王曉明

（山東省博興縣畜牧獸醫(yī)局，山東博興　256500）

豬流行性腹瀉病毒病的診治

王曉明

（山東省博興縣畜牧獸醫(yī)局，山東博興256500）

山東省博興縣某規(guī)模豬場(chǎng)新生仔豬發(fā)生了一起以嚴(yán)重腹瀉、脫水、嘔吐為主要特征的疫病，通過發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化等臨床診斷以及RT-PCR等實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，最終確定致病原為豬流行性腹瀉病毒。通過采取系列針對(duì)性治療措施，病情得到了有效控制。

豬流行性腹瀉病毒；診斷；治療

豬流行性腹瀉（porcine epidemic diarrhea，PED）是由豬流行性腹瀉病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）引起豬的一種急性、高度接觸性腸道傳染?。?］，該病可以導(dǎo)致豬的嚴(yán)重腹瀉，引起生產(chǎn)性能下降，嚴(yán)重的可導(dǎo)致死亡，是威脅養(yǎng)豬業(yè)的重要病毒性傳染病。近幾年，我國(guó)豬場(chǎng)發(fā)生豬流行性腹瀉病毒感染的報(bào)道日益增多［2.3］，給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)帶來了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。2015年10月，山東省博興縣某規(guī)模豬場(chǎng)新生仔豬發(fā)生了一起以嚴(yán)重腹瀉、脫水、嘔吐為主要特征的疫病，通過發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化等臨床診斷以及RT-PCR等實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，最終確定致病原為豬流行性腹瀉病毒。根據(jù)診斷結(jié)果，對(duì)豬場(chǎng)發(fā)病豬采取對(duì)癥治療，全部豬群進(jìn)行緊急疫苗免疫接種，同時(shí)對(duì)豬場(chǎng)進(jìn)行嚴(yán)格的衛(wèi)生消毒，豬場(chǎng)的病情得到有效控制。

1　發(fā)病情況

2015年10月，山東省博興縣某豬場(chǎng)所飼養(yǎng)的哺乳仔豬率先發(fā)病，主要表現(xiàn)為嘔吐、腹瀉、脫水，同圈仔豬發(fā)病率達(dá)100%，隨后向不同圈仔豬蔓延，發(fā)病后曾用抗生素治療無效，該豬場(chǎng)未進(jìn)行過豬病毒性腹瀉疫病相關(guān)疫苗的免疫。

2　臨床癥狀

發(fā)病仔豬精神沉郁，食欲下降，水樣腹瀉，糞便黃綠色，脫水，嘔吐，機(jī)體極度消瘦，但體溫正常。仔豬發(fā)病后2～3d內(nèi)死亡，發(fā)病率達(dá)80%以上，死亡率在50%以上。

3　病理變化

取病死仔豬進(jìn)行剖檢，可見病變主要在小腸，尸體脫水明顯，胃內(nèi)有尚未消化的乳凝塊，胃底黏膜出血，腸內(nèi)充滿黃綠色液體，腸壁變薄，腸管變透明，腸系膜充血嚴(yán)重，淋巴結(jié)腫脹。

4　實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

取病死豬的腸黏膜等病變組織剪碎，以1∶3比例加入滅菌生理鹽水后研磨，12 000 rpm/min離心10 min，取上清液利用病毒基因組RNA提取試劑盒（購(gòu)自北京百泰克生物技術(shù)有限公司）提取病料組織的基因組RNA。根據(jù)參考文獻(xiàn)［4］分別合成擴(kuò)增PEDV、TGEV、RV的特異性檢測(cè)引物，以提取的組織病料病毒基因組RNA為模板，按照參考文獻(xiàn)［4］中的RT-PCR反應(yīng)程序，利用一步法RT-PCR擴(kuò)增試劑盒（購(gòu)自大連寶生物工程有限公司）進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增，RT-PCR擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳顯示，RT-PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在347 bp的位置出現(xiàn)特異性的擴(kuò)增條帶，與PEDV檢測(cè)引物的預(yù)期擴(kuò)增片段大小一致，而TGEV、RV的檢測(cè)引物均沒有擴(kuò)增產(chǎn)物。

5　綜合診斷結(jié)果

經(jīng)發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化等臨床診斷以及RT-PCR等實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，確診此次疫病由感染豬流行性腹瀉病毒所致。

6　治療措施

確診豬場(chǎng)致病原為豬流行性腹瀉病毒后，采取了仔豬保溫、豬場(chǎng)嚴(yán)格消毒、仔豬及時(shí)補(bǔ)液、緊急免疫接種等一系列措施：消毒措施，對(duì)圈舍、器具等進(jìn)行全面徹底消毒；保溫，保持豬舍溫度高于正常溫度1℃以上；補(bǔ)液，發(fā)病豬群普遍使用優(yōu)質(zhì)口服補(bǔ)液鹽（購(gòu)自重慶方通動(dòng)物藥業(yè)有限公司），防止進(jìn)一步脫水；防繼發(fā)感染，發(fā)病豬群普遍使用痢菌凈（購(gòu)自重慶方通動(dòng)物藥業(yè)有限公司），防止繼發(fā)細(xì)菌感染；疫苗免疫，對(duì)全場(chǎng)豬群緊急免疫接種豬流行性腹瀉病毒活疫苗（購(gòu)自哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司）。采取上述治療措施后，豬場(chǎng)的發(fā)病率和死亡率迅速大幅度降低，2周后疫情得到緩解，豬場(chǎng)重新步入穩(wěn)定狀態(tài)。

7　討論

PEDV與豬傳染性胃腸炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus，TGEV）、輪狀病毒（Rotavirus，RV）感染的臨床癥狀和病理變化均極其相似，且常常存在混合感染以及一些細(xì)菌的繼發(fā)感染，增加了臨床鑒別診斷的難度，僅憑發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化等很難作出確診，確診還需借助實(shí)驗(yàn)室診斷方法。其中RT-PCR檢測(cè)方法能夠檢測(cè)到病毒基因組特定的核苷酸序列，具有血清學(xué)診斷方法無法比擬的準(zhǔn)確性，且該方法操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)快速、敏感性高、特異性強(qiáng)，是目前動(dòng)物疫病診斷中常用的快速檢測(cè)技術(shù)［5］。故本研究利用曹玉琴等［4］的PEDV-TGEV-RV多重RT-PCR鑒別檢測(cè)方法對(duì)臨床病例進(jìn)行了確診，曹玉琴等［4］方法對(duì)PEDV、TGEV和RV能分別擴(kuò)增出大小為347、779和510 bp的預(yù)期片段，靈敏度高，最低可以檢測(cè)約1.5× 105拷貝的陽性RNA模板，特異性強(qiáng)，對(duì)豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、日本腦炎病毒和偽狂犬病病毒的檢測(cè)均為陰性，是一種簡(jiǎn)便、快速、鑒別檢測(cè)PEDV、TGEV和RV的有效方法。故本研究選擇曹玉琴等［4］的方法作為PEDV感染的確診方法，使本研究診斷的可靠性和準(zhǔn)確性大大提高。

本病目前還沒有特效治療藥物，應(yīng)采取以加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和疫苗免疫接種為主的綜合性預(yù)防控制措施，豬場(chǎng)一旦發(fā)生豬流行性腹瀉病毒感染后應(yīng)采取對(duì)癥療法，減輕失水和酸中毒，防止細(xì)菌繼發(fā)感染，加強(qiáng)護(hù)理，做好防寒保暖，可以按照仔豬體重肌肉注射高免血清進(jìn)行被動(dòng)治療，對(duì)失水過多的病豬，靜脈滴注葡萄糖和格林氏液。

［1］劉政龍，王金良，沈志強(qiáng).豬流行性腹瀉病毒研究進(jìn)展［J］.中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2015，42（9）：2506-2511.

［2］劉小蘭，賀筍，陳蘭玲，等.豬流行性腹瀉病毒（XJ-DB2）株的分離鑒定［J］.中國(guó)獸醫(yī)雜志，2016，52（1）：19-21.

［3］張生祥，馬文瑞，包守泰，等.一例豬流行性腹瀉病毒的分離與鑒定［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2015，（20）：109-110.

［4］曹玉琴，付丹，楊堯，等.PEDV-TGEV-RV多重RT-PCR鑒別檢測(cè)方法的建立及應(yīng)用［J］.中國(guó)獸醫(yī)科學(xué)，2015，45（9）：5-11.

［5］楊麗梅，馬力，徐倩倩，等.我國(guó)豬病毒性腹瀉的診斷與流行病學(xué)調(diào)查研究概況［J］.動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2014，35（2）：115-119.

（編輯：晏兵兵）

S858.28

A

1006-799X（2016）15-0062-02

王曉明（1976-），男，山東博興人，助理獸醫(yī)師，主要研究方向?yàn)樾竽莲F醫(yī)。