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·綜述·

13C-尿素呼氣試驗檢測幽門螺桿菌的影響因素

王艷嬌(綜述)，劉改芳*(審校)(河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院消化內(nèi)科，河北 石家莊 050051)

[關(guān)鍵詞]螺桿菌，幽門；(13)C-尿素呼氣試驗；質(zhì)譜儀；紅外光譜儀

doi:10.3969/j.issn.1007-3205.2016.03.032

13C-尿素呼氣試驗(13C-urea breath test，13C-UBT)是1987年Graham等[1]首次報道用于幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，H.pylori)感染的診斷方法。該方法于1996年9月通過美國食品藥物管理局的評審批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床。至今13C-UBT仍然被認(rèn)為是H.pylori感染診斷的金標(biāo)準(zhǔn)。但有些因素可影響13C-UBT檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，使其出現(xiàn)假陰性或假陽性結(jié)果。現(xiàn)就13C-UBT檢測H.pylori的影響因素綜述如下。

1檢測儀器的影響

用于13C-UBT的檢測儀器主要有質(zhì)譜儀和紅外光譜儀2種。13C-呼氣質(zhì)譜儀由氣相色譜儀、離子比率質(zhì)譜儀、加樣器和計算機系統(tǒng)等組成，其工作原理為通過氣相色譜法，將CO2從呼出氣樣品中分離出來，得到純凈的CO2,然后將CO2注入離子比率質(zhì)譜儀中，離子比率質(zhì)譜儀包括離子源、質(zhì)量分析器和檢測器，根據(jù)相對分子質(zhì)量對CO2分子進(jìn)行分析，得到呼氣中13C的千分差值。

1.1質(zhì)譜儀質(zhì)譜儀檢測H.pylori是目前最靈敏的方法，但儀器核心部件的性能對檢測結(jié)果有一定的影響，其核心部件包括離子源和質(zhì)量分析器兩部分，樣品在質(zhì)譜分析前首先要進(jìn)行離子化，離子源部件的性能決定了離子化效率，因而很大程度上決定了一臺質(zhì)譜儀的靈敏度。質(zhì)量分析器的準(zhǔn)確性受分析器的穩(wěn)定性和分辨率的影響，為確保檢測結(jié)果不受儀器部件穩(wěn)定性等的影響，對于核心部件每5年需由專業(yè)技術(shù)人員定期進(jìn)行更換[2]。13C-呼氣質(zhì)譜儀結(jié)構(gòu)復(fù)雜、價格昂貴、維護(hù)費用高，使其在臨床的推廣應(yīng)用和普及受到一定的限制。相比之下，13C-紅外光譜儀因價格便宜、操作簡單，是目前我國臨床應(yīng)用比較普及的檢測H.pylori的儀器。

1.213C-紅外光譜儀13C-紅外光譜儀由高選擇性的13CO2和12CO2探測器組成，檢測CO2在紅外線譜之間的特異性吸收，最終得到呼氣中13C的千分差值。國內(nèi)外一些對比研究表明13C-紅外光譜儀與13C-呼氣質(zhì)譜儀的檢測結(jié)果具有很好的相關(guān)性，用于13C-UBT檢測H.pylori是非常可靠的[2]。13C-紅外光譜儀測定時需要將集氣袋的口打開連接至儀器端口，操作過程中可能會有一部分樣本漏出，從而降低測定值，因此應(yīng)用13C-紅外光譜儀進(jìn)行檢測時要盡量減少樣本漏出[3]。另外，13C-紅外光譜儀的性能不如質(zhì)譜儀穩(wěn)定，需要定期進(jìn)行校正，一般每周需要校正2次?？傊?，在應(yīng)用13C-呼氣質(zhì)譜儀檢測H.pylori時，對其核心部件需要定期進(jìn)行更換，以減少儀器本身對檢測結(jié)果造成的誤差；在應(yīng)用13C-紅外光譜儀時需注意盡快將集氣袋插入端口，減少因氣體漏出導(dǎo)致的誤差，并應(yīng)按要求時間及時對儀器進(jìn)行校正。

2飲食的影響

研究表明，許多食物會對13C-UBT的檢測結(jié)果有一定的影響。綻永華等[4]對60例H.pylori陽性的十二指腸潰瘍患者隨機分為2組進(jìn)行根除H.pylori治療，治療組口服埃索美拉唑+阿莫西林+呋喃唑酮+大蒜素膠囊，對照組不含大蒜素膠囊，服藥7 d后2組繼續(xù)服用埃索美拉唑3周，停藥4周后復(fù)查UBT,治療組H.pylori根除率為92.9%，對照組為84.4%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，大蒜素是大蒜的主要有效成分，其分子中的巰基可抑制與H.pylori生長繁殖有關(guān)的含巰基酶，進(jìn)而產(chǎn)生抗菌作用。富含乳酸桿菌的酸奶酪等食物的攝入可抑制H.pylori在胃內(nèi)的生長[5]。Fujimura等[6]研究認(rèn)為乳酸桿菌可以抑制H.pylori的生長。這與乳酸桿菌產(chǎn)生的細(xì)菌素、乳酸、過氧化氫等可以抑制H.pylori活性有關(guān)[7]。另外，Stoicov等[8]通過體外實驗及動物實驗發(fā)現(xiàn)綠茶對H.pylori有抑菌作用，這可能是因為綠茶的主要成分兒茶素對H.pylori尿素酶有抑制作用。因此，在13C-UBT檢測前患者需要隔夜空腹或禁食4 h以上，從而避免食物對檢測結(jié)果的影響；此外，還應(yīng)了解患者的飲食習(xí)慣，如果長期或近期飲用綠茶、頻繁進(jìn)食大蒜或富含乳酸桿菌的食物，檢測結(jié)果可能會出現(xiàn)假陰性或較低的檢測值。

3藥物的影響

研究已證實近期內(nèi)使用抗生素、鉍制劑、質(zhì)子泵抑制劑、H2受體阻滯劑、部分中藥(如黃連、黃芩、大黃等)對H.pylori的檢測有明顯的影響，可造成假陰性的結(jié)果。吳炎等[9]對156例十二指腸球部潰瘍患者做了研究，發(fā)現(xiàn)近期內(nèi)未使用抗生素者UBT陽性率明顯高于使用抗生素者，在停藥1個月后對之前檢測為陰性的患者再次檢測,陽性率為66．7%；不同種類的抗生素對UBT的影響是不同的，近期應(yīng)用克林霉素的患者，UBT均為H.pylori陽性，未顯示出影響；而近期應(yīng)用甲硝唑、阿莫西林等類藥物的患者，在停藥1個月后復(fù)查時，原H.pylori陰性者均轉(zhuǎn)為陽性；近期應(yīng)用左氧氟沙星的患者，在停藥1個月后復(fù)查時原來H.pylori陰性者45.5%轉(zhuǎn)為陽性，54.5%的患者仍為陰性。質(zhì)子泵抑制劑有強烈、持久的抑酸作用,應(yīng)用后會使胃內(nèi)酸度降低，H.pylori在生存環(huán)境不利時易于發(fā)生形態(tài)變異，常由S型縮卷成球形，處于靜止的自身保護(hù)狀態(tài)，可能導(dǎo)致對H.pylori的檢測出現(xiàn)假陰性[10]。而鉍制劑抗H.pylori的機制主要有：鉍制劑可進(jìn)入H.pylori菌體內(nèi)并聚集，促使其發(fā)生不規(guī)則收縮，導(dǎo)致細(xì)胞膜破裂；另外，鉍制劑還可與H.pylori產(chǎn)生的毒素結(jié)合，使H.pylori無法在胃黏膜上皮定植[11]。H2受體阻滯劑本身對H.pylori沒有抑制作用，其對13C-UBT結(jié)果的影響可能與其抑制胃酸分泌，使胃內(nèi)pH升高有關(guān)。部分中藥對13C-UBT結(jié)果也有很大影響，游運舸等[12]研究認(rèn)為用祛菌通幽湯(其內(nèi)含有炒大黃、黃連等)替代含鉍劑四聯(lián)方案中的抗生素對H.pylori有很好的根除效果，其具體機制尚不清楚。故在13C-UBT檢測前應(yīng)仔細(xì)詢問病情，了解之前是否使用過相關(guān)藥物，如有服藥史需告知患者停用相關(guān)藥物一定時間后再進(jìn)行檢測，如因某些原因不能停服者，可采用血清學(xué)方法檢測H.pylori抗體；對于H.pylori根除治療的患者應(yīng)囑其在停藥后4周以上復(fù)查，如復(fù)查仍為陽性者，應(yīng)在停藥后2～3個月待H.pylori恢復(fù)其典型形態(tài)、尿素酶活性恢復(fù)后再次行根除治療。

4疾病的影響

某些疾病狀態(tài)下進(jìn)行13C-UBT也會影響其檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性，出現(xiàn)假陽性或假陰性。李舜等[13]對382例上消化道疾病患者同期UBT的結(jié)果以病理對照作為判定H.pylori感染的標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果顯示慢性萎縮性胃炎者UBT假陽性率達(dá)24.1%，原因可能是萎縮性胃炎者胃酸缺乏極易發(fā)生胃內(nèi)其他產(chǎn)尿素酶的細(xì)菌過度生長,可能導(dǎo)致13C-UBT假陽性。尹曙明等[14]對94例殘胃者和100例非殘胃者進(jìn)行13C-UBT檢測，結(jié)果顯示殘胃者術(shù)后H.pylori感染率明顯低于術(shù)前和非殘胃者(37.2%vs79.8%，77.0%)，畢Ⅱ式術(shù)后H.pylori感染率低于畢Ⅰ式術(shù)后(24.4%vs47.2%)，且隨著術(shù)后病程的延長H.pylori感染率逐漸降低。胃部分切除的患者口服13C-尿素后13C-尿素在胃內(nèi)排空速度過快，更易進(jìn)入十二指腸或小腸，導(dǎo)致13C-UBT出現(xiàn)假陰性，對于殘胃者宜采用胃黏膜組織快速尿素酶試驗或H.pylori糞便抗原等檢測方法檢測。徐林發(fā)等[15]對53例上消化道出血患者做了研究，結(jié)果顯示UBT檢測H.pylori陽性率明顯低于病理組織學(xué)方法(24.5%vs90.6%)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，說明上消化道出血者用UBT檢測H.pylori會出現(xiàn)假陰性結(jié)果。這可能是因為出血后胃內(nèi)的血液及血凝塊一方面中和胃酸，使胃內(nèi)pH值升高，另一方面釋放大量的氧氣抑制H.pylori的生長，使H.pylori尿素酶活性降低[9]。鄭忠法等[16]研究顯示慢性胃炎H.pylori的陽性率為71.7%，膽汁反流性胃炎的H.pylori陽性率為36%，2組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，說明膽汁反流對H.pylori有抑制作用，但膽汁反流性胃炎與H.pylori感染是可以并存的，這可能與膽汁反流的時間、頻率等有關(guān)。高瑞梅等[17]關(guān)于H.pylori的細(xì)菌培養(yǎng)試驗顯示，膽汁濃度高于1∶192時H.pylori分離株無法生長。膽汁反流可以破壞H.pylori生長的微環(huán)境，膽汁酸對H.pylori的聚集、生長有明顯抑制效果，膽汁反流可影響13C-UBT的檢測結(jié)果，造成假陰性。因此，在13C-UBT前需先了解患者的疾病狀態(tài)，對可影響檢測結(jié)果的疾病給予相應(yīng)的處理措施，或采用其他(如H.pylori抗體檢測)檢測方法進(jìn)行檢測，以提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

5受檢者的配合及尿素劑型的影響

在檢測前需向患者詳細(xì)介紹13C-UBT的方法、簡單原理及需要患者配合的注意事項，以消除患者的顧慮，從而得到其重視和配合。檢測開始前需囑患者清潔口腔，因為口腔中也有一定的尿素酶活性，這會影響13C-UBT的檢測結(jié)果。零時呼氣后需叮囑患者保持安靜，避免劇烈活動，因為身體在安靜和運動狀態(tài)下CO2的產(chǎn)量有很大變化,呼氣中13CO2濃度會因內(nèi)源性CO2的產(chǎn)生而被不同程度的稀釋,使13CO2豐度明顯下降,造成檢測結(jié)果出現(xiàn)偏差。將13C-尿素制成膠囊口服可減少口腔尿素酶活性的影響,Peng等[18]比較了服用膠囊制劑及粉劑的UBT檢測H.pylori的敏感度、特異度及準(zhǔn)確性，結(jié)果顯示膠囊制劑的準(zhǔn)確性較高(98%、93%)。因此，為避免口腔中尿素酶活性對檢測結(jié)果的影響，檢測前需告知患者清潔口腔或口服膠囊制劑；在檢測前應(yīng)與患者溝通，使其配合操作者進(jìn)行檢測，這對于檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性也是非常必要的。

6展望

H.pylori感染可導(dǎo)致消化性潰瘍、胃癌、尋常型銀屑病、阿爾茨海默病等許多疾病[19]，因此對H.pylori感染的診斷及根除是非常重要的。13C-UBT作為目前國際公認(rèn)的檢測及抗H.pylori藥物療效監(jiān)測的金標(biāo)準(zhǔn)，已經(jīng)在臨床上推廣應(yīng)用。但其檢測的準(zhǔn)確性也受許多因素的影響，除上述影響因素外，關(guān)于13C-UBT的13C-尿素劑量等目前尚無統(tǒng)一的規(guī)定，有報道提出了優(yōu)化方案[20]，但減小13C-尿素劑量是否會影響檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性尚不明確。

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(本文編輯：許卓文)

[中圖分類號]R573

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]A

[文章編號]1007-3205(2016)03-0358-03

*通訊作者

[作者簡介]王艷嬌(1987-)，女，河北定興人，河北醫(yī)科大學(xué)第三醫(yī)院醫(yī)學(xué)碩士研究生，從事消化內(nèi)科疾病診治研究。

[收稿日期]2014-12-19；[修回日期]2015-01-13