劉杰鋒 鐘春媚 羅偉輝 翟冬旭

監(jiān)測IL-17、IL-21、IL-22、IL-23表達(dá)水平在潰瘍性結(jié)腸炎患者臨床治療中的應(yīng)用價(jià)值

劉杰鋒 鐘春媚 羅偉輝 翟冬旭

目的探討潰瘍性結(jié)腸炎(UC)患者外周血清中白細(xì)胞介素-17(IL-17)、白細(xì)胞介素-21(IL-21)、白細(xì)胞介素-22(IL-22)、白細(xì)胞介素-23(IL-23)的表達(dá)水平在臨床治療中的應(yīng)用價(jià)值。方法30例UC患者(觀察組)及30例健康者(對照組),應(yīng)用夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測外周血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23的含量,比較健康人群和UC患者外周血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23的水平差異及不同嚴(yán)重程度UC患者結(jié)腸黏膜組織中的表達(dá)差異性。結(jié)果觀察組患者外周血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平均明顯高于對照組(P＜0.05)；觀察組輕中度UC患者外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平明顯低于重度UC患者(P＜0.05)；初發(fā)型 UC患者外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平低于慢性復(fù)發(fā)型患者,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；觀察組治療后外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平明顯低于治療前(P＜0.05)。結(jié)論UC患者外周血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平明顯升高,與疾病活動(dòng)度密切相關(guān),可預(yù)測UC發(fā)展或評估治療效果。

白細(xì)胞介素-17；白細(xì)胞介素-21；白細(xì)胞介素-22；白細(xì)胞介素-23；潰瘍性結(jié)腸炎

UC是一種累及直腸和結(jié)腸的非特異性炎性疾病,病變多呈反復(fù)發(fā)作,增加患結(jié)腸癌的風(fēng)險(xiǎn)。盡管有關(guān)具體機(jī)制尚不十分清楚,但可以肯定細(xì)胞因子在UC的發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮了重要的作用。本研究觀察健康個(gè)體與不同疾病嚴(yán)重程度的UC患者外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23等因子水平的表達(dá)情況及這些值與患者疾病嚴(yán)重程度和治療反應(yīng)間的關(guān)系,為UC患者或高?；颊咴缙诎l(fā)現(xiàn)、早期治療以及動(dòng)態(tài)評估患者治療效果提供臨床依據(jù)?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2013年1月～2016年1月本院收治的30例UC患者為觀察組,男18例、女12例,年齡30～63歲、平均年齡(45.2±7.3)歲,均符合中華醫(yī)學(xué)會2007年制定的UC診斷表現(xiàn),病情嚴(yán)重程度為輕型(患者癥狀較輕微,腹瀉＜5次/d)和重型(腹瀉＞5次,為水瀉或血便,腹痛較重,有發(fā)熱癥狀,體溫＞38.5℃,心率＞90次/min)。其中輕度13例,中度7例,重度10例；初發(fā)型1例,慢性復(fù)發(fā)型19例。另選取本院30例體檢健康者為對照組,男15例、女15例,年齡30～65歲、平均年齡(43.9±7.1)歲。本研究通過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn),患者均簽署知情同意書。兩組研究對象一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。

1.2 治療方法 UC患者均口服柳氮磺胺吡啶1.0 g,4次/d。并加用白頭翁湯：白頭翁15 g,黃連6 g,黃柏、秦皮各12 g。1劑/d,水煎分服。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 標(biāo)本采集 對所有參與者進(jìn)行體格檢查,測量身高、體質(zhì)量,記錄觀察組患者的一般臨床表現(xiàn),如大便形狀及規(guī)律、病程、用藥情況、飲食情況等。所有參與者均經(jīng)隔夜禁食12～14 h,次日清晨抽取空腹肘靜脈血,用于檢測炎性指標(biāo)。觀察組所有患者均按照標(biāo)準(zhǔn)操作流程行結(jié)腸鏡檢查,并留取病變部位結(jié)腸黏膜組織。觀察組所有患者均行UC疾病活動(dòng)指數(shù)評估。

1.3.2 檢測方法 采用夾心酶聯(lián)免疫吸附法定量檢測,分別使用IL-17、IL-21、IL-22、IL-23試劑盒,定量檢測相應(yīng)指標(biāo)的靜脈血濃度。檢測步驟嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平比較 觀察組外周血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平均明顯高于對照組(P＜0.05)。見表1。

2.2 觀察組患者輕中度和重度患者外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平比較 觀察組輕中度患者外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平明顯低于重度患者(P＜0.05)。見表2。

2.3 觀察組患者不同類型患者外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平比較 初發(fā)型UC患者外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平低于慢性復(fù)發(fā)型患者(P＜0.05)。見表3。

2.4 觀察組患者治療前后外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平比較 觀察組患者治療后外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平均明顯低于治療前(P＜0.05)。見表4。

表1 兩組患者外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平比較 (±s,pg/ml)

表1 兩組患者外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平比較 (±s,pg/ml)

注：與對照組比較,aP＜0.05

組別 例數(shù) IL-17 IL-21 IL-22 IL-23觀察組 30 163.18±134.17a 112.83±30.25a 152.92±117.89a 140.99±136.63a對照組 30 86.49±9.10 71.37±25.38 78.62±10.69 72.31±6.15

表2 觀察組患者輕中度和重度患者外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平比較(±s,pg/ml)

表2 觀察組患者輕中度和重度患者外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平比較(±s,pg/ml)

注：與重度比較,aP＜0.05

程度 例數(shù) IL-17 IL-21 IL-22 IL-23輕中度 20 82.81±8.60a 92.23±35.34a 82.24±10.62a 64.79±11.57a重度 10 250.00±151.84 112.53±96.92 229.25±133.14 223.29±161.05

表3 觀察組患者不同類型患者外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平比較(±s,pg/ml)

表3 觀察組患者不同類型患者外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平比較(±s,pg/ml)

注：與慢性復(fù)發(fā)型比較,aP＜0.05

類型 例數(shù) IL-17 IL-21 IL-22 IL-23初發(fā)型 11 160.10±155.88a 86.45±63.89a 142.49±123.15a 118.38±111.21a慢性復(fù)發(fā)型 19 164.68±124.74 106.98±92.36 157.98±116.75 151.98±147.65

表4 觀察組患者治療前后外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平比較(±s,pg/ml)

表4 觀察組患者治療前后外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平比較(±s,pg/ml)

注：與治療前比較,aP＜0.05

時(shí)間 IL-17 IL-21 IL-22 IL-23治療前 163.18±134.17 112.83±30.25 152.92±117.89 140.99±136.63治療后 95.35±13.37a 89.95±18.56a 112.53±23.78a 123.05±78.01a

3 討論

炎性腸病(IBD)包括克羅恩病(CD)和UC,其病因和發(fā)病機(jī)制仍不清楚。目前公認(rèn),腸黏膜免疫調(diào)節(jié)異常在IBD 發(fā)生發(fā)展中起重要作用,而其發(fā)病機(jī)制中有多種細(xì)胞因子參與,其中IL是主要的具有多種生物活性的一組淋巴因子,且外周血IL水平目前在臨床上檢測均可實(shí)現(xiàn),具有標(biāo)本取材容易、檢測快速、檢測費(fèi)用較低的特點(diǎn),因此,若能通過早期檢測IBD患者或高危患者及治療患者外周血IL和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平而達(dá)到知曉患者疾病狀態(tài)的目的,那么對于早期干預(yù)IBD患者治療或者動(dòng)態(tài)觀察其治療效果具有極為重要的意義。

新發(fā)現(xiàn)的IBD細(xì)胞因子包括IL-17、IL-21、IL-22、IL-23。既往研究表明,IL-17在體內(nèi)外均是強(qiáng)效的炎癥因子,具有多種生物學(xué)活性,可誘導(dǎo)許多致炎因子的產(chǎn)生,這揭示了IL-17在炎癥發(fā)生發(fā)展過程中起著重要的調(diào)控作用［1］。研究發(fā)現(xiàn),與正常人相比,CD和UC患者血清中的IL-17水平均明顯升高［2］。目前也有證據(jù)表明,IL-23、IL-17軸在IBD的發(fā)病機(jī)制中可能處于關(guān)鍵地位,并有望成為IBD治療中新的靶標(biāo)［3］。IL-23屬于IL-12家族,主要參與輔助性T 細(xì)胞17(Th17)細(xì)胞擴(kuò)增和維持其存活［4］,缺乏IL-23時(shí),Th17細(xì)胞即明顯減少［5］,也在一些自身免疫性疾病的發(fā)生發(fā)展過程中起重要作用。在對IBD患者的研究中發(fā)現(xiàn),IBD患者腸道炎癥部位IL-23和IL-17表達(dá)均明顯增加［6］。提示IL-23和IL-17在IBD發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。但有關(guān)IL-23和IL-17在UC患者外周血清水平及其與患者疾病嚴(yán)重程度間的關(guān)系研究,目前不多。IL-21是有T細(xì)胞衍生的細(xì)胞因子家族中的一員,作用于小腸上皮細(xì)胞,維持Th1細(xì)胞(Th1)型炎癥的產(chǎn)生。既往研究表明,CD和UC患者中均存在IL-21表達(dá)［7］。有研究還發(fā)現(xiàn),IL-21可促進(jìn)IBD中自然殺傷細(xì)胞(NK)細(xì)胞的細(xì)胞毒反應(yīng),從而誘導(dǎo)IBD中CD4+T細(xì)胞分化為Th17細(xì)胞［8］。而Th17細(xì)胞又可分泌炎性因子IL-17。因此,IL-21在IBD的發(fā)病機(jī)制中起重要作用。同時(shí),Th17對IL-22的生成亦有重要作用［9］。在鼠類動(dòng)物UC模型的研究中發(fā)現(xiàn),IL-22具有防護(hù)作用,并認(rèn)為在腸道炎癥時(shí),IL-22可通過誘導(dǎo)杯狀細(xì)胞產(chǎn)生膜結(jié)合粘蛋白,從而減弱炎癥反應(yīng)［10］。

關(guān)于上述因子在同一時(shí)間點(diǎn)不同嚴(yán)重程度UC患者的外周血清含量及這些因子的水平與患者疾病嚴(yán)重程度和治療反應(yīng)間的關(guān)系,有待進(jìn)一步研究。本研究結(jié)果顯示,觀察組外周血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平均明顯高于對照組(P＜0.05)；輕中度患者其外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平均明顯低于重度患者(P＜0.05)；初發(fā)型 UC患者外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平較慢性復(fù)發(fā)型低(P＜0.05)；觀察組治療后外周血清IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平均明顯低于治療前(P＜0.05)。提示UC患者外周血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23水平明顯升高,且與疾病活動(dòng)度密切相關(guān),可預(yù)測UC發(fā)展或評估治療效果。

綜上所述,UC患者外周血清中IL-17、IL-21、IL-22、IL-23的水平和患者腸黏膜組織上述因子的表達(dá)情況及這些值與患者疾病嚴(yán)重程度和治療反應(yīng)間的關(guān)系可為UC患者或高?；颊咴缙诎l(fā)現(xiàn)、早期治療以及動(dòng)態(tài)評估患者治療效果提供臨床依據(jù)。

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10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.12.152

2016-03-29］

東莞市科研項(xiàng)目(項(xiàng)目編號：201510515000316)

523721 東莞市塘廈醫(yī)院內(nèi)科