顧佳士，邱麗華，戴海燕

(1.上海市浦東醫(yī)院婦產(chǎn)科，上海201300.；2.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院婦產(chǎn)科，上海200127)

PAPP-A及VEGF在子癇前期患者血清中的表達(dá)及其相關(guān)性研究

顧佳士1，邱麗華2，戴海燕1

(1.上海市浦東醫(yī)院婦產(chǎn)科，上海201300.；2.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬仁濟(jì)醫(yī)院婦產(chǎn)科，上海200127)

目的觀察子癇前期患者血清中妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)及血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá)情況，探討其與子癇前期病情嚴(yán)重程度的關(guān)系。方法選擇2013年1月至2014年12月在上海市浦東醫(yī)院門診行常規(guī)產(chǎn)前檢查并分娩的子癇前期孕婦60例為子癇前期組，根據(jù)病情嚴(yán)重程度將其分為輕度子癇前期組30例，重度子癇前期組30例。選取同期行本院門診產(chǎn)前檢查并住院分娩的正常孕婦30例為對(duì)照組。分別采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測(cè)定三組孕婦血清中的PAPP-A水平和VEGF的水平，分析其與子癇前期患者病情嚴(yán)重程度的關(guān)系。結(jié)果重度子癇前期組新生兒出生體重[(3.4±0.5)kg]低于輕度子癇前期組[(3.6±1.4)kg]和對(duì)照組[(3.7±0.5)kg]，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；重度子癇前期組患者血清PAPP-A值、VEGF值和24 h尿蛋白值分別為(900.6±379.0)μg/ml、(7.2±4.2)pg/ml、(2.5±1.2)g/24 h，輕度子癇前期組分別為(783.8±204.7)μg/ml、(5.3±1.4)pg/ml、(1.4±0.3)g/24 h，均分別高于對(duì)照組的(592.9±222.9)μg/ml、(4.8±2.8)pg/ml、(0.2±0.1)g/24 h，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；重度子癇前期組的血清PAPP-A值和24 h尿蛋白值均高于輕度子癇組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；Speraman相關(guān)分析顯示，血清PAPP-A值和血清VEGF值呈明顯的正相關(guān)(r=0.574，P＜0.05)。結(jié)論P(yáng)APPA及VEGF均參與了子癇前期的發(fā)生及發(fā)展。

子癇前期；妊娠相關(guān)血漿蛋白-A；血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子；相關(guān)性

子癇前期(Preeclampsia，PE)是一種妊娠期特有疾病，初產(chǎn)婦發(fā)病率為3%～8%[1]，是導(dǎo)致母胎發(fā)病和死亡的重要原因，多發(fā)生于妊娠20周后出現(xiàn)的以高血壓、蛋白尿?yàn)橹饕R床表現(xiàn)的一組臨床癥候群，常伴有多器官損傷及功能紊亂，其病因不明。目前研究證實(shí)，子癇前期的發(fā)病和絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞侵蝕不良以及螺旋小動(dòng)脈重鑄不足導(dǎo)致的胎盤形成不良，致胎盤淺著床，并使合體滋養(yǎng)細(xì)胞及細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞長(zhǎng)期處于慢性缺血、缺氧狀態(tài)密切相關(guān)。妊娠相關(guān)血漿蛋白-A (Pregnancy-associated plasma protein-A，PAPP-A)是一種妊娠密切相關(guān)的大分子糖蛋白，主要由胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞、蛻膜細(xì)胞合成并分泌進(jìn)入血循環(huán)，可以反應(yīng)滋養(yǎng)細(xì)胞缺血缺氧的水平。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(Vascular endothelial growth factor，VEGF)是一種糖蛋白，其主要的生物學(xué)功能是促進(jìn)新生血管形成和增加血管通透性，缺氧是促進(jìn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子分泌的重要因素。本研究通過檢測(cè)子癇前期患者血清中妊娠相關(guān)血漿蛋白A (PAPP-A)及血清血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)表達(dá)情況，進(jìn)一步研究其與子癇前期病情嚴(yán)重程度的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2013年1月至2014年12月在上海市浦東醫(yī)院門診行常規(guī)產(chǎn)前檢查并分娩的子癇前期孕婦60例為子癇前期組，根據(jù)病情嚴(yán)重程度其分為輕度子癇前期組30例，重度子癇前期組30例。同期在本院門診行產(chǎn)前檢查并住院分娩的正常孕婦30例為對(duì)照組。子癇前期診斷標(biāo)準(zhǔn)參考妊娠期高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。三組受檢者均為單胎，均排除其他妊娠并發(fā)癥及合并癥。本研究經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)，患者均知情同意。

1.2 研究方法

1.2.1 資料收集采集所有患者的年齡、孕周、孕產(chǎn)次等一般信息，分娩后統(tǒng)計(jì)新生兒出生體重。收集所有待測(cè)者入院24 h尿量并檢測(cè)24 h尿蛋白定量。

1.2.2 標(biāo)本采集所有的待測(cè)者均采集清晨空腹肘部靜脈血5 ml，-4℃冰箱放置1 h后離心10 min，取上層血清放置于-80℃冰箱待測(cè)。

1.2.3 PAPP-A及VEGF定量測(cè)定采用酶免疫分析法(ELISA)檢測(cè)，PAPP-A及VEGF試劑盒均由上海冠泰生物科技有限公司提供并進(jìn)行檢測(cè)，均按試劑盒說明書嚴(yán)格操作，樣品及標(biāo)準(zhǔn)品均設(shè)雙孔檢驗(yàn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；兩變量的相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組孕婦的年齡、孕周、新生兒出生體重比較三組孕婦年齡、孕周比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；重度子癇前期組新生兒出生體重均低于輕度子癇前期組和對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；輕度子癇前期組和對(duì)照組新生兒出生體重比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見表1。

表1 三組孕婦在年齡、孕周、新生兒出生體重的比較(±s)

表1 三組孕婦在年齡、孕周、新生兒出生體重的比較(±s)

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05；與輕度子癇前期組比較，bP＜0.05。

組別重度子癇前期組輕度子癇前期組對(duì)照組新生兒出生體重(kg) 3.4±0.5a3.6±1.4 3.7±0.5例數(shù)30 30 30年齡(歲) 25.5±1.5 24.5±2.1 23.5±3.3孕周37.8±0.6 38.4±1.6 39.5±0.4

2.2 三組孕婦血清PAPP-A、VEGF和24 h尿蛋白比較重度子癇前期組和輕度子癇前期組患者血清PAPP-A值和24 h尿蛋白值均高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。重度子癇前期組和輕度子癇前期組患者血清VEGF值比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見表2。

表2 三組孕婦在血清PAPP-A，VEGF，24 h尿蛋白比較(±s)

表2 三組孕婦在血清PAPP-A，VEGF，24 h尿蛋白比較(±s)

注：與對(duì)照組比較，aP＜0.05；與輕度子癇前期組比較，bP＜0.05。

組別例數(shù)PAPP-A(μg/m)VEGF(Pg/ml)尿蛋白(g/24 h)重度子癇前期組輕度子癇前期組對(duì)照組30 30 30 900.6±379.0a783.8±204.7b592.9±222.9 7.2±4.2a5.3±1.4 4.8±2.8 2.5±1.2a1.4±0.3b0.2±0.1

2.3 血清PAPP-A和血清VEGF的相關(guān)性Speraman相關(guān)分析顯示，血清PAPP-A值和血清VEGF值呈明顯的正相關(guān)，相關(guān)指數(shù)為r=0.574，P＜0.05。

3 討論

3.1 PAPP-A和子癇前期之間的關(guān)系PAPP-A是一種相對(duì)分子量為800×103的大分子糖蛋白化合物，其結(jié)構(gòu)是由等比例的兩個(gè)分子量為200×103～250× 103的亞基與兩個(gè)嗜酸粒細(xì)胞的主要堿性蛋白前體組成，通過二硫鍵結(jié)合而成的大分子化合物(PAPPA/ ProMBP)[3]。其生物學(xué)作用主要通過作用于胰島素樣生長(zhǎng)因子軸(IGF Axis)而發(fā)揮生物學(xué)作用。IGF Axis由胰島素樣生長(zhǎng)因子(IGF)、胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白(IGFBPs)及IGFBPs的水解蛋白共同構(gòu)成[4-5]。PAPP-A是IGFBP的蛋白水解酶。IGFBP經(jīng)裂解后釋IGF。在缺氧的環(huán)境下，IGF可以和平滑肌細(xì)胞上的胰島素樣生長(zhǎng)因子受體結(jié)合發(fā)生信號(hào)的傳導(dǎo)，促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的遷徙、增殖和分化，導(dǎo)致血管內(nèi)皮的增生和狹窄，大量的炎性細(xì)胞的釋放，內(nèi)皮細(xì)胞的遷移和毛細(xì)血管網(wǎng)的重塑[6]，進(jìn)而導(dǎo)致子癇前期的發(fā)生。Bersinger等[7]研究表明，子癇前期患者妊娠早中期血清PAPP-A水平降低，其測(cè)定了孕17周時(shí)子癇前期患者血清PAPP-A水平，與對(duì)照組相比明顯減少。而董旭東等[8]研究表明孕早中期血清PAPP-A明顯高于血壓正常組。對(duì)于孕晚期血清PAPP-A的變化，目前的研究多數(shù)認(rèn)為子癇前期患者孕晚期血清PAPP-A的數(shù)值較正常組偏高，而且隨著病情的加重，其濃度也逐漸上升，由此推測(cè)血清PAPP-A可以作為判斷病情嚴(yán)重程度的指標(biāo)之一[9]。我們的研究表明，在孕晚期子癇前期患者血清PAPP-A數(shù)值明顯高于血壓正常組，而且重度子癇前期組明顯高于輕度子癇前期組，重度子癇前期組24 h尿蛋白定量明顯高于輕度子癇前期組和對(duì)照組，重度子癇前期組新生兒出生體重明顯小于輕度子癇前期組和對(duì)照組，提示血清PAPP-A數(shù)值可以反應(yīng)孕晚期子癇前期病情嚴(yán)重程度。

3.2 VEGF和子癇前期之間的關(guān)系VEGF是由8個(gè)外顯子、7個(gè)內(nèi)顯子組成的單一基因，全長(zhǎng)14 kD，定位于染色體6p21.3[10]。VEGF參與了許多生理性和病理性的血管生成，在缺氧的環(huán)境下時(shí)，其表達(dá)也明顯增強(qiáng)?；A(chǔ)研究表明，VEGF一方面促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)的表達(dá)，MMP反過來可以加強(qiáng)VEGF誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞遷徙的作用。另一方面，VEGF還可促進(jìn)纖溶酶原激活劑及其蛋白質(zhì)分解酶的釋放，降解毛細(xì)血管基底膜，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞遷移和趨化，誘使血管內(nèi)皮細(xì)胞侵入，進(jìn)一步形成新生血管[11]?；A(chǔ)研究表明，VEGF參與了胎盤血管的構(gòu)成與重鑄過程，呂曉娟等[12]測(cè)定大鼠子癇前期模型中血清和胎盤中VEGF的表達(dá)，結(jié)果表明：子癇前期大鼠血清和胎盤中VEGF的表達(dá)均明顯低于正常對(duì)照組。而劉建國(guó)等[13]檢測(cè)了妊娠期高血壓組和對(duì)照組孕晚期孕婦中血清VEGF表達(dá)情況顯示，子癇前期組血清VEGF的表達(dá)高于于對(duì)照組，隨子癇前期病情加重，VEGF水平呈上升趨勢(shì)，提示孕婦血清中的VEGF的上升和子癇前期的發(fā)病及病情進(jìn)展相關(guān)。我們的研究顯示在孕晚期子癇前期組患者血清中的VEGF明顯高于血壓正常組，與劉建國(guó)等[13]的研究結(jié)果一致。但是重度子癇前期組和輕度子癇前期組血清VEGF比較差異無統(tǒng)計(jì)意義，提示VEGF并不能作為判斷子癇前期病情嚴(yán)重程度的參考指標(biāo)。

3.3 PAPP-A和VEGF的關(guān)系胎盤血管重鑄障礙是子癇前期發(fā)生發(fā)展的重要機(jī)制之一，而缺血缺氧及血管內(nèi)皮的損傷是導(dǎo)致胎盤血管重鑄障礙的重要原因。PAPP-A可以反應(yīng)滋養(yǎng)細(xì)胞缺血缺氧的水平，而VEGF其主要功能是促進(jìn)新生血管形成和增加血管通透性。目前已有研究顯示，血清PAPP-A和VEGF聯(lián)合檢測(cè)對(duì)妊娠相關(guān)疾病診斷具有一定的參考價(jià)值[14]。我們的研究顯示血清PAPP-A值和血清VEGF值之間呈明顯的正相關(guān)(r=0.574，P＜0.05)，進(jìn)一步提示了PAPPA及VEGF均參與了子癇前期的發(fā)生及發(fā)展，同時(shí)胎盤淺著床導(dǎo)致的缺血缺氧，促進(jìn)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子分泌從而導(dǎo)致了胎盤血管異常增生和重鑄，進(jìn)一步加重了子癇前期病情的發(fā)展。

本研究通過檢測(cè)重度子癇前期、輕度子癇前期和對(duì)照組患者血清中的PAPP-A和VEGF水平發(fā)現(xiàn)PAPPA及VEGF均參與了子癇前期的發(fā)生及發(fā)展，而且血清PAPP-A和VEGF之間呈正相關(guān)。孕婦血清PAPP-A數(shù)值可以反應(yīng)孕晚期子癇前期病情的嚴(yán)重程度。

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Serum changes of pregnancy-associated plasma protein-A,vascular endothelial growth factor and theircorrelation in preeclampsia.

GU Jia-shi1,QIU Li-hua2,DAI Hai-yan1,1.Department of Gynaecology and Obstetrics, Shanghai Pudong Hospital,Shanghai 200399,CHINA;2.Department of Gynaecology and Obstetrics,Renji Hospital,School of Medicine,Shanghai Jiaotong University,Shanghai 200127,CHINA

ObjectiveTo investigate the serum changes of pregnancy-associated plasma protein-A(PAPP-A), vascular endothelial growth factor(VEGF)in patients with preeclampsia,and to analyze their correlation with the severity of disease.MethodsFrom January 2013 to December 2014,90 pregnant women who had prenatal examinations and delivered in the Department of Obstetrics,Shanghai Pudong Hospital were recruited,including 60 patients with preeclampsia(PE group)and 30 healthy pregnant women(control group).The 60 patients with PE were divided into severe PE group(n=30)and mild PE group(n=30)according to the severity of the disease.Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)was used to determine the serum concentrations of PAPPA-A and VEGF.The correlations between the expression of serum PAPPA-A,VEGF and the severity of the disease were analyzed.ResultsThe newborn birth weight of the severe PE group[(3.4±0.5)kg]were less than that of the mild PE group[(3.6±1.4)kg]and control group[(3.7± 0.5)kg],and the differences were statistically significant(P＜0.05).The serum levels of PAPPA-A,VEGF and 24 hours urinary protein in the severe PE group[(900.6±379.0)μg/ml,(7.2±4.2)pg/ml,(2.5±1.2)g/24 h]and the mild PE group [(783.8±204.7)μg/ml,(5.3±1.4)pg/ml,(1.4±0.3)g/24 h]were significantly higher than those in the control group [(592.9±222.9)μg/ml,(4.8±2.8)pg/ml,(0.2±0.1)g/24 h],P＜0.05.The serum level of PAPPA-A and the 24 hours urinary protein in the severe PE group were higher than those in the mild PE group(P＜0.05).Spearman′s correlation analysis showed that the serum level of PAPPA-A was positively correlated with the serum concentration of VEGF(P＜0.05). ConclusionPAPPAand VEGF are involved in the occurrence and development of preeclampsia.

Preeclampsia(PE);Pregnancy-associated plasma protein-A(PAPP-A);Vascular endothelial growth factor(VEGF);Correlation

R714.24+5

A

1003—6350（2016）02—0226—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2016.02.018

2015-08-20)

上海市浦東新區(qū)衛(wèi)計(jì)委青年科技項(xiàng)目(編號(hào)：PW2013B-10)；上海市浦東新區(qū)衛(wèi)計(jì)委重點(diǎn)學(xué)科資助項(xiàng)目(編號(hào)：PWZX2014)；上海市青年醫(yī)師培養(yǎng)資助計(jì)劃項(xiàng)目

戴海燕。E-mail：daihaiyan@hotmail.com