姜樹(shù)朋，李艷，童永清

(武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心，湖北 武漢 430060)

武漢地區(qū)536名體檢人群ALDH2的基因多態(tài)性分布

姜樹(shù)朋，李艷，童永清

(武漢大學(xué)人民醫(yī)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中心，湖北 武漢 430060)

目的 了解武漢地區(qū)體檢人群ALDH2基因多態(tài)性的分布情況。方法選取2015年6月至2016年4月在武漢大學(xué)人民醫(yī)院進(jìn)行ALDH2基因檢測(cè)的無(wú)親緣關(guān)系健康體檢人群536名，其中男性384名，女性152名。采用基因芯片法檢測(cè)ALDH2 rs671基因多態(tài)性，同時(shí)與已報(bào)道的其他地區(qū)ALDH2 rs671基因型結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果在武漢地區(qū)536名體檢人群中，ALDH2 rs671三種基因型即GG型、GA型和AA型頻率分別為64.18%、31.90%和3.92%；不同年齡段ALDH2基因型分布比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。本地區(qū)與上海、洛陽(yáng)、西寧、四川地區(qū)ALDH2 rs671基因型比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，與北京、臺(tái)灣和山東地區(qū)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論武漢地區(qū)ALDH2 rs671基因多態(tài)性分布具有地域特異性，ALDH2 GG型是本地區(qū)優(yōu)勢(shì)基因型。

乙醛脫氫酶2；rs671；基因多態(tài)性

乙醇主要在肝臟中代謝，即乙醇在乙醇脫氫酶(ADH)的催化下氧化生成乙醛，再由乙醛脫氫酶2 (ALDH2)催化生成乙酸，進(jìn)入三羧酸循環(huán)，徹底氧化成CO2和水。乙醛脫氫酶2是該代謝過(guò)程中的主要關(guān)鍵酶[1]。乙醛脫氫酶基因位于12號(hào)染色體(12q24.2)，它的主要多態(tài)性是rs671，即ALDH2*1基因在第12號(hào)外顯子發(fā)生1510G＞A變異，形成ALDH2*2，相應(yīng)地，酶的第504位氨基酸由谷氨酸(Glu)變?yōu)橘?lài)氨酸(Lys)，在其作用下，乙醛代謝成乙酸的速度減慢，造成乙醛在體內(nèi)堆積，引發(fā)肝臟損傷，甚至導(dǎo)致終末期肝病或肝癌。此外，ALDH2 rs671基因多態(tài)性與心血管病疾病、精神分裂癥、阿茨海默癥等的發(fā)生或發(fā)展具有一定聯(lián)系[2-4]。本研究通過(guò)PCR基因芯片雜交法檢測(cè)536名體檢人群ALDH2 rs671基因型，調(diào)查武漢地區(qū)ALDH2基因多態(tài)性分布情況。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年6月至2016年4月于武漢大學(xué)人民醫(yī)院進(jìn)行ALDH2基因檢測(cè)的無(wú)親緣關(guān)系健康體檢人群，其中男性384名，女性152名。

1.2 試劑和儀器 上海百傲科技股份有限公司ALDH2基因檢測(cè)試劑盒，由上海百傲科技股份有限公司生產(chǎn)?；驍U(kuò)增儀：Bio-Rad T100 PCR儀(美國(guó)伯樂(lè)公司)?；蛐酒瑱z測(cè)儀器：e-Hyb全自動(dòng)雜交儀(上海百傲公司)；BE-2.0生物芯片識(shí)讀儀(上海百傲公司)。

1.3 方法 采集受檢者2 mL EDTA-K2抗凝血，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行基因組DNA提取，按下列條件進(jìn)行基因擴(kuò)增：50℃5 min；94℃5 min；94℃25 s，60℃25 s，72℃30 s，35個(gè)循環(huán)；72℃5 min；4℃保存。然后按照試劑盒要求進(jìn)行芯片雜交，判讀結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，Hardy-Weinberg平衡分析采用χ2檢驗(yàn)，不同年齡組ALDH2基因型分布采用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)，并將武漢地區(qū)ALDH2基因型分布頻率分別與文獻(xiàn)報(bào)道上海等7個(gè)地區(qū)的ALDH2基因型分布頻率相比較，兩地區(qū)間的基因多態(tài)性頻率分布的差異比較采用2×2列表的χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 ALDH2 G1510A基因分型結(jié)果 經(jīng)PCR-芯片雜交法反應(yīng)后，所得結(jié)果利用分析軟件確定各樣本基因型。ALDH2三種基因型依次是GG、GA、AA，見(jiàn)圖1。

圖1 ALDH2 G1510A基因分型結(jié)果

2.2 Hardy-Weinberg平衡分析 對(duì)收集的536名體檢人群ALDH2的基因型檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗(yàn)，見(jiàn)表1，ALDH2 G與A兩種等位基因的頻率分別為80.13%和19.87%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.001 9，P＞0.05)，說(shuō)明檢驗(yàn)結(jié)果符合Hardy-Weinberg遺傳平衡定律，該樣本具有區(qū)域群體代表性。

表1 Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗(yàn)

2.3 本地區(qū)不同年齡組體檢人群ALDH2 rs671基因型分布情況 536名體檢人群ALDH2基因GG型、GA型和AA型頻率分別為64.18%，31.90%和3.92%。見(jiàn)表2，將該人群分為4個(gè)年齡組，不同年齡組基因型進(jìn)行Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2= 1.699，P＞0.05)。

表2 武漢地區(qū)不同年齡組體檢人群ALDH2 rs671基因型分布情況(例)

2.4 本地區(qū)與文獻(xiàn)報(bào)道我國(guó)其他地區(qū)ALDH2 rs671基因型比較 根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道數(shù)據(jù)[5-11]，本研究武漢地區(qū)536名體檢人群ALDH2基因的分型數(shù)據(jù)與上海等其他7個(gè)地區(qū)數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，見(jiàn)表3。本地區(qū)與上海、洛陽(yáng)、西寧、四川地區(qū)ALDH2 rs671基因型差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，與北京、臺(tái)灣和山東地區(qū)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表3 武漢地區(qū)與文獻(xiàn)報(bào)道我國(guó)其他地區(qū)ALDH2 rs671基因型比較(例)

3 討 論

乙醛脫氫酶2是酒精代謝過(guò)程中的關(guān)鍵酶[12]。Rs671(1510G＞A)是ALDH2基因上最重要的一個(gè)SNP位點(diǎn)，該位點(diǎn)與ALDH2蛋白的空間結(jié)構(gòu)有關(guān)，因此影響該酶的活性。ALDH2 rs671野生純合子(GG型)顯示正常的酶活性；rs671雜合子(GA型)大約只有其正?；钚缘?%；而rs671突變純合子(AA型)對(duì)于乙醛降解基本上不具備酶活性,導(dǎo)致乙醛在體內(nèi)積累[1]，引發(fā)“飲酒臉紅反應(yīng)”。相關(guān)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，乙醛脫氫酶2缺乏可以激活I(lǐng)L-6/STAT3通路，這條信號(hào)的持續(xù)激活可發(fā)生促炎反應(yīng)，導(dǎo)致肝損傷[13]。另外，乙醛是一類(lèi)非?；顫姷姆肿?，它可以修飾蛋白質(zhì)和核酸，導(dǎo)致這些生物分子功能發(fā)生障礙[14]。ALDH2除了具有脫氫酶活性外，還有酯酶的催化活性，其酯酶活性可以通過(guò)將硝酸甘油脫硝產(chǎn)生NO，進(jìn)而引起血管擴(kuò)張，當(dāng)rs671位點(diǎn)變異后，硝酸甘油代謝速率大大降低，從而無(wú)法產(chǎn)生一氧化氮，難以發(fā)揮藥效[15-16]。因此，檢測(cè)ALDH2基因多態(tài)性不僅可以指導(dǎo)健康飲酒，還可指導(dǎo)硝酸甘油合理用藥。

本研究對(duì)武漢地區(qū)體檢人群進(jìn)行了大樣本流行病學(xué)調(diào)查，武漢地區(qū)ALDH2 rs671基因多態(tài)性分布具有地域特異性，ALDH2 GG型是本地區(qū)優(yōu)勢(shì)基因型。將武漢與各地報(bào)道數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，結(jié)果顯示武漢地區(qū)ALDH2基因型與上海、洛陽(yáng)、西寧、四川地區(qū)ALDH2基因型差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與北京、臺(tái)灣和山東地區(qū)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。表明武漢地區(qū)人群ALDH2 rs671 GG基因型的頻率大于臺(tái)灣人群，但小于北京與山東人群，GG型地域分布總體上具有北高南低的趨勢(shì)。

2014年發(fā)布的《世界癌癥報(bào)告》重點(diǎn)揭示了酒精在癌癥中的作用，該報(bào)告顯示，全球3.5%的癌癥與酒精有關(guān)。Jin等[17]通過(guò)小鼠模型和臨床數(shù)據(jù)，揭示了ALDH2是一種肝癌的腫瘤抑制因子，而ALDH2基因多態(tài)性變異，即ALDH2*2等位基因可能是肝癌發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)因素，ALDH2*2等位基因與乙醇的相互作用可能具有比先前理解的更重要的人類(lèi)公共健康危害作用。因此，為了身體健康，ALDH2*2等位基因攜帶者，即ALDH2 GA型/AA型，應(yīng)該慎重飲酒。

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Distribution of ALDH2 gene polymorphism in 536 cases of health checkup in Wuhan.

JIANG Shu-peng,LI Yan, TONG Yong-qing.Department of Clinical Laboratory,Renmin Hospital of Wuhan University,Wuhan 430060,Hubei,CHINA

ObjectiveTo study the distribution of aldehyde dehydrogenase 2 family(ALDH2)gene polymorphism of health checkup in Wuhan.MethodsA total of 536 cases of health checkup,whose ALDH2 genotype were detected in Renmin Hospital of Wuhan University from June 2015 to April 2016,among which 384 were male and 152 were female,were selected as the research objects.The polymorphism of ALDH2 rs671 was detected by gene-chip method,and the results were compared with ALDH2 rs671 genotype of other regions.ResultsThe frequencies of type GG,type GA and type AA in ALDH2 rs671 in 536 cases of health checkup in Wuhan were 64.18%,31.90%and 3.92%,respectively. There was no significant difference in ALDH2 genotype distribution among different age groups(P＞0.05).There was no significant difference in ALDH2 genotype between this region and Luoyang,Xining,Shanghai,Sichuan(P＞0.05),but there was significant difference between this region and Beijing,Taiwan,Shandong(P＜0.05).ConclusionThe distribution of ALDH2 rs671 gene polymorphism is regionally specific in Wuhan,and ALDH2 genotype GG is the dominant genotype in this region.

Aldehyde dehydrogenase 2 family(ALDH2);rs671;Gene polymorphism

R194.3

A

1003—6350（2016）23—3820—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.23.011

2016-07-12)

國(guó)家重點(diǎn)臨床專(zhuān)科建設(shè)項(xiàng)目(編號(hào)：財(cái)社[2010]305號(hào))

李艷。E-mail：yanlitf1120@163.com。