王華

FQ-PCR技術定量檢測HBV-DNA與乙型肝炎病毒免疫學標記物的相關性

王華

目的探討熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)技術定量檢測乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸(HBV-DNA)的效果, 并分析HBV-DNA與乙型肝炎病毒免疫學標記物的相關性。方法198例乙型肝炎患者, 分別采用FQ-PCR技術和酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)對患者血清行HBV-M定性檢測和HBVDNA定量檢測。結果HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+)HBV-DNA陽性率為93.24%, 病毒量為(6.89±1.85)copies/ml顯著高于HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)、HBsAg(+)HBcAb(+)、HBsAb(+)HBeAb(+)HBcAb(+)、HBeAb(+) HBcAb(+)、HBcAb(+), 其中HBcAb(+)最低, 差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結論血清HBV-DNA與HBV復制程度具有顯著相關性, 能夠反映患者發(fā)病程度、傳染性等, 對臨床制定治療方案有指導意義。

乙型肝炎；熒光定量聚合酶鏈反應；免疫學標記物；乙型肝炎病毒脫氧核糖核酸；相關性

乙型肝炎是由HBV感染引發(fā)的疾病, 會誘發(fā)肝臟損害,若治療不當可進展為肝硬化, 嚴重威脅著人們的身體健康。近年來, 乙型肝炎病毒的發(fā)生率明顯升高。因此, 臨床應加強對乙型肝炎的防治, 提高患者的預后生活質量。定量檢測HBV-DNA能夠反映血清HBV病毒的復制情況, 對確定治療方案具有指導意義。有研究指出, 加強對HBV-DNA及乙型肝炎病毒免疫的檢測, 在臨床評估乙型肝炎的病毒傳染性、疾病嚴重程度中具有重要意義［1］。對此, 本文探討了HBVDNA及乙型肝炎病毒免疫學標記物的相關性, 為臨床治療乙型肝炎提供客觀依據(jù), 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2012年9月～2014年9月醫(yī)院收治的乙型肝炎患者198例作為研究對象, 男82例, 女116例, 年齡20～76歲, 平均年齡(42.06±9.68)歲；根據(jù)乙型肝炎病毒血清HBV-M模式：74例HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+), 63例HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+), 16例HBsAg(+)HBcAb(+), 17例HBsAb(+)HBeAb(+)HBcAb(+), 10例HBeAb(+)HBcAb(+), 18例 HBcAb(+)。

1.2方法 198例受試者均行空腹靜脈采血6 ml, 置于2支抗凝試管中(3 ml/支), 置入血液離心機中行血清分離, 轉速為3000 r/min, 10 min后取出。采用ELISA檢測HBV-M水平；采用FQ-PCR技術檢測HBV-DNA水平, ＞1.0×102copies/ml提示為陽性。檢測期間嚴格按照實際說明書操作。

1.3統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示, 采用t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結果

HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+) HBV-DNA陽性率為93.24%, 病毒量為(6.89±1.85)copies/ml, 均顯著高于HBsAg(+)HBeAb(+) HBcAb(+)、HBsAg(+)HBcAb(+)、HBsAb(+)HBeAb(+)HBcAb (+)、HBeAb(+)HBcAb(+)、HBcAb(+), 其中HBcAb(+)病毒量最低,差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 HBV-M模式與HBV-DNA結果分析［n(%),±s］

表1 HBV-M模式與HBV-DNA結果分析［n(%),±s］

注：與其他HBV模式相比,aP＜0.05

HBV模式 例數(shù) HBV-DNA陽性率 病毒量(copies/ml) HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+) 74 69(93.24)a6.89±1.85aHBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+) 63 31(49.21) 5.97±1.20 HBsAg(+)HBcAb(+) 16 7(43.75) 5.21±1.13 HBsAb(+)HBeAb(+)HBcAb(+) 17 3(17.65) 4.01±0.62 HBeAb(+)HBcAb(+) 10 1(10.00) 3.91±0.79 HBcAb(+) 18 3(16.67) 3.86±0.82

3 討論

兩對半(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)是臨床檢查HBV病毒感染的常見指標, 若檢查結果顯示為大三陽, 則提示HBV病毒處于活躍狀態(tài), 傳染性較強；若檢查結果顯示為小三陽, 則提示病毒復制能力弱, 傳染性降低。然而,有研究指出, 該檢查方案無法反映HBV的復制水平, 尤其在準確反映器官移植、醫(yī)源性感染等患者HBV病毒感染中存在局限性［2］。近年來, FQ-PCR技術定量檢測HBV-DNA逐漸用于臨床診斷中, 取得滿意效果。

HBV-DNA為完整的HBV顆粒內核核心表達, 能夠顯示病毒復制、減少、轉陰等情況, 在臨床確定抗病毒方案中具有指導意義［3］。本組研究中, HBsAg(+)HBeAg(+)HBcAb(+) HBV-DNA陽性率為93.24%, 病毒量為(6.89±1.85)copies/ml,顯著高于HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)、HBsAg(+)HBcAb(+)、HBsAb(+)HBeAb(+)HBcAb(+)、HBeAb(+)HBcAb(+)、HBcAb(+),其中HBcAb(+)病毒量最低, 差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。由研究結果可看出, 大三陽患者HBV-DNA的復制能力較強。有文獻指出, HBV-DNA與HBeAg陽性表達具有顯著相關性［4］, 本研究結果與此一致。HBsAg(+)HBeAb(+)HBcAb(+)、HBsAg(+)HBcAb(+)的HBV感染力無差異, 可能與前區(qū)C序列基因表達, 抑制HBsAg表達, 造成HBsAg呈陰性有關, 但該模式HBV感染的病毒傳染性仍較高［5］。

綜上所述, 人體一旦明確存在HBV感染, 應聯(lián)合HBV免疫學標記物及HBV-DNA, 便于臨床明確乙型肝炎患者HBV病毒復制能力、傳染性及臨床治療效果, 在防治乙型肝炎中具有重要意義。

［1］鄭衛(wèi)東, 田彩霞, 左萬超, 等.1427例乙型肝炎患者PreS1、HBV DNA和HBV-M相關性分析.國際檢驗醫(yī)學雜志, 2012, 33(7):802-803, 805.

［2］彭強, 楊彩霞.乙型肝炎血清免疫學標志物與HBV DNA定量檢測的相關性.國際檢驗醫(yī)學雜志, 2011, 32(15):1770-1772.

［3］蔡葉琴, 孫彥, 黃黎, 等.血清HBV-DNA與HBV免疫學標志物的相關性研究.河北醫(yī)學, 2011, 17(2):153-155.

［4］張蕾, 周玉妮, 董景云, 等.血清HBV-DNA載量、乙肝免疫學標志物定量與老年慢性乙肝患者肝功能的關系.中國老年學雜志, 2014, 34(13):3563-3564.

［5］張慶安.乙肝患者血清免疫學標志物檢測結果與HBV-DNA定性、定量關系的分析.山東醫(yī)藥, 2012, 52(22):74-76.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2016.03.011

2015-09-30］

453000 新鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院檢驗科