趙華偉，汪 晶，崔 瑛＊＊，王桁杰，王君明，馬 開

（1. 河南中醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院 鄭州 450046；2. 呼吸疾病診療與新藥研發(fā)河南省協(xié)同創(chuàng)新中心鄭州 450046；3. 河南省中醫(yī)藥研究院 鄭州 450000）

基于“病證-效應(yīng)-生物樣本分析”方法的桑寄生補(bǔ)肝腎強(qiáng)筋骨功效物質(zhì)及歸經(jīng)研究＊

趙華偉1，2，汪 晶1，2，崔 瑛1，2＊＊，王桁杰1，2，王君明1，2，馬 開3

（1. 河南中醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院 鄭州 450046；2. 呼吸疾病診療與新藥研發(fā)河南省協(xié)同創(chuàng)新中心鄭州 450046；3. 河南省中醫(yī)藥研究院 鄭州 450000）

目的：建立與桑寄生功效相對(duì)應(yīng)的骨質(zhì)疏松模型，觀察桑寄生補(bǔ)肝腎強(qiáng)筋骨功效物質(zhì)及其在大鼠體內(nèi)分布與歸經(jīng)的關(guān)系。方法：采用維甲酸制造骨質(zhì)疏松模型大鼠模型，觀察桑寄生水煎液藥效。同時(shí)以萹蓄苷、槲皮苷、蘆丁為指標(biāo)成分，對(duì)含藥組織進(jìn)行分析檢測(cè)，觀察其體內(nèi)分布及代謝時(shí)間，研究功效相關(guān)物質(zhì)的組織分布與歸經(jīng)的關(guān)系。結(jié)果：桑寄生水煎液能明顯提高骨質(zhì)疏松模型大鼠左股骨骨重、骨重/骨長(zhǎng)、骨重/骨直徑等指標(biāo)，且能降低大鼠血清中骨鈣素（OT）、堿性磷酸酶（ALP）含量。大鼠體內(nèi)桑寄生指標(biāo)成分的分析結(jié)果顯示，蘆丁僅在胃中有少量分布，萹蓄苷在組織中AUC0-t大小順序?yàn)槲福灸I＞腦＞小腸＞大腸＞肝＞肺，體內(nèi)維持時(shí)間長(zhǎng)短順序?yàn)槟I=胃＞腦＞大腸＞小腸=脾＞肝＞心＞肺＞血清。槲皮苷在組織中AUC0-t大小順序?yàn)槟I＞胃＞肝＞心＞肺＞脾＞小腸＞大腸＞腦，體內(nèi)維持時(shí)間長(zhǎng)短順序?yàn)槟I=胃=腦=肺=肝=脾=心＞大腸＞血清＞小腸。結(jié)論：桑寄生水煎液可對(duì)抗維甲酸致大鼠骨質(zhì)疏松，具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨作用；萹蓄苷、槲皮苷為桑寄生補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨代表成分；萹蓄苷、槲皮苷在大鼠體內(nèi)分布與桑寄生歸腎經(jīng)的傳統(tǒng)認(rèn)識(shí)一致。

桑寄生 大鼠骨質(zhì)疏松 藥效 功效物質(zhì) 歸經(jīng)

桑寄生為桑寄生科植物桑寄生Taxillus chinensis（DC.） Danser的干燥帶葉莖枝，性平，味苦、甘，具有祛風(fēng)濕、補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、安胎的功效，臨床常用于痹癥日久、傷及肝腎、腰膝酸軟、筋骨無力等病癥[1]。目前，關(guān)于桑寄生的研究主要集中在化學(xué)成分、藥理作用等方面。關(guān)于桑寄生功效物質(zhì)和歸經(jīng)的研究尚未見報(bào)道。因此，本研究進(jìn)行了桑寄生功效補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨功效物質(zhì)及歸經(jīng)研究。

功效物質(zhì)是指表達(dá)中藥傳統(tǒng)功效的化學(xué)物質(zhì)。對(duì)中藥功效的認(rèn)識(shí)，是以一定的證候?yàn)榛A(chǔ)，而化學(xué)物質(zhì)的認(rèn)識(shí)，又需要借助現(xiàn)代化學(xué)分析手段，故中藥功效物質(zhì)的認(rèn)識(shí)既需要以證候和藥效為基礎(chǔ)，又需要借助化學(xué)分析手段。基于以上認(rèn)識(shí)，本研究建立了“病癥—效應(yīng)—生物樣本分析”結(jié)合研究中藥功效物質(zhì)的系統(tǒng)方法[2，3]。歸經(jīng)是藥物對(duì)機(jī)體臟腑經(jīng)絡(luò)選擇性的作用，有研究表明藥物的作用部位與歸經(jīng)關(guān)系密切，且藥物中功效成分在體內(nèi)的分布是藥物歸經(jīng)的重要依據(jù)[4，5]。因此，結(jié)合藥代動(dòng)力學(xué)方法，觀察功效物質(zhì)在病癥模型動(dòng)物中的分布，從而可以獲得中藥歸經(jīng)與藥物分布相關(guān)性的認(rèn)識(shí)[2，6，7]。

本研究是在上述思路的指導(dǎo)下，觀察桑寄生對(duì)骨質(zhì)疏松模型大鼠的作用，以反映桑寄生補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨功效。在此基礎(chǔ)上，針對(duì)給藥模型大鼠，開展生物樣本（血清、臟腑組織）的化學(xué)成分分析，從而獲得對(duì)桑寄生補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨功效物質(zhì)的認(rèn)識(shí)，通過桑寄生指標(biāo)成分在臟腑組織的分布，探討桑寄生的歸經(jīng)。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)藥物

本研究中的桑寄生樣品購(gòu)于河南張仲景大藥房（生產(chǎn)日期為2014年5月18日）。經(jīng)河南中醫(yī)學(xué)院陳隨清教授鑒定為桑寄生科植物桑寄生Taxillus chinensis （DC.） Danser的干燥帶葉莖枝。

龍牡壯骨顆粒（武漢健民藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，批號(hào)：1407223）；維甲酸（大連美侖生物技術(shù)有限公司）；萹蓄苷、槲皮苷（四川省維克其生物科技有限公司，批號(hào)分別為：130625、130508）；槲皮素（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：100080-200306）。

1.2 試劑

骨鈣素（OT） ELISA檢測(cè)試劑盒、堿性磷酸酶（ALP）ELISA檢測(cè)試劑盒（武漢基因美生物科技有限公司，批號(hào)分別為：201501、201501）。甲醇、乙腈、磷酸均為色譜純。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器

TGL-16gR高速冷凍離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）；不銹鋼數(shù)顯卡尺（上海尺喜工量具有限公司）；酶標(biāo)儀（美國(guó)BioTek Instruments公司），Waters e2695高效液相色譜儀自帶Waters2489檢測(cè)器（美國(guó)Waters公司）； AE240電子分析天平（瑞士梅特勒儀器有限公司）；氮?dú)獯蹈蓛x（北京八方世紀(jì)）。

1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF級(jí)Wistar大鼠，雄性，體質(zhì)量160±10 g，購(gòu)于山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司質(zhì)檢中心實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室，批號(hào)：0017218，許可證號(hào)：SCXK（魯）20130001；分籠飼養(yǎng)在20±2 ℃的動(dòng)物室，專人飼養(yǎng)和管理，飼以標(biāo)準(zhǔn)全價(jià)飼料。

2 方法

2.1 藥物制備

2.1.1 桑寄生水煎液的制備

取桑寄生藥材粉碎成粗粉，加10倍量（重量）水浸泡30 min，煎30 min，濾過，藥渣加8倍量（重量）水煎煮20 min，濾過，合并兩次濾液，低溫濃縮至1 g·mL-1的桑寄生水煎液。

2.1.2 龍牡壯骨顆?；鞈乙旱闹苽?/p>

取龍牡壯骨顆粒255 g，加蒸餾水超聲溶解，配制成0.5 g·mL-1的混懸液。

2.2 造模與給藥

大鼠不限食水飼養(yǎng)5天，禁食24 h后稱重，標(biāo)記，隨機(jī)分為正常組、模型組、陽(yáng)性組（龍牡壯骨顆粒組）、桑寄生高、中、低劑量組，每組9只（其中桑寄生高劑量組18只）。除空白組外各組大鼠上午用1%羧甲基纖維素鈉配成的維甲酸混懸液70 mg·kg-1灌胃[8，9]；下午各組大鼠給予相應(yīng)的藥物或生理鹽水，其中桑寄生各劑量組分別給予桑寄生高（10 g·kg-1）、中（5 g·kg-1）、低（2.5 g·kg-1）劑量水煎液，陽(yáng)性組給予龍牡壯骨顆?；鞈乙海? g·kg-1）[10-12]，每日灌胃1次，空白、模型給予生理鹽水。灌胃體積1 mL/100g，連續(xù)給藥14天后，停止給予維甲酸，每日下午各組大鼠繼續(xù)給予相應(yīng)藥物或生理鹽水14天。

2.3 取材

各組大鼠于給藥28天當(dāng)晚禁食不禁水。次日桑寄生高劑量組9只大鼠分別于給予桑寄生高劑量水煎液后10、30、40、60、80、90、120、240、360min時(shí)摘眼球取血，脫頸椎處死，立即取心、肝、脾、肺、腎、胃、腦、大腸、小腸，用于測(cè)定各成分的組織分布，其余大鼠分別于給藥30 min后摘眼球取血，脫頸椎處死。所有全血均靜置0.5 h后置低溫高速離心機(jī)中10 000 r·min-1離心10 min，取上清液-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

2.4 血清樣品的處理

全血10 000 r·min-1離心10 min后，精密吸取1.5 mL血清置10 mL離心管中，加入3倍量甲醇（按血清：甲醇=1:3的比例），用快速混勻器充分振搖5 min，10 000 r·min-1離心10 min，吸取上清液置另一個(gè)10 mL離心管中，沉淀物再次精密加入3倍量甲醇，用快速混勻器充分振搖5 min，10 000 r·min-1離心10 min，合并兩次上清液。50℃氮?dú)獯蹈桑芗尤爰状? mL，超聲提取5 min，取上清液用0.22 μm微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。血清用于血清中骨鈣素（Osteocalcin，OT）濃度、堿性磷酸酶（Alkaline Phosphatase，ALP）濃度的檢測(cè)，按照試劑盒說明書用ELISA（酶聯(lián)免疫法）檢測(cè)。血清也用于桑寄生的化學(xué)成分分析。

2.5 組織樣品的處理

將各組織用生理鹽水洗凈，濾紙吸干，精密稱取約1 g的組織（不足1 g的稱取全部），剪碎，加入3倍量生理鹽水（按組織：生理鹽水=1 g：3 mL的比例），置10 mL離心管中，用細(xì)胞破碎儀破碎。組織破碎液精密加入3倍量甲醇（按組織1 g：甲醇3 mL的比例），快速混勻器充分振搖5 min，10 000 r·min-1離心10 min，吸取上清液置另一個(gè)10 mL離心管中，沉淀物再次精密加入3倍量甲醇，用快速混勻器充分振搖5 min，10 000 r·min-1離心10 min，合并兩次上清液。50℃氮?dú)獯蹈?，精密加入甲? mL，超聲提取5 min，取上清液用0.22 μm微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。用于桑寄生化學(xué)成分分析。

2.5 HPLC含量測(cè)定方法

2.5.1 色譜條件

Platisil ODS C18色譜柱（5μm，250×4.6 mm），流動(dòng)相乙腈（A）-0.1% 磷酸水（B）；流速：0.8 mL·min-1；柱溫：28℃；進(jìn)樣量10 μL；檢測(cè)波長(zhǎng)：330 nm；洗脫梯度：79%B（2 min）→79%B（15 min）→77%B（20 min）→77%B（30 min）→79%B（35 min）。

2.5.2 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取對(duì)照品萹蓄苷1.00 mg、槲皮苷1.00 mg和蘆丁1.00 mg，分別于3個(gè)10 mL容量瓶中，用甲醇溶解、定容，配制成萹蓄苷、槲皮苷和蘆丁濃度為0.100 mg·mL-1的單一對(duì)照品儲(chǔ)備液。

分別精密量取單一對(duì)照品溶液適量于同一容量瓶中，用甲醇稀釋成濃度分別為含0.005、0.02、0.08、0.15、0.2、0.25、0.5、0.75、1 μg·mL-1萹蓄苷的對(duì)照品溶液， 0.005、0.02、0.08、0.15、0.25、0.5、1、2、2.5 μg·mL-1槲皮苷的對(duì)照品溶液，含0.005、0.02、0.05、 0.08、0.15、0.2、0.25、0.5、0.75 μg·mL-1蘆丁的對(duì)照品溶液，4℃冷藏避光貯藏備用。

2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

3 結(jié)果

3.1 大鼠一般情況觀察

實(shí)驗(yàn)過程中各組大鼠體重均有所增加，模型組大鼠體重增加幅度不及其它組，除空白組外其余各組在給予維甲酸一周左右相繼出現(xiàn)豎毛、拱背，活動(dòng)量減少，其中模型組最為明顯。停止給予維甲酸后，陽(yáng)性組和桑寄生高、中、低劑量組大鼠的豎毛、拱背狀況得到極大改善。

3.2 對(duì)骨質(zhì)疏松模型大鼠左股骨骨重、骨長(zhǎng)、骨直徑的影響

模型組較空白組左股骨骨重、骨長(zhǎng)、骨重/骨直徑、骨重/骨長(zhǎng)均有顯著降低，陽(yáng)性組、桑寄生水煎液高劑量組與模型組比較，骨重、骨重/骨直徑、骨重/骨長(zhǎng)均有明顯改善；桑寄生水煎液中劑量、低劑量與模型組相比，骨重、骨重/骨直徑、骨重/骨長(zhǎng)差別不顯著。結(jié)果表明，一定劑量桑寄生水煎液能增加大鼠左股骨骨密度，見表1、2。

表1 對(duì)骨質(zhì)疏松模型大鼠左股骨骨重、骨長(zhǎng)、骨直徑的影響（±s，n=9）

表1 對(duì)骨質(zhì)疏松模型大鼠左股骨骨重、骨長(zhǎng)、骨直徑的影響（±s，n=9）

注：與正常組比較，##P＜0.01；與模型組比較，**P＜0.01。

組別骨重/g骨長(zhǎng)/mm骨直徑/mm正常組0.816 3±0.419 3 30.664 4±1.359 0 6.573 3±0.584 4模型組0.530 4±0.079 4##27.524 4±1.670 4##6.368 9±0.569 5陽(yáng)性組0.707 8±0.064 2**27.380 0±2.025 86.241 1±0.429 7桑寄生高劑量0.684 7±0.100 3**27.764 4±1.135 26.162 2±0.302 8桑寄生中劑量0.589 4±0.041 928.565 6±0.915 26.616 7±0.462 1桑寄生低劑量0.542 3±0.059 827.152 2±1.594 36.383 3±0.3692 2

表2 對(duì)骨質(zhì)疏松模型大鼠左股骨骨重/骨長(zhǎng)、骨重/骨直徑的影響（±s，n=9）

表2 對(duì)骨質(zhì)疏松模型大鼠左股骨骨重/骨長(zhǎng)、骨重/骨直徑的影響（±s，n=9）

注：與正常組比較，##P＜0.01；與模型組比較**P＜0.01。

組別骨重/骨直徑（g?mm-1）骨重/骨長(zhǎng)（g?mm-1）正常組0.125 0±0.012 3 0.026 6±0.001 4模型組0.083 7±0.012 9##0.019 2±0.001 9##陽(yáng)性組0.113 8±0.011 4**0.026 1±0.003 9**桑寄生高劑量0.110 9±0.013 3**0.024 8±0.004 2**桑寄生中劑量0.089 5±0.010 1 0.020 6±0.001 5桑寄生低劑量0.085 4±0.014 5 0.020 1±0.003 4

3.3 血清中骨鈣素、堿性磷酸酶濃度的檢測(cè)結(jié)果

模型組與正常組比較，血清中骨鈣素（OT）、堿性磷酸酶（ALP）濃度明顯提高，陽(yáng)性組及桑寄生給藥組能明顯降低血清中OT、ALP濃度水平，其中陽(yáng)性組及桑寄生給藥組中OT 、ALP 濃度水平與模型組比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01，P＜0.05）。見表3。

3.4 組織樣品桑寄生指標(biāo)成分藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)分析

各組織桑寄生成分濃度-時(shí)間經(jīng)DAS 2.0統(tǒng)計(jì)處理后發(fā)現(xiàn)，萹蓄苷在組織中AUC0-t大小排序?yàn)槲福灸I＞腦＞小腸＞大腸＞肝＞肺，Cmax大小排序?yàn)槲福灸I＞小腸＞腦＞肝＞大腸＞肺，Tmax大小排序?yàn)榇竽c＞小腸=胃＞腎=肝＞肺=腦；槲皮苷組織中AUC0-t大小排序?yàn)槟I＞胃＞肝＞心＞肺＞脾＞小腸＞大腸＞腦，Cmax大小排序?yàn)槲福靖危灸I＞心＞脾＞小腸＞肺＞腦＞大腸，Tmax大小排序?yàn)榇竽c＞肺＞肝=心=胃＞小腸＞腦＞脾=腎，見表4、5、6。

表3 對(duì)大鼠血清OT、ALP 測(cè)定值的影響（ˉx±s，n=9）

表4 維甲酸骨質(zhì)疏松模型桑寄生水煎液高劑量組織萹蓄苷含量藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

表5 維甲酸骨質(zhì)疏松模型桑寄生水煎液高劑量組織槲皮苷含量藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

表6 桑寄生指標(biāo)成分在大鼠體內(nèi)組織分布與歸經(jīng)相關(guān)性

4 討論

4.1 桑寄生補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨藥效觀察

本實(shí)驗(yàn)中，模型組大鼠拱背、豎毛、體重增加遲緩、活動(dòng)減少、反應(yīng)遲鈍，并且該組大鼠左股骨重、骨重/股直徑、骨重/骨長(zhǎng)等指標(biāo)明顯下降，從側(cè)面反映出維甲酸可致大鼠左股骨骨密度降低，表明造模成功[13]。陽(yáng)性組和桑寄生水煎液高、中劑量組均能提高大鼠左股骨重、骨重/股直徑、骨重/骨長(zhǎng)，與模型組比較，差異顯著（P＜0.01），表明桑寄生具有對(duì)抗維甲酸大鼠骨質(zhì)疏松作用。維甲酸可降低正常人成骨細(xì)胞的活性，并抑制成骨細(xì)胞增殖、激活破骨細(xì)胞，使血清中ALP、OT等指標(biāo)明顯升高[14]。陽(yáng)性組、桑寄生各劑量組均能降低血清中OT 、ALP水平，與模型組比較，差異顯著（P＜0.01，P＜0.05），表明桑寄生水煎液可抑制骨吸收，提高骨質(zhì)量，改善骨代謝的負(fù)平衡狀態(tài)，從而達(dá)到治療骨質(zhì)疏松的作用。上述結(jié)果表明，桑寄生水煎液可對(duì)抗維甲酸所致大鼠骨質(zhì)疏松，具有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨作用。

4.2 桑寄生功效物質(zhì)觀察及其分布與歸經(jīng)的關(guān)系

桑寄生主要含黃酮類、生物堿、萜類、有機(jī)酸、多糖、蛋白質(zhì)、凝集素等化學(xué)成分[15]。桑寄生中所含黃酮類成分主要為槲皮素、萹蓄苷、槲皮苷、蘆丁、廣寄生苷等[16，17]。體外研究表明，黃酮類物質(zhì)可通過抑制破骨細(xì)胞分化，促進(jìn)骨形成，起到抗骨質(zhì)疏松的作用[18]。根據(jù)上述研究成果，本實(shí)驗(yàn)選擇萹蓄苷、槲皮苷、蘆丁等黃酮類成分作為桑寄生的指標(biāo)成分。維甲酸致骨質(zhì)疏松模型大鼠的組織分布結(jié)果顯示，槲皮苷分布于腦、心、肝、脾、肺、腎、胃、大腸、小腸、血清中，萹蓄苷分布于肺、腎、胃、小腸，蘆丁僅在胃中有少量分布。結(jié)合藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，萹蓄苷、槲皮苷是桑寄生補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨的代表性成分。指標(biāo)成分在組織中的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)AUC0-t、維持時(shí)間結(jié)果分析表明，萹蓄苷在維甲酸致骨質(zhì)疏松模型大鼠腎組織中AUC0-t較大（居于第2位），腎內(nèi)藥物維持時(shí)間上居首位，提示萹蓄苷在腎組織中分布較多，維持較長(zhǎng)，與桑寄生歸腎經(jīng)的傳統(tǒng)認(rèn)識(shí)一致。萹蓄苷在肺中分布較多，提示桑寄生還可能作用于肺經(jīng)，但仍需要進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證明。槲皮苷在維甲酸致骨質(zhì)疏松模型大鼠腎組織中AUC0-t和藥物維持時(shí)間均居首位，提示槲皮苷在腎組織中作用更強(qiáng)，這與桑寄生歸腎經(jīng)的傳統(tǒng)認(rèn)識(shí)的認(rèn)識(shí)一致。因此，桑寄生歸腎經(jīng)的主要功效物質(zhì)為槲皮苷、萹蓄苷。

綜上所述，桑寄生對(duì)抗維甲酸所致大鼠骨質(zhì)疏松的功效相關(guān)成分為萹蓄苷、槲皮苷。因此，萹蓄苷、槲皮苷為桑寄生補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨功效的代表性成分。萹蓄苷、槲皮苷在維甲酸致骨質(zhì)疏松模型大鼠體內(nèi)分布情況與桑寄生歸腎經(jīng)具有高度一致性，符合桑寄生歸腎經(jīng)的傳統(tǒng)認(rèn)識(shí)。

1 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 2015: 299-300.

2 崔瑛,楊晶晶,郭敏娟,等. 基于“病證-效應(yīng)-生物樣本分析”方法的酸棗仁“安神”藥性物質(zhì)及歸經(jīng)的研究.世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化, 2015, 17(3): 569-577.

3 崔瑛,紀(jì)彬,馮志毅,等.姜的溫中功效物質(zhì)研究.中藥與臨床, 2011, 2(5): 27-32.

4 付志玲.炮制改變苦杏仁功效與歸經(jīng)的體內(nèi)作用機(jī)制研究.陜西:西北大學(xué)碩士學(xué)位論文, 2010: 3-4.

5 王瑾,梁茂新.中藥歸經(jīng)現(xiàn)代研究的思路與方法.世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化, 2012, 14(1): 1237-1241.

6 郭敏娟,張廷,馬開,等.干姜中有效成分在大鼠體內(nèi)組織分布與歸經(jīng)的相關(guān)性研究.中草藥, 2014, 45(7): 965-972.

7 李乾勝,申玲玲,馬開,等.生姜在大鼠臟腑組織分布與其歸經(jīng)相關(guān)性研究.中醫(yī)學(xué)報(bào), 2014, 29(194): 1004-1009.

8 許鵬,郭雄,張銀剛,等. 維甲酸誘導(dǎo)骨質(zhì)疏松模型大鼠的效果及機(jī)理. 四川大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）, 2005, 36(2): 229-232.

9 賈婷婷,張?jiān)茲?劉順振,等.維甲酸誘導(dǎo)大鼠骨質(zhì)疏松模型的制作.口腔醫(yī)學(xué)研究, 2012, 28(5): 420-422.

10 邵金鶯,尹鐘洙,許哲,等.龍牡壯骨藥對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性骨質(zhì)疏松的影響.中藥藥理與臨床, 1989, 5(4): 25-27.

11 藍(lán)肇熙,王杰龍,李凌志.骨立拮抗維甲酸所致大鼠骨質(zhì)疏松的實(shí)驗(yàn)研究. 華西藥學(xué)雜志, 2003, 18(4): 250-252.

12 唐玲,馮寶民,史麗穎,等.山茶屬植物的抗骨質(zhì)疏松作用.中藥材, 2008, 31(10): 1540-1544.

13 虞驚濤,馬信龍,馬劍雄.骨質(zhì)疏松動(dòng)物模型評(píng)價(jià)方法.中華骨質(zhì)疏松和骨礦鹽疾病雜志, 2014, 7(1): 66-70.

14 Ahmed N,Sammons,J, Khokher M A, et al. Retinoic acid suppresses interleukin 6 production in normal human osteoblasts. Cytokine, 2000; 12(3): 289-293.

15 李永華,阮金蘭,陳士林,等.中國(guó)桑寄生科藥用植物資源學(xué)研究進(jìn)展.世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化, 2009, 2(11): 665-668.

16 李永華,盧 棟,趙明惠,等. 廣西桑寄生科藥用植物資源的開發(fā)與應(yīng)用研究.廣西醫(yī)學(xué), 2006, 28(11): 1695-1698.

17 李永華,陳士林,盧棟,等.不同寄主植物桑寄生總黃酮含量研究.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥, 2009, 20(12): 3009-3010.

18 王若光,尤邵玲,馮光榮.中藥植物性雌激素研究.中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2004, 24(2): 169-171.

A Research of Effective Chemicals of Taxillus Chinensis Danser on Osteoporosis and Channel Tropism Based on Disease-Effect-Bioanalysis

Zhao Huawei1,2, Wang Jing1,2, Cui Ying1,2, Wang Hengjie1,2, Wang Junming1,2, Ma Kai3
(1. School of Pharmacy, Henan College of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou 450046, China;
2.Collaborative Innovation Center for Respiratory Disease Diagnosis And Treatment & Chinese Medicine Development of Henan Province, Zhengzhou 450046 ,China;
3. Henan Academy of Traditional Chinese Medicine, Zhengzhou 450000, China)

This study aimed to observe the effect of Taxillus on osteoporotic rats and investigate effective chemicals of Taxillus, in order to find out the relationships between their body distribution and the channel tropism of Taxillus. The osteoporotic rat models were established through retinoic acid administration to observe the efficacy of the water solution of Taxillus. Besides, taking rutin, avicularin and quercetin as indexes, organs of all rats were prepared to measure their distributions and metabolism before analyzing the correlation between body distribution of effective chemicals and channel tropism of Taxillus. It was found that Taxillus solution significantly improved weight (W), W / length (L) and W / diameter (D) of osteoporotic rats, and reduced the contents of osteocalcin (OT) and alkaline phosphatase (ALP). Rutin, one of the indexes in this study, was seldom in the stomach. AUC0-t of avicularin showed its distribution in stomach, kidney, brain, small intestine, large intestine, liver, lung from most to least in content. The metabolism results showed that avicularin stayed longer time in stomach and kidney than that in brain, large intestine, small intestine and spleen, liver, heart, lung, and plasma. And AUC0-t of quercetin showed its distribution in kidney, stomach, liver, heart, lung, spleen, small intestine, large intestine and brain from most to least in content. Quercetin kept longer time in kidney, stomach, liver, heart, spleen and brain than that in large intestine, plasma and small intestine. In conclusion, water solution of Taxillus was effective in the treatment of osteoporotic rats. Avicularin and quercetin, as the main substance of Taxillus, functioned in nourishing liver and kidney. Their distributions in rats were consistent with the channel tropism of Taxillus.

Taxillus, osteoporotic in rats, pesticide effect, effective chemicals, channel tropism

10.11842/wst.2016.04.012

R285.1

A

（責(zé)任編輯：馬雅靜，責(zé)任譯審：朱黎婷）

2015-10-08

修回日期：2015-11-17

＊ 國(guó)家自然科學(xué)基金委面上項(xiàng)目（81473368）：基于“病證-效應(yīng)-生物樣本分析”方法的生姜、干姜、炮姜藥性物質(zhì)研究，負(fù)責(zé)人：崔瑛。

＊＊ 通訊作者：崔瑛，教授，博士生導(dǎo)師，主要研究方向：中藥藥性物質(zhì)研究。