杜小英，馬東衛(wèi)，宋愿智(.陜西方舟制藥有限公司，西安 70075；.陜西省食品藥品檢驗(yàn)所，西安 70065)

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HPLC法測定貝那普利氫氯噻嗪片的有關(guān)物質(zhì)

杜小英1，馬東衛(wèi)1，宋愿智2(1.陜西方舟制藥有限公司，西安 710075；2.陜西省食品藥品檢驗(yàn)所，西安 710065)

摘要：目的建立高效液相色譜法測定貝那普利氫氯噻嗪片的有關(guān)物質(zhì)。方法采用Ultimate AQ-C18色譜柱(250 mm×4.60 mm，5 μm)；流動(dòng)相：四氫呋喃-水-冰醋酸(250 mL+750 mL+4 mL，加入四丁基溴化銨1.0 g)；流速：1.5 mL·min-1；檢測波長：240和316 nm。結(jié)果雜質(zhì)CGS14831的線性范圍為3.74～28.08 μg·mL-1，相關(guān)系數(shù)r=0.999 6；雜質(zhì)CGP42454A、CGS14829A的線性范圍為1.63～12.19 μg·mL-1：相關(guān)系數(shù)r=0.999 5；雜質(zhì)SU5683的線性范圍為2.03～15.24 μg·mL-1，相關(guān)系數(shù)r=0.999 7。結(jié)論該方法重復(fù)性好，結(jié)果準(zhǔn)確，能更好地控制貝那普利氫氯噻嗪片中有關(guān)物質(zhì)的含量。

關(guān)鍵詞：鹽酸貝那普利；氫氯噻嗪；有關(guān)物質(zhì)；高效液相色譜法

貝那普利氫氯噻嗪片是由血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑(ACEI)鹽酸貝那普利和利尿劑氫氯噻嗪為主要成分組成的復(fù)方降壓藥，該兩類藥物合用后，對(duì)血壓下降起到協(xié)同作用。規(guī)格為每片含鹽酸貝那普利10 mg、氫氯噻嗪12.5 mg，劑型為薄膜衣片。為了有效控制本產(chǎn)品的質(zhì)量，根據(jù)SFDA《藥品注冊(cè)管理辦法》及相關(guān)技術(shù)指導(dǎo)原則[1-3]，采用外標(biāo)法和自身對(duì)照法相結(jié)合的方法，對(duì)鹽酸貝那普利和氫氯噻嗪有關(guān)物質(zhì)同時(shí)測定，可更好地用于本品的質(zhì)量控制。

1儀器與試藥

1.1儀器島津 SPD-15C 紫外檢測器；島津SPD-M10A VP二極管陣列檢測器；島津 LC solution 15C色譜工作站；島津 LC solution色譜工作站。

1.2試藥鹽酸貝那普利對(duì)照品(中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)100768-201102)；氫氯噻嗪對(duì)照品(中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)100309-201103)；雜質(zhì)CGS14831、CGP42454A、CGS14829A對(duì)照品由USP ROCKVILLE MD提供；雜質(zhì)SU5683對(duì)照品由德國LGC GmbH公司提供；貝那普利氫氯噻嗪片(陜西方舟制藥有限公司提供)；乙腈、冰醋酸、四氫呋喃為色譜純；水為二次蒸餾水；其他試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

2.1色譜條件色譜柱：Ultimate AQ-C18(250 mm×4.60 mm 5 μm)；柱溫：室溫；流速：1.5 mL·min-1；檢測器：UV檢測器；檢測波長：240和316 nm；運(yùn)行時(shí)間：50 min；進(jìn)樣體積：20 μL。流動(dòng)相：四氫呋喃-水-冰醋酸(250 mL+750 mL+4 mL，加入四丁基溴化銨1.0 g)。

2.2檢測波長的選擇取本品鹽酸貝那普利歸屬下的特定雜質(zhì)(CGS14831A和CGP42454A)、氫氯噻嗪歸屬下的特定雜質(zhì)SU5683、氫氯噻嗪、鹽酸貝那普利進(jìn)行DAD全波長掃描，確定有關(guān)物質(zhì)的檢測波長。測得CGS14831A最大吸收波長為238 nm、CGP42454A最大吸收波長為236 nm 、SU5683最大吸收波長為312和239 nm、氫氯噻嗪最大吸收波長為242和317 nm、鹽酸貝那普利最大吸收波長為238 nm。故確定有關(guān)物質(zhì)的檢測波長為240 nm，并同時(shí)對(duì)316 nm的波長進(jìn)行檢測，在316 nm波長條件下檢測出的雜質(zhì)均歸屬為氫氯噻嗪雜質(zhì)。

2.3系統(tǒng)適用性要求理論板數(shù)按氫氯噻嗪峰計(jì)算應(yīng)不低于2 000，CGS14831，SU5683與氫氯噻嗪峰的分離度應(yīng)符合要求。

2.4對(duì)照品溶液取有關(guān)物質(zhì)CGS14831對(duì)照品20 mg，精密稱定，置于50 mL量瓶中，加溶劑使溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為雜質(zhì)對(duì)照品儲(chǔ)備液Ⅰ；取有關(guān)物質(zhì)SU5683對(duì)照品適量，精密稱定，加溶劑制成1 mL含0.25 mg的溶液，作為雜質(zhì)對(duì)照品儲(chǔ)備液Ⅱ；取有關(guān)物質(zhì)CGS14829A對(duì)照品或有關(guān)物質(zhì)CGP42454A對(duì)照品適量，精密稱定，加溶劑制成1 mL含0.2 mg的溶液，作為雜質(zhì)對(duì)照品儲(chǔ)備液Ⅲ；精密量取雜質(zhì)對(duì)照品儲(chǔ)備液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各2 mL，置于50 mL量瓶中，加溶劑溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2.5供試品溶液取含量測定項(xiàng)下的細(xì)粉，精密稱取適量(相當(dāng)于鹽酸貝那普利40 mg)，置于50 mL量瓶中，加溶劑40 mL，超聲處理10 min，振搖15 min，放冷至室溫，用溶劑稀釋至刻度(如有泡沫，可加入幾滴乙腈)，搖勻，用0.45 μm的濾膜過濾，棄去初濾液6 mL，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.6對(duì)照溶液精密量取供試品溶液1 mL，置于100 mL量瓶中，加溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。

2.7測定方法精密量取上述溶液各20 μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按照外標(biāo)法以峰面積計(jì)算已知雜質(zhì)含量，并對(duì)未知雜質(zhì)用自身對(duì)照法進(jìn)行計(jì)算。同時(shí)記錄供試品溶液在316 nm波長處的色譜圖，以確定未知雜質(zhì)的歸屬。有關(guān)物質(zhì)CGS14831的含量不得超過鹽酸貝那普利標(biāo)示量的3.0%；有關(guān)物質(zhì)CGS14829A和CGP42454A的含量應(yīng)不得超過鹽酸貝那普利標(biāo)示量的1.0%；有關(guān)物質(zhì)SU5683的含量不得超過氫氯噻嗪標(biāo)示量的1.0%。鹽酸貝那普利中未知雜質(zhì)的峰面積與對(duì)照溶液的峰面積比較，單個(gè)未知雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液峰面積的0.5倍(0.5%)；除有關(guān)物質(zhì)CGS14831外，鹽酸貝那普利中有關(guān)物質(zhì)的總量不得超過2.0%；氫氯噻嗪中未知雜質(zhì)的峰面積與對(duì)照溶液峰面積比較，單個(gè)未知雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液峰面積的0.5倍(0.5%)；氫氯噻嗪中有關(guān)物質(zhì)的總量不得超過1.0%。

2.8干擾實(shí)驗(yàn)

2.8.1空白輔料溶液精密稱取本品空白輔料870 mg，置于50 mL量瓶中，加溶劑40 mL，振搖，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，過濾，取續(xù)濾液作為空白輔料溶液，按照上述色譜條件測定，記錄色譜圖。

2.8.2系統(tǒng)適用性溶液取氫氯噻嗪對(duì)照品25 mg，鹽酸貝那普利對(duì)照品20 mg，精密稱定，置于25 mL量瓶中，分別加入CGS14831、SU5683、CGS14829A和CGP42454A混合雜質(zhì)對(duì)照品儲(chǔ)備液各1 mL，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為系統(tǒng)適用性溶液，按照上述色譜條件測定，記錄色譜圖。

2.8.3結(jié)果空白輔料、溶劑不干擾供試品有關(guān)物質(zhì)檢測，各雜質(zhì)與主峰之間和各雜質(zhì)之間的分離度均符合要求，結(jié)果表明，本方法專屬性良好。見圖1。

圖1HPLC圖

a.空白輔料240 nm；B.空白輔料316 nm；C.系統(tǒng)適用性240 nm；D.系統(tǒng)適用性316 nm

Fig.1 HPLC chromatograms

a.blank adjuvants at 240 nm；B.blank adjuvants at 316 nm；C.system suitability at 240 nm；D.system suitability at 316 nm

2.9專屬性實(shí)驗(yàn)(破壞實(shí)驗(yàn))將原料經(jīng)酸、堿、熱、光、氧強(qiáng)制降解后，進(jìn)行二極管陣列檢測器分析檢測,確定雜質(zhì)的歸屬，對(duì)供試品、空白輔料進(jìn)行酸、堿、熱、光、氧強(qiáng)制降解后，進(jìn)行二極管陣列檢測器分析檢測，進(jìn)一步考察有關(guān)物質(zhì)檢測色譜條件的專屬性。

2.9.1實(shí)驗(yàn)操作

2.9.1.1鹽酸貝那普利

(1)酸破壞供試品溶液取鹽酸貝那普利8 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑5 mL,溶解，精密加入1 mol·L-1的鹽酸溶液1 mL，放置24 h，再加入1 mol·L-1氫氧化鈉溶液1 mL，并用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為酸破壞供試品溶液。

(2)堿破壞供試品溶液取鹽酸貝那普利8 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑5 mL，溶解，精密加入1 mol·L-1的氫氧化鈉溶液1 mL，放置24 h，再加入1 mol·L-1的鹽酸溶液1 mL，并用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為堿破壞供試品溶液。

(3)熱破壞供試品溶液取鹽酸貝那普利8 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑5 mL，溶解，置于80 ℃水浴中加熱8 h，取出，放冷至室溫，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為熱破壞供試品溶液。

(4)氧破壞供試品溶液取鹽酸貝那普利8 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑5 mL溶解，精密加入100 g·L-1過氧化氫溶液1 mL，混勻，室溫放置12 h，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為氧破壞供試品溶液。

(5)光破壞供試品溶液取鹽酸貝那普利8 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑8 mL，溶解，在4 500±500 lx的條件下，放置48 h，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為光破壞供試品溶液。

2.9.1.2氫氯噻嗪

(1)酸破壞供試品溶液取氫氯噻嗪10 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑5 mL，溶解，精密加入1 mol·L-1的鹽酸溶液1 mL，放置24 h，再加入1 mol·L-1的氫氧化鈉溶液1 mL，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為酸破壞供試品溶液。

(2)堿破壞供試品溶液取氫氯噻嗪10 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑5 mL，溶解，精密加入1 mol·L-1的氫氧化鈉溶液1 mL，放置24 h，再加入1 mol·L-1的鹽酸溶液1 mL，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為堿破壞供試品溶液。

(3)熱破壞供試品溶液取氫氯噻嗪10 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑5 mL,溶解，置于80 ℃水浴中加熱8 h，取出，放冷至室溫，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為熱破壞供試品溶液。

(4)氧破壞供試品溶液取氫氯噻嗪10 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑5 mL,溶解，精密加入100 g·L-1過氧化氫溶液1 mL，混勻，室溫放置12 h，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為氧破壞供試品溶液。

(5)光破壞供試品溶液取氫氯噻嗪10 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑8 mL,溶解，在4 500±500 lx的條件下，放置48 h，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，作為光破壞供試品溶液。

2.9.1.3供試品及空白輔料破壞實(shí)驗(yàn)

(1)未破壞供試品溶液取本品細(xì)粉，精密稱取適量鹽酸貝那普利8 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑8 mL，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，過濾，棄去初濾液6 mL，取續(xù)濾液作為供試品溶液。取空白輔料190 mg，同法制得未破壞空白輔料溶液。

(2)酸破壞供試品溶液取本品細(xì)粉，精密稱取鹽酸貝那普利8 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑5 mL，超聲處理10 min，振搖15 min，放冷至室溫，加入1 mol·L-1的鹽酸溶液1 mL，放置24 h，再加入1 mol·L-1氫氧化鈉溶液1 mL，并用溶劑稀釋至刻度，搖勻，用0.45 μm的濾膜過濾，棄去初濾液6 mL，取續(xù)濾液作為供試品溶液。取空白輔料190 mg，同法制得酸破壞空白輔料溶液。

(3)堿破壞供試品溶液取本品細(xì)粉，精密稱取鹽酸貝那普利8 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑5 mL，振搖，精密加入1 mol·L-1的氫氧化鈉溶液1 mL，放置24 h，精密加入1 mol·L-1的鹽酸溶液1 mL，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，過濾，棄去初濾液6 mL，取續(xù)濾液作為供試品溶液。取空白輔料190 mg，同法制得堿破壞空白輔料溶液。

(4)熱破壞供試品溶液取本品細(xì)粉，精密稱取鹽酸貝那普利8 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑5 mL，振搖，置于80 ℃水浴中，加熱8 h，取出，放冷至室溫，并用溶劑稀釋至刻度，搖勻，過濾，棄去初濾液6 mL，取續(xù)濾液作為供試品溶液。取空白輔料190 mg，同法制得熱破壞空白輔料溶液。

(5)氧破壞供試品溶液取本品細(xì)粉，精密稱取鹽酸貝那普利8 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑5 mL，振搖，精密加入100 g·L-1過氧化氫溶液1 mL，混勻，室溫放置12 h，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，過濾，棄去初濾液6 mL，取續(xù)濾液作為供試品溶液。取空白輔料190 mg，同法制得氧化破壞空白輔料溶液。

(6)光破壞供試品溶液取本品細(xì)粉，精密稱取鹽酸貝那普利8 mg，置于10 mL量瓶中，加溶劑8 mL，振搖，在4 500±500 lx的條件下，放置48 h，用溶劑稀釋至刻度，搖勻，過濾，棄去初濾液6 mL，取續(xù)濾液作為供試品溶液。取空白輔料190 mg，同法制得氧化破壞空白輔料溶液。

(7)測定方法精密量取上述供試品溶液各20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。DAD三維圖見圖2，貝那普利氫氯噻嗪片原料破壞實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1，貝那普利氫氯噻嗪片樣品破壞實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。

表1貝那普利氫氯噻嗪片原料破壞實(shí)驗(yàn)結(jié)果

Tab.1 The destructive test results of API of Benazepril Hydrochloride and Hydrochlorothiazide Tablets

樣品名稱雜質(zhì)峰個(gè)數(shù)雜質(zhì)保留時(shí)間/min不純物峰純度指數(shù)單點(diǎn)閾值未破壞樣品氫氯噻嗪26．175-0．9999630．9999407．014鹽酸貝那普利24．186-0．9999990．9999726．919酸破壞氫氯噻嗪26．147-0．9999660．9999566．957鹽酸貝那普利24．201-0．9999940．99990024．476酸破壞氫氯噻嗪34．342-0．9999400．9999295．9036．608鹽酸貝那普利24．204-0．9999950．99997124．522高溫破壞氫氯噻嗪25．906-0．9999360．9999286．602鹽酸貝那普利24．188-0．9999900．99997124．488光照破壞氫氯噻嗪24．595-0．9999680．9999566．228鹽酸貝那普利24．216-0．9999920．99997224．580氧化破壞氫氯噻嗪34．360-0．9999640．9999325．9336．653鹽酸貝那普利24．200-0．9999920．99997124．586

注：-表示未檢出。

表2貝那普利氫氯噻嗪片樣品破壞實(shí)驗(yàn)結(jié)果

Tab.2 The destructive test results of samples of Benazepril Hydrochloride and Hydrochlorothiazide Tablets

樣品名稱雜質(zhì)峰個(gè)數(shù)雜質(zhì)保留時(shí)間/min主峰純度/%物料平衡/%不純物峰純度指數(shù)單點(diǎn)閾值未破壞樣品氫氯噻嗪鹽酸貝那普利24．2726．17199．75--0．9999550．9999450．9999990．999955酸破壞氫氯噻嗪鹽酸貝那普利34．3164．6176．25495．5696．4-0．9999810．9997360．9999920．999872堿破壞氫氯噻嗪鹽酸貝那普利34．3064．6026．23995．5496．1-0．9999930．9997310．9999660．999865高溫破壞氫氯噻嗪鹽酸貝那普利24．1145．87597．8795．7-0．9999490．9999231．0000000．999938光照破壞氫氯噻嗪鹽酸貝那普利34．2974．5926．22495．5698．1-0．9999810．9997900．9999930．999897氧化破壞氫氯噻嗪鹽酸貝那普利24．1295．90699．0999．6-0．9999490．9999211．0000000．999934

注：-表示未檢出。

圖2專屬性實(shí)驗(yàn)DAD三維圖

A1.鹽酸貝那普利未破壞；A2.氫氯噻嗪未破壞；B1.鹽酸貝那普利酸破壞；B2.氫氯噻嗪酸破壞；C1.鹽酸貝那普利堿破壞；C2.氫氯噻嗪堿破壞；D1.鹽酸貝那普利熱破壞；D2.氫氯噻嗪熱破壞；E1.鹽酸貝那普利氧化破壞；E2.氫氯噻嗪氧化破壞；F1.鹽酸貝那普利光破壞；F2.氫氯噻嗪光破壞

Fig.2 The three-dimensional figures of DAD of specificity test

A1.no damage of benazepril hydrochloride；A2.no damage of hydrochlorothiazide；B1.benazepril hydrochloride destroyed by acid；B2.hydrochlorothiazide destroyed by acid；C1.benazepril hydrochloride destroyed by alkali；C2.hydrochlorothiazide destroyed by alkali；D1.benazepril hydrochloride destroyed by heat；D2.hydrochlorothiazide destroyed by heat；E1.benazepril hydrochloride destroyed by oxidation；E2.hydrochlorothiazide destroyed by oxidation；F1.benazepril hydrochloride destroyed by light；F2.hydrochlorothiazide destroyed by light

A1.no damage of benazepril hydrochloride；A2.no damage of hydrochlorothiazide；B1.benazepril hydrochloride destroyed by acid；B2.hydrochlorothiazide destroyed by acid；C1.benazepril hydrochloride destroyed by alkali；C2.hydrochlorothiazide destroyed by alkali；D1.benazepril hydrochloride destroyed by heat；D2.hydrochlorothiazide destroyed by heat；E1.benazepril hydrochloride destroyed by oxidation；E2.hydrochlorothiazide destroyed by oxidation；F1.benazepril hydrochloride destroyed by light；F2.hydrochlorothiazide destroyed by light

A1.no damage of benazepril hydrochloride；A2.no damage of hydrochlorothiazide；B1.benazepril hydrochloride destroyed by acid；B2.hydrochlorothiazide destroyed by acid；C1.benazepril hydrochloride destroyed by alkali；C2.hydrochlorothiazide destroyed by alkali；D1.benazepril hydrochloride destroyed by heat；D2.hydrochlorothiazide destroyed by heat；E1.benazepril hydrochloride destroyed by oxidation；E2.hydrochlorothiazide destroyed by oxidation；F1.benazepril hydrochloride destroyed by light；F2.hydrochlorothiazide destroyed by light

2.9.2實(shí)驗(yàn)結(jié)果結(jié)果顯示，有關(guān)物質(zhì)CGS14831、CGS14829A和CGP42454A來源于鹽酸貝那普利；SU5683來源于氫氯噻嗪；破壞后的樣品降解出的雜質(zhì)，與主峰均能有效分離，且各破壞條件下的主峰無不純物，證明采用該色譜方法檢測本品有關(guān)物質(zhì)，具有較強(qiáng)的專屬性。

2.10線性范圍考察

2.10.1對(duì)照品線性在本品有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)下的雜質(zhì)對(duì)照品溶液濃度的定量限至限度的200%范圍內(nèi)做線性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，本品在該范圍內(nèi)呈線性，回歸方程分別為：CGS14831：Y=14 203X+29 662，相關(guān)系數(shù)r=0.999 6；CGP42454A和CGS14829A的混合對(duì)照：Y=7 178.4X+11 561，相關(guān)系數(shù)r=0.999 5；SU5683：Y=5 795X-7 262.8，相關(guān)系數(shù)r=0.999 7。

2.10.21%對(duì)照溶液線性在本品有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)下1%對(duì)照溶液的0.1%～4.0%范圍內(nèi)做線性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，本品在該范圍內(nèi)呈線性關(guān)系，鹽酸貝那普利的回歸方程:Y=14 949X+8 262.7，相關(guān)系數(shù)r=0.999 1；氫氯噻嗪的回歸方程為Y=5 112.4X+7 506，相關(guān)系數(shù)r=0.999 4。

2.11準(zhǔn)確度考察對(duì)本品已知3個(gè)雜質(zhì)3個(gè)不同濃度進(jìn)行回收率實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，有關(guān)物質(zhì)CGS14831的平均回收率為97.96%，RSD為1.08%；有關(guān)物質(zhì)SU5683的平均回收率為98.70%，RSD為1.14%；有關(guān)物質(zhì)CGP42454A和CGS14829A混合對(duì)照品的平均回收率為99.71%，RSD為0.97%；平均回收率均在80.0%～120.0%之間，RSD均小于10%，結(jié)果顯示，本方法準(zhǔn)確度良好。

2.12重復(fù)性考察取同一批供試品溶液6份，按上述方法處理，依法測定峰面積，對(duì)6個(gè)結(jié)果之間的精密度進(jìn)行重復(fù)性實(shí)驗(yàn)。有關(guān)物質(zhì)CGS14831的RSD為3.83%、有關(guān)物質(zhì)SU5683的RSD為4.96%、有關(guān)物質(zhì)CGP42454A和CGS14829A混合對(duì)照品的RSD為5.95%。結(jié)果表明，該方法重復(fù)性較好。

2.13樣品檢測采用上述的有關(guān)物質(zhì)檢測方法對(duì)本品3批市售品進(jìn)行有關(guān)物質(zhì)檢查，自制3批樣品檢驗(yàn)結(jié)果符合規(guī)定，雜質(zhì)個(gè)數(shù)及含量與參比制劑基本一致。結(jié)果見表3。

3討論

貝那普利氫氯噻嗪片是由鹽酸貝那普利和氫氯噻嗪為主要成分組成的復(fù)方降壓藥，該產(chǎn)品原質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(YBH04162009)有關(guān)物質(zhì)檢測方法為高效液相色譜法[4]，采用原標(biāo)準(zhǔn)供試品濃度對(duì)有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，雜質(zhì)響應(yīng)值太小，不易被檢出，將濃度調(diào)整為原標(biāo)準(zhǔn)的4倍，雜質(zhì)能準(zhǔn)確檢測到，故確定用4倍濃度進(jìn)行本品有關(guān)物質(zhì)的檢測。

表3樣品有關(guān)物質(zhì)檢測結(jié)果

Tab.3 Results of related substances determination

批號(hào)CGS14831/%SU5683/%CGP42454A/%貝那普利其他雜質(zhì)/%氫氯噻嗪其他雜質(zhì)/%貝那普利總雜/%氫氯噻嗪總雜/%201202010．050．06----0．06201202020．060．05----0．05201202030．070．05----0．05市售品0．130．28--0．070．070．28

注：-表示未檢出。原標(biāo)準(zhǔn)采用316 nm作為檢測波長，對(duì)鹽酸貝那普利的雜質(zhì)檢測不夠準(zhǔn)確，現(xiàn)參考有關(guān)文獻(xiàn)[5-7]，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定有關(guān)物質(zhì)的檢測波長為240 nm，并同時(shí)以316 nm的波長進(jìn)行檢測。結(jié)果表明，該方法線性、準(zhǔn)確度、重復(fù)性等均符合要求，可作為本品有關(guān)物質(zhì)的控制方法。

參考文獻(xiàn)：

[1]國家藥典委員會(huì).中國藥典2010年版[S]. 二部，北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：附錄29-31.

[2]國家食品藥品監(jiān)督管理局.局令28號(hào).藥品注冊(cè)管理辦法[S]2007:7-10.

[3]國家食品藥品監(jiān)督管理局.藥物研究技術(shù)指導(dǎo)原則(2005)[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社.2005：196.

[4]YBH04162009,中華人民共和國單頁標(biāo)準(zhǔn)[S].

[5]陳小偉，劉阿利.纈沙坦氫氯噻嗪片有關(guān)物質(zhì)測定方法研究[J].齊魯藥事，2012，31(4):214-216.

[6]陳鳳菊，李燕，李建文，等.HPLC法測定氯沙坦鉀-氫氯噻嗪復(fù)方分散片中藥物及有關(guān)物質(zhì)的含量[J].沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，2009，26(6):460-465.

[7]蘇敏，章志強(qiáng)，鄧玉清，等.RP-HPLC法測定貝那普利氫氯噻嗪片的含量[J].西北藥學(xué)雜志，2014，29(6):583-586.

Determination of related substances in Benazepril Hydrochloride and Hydrochlorothiazide Tablets by HPLC

DU Xiaoying1，MA Dongwei1，SONG Yuanzhi2(1.Shaanxi Ark Pharmaceutical Limited Company，Xi′an 710075，China；2.Shaanxi Institute for Food and Drug Control， Xi′an 710065，China)

Abstract:Objective To establish a method for the determination of related substances in Benazepril Hydrochloride and Hydrochlorothiazide Tablets by HPLC. Method Ultimate AQ-C18column(250 mm×4.60 mm，5 μm) was used；the mobile phase consisted of tetrahydrofuran water-glacial acid(250 mL+750 mL+4 mL，add tetrabutylammonium bromide 1.0 g)，with a flow rate of 1.5 mL·min-1. The detection wavelength was 240 and 316 nm. Results The calibration curve of impurities CGS14831 was linear in the range of 3.74-28.08 μg·mL-1，r=0.999 6；the calibration curve of impurities CGP42454A and CGS14829A were linear in the range of 1.63-12.19 μg·mL-1，r=0.999 5；the calibration curve of impurities SU5683 was linear in the range of 2.03-15.24 μg·mL-1，r=0.999 7. Conclusion The method is repeatable and accurate, and could be used for the quality control of Benazepril Hydrochloride and Hydrochlorothiazide Tablets.

Key words:benazepril hydrochloride；hydrochlorothiazide；related substances；HPLC

(收稿日期：2015-06-27)

中圖分類號(hào)：R927.2

文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1004-2407(2016)02-0149-06

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.02.012