黃麗霞，馬利國

(深圳市人民醫(yī)院暨南大學(xué)附屬第二臨床學(xué)院婦科，廣東 深圳 518020)

子宮內(nèi)膜異位癥患者白細(xì)胞介素8的變化與復(fù)發(fā)的關(guān)系

黃麗霞，馬利國

(深圳市人民醫(yī)院暨南大學(xué)附屬第二臨床學(xué)院婦科，廣東 深圳 518020)

目的 研究子宮內(nèi)膜異位癥患者復(fù)發(fā)與白細(xì)胞介素8(IL-8)的關(guān)系。方法隨機(jī)選取2013年11月至2014年5月在我院婦科經(jīng)腹腔鏡及病理確診為子宮內(nèi)膜異位癥患者67例(內(nèi)異癥組)，術(shù)后隨訪18個月，其中臨床復(fù)發(fā)21例(復(fù)發(fā)組)，未復(fù)發(fā)40例(未復(fù)發(fā)組)，失訪6例。另選取30例同期健康育齡婦女為對照組。檢測各組受檢者在位內(nèi)膜IL-8 mRNA的表達(dá)。結(jié)果內(nèi)異癥組患者的在位內(nèi)膜IL-8 mRNA表達(dá)值為(20.58±6.43)，其中復(fù)發(fā)組表達(dá)值為(16.25±4.21)，未復(fù)發(fā)組為(1.48±0.66)，而對照組為(1.61±0.76)。內(nèi)異癥組在位內(nèi)膜IL-8 mRNA表達(dá)值均高于未復(fù)發(fā)組和對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；復(fù)發(fā)組IL-8 mRNA表達(dá)值亦均高于未復(fù)發(fā)組和對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；而未復(fù)發(fā)組IL-8 mRNA表達(dá)值與對照組比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論子宮內(nèi)膜異位癥患者和復(fù)發(fā)患者的在位內(nèi)膜IL-8 mRNA表達(dá)異常；未復(fù)發(fā)患者的IL-8 mRNA表達(dá)接近正常。IL-8參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生和發(fā)展。

子宮內(nèi)膜異位癥；在位內(nèi)膜；白細(xì)胞介素-8；復(fù)發(fā)；相關(guān)性

子宮內(nèi)膜異位癥簡稱內(nèi)異癥，發(fā)病率不斷上升，嚴(yán)重影響婦女的身心健康及生育能力[1]。該病的治療以手術(shù)為主，術(shù)后復(fù)發(fā)率高。目前術(shù)后復(fù)發(fā)的診斷僅限臨床診斷，缺乏一個好的監(jiān)測指標(biāo)。本研究通過檢測治療前后的子宮內(nèi)膜異位癥患者在位內(nèi)膜的IL-8 mRNA的表達(dá)變化，以探討其與子宮內(nèi)膜異位癥復(fù)發(fā)的關(guān)系，為子宮內(nèi)膜異位癥的術(shù)后復(fù)發(fā)的監(jiān)測和早干預(yù)提供依據(jù)，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機(jī)選取2013年11月到2014年5月在我院婦科經(jīng)腹腔鏡及病理確診為子宮內(nèi)膜異位癥的67例患者為內(nèi)異癥組，另選取30例因上環(huán)就診我院的同期健康育齡婦女為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：入組前3個月內(nèi)未行激素治療；月經(jīng)規(guī)律。排除標(biāo)準(zhǔn)：近期有生育要求；半年內(nèi)有內(nèi)異癥相關(guān)治療；有宮內(nèi)節(jié)育器；合并子宮腺肌病、子宮肌瘤、多囊卵巢綜合征等內(nèi)分泌相關(guān)疾病和自身免疫性疾病。本實(shí)驗(yàn)經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核批準(zhǔn)且入選者均已簽署知情同意書。

1.2 治療方法 內(nèi)異癥組手術(shù)方式均行保守性手術(shù)，術(shù)前取子宮內(nèi)膜，術(shù)中徹底清除子宮內(nèi)膜異位病灶，術(shù)后常規(guī)GnRH-a治療6個月，嚴(yán)密隨訪至術(shù)后18個月、行B超、婦科檢查和抽血查CA125等，評估其是否復(fù)發(fā)。按是否臨床復(fù)發(fā)分復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組，兩組均再取子宮內(nèi)膜。

1.3 子宮內(nèi)膜采集 常規(guī)消毒后采用一次性宮腔組織吸引管吸取子宮內(nèi)膜，固定保存，石蠟包埋。

1.4 檢測方法 各組取得的內(nèi)膜組織先行常規(guī)病理檢查，排除其他婦科疾病，再行實(shí)驗(yàn)。IL-8 mRNA的檢測采用實(shí)時定量PCR(RT-PCR)的方法測定子宮內(nèi)膜中IL-8 mRNA的表達(dá)情況。梯度PCR儀由美國PE公司提供，7500 Real Time PCR系統(tǒng)由美國ABI公司提供，相關(guān)試劑盒均由德國Qiagen公司提供。采用ΔΔCt值統(tǒng)計法進(jìn)行定量分析。具體如下：提取在位內(nèi)膜細(xì)胞的總RNA，進(jìn)行RNA標(biāo)本質(zhì)量及濃度測定，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA并以此為模版，以β-actin作為內(nèi)參照，按照PCR擴(kuò)增試劑盒進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增條件為：95℃變性30 s→95℃變性5 s→60℃變性34 s，共40個循環(huán)，引物資料，見表1。

表1 引物資料

1.5 內(nèi)異癥復(fù)發(fā)的定義 國內(nèi)對臨床復(fù)發(fā)的診斷標(biāo)準(zhǔn)：(1)術(shù)后癥狀緩解3個月后病變復(fù)發(fā)并加重；(2)術(shù)后盆腔陽性體征消失后又復(fù)出現(xiàn)或加重至術(shù)前水平；(3)術(shù)后超聲檢查發(fā)現(xiàn)新的內(nèi)異癥病灶；(4)血清CA125下降后又復(fù)升高，且排除其他疾病。符合上述(2)、(3)、(4)3項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)之一且伴或不伴有(1)項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)者診斷為復(fù)發(fā)。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)，率的比較采用卡方檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組的術(shù)中病灶累及情況比較 67例內(nèi)異癥組患者術(shù)后嚴(yán)密隨訪18個月，其中臨床復(fù)發(fā)21例(復(fù)發(fā)組)，未復(fù)發(fā)40例(未復(fù)發(fā)組)，失訪6例，術(shù)后18個月的復(fù)發(fā)率為31.34%，失訪率為8.96%。兩組的單側(cè)或雙側(cè)卵巢受累、是否合并后穹隆觸痛結(jié)節(jié)和rAFS評分比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，見表2。

表2 復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組患者的術(shù)中病灶累及情況比較（例）

2.2 復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組患者在位內(nèi)膜IL-8 mRNA的表達(dá)比較 內(nèi)異癥組患者的在位內(nèi)膜IL-8 mRNA表達(dá)值為(20.58±6.43)，其中復(fù)發(fā)組為(16.25±4.21)，未復(fù)發(fā)組為(1.48±0.66)，對照組IL-8 mRNA表達(dá)值為(1.61± 0.76)。內(nèi)異癥組在位內(nèi)膜IL-8 mRNA表達(dá)值分別與對照組和未復(fù)發(fā)組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(t= 14.430、15.130，P＜0.05)；復(fù)發(fā)組IL-8 mRNA表達(dá)值分別與對照組和未復(fù)發(fā)組比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(t= 13.330、14.320，P＜0.05)；而未復(fù)發(fā)組IL-8 mRNA表達(dá)值與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(t=-0.734，P＞0.05)。

3 討 論

子宮內(nèi)膜異位癥是育齡婦女一種常見及易復(fù)發(fā)的疾病。其發(fā)病率為10%～15%，且不斷上升。因多發(fā)于生育期婦女，保守性手術(shù)已成為最主要的治療方法，但術(shù)后極易復(fù)發(fā)。目前子宮內(nèi)膜異位癥復(fù)發(fā)的診斷僅限臨床診斷，缺乏一個好的監(jiān)測指標(biāo)。本研究發(fā)現(xiàn)IL-8參與了內(nèi)異癥的發(fā)生和發(fā)展，檢測IL-8 mRNA來預(yù)測復(fù)發(fā)，盡早干預(yù)，預(yù)防復(fù)發(fā)。

比較復(fù)發(fā)組和未復(fù)發(fā)組的手術(shù)中病灶累及情況發(fā)現(xiàn)，雙側(cè)卵巢受累，合并后穹隆觸痛結(jié)節(jié)，rAFS評分高易復(fù)發(fā)。雙側(cè)卵巢病變的患者與單側(cè)相比，復(fù)發(fā)率明顯增高，主要原因是雙側(cè)病變多為一種進(jìn)展了的病變，嚴(yán)重程度明顯高于單側(cè)病變的患者，因此復(fù)發(fā)率也相應(yīng)增高[2-4]。后穹窿出現(xiàn)觸痛結(jié)節(jié)多為病灶發(fā)生于直腸陰道隔內(nèi)，病變浸潤程度深，徹底清除困難，易復(fù)發(fā)[5]。R-AFS評分用于評估子宮內(nèi)膜異位癥患者疾病的嚴(yán)重程度。評分越高，手術(shù)越困難，易殘留病灶，術(shù)后極容易復(fù)發(fā)。本研究的復(fù)發(fā)率為31.34%，較文獻(xiàn)[6-7]高，主要原因是本研究對象均為rAFS評分Ⅲ期，Ⅳ期的患者為主，復(fù)發(fā)率高。雙側(cè)卵巢受累、合并后穹隆觸痛結(jié)節(jié)以及rAFS評分高是復(fù)發(fā)的危險因素，與國內(nèi)外研究相符。

本研究還發(fā)現(xiàn)，子宮內(nèi)膜異位癥患者和復(fù)發(fā)患者的在位內(nèi)膜的IL-8 mRNA表達(dá)異常；未復(fù)發(fā)的患者IL-8 mRNA表達(dá)接近正常。IL-8參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生和發(fā)展。IL-8是一種小分子量活性多肽，通過與其受體結(jié)合，趨化及激活中性粒細(xì)胞釋放一系列炎性細(xì)胞因子及生長因子，調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)。它能增加子宮內(nèi)膜細(xì)胞與腹膜的粘附，促進(jìn)病灶的發(fā)生和形成；它能增強(qiáng)血管生成因子的活性，促進(jìn)血管的生成，加快異位病灶血管生成，促進(jìn)病灶進(jìn)一步發(fā)展[8-10]。IL-8是一種炎性細(xì)胞因子，不僅參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生和發(fā)展，還參與身體炎癥反應(yīng)，是否能監(jiān)測IL-8的表達(dá)來預(yù)測和早干預(yù)子宮內(nèi)膜異位癥的復(fù)發(fā)，還需更大樣本量的深入研究。

綜上所述，子宮內(nèi)膜異位癥是一種極易復(fù)發(fā)的疾病。雙側(cè)卵巢受累、合并后穹隆觸痛結(jié)節(jié)以及rAFS評分高是復(fù)發(fā)的危險因素。IL-8參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生和發(fā)展。展望未來，希望能從在位內(nèi)膜的IL-8 mRNA的角度研究更多的新型試劑盒來檢測子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生，評估術(shù)后復(fù)發(fā)，進(jìn)行術(shù)后患者復(fù)發(fā)的監(jiān)測，盡早干預(yù)，預(yù)防復(fù)發(fā)。

[1]Maryam M,Melissa P,Anne S,et al.Impact of endometriosis on women's lives:a qualitative study[J].BMC Women's Health,2014, 14:123-125.

[2]林秀珠.子宮內(nèi)膜異位癥的臨床診治與復(fù)發(fā)因素分析[J].中國中醫(yī)藥咨訊,2010,34(2):125.

[3]任青,朱新枝.腹腔鏡治療卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫110例分析[J].西部醫(yī)學(xué),2010,22(11):2111-2113.

[4]吳虹霆,胡珊,陳智慧,等.妊娠期卵巢子宮內(nèi)膜異位癥的診治與復(fù)發(fā)因素分析[J].臨床誤診誤治,2010,23(1):36-38.

[5]張漢英,張利,張桂麗,等.子宮內(nèi)膜異位癥術(shù)后復(fù)發(fā)的相關(guān)因素分析[J].西部醫(yī)學(xué),2014,26(5):641-643.

[6]Moscarini M,Milazzo GN,Assorgi C,et al.Ovarian stripping versus cystectomy:recurrence of endometriosis and pregnancy rate[J].Archives of Gynecology and Obstetrics,2014,290(1):163-167.

[7]尹聰,金仙玉.復(fù)發(fā)性子宮內(nèi)膜異位癥的研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展,2010,19(4):308-310.

[8]Szubert M,Suzin J,Duechler M,et al.Evaluation of selected angiogenic and inflammatory markers in endometriosis before and after danazol treatment[J].Redproduction,Fertility and Development,2014, 26(3):414-420.

[9]Nishida M,Nasu K,Narahara H.Role of chemokines in the pathogenesis of endometriosis[J].Front Biosci(Schol Ed),2011,3:1196-120.

[10]Kuroda K,Kitade M,Kikuchi I,et al.Peritoneal vascular density assessment using narrow-band imaging and vascular analysis software, and cytokine analysis in women with and without endometriosis[J]. Minim Invasive Gynecol,2010,17(1):21-25.

Relationship between interleukin-8 and endometriosis recurrence.

HUANG Li-xia,MA Li-guo.Department of Gynecology,Shenzhen People's Hospital,the Second Clinical Medical College of Jinan University,Shenzhen 518020, Guangdong,CHINA

ObjectiveTo study the relationship between interleukin-8 and endometriosis recurrence.MethodsSixyt-seven cases were diagnosed as endometriosis(endometriosis group)and underwent endoscopic surgery in the department of Gynecology of Shenzhen People's Hospital from November 2013 to May 2015.Of these,21 cases experienced recurrence(recurrence group),with 6 cases having no follow-up information and 40 cases having no recurrence(no recurrence group)18 months afterwards.Thirty healthy women were selected as the control group.The expression levels of IL-8 mRNA in patients with endometriosis were detected before and after surgery.ResultsExpression levels of IL-8 mRNA in eutopic endometrium of endometriosis group,recurrence groupis,no recurrence group and control group were respectively(20.58±6.43),(16.25±4.21),(1.48±0.66)and(1.61±0.76).IL-8 mRNA expression in endometriosis group and recurrence group were significantly higher than that in no recurrence group and control group with statistically significant differences(P＜0.05).There was no statistically significant difference in IL-8 mRNA expression in eutopic endometrium between no recurrence group and control group(P＞0.05).ConclusionThere is a significant increase in the expression of IL-8 mRNA in eutopic endometrium of patients with endometriosis and recurrent.IL-8 mRNA expression level in patients without recurrence is very close to healthy people.IL-8 may play an important role in the occurrence and progression of endometriosis.

Endometriosis;Eutopic endometrium;Interleukin-8;Recurrence;Correlation

R711.71

A

1003—6350（2016）09—1395—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.09.007

2015-11-18)

深圳市科技創(chuàng)新委員會重大項(xiàng)目（編號：JCYJ20130402092657780）

黃麗霞。E-mail：sunglowhlx@126.com