shì)，其中2和3層濾紙的發(fā)芽率之間差異均不顯著，且均顯著高于4和5層的萌發(fā)率(P<0.05，下同)，兩者在5層濾紙下，萌發(fā)率均為0。21 d時(shí)，濾紙層厚度為2和3層的RE和YW的種子發(fā)芽率均顯著高于濾紙層厚度為4和5層的種子發(fā)芽率，其中2和3層濾紙的發(fā)芽率之間差異均不顯著。

表3 不同基因型再生效率比較

表4 5種基因型與“全明星”再生效率比較

表5 鳳梨草莓外植體不同放置方式再生效率的比較

2.1.2 外植體類型和基因型對(duì)森林草莓離體再生效率的影響 外植體類型對(duì)RE離體再生效率的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，RE葉柄和葉片的再生頻率分別為58.3和85.0；葉柄和葉片的平均再生芽數(shù)分別為4.8和7.4。RE葉片的再生頻率和平均再生芽數(shù)均顯著高于葉柄。

基因型對(duì)森林草莓葉片離體再生效率的影響。RE和YW葉片的離體再生頻率分別為85.0 %和88.3 %；平均再生芽數(shù)分別為7.4和7.0。RE和YW兩者之間的離體再生頻率、平均再生芽數(shù)指標(biāo)差異均不顯著。

2.2 具有高離體再生能力的八倍體鳳梨草莓基因型的篩選

2.2.1 鳳梨草莓優(yōu)系葉片離體再生能力的比較 從圖2和表2可以看出，11-3-2和11-4-2再生率分別高達(dá)100.0 %和93.3 %，均顯著高于除08-4-2和11-9-26之外的其它基因型；11-3-2和11-4-2平均再生芽數(shù)分別為11.4和11.5，均顯著高于其它基因型；11-3-2和11-4-2的再生芽的玻璃化率為0 %或較低。因此，篩選出的2個(gè)具有高再生效率的基因型為11-3-2、11-4-2。

2.2.2 鳳梨草莓雜交組合實(shí)生苗的建立及其葉片離體再生能力比較 從表3可以看出，YA-1、SB-8和SB-9再生效率均為100.0 %，均顯著高于除YA-4、YA-9和SB-7之外的其他基因型；YA-1、SB-8和SB-9平均再生芽數(shù)分別為11.5、13.5和13.3，均顯著高于其他基因型。因此，篩選出的3個(gè)具有高再生效率的基因型為YA-1、SB-8和SB-9。

2.2.3 不同鳳梨草莓基因型葉片離體再生能力比較 從表3可以看出，篩選出的基因型除11-4-2的不定芽再生效率為93.3 %外，其他基因型11-3-2、YA-1、SB-8和SB-9的再生效率均為100.0 %，均顯著高于再生效率80.0 %的對(duì)比品種“全明星”；11-3-2、11-4-2、YA-1、SB-8和SB-9平均再生芽數(shù)分別為11.4、11.5、11.5、13.5和13.3，均顯著高于平均再生芽數(shù)為4.7的“全明星”。因此，共篩選出的5個(gè)具有更高再生效率的基因型為11-3-2、11-4-2、YA-1、SB-8和SB-9。

2.3 外植體的放置方式對(duì)葉片離體再生效率的影響

從表5可以看出，不同基因型，其葉片正面接觸培養(yǎng)基的處理的離體再生效率均高達(dá)100 %，平均再生芽數(shù)10.0以上，而2種基因型的葉片背面接觸培養(yǎng)基的處理的離體再生效率平均小于80 %，平均再生芽數(shù)7.0以下。

3 討 論

3.1 外植體放置方式對(duì)不定芽再生的影響

接種時(shí)外植體的放置方式等因素影響葉片的生理狀態(tài)，而葉片的生理狀態(tài)影響葉片的離體再生能力。一般認(rèn)為葉片正面接觸培養(yǎng)基的再生頻率高于葉片背面接觸培養(yǎng)基的再生頻率[16]。本研究發(fā)現(xiàn)以鳳梨草莓SB-3和SB-8的葉片作為外植體，葉片正面接觸培養(yǎng)基的再生率和平均再生芽數(shù)均比背面接觸培養(yǎng)基的高，與Welande[16]對(duì)葉片的研究的相關(guān)結(jié)果類似。經(jīng)后續(xù)觀察發(fā)現(xiàn)葉片背面接觸培養(yǎng)基產(chǎn)生的再生芽較葉片正面接觸培養(yǎng)基產(chǎn)生的再生芽矮小且生長(zhǎng)緩慢，是否是由于葉片正面的柵欄組織比葉片背面的柵欄組織對(duì)培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)更為敏感所導(dǎo)致[17]，有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

3.2 八倍體鳳梨草莓高離體再生能力基因型的篩選

高效離體再生是遺傳轉(zhuǎn)化基礎(chǔ)[18]。李文然等[19]以蘋果屬八棱海棠實(shí)生種子為試材，建立八棱海棠試管苗無性系，并成功篩選出具有高離體再生能力的基因型，為高效遺傳轉(zhuǎn)化體系建立奠定基礎(chǔ)。本試驗(yàn)為了得到具有高再生能力的八倍體鳳梨草莓基因型，分別從2個(gè)方面著手：一是以沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)果樹細(xì)胞工程實(shí)驗(yàn)室保存的鳳梨草莓優(yōu)系為試材，進(jìn)行葉片的離體再生培養(yǎng)，二是以2個(gè)鳳梨草莓雜交組合種子建立試管苗無性系為試材，進(jìn)行葉片離體再生培養(yǎng)，最后以2種方式篩選出的具有高離體再生能力的鳳梨草莓基因型以及鳳梨草莓品種“全明星”為試材，分析比較了它們的離體再生能力。張紅梅等[20]以“全明星”葉片為試材進(jìn)行離體再生，而本試驗(yàn)從更為豐富的基因型中篩選出比“全明星”更高離體再生頻率的基因型，說明了此種方法是更加可行的。

隨著分子生物學(xué)理論和技術(shù)的發(fā)展，分子育種正成為作物育種的重要發(fā)展方向，而草莓已成為薔薇科果樹分子生物學(xué)研究的模式植物?；蜻^量表達(dá)和基因沉默是揭示基因功能的重要手段，而這依賴于高效的遺傳轉(zhuǎn)化體系。自James等[13]1990年首次獲得草莓轉(zhuǎn)基因植株以來，利用根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葉盤轉(zhuǎn)化法是至今草莓遺傳轉(zhuǎn)化的最主要手段。在遺傳轉(zhuǎn)化上，盡管草莓的遺傳轉(zhuǎn)化研究已開展20多年，但是仍然存在轉(zhuǎn)化效率低的問題，阻礙了轉(zhuǎn)基因技術(shù)在草莓上的應(yīng)用。因此，在建立了二倍體森林草莓和八倍體鳳梨草莓高效離體再生體系的基礎(chǔ)上進(jìn)一步篩選出對(duì)農(nóng)桿菌敏感的基因型，建立草莓高效遺傳轉(zhuǎn)化體系具有重要意義，為草莓功能基因驗(yàn)證打下基礎(chǔ)。

4 結(jié) 論

本研究結(jié)果表明，不同培養(yǎng)方式下，森林草莓種子發(fā)芽率高低順序依次為：無菌水培養(yǎng)、無激素固體培養(yǎng)基培養(yǎng)和激素固體培養(yǎng)基培養(yǎng)；發(fā)芽率隨濾紙層數(shù)增多而呈下降趨勢(shì)。森林草莓種質(zhì)資源RE種子發(fā)芽率前期高于YW，成苗速度和質(zhì)量上兩者無明顯差異；外植體類型對(duì)離體再生不定芽效率具有顯著影響，葉片的再生率和平均再生芽數(shù)均高于其葉柄。同一種類型的外植體，RE和YW兩種基因型在再生效率上無顯著差異。篩選出的11-3-2、11-4-2、YA-1、SB-8和SB-9等5種鳳梨草莓基因型離體再生能力顯著高于“全明星”；且葉片正面接觸培養(yǎng)基的外植體不定芽再生率和平均再生芽數(shù)均高于背面接觸培養(yǎng)基的外植體。

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(責(zé)任編輯 汪羽寧)

Seeds Germination and Development of High EfficientinvitroRegeneration System in Strawberry

LI Wen-yan, KONG Fang-nan, WEI You, ZHAO Jing, XU Dong-ying, MA Xian-hua, ZHOU Jing*

(South Asian Tropical Agricultural Science Research Institute of Guangxi, Guangxi Longzhou 532415, China)

Fragariavescawas used as test materials in this study, the effect of the different culture methods on seeds germination and different geno types‘Ruegen’ (RE) and‘Yellow Wonder’ (YW) and different types of explants oninvitroregeneration rates were researched. And in order to optimize theinvitroregeneration system ofF. ×ananassa, the good strains and tube seedling clones ofF. ×ananassawere used as test materials too,invitroregeneration rate of leaf was studied under the same culture conditions, the genotypes ofF. ×ananassawith highinvitroregeneration rates were screened finally, and then they were compared to‘Allstar’.The genotypes with higherinvitroregeneration rates were screened. The results showed that the order from high to low of seeds germination rates by using different cultivation ways were:sterile water cultivation, solid medium adding no hormone cultivation and solid medium adding hormone cultivation. Germination rates gradually descend along with the increased filter layers. Theinvitroadventitious buds regeneration rates were significantly affected by explants types, the regeneration rates and the average numbers of regeneration buds of leaves were higher than the petioles. For the genotype RE, the regeneration rates of adventitious buds of leaves and petioles were 85.0 % and 58.3 % respectively, the average numbers of buds of leaves and petioles were 7.4 and 4.8 respectively. Two genotypes RE and YW had no significant differences in regeneration efficiency. Five genotypes 11-3-2, 11-3-2, YA-1, SB-8 and SB-9 were screened and theinvitroregeneration rates were significantly higher than ‘Allstar’. The regeneration rates and the average numbers of adventitious buds of adaxial blades were higher than the abaxial blades.

Fragariaspp.; Seeds germination;invitroregeneration; High-efficiency; System establishment

1001-4829(2016)10-2463-07

10.16213/j.cnki.scjas.2016.10.039

2016-07-05

廣西壯族自治區(qū)直屬公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)項(xiàng)目(GXNYRKS201601)

李文硯(1987-)，女，河北邯鄲人，研究實(shí)習(xí)員，碩士，主要從事熱帶亞熱帶果樹種質(zhì)資源研究及開發(fā)利用工作，E-mail：liwenyan20100@163.com,*為通訊作者，周 婧，E-mail：823343462@qq.com。

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