李興，馬麗娜，彭大為，王美清，毛山山

(中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬?？卺t(yī)院?？谑腥嗣襻t(yī)院腫瘤化療科1、神經(jīng)內(nèi)科2，海南 ?？?570208)

VEGF、MMP及IL-6相關(guān)指標(biāo)的表達(dá)與非霍奇金淋巴瘤的相關(guān)性

李興1，馬麗娜2，彭大為1，王美清1，毛山山1

(中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬?？卺t(yī)院?？谑腥嗣襻t(yī)院腫瘤化療科1、神經(jīng)內(nèi)科2，海南 海口 570208)

目的 觀察血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)的表達(dá)，并探討其與非霍奇金淋巴瘤(NHL)的關(guān)系。方法選擇2010年1月至2013年12月在我院腫瘤化療科接受治療的NHL患者61例作為觀察組，選擇同期在我院接受治療的良性淋巴結(jié)病變患者50例作為對(duì)照組。比較兩組患者的VEGF、MMP-9及IL-6表達(dá)情況，同時(shí)分析其與不同病理的關(guān)系。結(jié)果觀察組患者的VEGF、MMP-9及IL-6陽性表達(dá)率分別為75.41%(46/61)、63.93%(39/61)、54.10%(33/61)，均明顯高于對(duì)照組的14.00%(14/50)、8.00%(4/50)、4.00%(2/50)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；在侵襲性病理分型、Ⅲ～Ⅳ期臨床分期、腫瘤≥3 cm、高度惡化、LDH升高患者中VEGF表達(dá)陽性率更高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(85.11%vs 42.86%，95.83%vs 35.14%，94.12%vs 68.18%，91.43%vs 53.85%，94.74%vs 61.90%，均P＜0.05)。在Ⅲ～Ⅳ期臨床分期、腫瘤≥3 cm、高度惡化患者中MMP-9表達(dá)陽性率更高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(91.67%vs 18.92%，88.24%vs 54.55%，82.86%vs 38.46%，均P＜0.05)。在Ⅲ～Ⅳ期臨床分期以及腫瘤≥3 cm患者中IL-6表達(dá)為陽性的比例更大，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(87.50%vs 32.43%，76.47%vs 45.45%，均P＜0.05)。結(jié)論NHL患者的VEGF、MMP-9及IL-6均呈現(xiàn)高水平表達(dá)，同時(shí)與病理分型、惡化程度、腫瘤大小等存在顯著的關(guān)系，臨床上可以根據(jù)這些指標(biāo)進(jìn)行腫瘤治療及預(yù)后判斷，具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

非霍奇金淋巴瘤；血管內(nèi)皮生長因子；基質(zhì)金屬蛋白酶；白細(xì)胞介素；相關(guān)性

侵襲與轉(zhuǎn)移作為腫瘤主要的臨床特性，對(duì)治療以及預(yù)后都有非常顯著的影響[1]。相關(guān)侵襲的嚴(yán)重結(jié)果容易導(dǎo)致治療的失敗，因此臨床上對(duì)相關(guān)侵襲的關(guān)注是顯得非常重要。非霍奇金淋巴瘤(NHL)在整個(gè)病變過程中就會(huì)表現(xiàn)出多個(gè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，臨床上通過測(cè)定腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行觀察[2]。其中血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)作為常見的生長因子，是血管新生增殖的主要因素。但新生的血管不穩(wěn)定性高，從而加大了病變的可能性。除此之外，基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)以及白細(xì)胞介素(IL)等指標(biāo)也為NHL的臨床治療、預(yù)后提供較多的理論依據(jù)[3]。鑒于此，本文通過觀察NHL患者VEGF、MMP-9以及IL-6等指標(biāo)的水平，分析其與NHL的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010年1月至2013年12月在我院接受治療的NHL患者61例作為觀察組，其中男性38例，女性23例；年齡28～79歲，平均(55.3±5.19)歲。另選擇同期在我院接受治療的良性淋巴結(jié)病變患者50例作為對(duì)照組，其中男性30例，女性20例；年齡30～71歲，平均(53.9±5.13)歲。兩組患者的年齡、性別等基本資料比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法 完善兩組患者的資料，包括病理分型、臨床分期腫瘤大小、惡性程度。同時(shí)對(duì)是否出現(xiàn)全身癥狀、血清乳酸脫氫酶(LDH)水平升高等進(jìn)行確定，然后采用免疫組化法對(duì)VEGF、MMP-9以及IL-6水平進(jìn)行測(cè)定。將得到的標(biāo)本應(yīng)用10%甲醛固定后石蠟包埋，然后制成4 μm的連續(xù)切片備用。其中鼠抗人的VEGF、MMP-9以及IL-6單克隆抗體均購自上海長嘉生物科技公司，按照說明書對(duì)組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)法檢測(cè)。最后在顯微鏡下觀察染色結(jié)果，并通過對(duì)染色陽性腫瘤細(xì)胞比例與強(qiáng)度評(píng)分。

1.3 判斷標(biāo)準(zhǔn)[4-5]首先進(jìn)行染色強(qiáng)度的計(jì)分：沒有染色者記為0分、輕度染色記為1分、中度染色記為2分以及強(qiáng)度染色記為3分。然后對(duì)染色細(xì)胞面積進(jìn)行定量計(jì)分：沒有細(xì)胞染色記為0分、＜25%的細(xì)胞被染色記為1分、25%～50%的細(xì)胞被染色記為2分以及＞50%的細(xì)胞被染色記為3分。最后將兩種計(jì)分相加記為染色總結(jié)果，當(dāng)總分＞2分記為陽性，反之為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組患者的VEGF、MMP-9及IL-6表達(dá)情況比較 觀察組患者的VEGF、MMP-9、IL-6陽性表達(dá)率均顯著高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表1。

表1 兩組患者的VEGF、MMP-9及IL-6表達(dá)情況比較[例（%）]

2.2 VEGF與NHL的病理關(guān)系 不同性別、年齡、是否有全身癥狀患者的VEGF表達(dá)情況比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≥0.05)。在侵襲性病理分型、Ⅲ～Ⅳ期臨床分期、腫瘤≥3 cm、高度惡化、LDH升高患者中VEGF表達(dá)陽性率更高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表2 VEGF與NHL的病理關(guān)系[例（%）]

2.3 MMP-9與NHL的病理關(guān)系 不同性別、年齡、病理分型、是否有全身癥狀以及是否存在LDH升高患者中MMP-9表達(dá)情況比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。在Ⅲ～Ⅳ期臨床分期、腫瘤≥3 cm、高度惡化患者中MMP-9表達(dá)陽性率更高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表3。

表3 MMP-9與NHL的病理關(guān)系[例（%）]

2.4 IL-6與NHL的病理關(guān)系 不同性別、年齡、病理分型、是否有全身癥狀、惡性程度以及是否存在LDH升高患者中IL-6表達(dá)情況比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。在Ⅲ～Ⅳ期臨床分期以及腫瘤≥3 cm患者中IL-6表達(dá)陽性陽性率更高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表4。

表4 IL-6與NHL的病理關(guān)系[例（%）]

3 討 論

淋巴癌作為惡性腫瘤之一，已經(jīng)引起研究人員的主要關(guān)注。在不同地區(qū)淋巴瘤的發(fā)生率存在差異，而在不同年齡階段都有發(fā)生淋巴癌的可能性。淋巴癌以NHL居多，臨床上對(duì)NHL的治療及預(yù)后是研究的主要內(nèi)容。因此，尋找準(zhǔn)確、高效的腫瘤標(biāo)記物能顯著提高預(yù)后效果。本文通過研究NHL患者與腫瘤良性增生患者相關(guān)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：觀察組VEGF、MMP-9以及IL-6陽性表達(dá)率均顯著高于對(duì)照組。符合Zhang等[6]和Wróbel等[7]的報(bào)道。VEGF作為腫瘤研究過程中主要預(yù)后不良因素，在整個(gè)研究過程中起到非常重要的指導(dǎo)作用。MMP-9是一類與腫瘤生長、侵襲存在顯著關(guān)系的基質(zhì)金屬蛋白酶，與IL-6共同為腫瘤的發(fā)生、預(yù)后提供有效指導(dǎo)依據(jù)。

本文通過對(duì)比VEGF、MMP-9以及IL-6與NHL的不同病理關(guān)系，分析得到：(1)在侵襲性病理分型、Ⅲ～Ⅳ期臨床分期、腫瘤≥3 cm、高度惡化以及LDH升高患者中VEGF表達(dá)為陽性的比例更大；(2)在Ⅲ～Ⅳ期臨床分期、腫瘤≥3 cm以及高度惡化患者中MMP-9表達(dá)為陽性的比例更大；(3)在Ⅲ～Ⅳ期臨床分期以及腫瘤≥3 cm患者中IL-6表達(dá)為陽性的比例更大?，F(xiàn)對(duì)結(jié)果做如下分析：(1)VEGF是目前臨床上作用效果最為顯著的促血管生成因子，通過與血管內(nèi)皮細(xì)胞膜上相關(guān)酶的特異性結(jié)合達(dá)到促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的效果[8-9]。新生血管在生成后其通透性過高并且形成不穩(wěn)定，這就使得大量的血漿外滲后積攢在血管外的基質(zhì)中。長期作用下，形成嚴(yán)重疾病。因此，腫瘤臨床分期越高、惡化程度越高以及腫瘤越大的NHL患者中VEGF水平越高。(2)腫瘤的侵襲以及轉(zhuǎn)移是研究的主要焦點(diǎn)，并且經(jīng)常將相關(guān)病理學(xué)特點(diǎn)作為臨床上對(duì)腫瘤良惡性及預(yù)后的判斷。在一般情況下腫瘤是從相應(yīng)瘤細(xì)胞脫離以后向相近組織發(fā)生侵犯行為，就細(xì)胞腫瘤跨過基質(zhì)等主要屏障。其中，基質(zhì)金屬蛋白酶作為構(gòu)成物中最主要的蛋白酶而被重點(diǎn)關(guān)注。尤其是MMP-9的高表達(dá)，往往是腫瘤深入研究過程中的主要標(biāo)志物[10]。MMP-9也被稱為明膠酶B，在細(xì)胞外基質(zhì)以及膜表面都有作用，也可在正常的上皮細(xì)胞中表達(dá)。在許多肺癌等嚴(yán)重疾病腫瘤細(xì)胞的出現(xiàn)、轉(zhuǎn)移等都發(fā)現(xiàn)MMP-9表達(dá)異常，還會(huì)出現(xiàn)在間質(zhì)腫瘤以及上皮相關(guān)來源的腫瘤。因此，MMP-9的表達(dá)與腫瘤的分化、分期都存在相關(guān)性。(3)IL-6對(duì)人體具有雙重的代表意義，不僅對(duì)生理水平有控制作用，同時(shí)又參與多數(shù)疾病的發(fā)展過程[11-12]。IL-6是可以來源于單核細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞甚至膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞因子，同樣在正常人體內(nèi)含量少。只在炎癥發(fā)生或存在腫瘤時(shí)會(huì)有IL-6表達(dá)異常，并參與組織細(xì)胞的分化、功能等多個(gè)過程。因此，在NHL患者中當(dāng)臨床分期增加以及腫瘤增大的過程中水平逐漸升高，發(fā)揮的負(fù)面影響也更大。

綜上所述，在NHL患者中VEGF、MMP-9以及IL-6水平顯著升高，同時(shí)VEGF、MMP-9以及IL-6水平的研究還能為臨床上對(duì)NHL的治療與預(yù)后提供理論依據(jù)，具有重要意義。

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Correlation between expression of VEGF,MMP and IL-6 related parameters and non-Hodgkin lymphoma.

LI Xing1,MA Li-na2,PENG Da-wei1,WANG Mei-qing1,MAO Shan-shan1.Department of Tumor-Chemotherapy1, Department of Neurology2,Central South University Xianya School of Medicine Affiliated Haikou Hospital(Haikou People's Hospital),Haikou 570208,Hainan,CHINA

Objective To observe the expression of vascular endothelial growth factor(VEGF),matrix metalloproteinase-9(MMP-9)and interleukin-6(IL-6),and to investigate their relationship with non-Hodgkin's lymphoma.MethodsSixty-one patients with non-Hodgkin lymphoma(NHL)were selected as the observation group and 50 patients with benign lymph node disease were enrolled as the control group(with hospitalized time limited from January 2010 to December 2013).The expression of VEGF,MMP-9 and IL-6 were compared between the two groups,and the relationships between them and different pathological changes were analyzed.ResultsThe positive expression rate of VEGF,MMP-9 and IL-6 were significantly higher in the observation group than the control group[75.41%(46/61)vs 14.00%(14/50),63.93%(39/61)vs 8.00%(4/50),54.10%(33/61)vs 4.00%(2/50),P＜0.05].The VEGF positive expression rates of patients with invasive pathological typing,Ⅲ～Ⅳclinical stage,tumor≥3 cm,high deterioration,elevated LDH were significantly higher(85.11%vs 42.86%,95.83%vs 35.14%,94.12%vs 68.18%,91.43%vs 53.85%,94.74%vs 61.90%,P＜0.05).The MMP-9 positive expression rate of patients withⅢ～Ⅳclinical stage,tumor≥3 cm,high deterioration were significantly higher(91.67%vs 18.92%,88.24%vs 54.55%,82.86%vs 38.40%,P＜0.05).The IL-6 positive expression rate of patients withⅢ～Ⅳclinical stage,tumor≥3 cm were significantly higher(87.50%vs 32.43%,76.47% vs 45.45%,P＜0.05).ConclusionVEGF,MMP-9,IL-6 in NHL patients show a high level of expression,and they have significant relationships with pathological type,deterioration degree and tumor size.These indicators can be used for tumor treatment and prognosis evaluation,which has great application value.

Non-Hodgkin lymphoma(NHL);Vascular endothelial growth factor(VEGF);Matrix metalloproteinases(MMP);Interleukin;Correlation

R733.4

A

1003—6350（2016）09—1412—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.09.013

2015-11-18)

李興。E-mail：370485421@qq.com