侯　杰 綜述，管世鶴 審校

(安徽醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，合肥 230001)

?

·綜述·

維生素D與乙型肝炎關(guān)系研究進(jìn)展*

侯杰 綜述，管世鶴△審校

(安徽醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，合肥 230001)

維生素D；乙型肝炎；維生素D受體

維生素 D(VD)是人體的一種必需維生素，主要是通過(guò)日曬合成或食物攝入，合成的VD3需要和VD轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白或清蛋白結(jié)合后，運(yùn)輸至肝臟和腎臟進(jìn)行羥化并形成具有生物活性的VD [1,25(OH)2D3]。另外，由肝臟中合成的25(OH)D是人體血液循環(huán)中VD主要代謝產(chǎn)物，也是監(jiān)測(cè)體內(nèi)VD狀態(tài)最穩(wěn)定的指標(biāo)[1]。既往研究表明，VD在體內(nèi)主要發(fā)揮調(diào)節(jié)鈣、磷代謝與維持骨骼穩(wěn)態(tài)的作用，而VD不足則可引發(fā)一系列骨質(zhì)疾病。最新研究發(fā)現(xiàn)，慢性肝臟疾病中不僅普遍存在VD不足的現(xiàn)象，而且VD受體(VDR) 表達(dá)模式與慢性肝臟疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。本文就VD及其受體與乙型肝炎病毒(HBV)感染相關(guān)的最新研究進(jìn)展作如下綜述。

1　VD的簡(jiǎn)介

1.1VD的獲得VD為固醇類(lèi)衍生物，屬脂溶性維生素，具有抗佝僂病功能，所以又稱(chēng)為抗佝僂病維生素。VD種類(lèi)很多，其中以麥角鈣化醇(VD2)和膽鈣化醇(VD3)較為重要。VD2主要在植物中合成，在酵母、覃類(lèi)、麥角等含量較多。VD3在海魚(yú)、魚(yú)肝油、動(dòng)物肝臟等含量較多[2]。人體中VD主要由紫外線(xiàn)照射皮膚合成，皮膚中7脫氫膽固醇經(jīng)紫外線(xiàn)(波長(zhǎng)290～315 nm)照射后可轉(zhuǎn)化為VD3前體，再迅速經(jīng)過(guò)熱異構(gòu)反應(yīng)后生成VD3，另外，體內(nèi)僅有很少一部分的VD是通過(guò)食物獲得的[3]。

1.2VD的生化代謝和生理作用食物中的VD通過(guò)膽汁酸循環(huán)過(guò)程一起吸收至腸腔內(nèi)，再經(jīng)腸上皮細(xì)胞吸收后通過(guò)淋巴循環(huán)轉(zhuǎn)運(yùn)至血液中。食物攝入和皮膚合成的VD3經(jīng)過(guò)肝臟羥化作用變成為25(OH)D3，是VD的前體，經(jīng)過(guò)腎細(xì)胞再羥化成為1,25(OH)2D3(也稱(chēng)為骨化三醇)，隨血液循環(huán)到全身細(xì)胞，發(fā)揮激素作用[4]。VD可以促進(jìn)鈣和磷在腸道的吸收，以及腎小管對(duì)鈣和磷的重吸收，提高鈣、磷在血液中水平，與甲狀旁腺激素及降鈣素等激素具有協(xié)同作用，共同維持體內(nèi)鈣、磷水平穩(wěn)定。另有研究表明，VD在體內(nèi)主要是通過(guò)與分布在細(xì)胞內(nèi)的VDR結(jié)合而發(fā)揮免疫學(xué)功能的[5]。

2　VDR基因表達(dá)與乙型肝炎的關(guān)系

2.1VDR及其基因簡(jiǎn)介VDR為親核蛋白，是介導(dǎo)1,25(OH)2D發(fā)揮生物效應(yīng)的核內(nèi)生物大分子，屬于類(lèi)固醇激素/甲狀腺激素受體超家族成員。VD的許多生物學(xué)功能都是通過(guò)VDR介導(dǎo)調(diào)節(jié)靶基因轉(zhuǎn)錄來(lái)實(shí)現(xiàn)的，1,25(OH)2D 激素信號(hào)分子在靶細(xì)胞與VDR結(jié)合形成激素-受體復(fù)合物，該復(fù)合物作用于靶基因上的特定DNA序列，進(jìn)而調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)[6]。早在1980年，VDR就在免疫細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，后來(lái)逐漸發(fā)現(xiàn)VDR遍布于心、腦、腎臟、肝臟、皮膚以及各種免疫細(xì)胞中[7]。目前關(guān)于VDR基因多態(tài)性研究已經(jīng)有很多，發(fā)現(xiàn)了4個(gè)主要的多態(tài)性位點(diǎn)，分別為VDR-ApaⅠ(A/a,rs7975232)、VDR-TaqⅠ(T/t,rs731236)、VDR-FokⅠ(F/f,rs2228570/rs1073810)和VDR-BsmⅠ(B/b,rs1544410)[8]。

2.2VDR基因多態(tài)性與乙型肝炎的關(guān)系VDR介導(dǎo)活性VD發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，兩者結(jié)合后可抑制1型輔助型T細(xì)胞(Th1)的增殖以及干擾素的分泌[9]，而機(jī)體主要是以Th1細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫來(lái)清除HBV，因此，VDR基因的表達(dá)不同可能與HBV的感染具有很大的相關(guān)性。李俊紅等[10]通過(guò)聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(PCR-RFLP)技術(shù)分別對(duì)募集的無(wú)癥狀HBV攜帶組和慢性乙型肝炎組患者做VDR基因TaqⅠ和FokⅠ進(jìn)行基因分型測(cè)定，結(jié)果顯示攜帶含有FokⅠFF基因型在慢性乙型肝炎組的頻率顯著高于攜帶組，經(jīng)Logistic回歸分析，調(diào)整復(fù)雜條件后，兩組間FF基因型頻率的差異仍具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(OR=1.95,P<0.05)，F(xiàn)okⅠ和TaqⅠ組成的FT基因型在慢性乙肝組的頻率也明顯偏高(OR=1.45,P<0.05)，提示了VDR基因的表達(dá)不同很可能與HBV的易感性相關(guān)。國(guó)外學(xué)者Suneetha等[11]運(yùn)用熒光素酶分析慢性乙肝患者VDR基因結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)ApaⅠ和TaqⅠ的基因型與HBV的易感性以及感染后的高病毒載量、發(fā)展成肝癌具有重大的聯(lián)系。伊朗學(xué)者Arababadi等[12]獲取3 700例志愿者的標(biāo)本，并從中選取了352例隱匿性肝炎患者標(biāo)本，運(yùn)用PCR技術(shù)分析發(fā)現(xiàn)位于9號(hào)染色體外顯子上的基因位點(diǎn)，即TaqⅠ與隱匿性肝炎具有一定的聯(lián)系。結(jié)合國(guó)內(nèi)外學(xué)者近年來(lái)的研究，可以推測(cè)VDR基因的多態(tài)性與乙型肝炎的發(fā)生、發(fā)展以及結(jié)局相關(guān)聯(lián)[13-14]，但是目前國(guó)內(nèi)還未發(fā)現(xiàn)其具體機(jī)制以及關(guān)聯(lián)的準(zhǔn)確性，因此，上述結(jié)論還需大量實(shí)驗(yàn)加以證實(shí)。

3　VD缺乏與乙型肝炎的關(guān)系

近些年來(lái)，越來(lái)越多的國(guó)內(nèi)外學(xué)者發(fā)現(xiàn)在各種肝臟疾病中普遍存在著VD的缺乏，Wong等[15]學(xué)者從1997年到2000年登記的426例慢性乙肝患者，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期隨訪(fǎng)檢測(cè)他們血清25(OH)D3的水平以及HBV DNA載量水平，結(jié)果顯示82%的患者表現(xiàn)出 25(OH)D3的水平偏低(<32 ng/mL)，并且低血清25(OH)D3水平的患者更易病情惡化，發(fā)展為肝硬化，肝癌，甚至死亡。Farnik等[16]對(duì)203例慢性乙肝患者研究發(fā)現(xiàn)，血清25(OH)D3嚴(yán)重缺乏(<10 ng/mL)、中等缺乏(10～<20 ng/mL)、水平正常(≥20 ng/mL)分別占 34%、47%、19%，并且通過(guò)多因素分析，慢性乙肝患者體內(nèi)血清25(OH)D3水平與其HBV DNA載量呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，并且HBV DNA 載量與血清25(OH)D3水平呈現(xiàn)相反的季節(jié)性變化。另外，國(guó)外學(xué)者Stokes等[17]和Putz-Bankuti等[18]對(duì)慢性肝硬化和肝衰竭患者體內(nèi)VD水平進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，VD在慢性肝炎發(fā)展過(guò)程中可能是一個(gè)重要因素，血清內(nèi)低水平的VD可預(yù)示著肝組織的損傷程度高，病情發(fā)展快且預(yù)后效果差等情況，進(jìn)而提高了患者的病死率，因此維持患者體內(nèi)一定的VD水平，可有效緩解病程的發(fā)展。此外，研究表明，由多種不同原因引起的慢性肝臟疾病普遍存在VD的缺乏，如酒精性肝炎(ALD)[19]、自身免疫性肝病(AIH)[20]、慢性丙型肝炎(CHC)[21]、肝細(xì)胞癌(HCC)[22]等。

4　VD對(duì)乙型肝炎治療的影響

據(jù)研究表明，VD具有調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的功能，能減少CD4+T細(xì)胞的增殖、分化以及其細(xì)胞因子的分泌[23]，促進(jìn)抗炎因子IL-4、IL-5的分泌，同時(shí)提高調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的活性，刺激細(xì)胞免疫，參與機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)。Hu等[24]學(xué)者用雌性BALB/C小鼠構(gòu)建了急性肝炎的動(dòng)物模型，結(jié)果發(fā)現(xiàn)1,25(OH)2D3可以調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)應(yīng)答，顯著減少肝細(xì)胞的損傷，同時(shí)上調(diào)VDR的基因表達(dá)。目前對(duì)于慢性乙肝臨床上的治療還是依賴(lài)于干擾素，但患者對(duì)IFN-γ的病毒學(xué)應(yīng)答效果并不理想，對(duì)此國(guó)內(nèi)外進(jìn)行大量的實(shí)驗(yàn)研究。Lange等[25]學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，VDR可能與Jak-STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑具有某種相互關(guān)系，同時(shí)發(fā)現(xiàn)運(yùn)用骨化三醇可以明顯增加慢性肝炎患者對(duì)IFN-γ的免疫應(yīng)答，進(jìn)而為改善臨床上干擾素治療低療效的現(xiàn)狀提供了新的思路和方向。但就目前研究來(lái)說(shuō)，關(guān)于VD與慢性肝炎的關(guān)系研究還是較少，很多研究報(bào)道的結(jié)論有差異之處，這可能與樣本量、性別、年齡、檢測(cè)方法差異有關(guān)，因此，VD與慢性肝炎的發(fā)生、發(fā)展以及預(yù)后的關(guān)系還需要更多的實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證。

5　小結(jié)與展望

近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外對(duì)VD的研究發(fā)展非常迅速，VD除了能調(diào)節(jié)鈣、磷代謝外，還被認(rèn)為是一種新的免疫調(diào)節(jié)激素，具有調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的功能。HBV感染依舊是世界衛(wèi)生健康的一大難題，嚴(yán)重危害人類(lèi)的健康和生命。VDR基因多態(tài)性揭示可能與HBV感染有關(guān)，同時(shí)VD與乙型肝炎患者的治療相關(guān)，但目前對(duì)VD和VDR系統(tǒng)的研究還尚未健全，VD的缺乏對(duì)慢性肝炎的影響機(jī)制以及其與VDR系統(tǒng)對(duì)肝臟疾病的作用機(jī)制均未明確，對(duì)于補(bǔ)充VD來(lái)控制乙型肝炎患者病情發(fā)展，同時(shí)避免高鈣血癥的發(fā)生還有待進(jìn)一步的探索。因此，VD為HBV感染者治療提供的新思路和方法還需更多的前瞻性研究。

[1]Heaney RP.Vitamin D-baseline status and effective does[J].N Engl J Med,2012,367(1):77-78.

[2]楊春華．VD簡(jiǎn)介[J]．中國(guó)實(shí)用醫(yī)學(xué)，2009，4(3)：243-244．

[3]Kitson MT,Roberts SK.D-livering the message:the importance of vitamin D status in chronic liver disease[J].J Hepatol,2012,57(4):897-909.

[4]Lips P.Relative value of 25(OH)D and 1,25(OH)2D measurements[J].J Bone Miner Res,2007,22(11):1668-1671.

[5]Haussler MR,Whitfield GK,Haussler CA,et al.The nuclear vitamin D receptor:biological and molecular regulatory properties revealed[J].J Bone Miner Res,1998,13(3):325-349.

[6]李俊紅，李洪權(quán)，李卓，等.維生素D受體基因TaqⅠ、FokⅠ單核苷酸多態(tài)與HBV感染結(jié)局關(guān)聯(lián)探討[J].中華醫(yī)學(xué)雜志,2006,86(28):1952-1956.

[7]Ramagopalan SV,Heger A,Berlanga AJ,et al.A ChIP-seq defined genome-wide map of vitamin D receptor binding:associations with disease and evolution[J].Genome Res,2010,20(10):1352-1360.

[8]Huang YW,Liao YT,Chen W,et al.Vitamin D receptor gene polymorphisms and distinct clinical phenotypes of hepatitis B carriers in Taiwan[J].Genes Immun,2010,11(1):87-93.

[9]Margher ita T.Cantor na and Amanda Waddell.The Vitamin D receptor turns off chronically activated T cells [J].Ann N Y Acad Sci,2014,1317:70-75.

[10]李俊紅，陳冬梅，李卓，等.維生素D受體基因多態(tài)性與乙型肝炎病毒感染的關(guān)聯(lián)研究[J].中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志，2006,23(4):402-405.

[11]Suneetha PV,Sarin SK,Goyal A,et al.Association between vitamin D receptor,CCR5,TNF-alpha and TNF-beta gene polymorphisms and HBV infection and severity of liver disease[J].J Hepatol,2006,44(5):856-863.

[12]Arababadi MK,Pourfathollah AA.Association of exon 9 but not intron 8 VDR polymorphisms with occult HBV infection in south-eastern Iranian patients[J].J Gastroenterol Hepatol,2010,25(1):90-93.

[13]Yao X,Zeng H,Zhang G,et al.The associated ion between the VDR gene polymorphisms and susceptibility to hepatocellular carcinoma and the clinicopathological features in subjects infected with HBV[J].Biomed Res Int,2013，2013:953-974.

[14]Karatayli SC,Ulger ZE,Ergul AA,et al.Tumour necrosis factor-alpha,interleukin-10,interferon-gamma and vitamin D receptor gene polymorphisms in patients with chronic hepatitis delta[J].J Viral Hepat,2014,21(4):297-304.

[15]Wong GL,Chan HL,Chan HY,et al.Adverse effects of vitamin D deficiency on outcomes of patients with chronic hepatitis B[J].Clin Gastroenterol Hepatol,2015,13(4):783-790.

[16]Farnik H,Bojunga J,Berger A,et al.Low vitamin D serum concentration is associated with high levels of hepatitis B virus replication in chronically infected patients[J].Hepatology,2013,58(4):1270-1276.

[17]Stokes CS,Krawczyk M,Reichel C,et al.Vitamin D deficiency is associated with mortality in patients with advanced liver cirrhosis[J].Eur J Clin Invest,2014,44(2):176-183.

[18]Putz-Bankuti C,Pilz S,Stojakovic T,et al.Association of 25-hydroxyvitamin D levels with liver dysfunction and mortality in chronic liver disease[J].Liver Int,2012,32(5):845-851.

[19]Trépo E,Ouziel R,Pradat P,et al.Marked 25-hydroxyvitamin D deficiency is associated with poor prognosis in patients with alcoholic liver disease[J].J Hepatol,2013,59(2):344-350.

[20]Agmon-Levin N,Theodor E,Segal RM.Itamin D in systemic and Organ-Specific autoimmune diseases[J].Clin Rev Allergy Immunol,2013,45(2):256-266.

[21]Gentile I,Scarano F,Celotti A,et al.Low vitamin D levels are associated with the presence of serum cryoglobulins in patients with chronic HCV infection[J].In Vivo,2015,29(3):399-404.

[22]Chiang KC,Yeh CN,Chen MF,et al.Hepatocellular carcinoma and vitamin D:a review[J].J Gastroenterol Hepatol,2011,26(11):1597-1603.

[23]Konijeti GG,Arora P,Boylan MR,et al.Vitamin D supplementation modulates T Cell-Mediated immunity in humans:results from a randomized control trial[J].J Clin Endocrinol Metab,2016,101(2):533-538.

[24]Hu XD,Jiang SL,Liu CH,et al.Preventive effects of 1,25-(OH)2VD3against ConA-induced mouse hepatitis through promoting vitamin D receptor gene expression[J].Acta Pharmacol Sin,2010,31(6):703-708.

[25]Lange CM,Gouttenoire J,Duong FH,et al.Vitamin D receptor and Jak-STAT signaling crosstalk results in calcitriol-mediated increase of hepatocellular response to IFN-α[J].J Immunol,2014,192(12):6037-6044.

2016-02-24修回日期：2016-05-13)

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81171662)。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.15.032

A

1673-4130(2016)15-2134-03