吳慧靜

?臨床醫(yī)學?

CCL-18在慢性阻塞性肺疾病中的表達

吳慧靜

目的 比較分析趨化因子配體-18(CCL-18)在急性加重期慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)患者治療前后的表達水平變化情況,為患者病情嚴重程度和臨床療效評價提供依據(jù)。方法 急性加重期慢阻肺住院病例80例為A組,穩(wěn)定期慢阻肺病例80例為B組,健康對照60例為C組,A組患者于入院后24 h,治療后3、6、9和12 d取血樣檢測；B組患者于病情穩(wěn)定后24 h取血樣檢測；C組于體檢時取血樣,采用酶聯(lián)免疫吸附法測定CCL-18和白細胞介素-6(IL-6)值。結(jié)果 A組入院后24 h,A組CCL-18和IL-6顯著高于B、C組(P＜0.01),B組顯著高于C組(P＜0.01)。隨著治療的進行,A組患者CCL-18和FEV1%預(yù)計值逐漸下降,以CCL-18為自變量,以FEV1%預(yù)計值為因變量進行一元回歸分析,證實兩種變量間存在負相關(guān)：r=-0.991,Y=126.599-9.714X(P＜0.01)。結(jié)論 CCL-18在慢阻肺患者中呈高表達,隨著患者病情的加重,CCL-18表達增高,且其表達與患者肺功能呈負相關(guān)性。

趨化因子配體-18；慢性阻塞性肺疾?。换虮磉_

慢性阻塞性肺疾病在臨床比較多見,尤其我國老齡化越來越嚴重,其發(fā)生率和死亡率也不斷增加。慢阻肺的發(fā)病機制多與有害氣體或顆粒造成的肺部異常炎癥反應(yīng)有關(guān),已有研究證實吸煙是慢阻肺發(fā)病的主要危險因素［1］。CCL-18其mRNA在人體肺臟等一些器官組織中呈現(xiàn)著持續(xù)高表達的特征［2］。已有報道表明CCL-18參與了過敏性哮喘、乳腺癌、卵巢上皮癌等疾病的發(fā)病過程［3,4］。我國臨床對慢阻肺患者肺部CCL-18表達的研究樣本比較有限,還需要更多的研究探尋該趨化因子在肺部疾病發(fā)生與發(fā)展過程中的作用,為臨床治療提供新的思路。本研究比較分析了CCL-18在急性加重期慢阻肺患者治療前后的表達水平變化情況,希望為患者病情嚴重程度和臨床療效評價提供依據(jù),現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2014年1～12月間急性加重期慢阻肺住院病例80例為A組：男52例,女28例；年齡56～78歲,平均年齡(64.8±7.2)歲；病程5～20年,平均病程(12.8±3.2)年；吸煙史58例。選取同期穩(wěn)定期慢阻肺病例80例為B組：男50例,女30例；年齡55～76歲,平均年齡(65.2±7.5)歲；病程4～21年,平均病程(12.3±4.1)年；吸煙史62例。另選取同期院內(nèi)健康體檢健康者60例為C組,男38例,女22例；年齡52～73歲,平均年齡(63.8±8.2)歲。三組研究對象除本文相關(guān)疾病外,其他一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05),具有可比性。

1.2 納入標準 ①慢阻肺診斷及分期標準參照2007修訂版《慢性阻塞性肺疾病診療規(guī)范》［5］； ②急性加重期指短期內(nèi)喘息、咳嗽、咳痰等癥狀加重,膿性痰增多,可伴或不伴發(fā)熱等炎性癥狀；③穩(wěn)定期指患者經(jīng)治療10～14 d后喘息、咳嗽、咳痰等癥狀明顯減輕,偶發(fā)輕微咳嗽,少量痰液；④排除合并有其他類型肺部疾病、肝炎、糖尿病、心血管疾病、嚴重感染、臟器功能衰竭、惡性腫瘤、血液系統(tǒng)疾病、免疫系統(tǒng)疾病及近期有免疫抑制劑用藥患者；⑤臨床化驗項目均在詳細告知患者并獲得患者同意后實施。

1.3 方法

1.3.1 取樣及樣本處理 A組患者于入院后24 h和治療后3、6、9和12 d取血樣檢測；B組患者于病情穩(wěn)定后24 h取血樣檢測；C組于體檢時取血樣。均取清晨空腹靜脈血3ml,抗凝并于室溫中靜置1～2 h,送入4℃冰箱保存。實驗室離心機處理,3000 r/min,10min,留取上清液置于-80℃冰箱保存待測。

1.3.2 CCL-18檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附法,試劑盒由上海藍基生物科技有限公司提供,操作方法嚴格參照說明。

1.3.3 IL-6檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附法,試劑盒由上海藍基生物科技有限公司提供,操作方法嚴格參照說明。

1.3.4 肺功能監(jiān)測 采用肺功能監(jiān)測儀進行第一秒用力呼出量(FEV1)的測定,并計算FEV1%預(yù)計值。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計學軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示,兩組間比較采用t檢驗,多組間比較采用方差分析；計數(shù)資料采用χ2檢驗；相關(guān)性分析采用直線回歸分析,以患者CCL-18值為自變量,FEV1%預(yù)計值為因變量。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 三組間CCL-18和IL-6比較 A組入院后24 h,A組CCL-18和IL-6顯著高于B、C組(t=19.764、44.172、9.913、15.351,P＜0.01),B組顯著高于C組(t=21.166、4.668,P＜0.01)。見表1。

2.2 A組治療前后CCL-18和FEV1%預(yù)計值變化情況 隨著治療的進行,患者CCL-18和FEV1%預(yù)計值逐漸下降,以CCL-18為自變量,以FEV1%預(yù)計值為因變量進行一元回歸分析,證實兩種變量間存在回歸關(guān)系,呈負相關(guān)：r=-0.991,Y=126.599-9.714X(P＜0.01)。見表2,圖1。

表1 三組CCL-18和IL-6水平比較(±s)

表1 三組CCL-18和IL-6水平比較(±s)

注：三組比較,P＜0.01

組別 例數(shù) CCL-18(ng/ml) IL-6(ng/L) A組 80 8.2±0.8 11.8±1.3 B組 80 5.7±0.8 9.6±1.5 C組 60 3.4±0.3 8.5±1.2F12.473 7.896P＜0.01 ＜0.01

表2 A組患者治療不同時間點的CCL-18與FEV1%預(yù)計值變化水平(±s)

表2 A組患者治療不同時間點的CCL-18與FEV1%預(yù)計值變化水平(±s)

指標 入院后24 h 治療后3 d 治療后6 d 治療后9 d 治療后12 d CCL-18(ng/ml) 8.2±0.8 7.1±0.5 6.3±0.7 5.9±0.7 5.7±0.8 FEV1%預(yù)計值(%) 47.9±9.6 56.6±8.2 63.8±7.3 69.4±7.8 72.8±7.6

圖1 CCL-18與FEV1%預(yù)計值相關(guān)性

3 討論

慢阻肺以不完全可逆的呼吸道氣流受限為主要表現(xiàn)特征,臨床上對其發(fā)病機制尚不明確,但已有研究證實氧化/抗氧化失衡、氣道炎癥、異常細胞凋亡、免疫反應(yīng)、蛋白酶失衡等參與其發(fā)病過程［6,7］。氣道炎癥學說認為,慢阻肺的發(fā)病與感染、吸煙、過敏、粉塵顆粒、有毒物質(zhì)、大氣污染等密切相關(guān),是這些因素刺激肺部組織而引發(fā)的一類氣道慢性炎癥反應(yīng)［8］,其發(fā)病過程有多種炎癥因子、炎癥細胞、趨化因子、細胞因子等參與其中,較為典型的如白細胞介素、中性粒細胞、巨噬細胞、T淋巴細胞等可破壞肺泡和肺組織結(jié)構(gòu),從而影響肺功能［9］。

趨化因子為一類具有顯著的催化作用的可溶性蛋白,分子量小,可廣泛參與習慣性炎癥反應(yīng),可對樹突細胞、中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、自然殺傷細胞(NK)等起到趨化作用,并參與了淋巴細胞的活化,隨淋巴系統(tǒng)遷移［10-12］。另外,趨化因子在血管生成、腫瘤生長與轉(zhuǎn)移、造血等病理生理過程中也起到了一定趨化作用,我國臨床已有報道［13］對趨化因子在白血病病例中的表達及意義做出研究。CCL-18最早于1997年在人的胎兒肺內(nèi)發(fā)現(xiàn),是一種肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子。早期的研究發(fā)現(xiàn),CCL-18在肺內(nèi)呈現(xiàn)持續(xù)的高表達,而在淋巴組織、胸腺、闌尾等組織中則呈低表達。近些年來,我國臨床逐漸出現(xiàn)肺部疾病的CCL-18表達的相關(guān)研究,劉桂桃等［14］通過動物實驗證實了CCL-18參與肺纖維化的發(fā)生過程；王健等［15］的臨床報道證實了CCL-18在過敏性哮喘急性發(fā)作期中的高表達特征。

CCL-18參與慢阻肺及其急性發(fā)作的機制在于：CCL-18與特異性受體結(jié)合后募集相應(yīng)炎細胞向氣道遷移,造成氣道內(nèi)大量的細胞因子被釋放,觸發(fā)瀑布式級聯(lián)反應(yīng),刺激氣道黏液細胞的大量分泌,從而促進氣道的高反應(yīng)性。CCL-18促進了患者氣道內(nèi)炎癥細胞的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程,從而參與和促進了炎癥反應(yīng)的發(fā)生。本組研究中,對慢阻肺急性加重期、穩(wěn)定期及健康人的血清CCL-18及IL-6水平檢測結(jié)果顯示,患者病情程度越重,炎癥因子和趨化因子的表達越高,證實了CCL-18在慢阻肺、尤其是急性加重期慢阻肺患者中的高表達,參與了慢阻肺炎癥反應(yīng)的發(fā)生機制中。FEV1%預(yù)計值反映了肺功能水平,對急性加重期慢阻肺患者治療不同時點的CCL-18與FEV1%預(yù)計值變化的相關(guān)性分析結(jié)果顯示,CCL-18與患者肺功能的變化呈負相關(guān),說明CCL-18的表達對于指導(dǎo)臨床診斷、治療、預(yù)后評價及對肺功能的評估具有一定價值。

綜上所述,CCL-18在慢阻肺患者中呈高表達,隨著患者病情的加重,CCL-18表達增高,且其表達與患者肺功能呈負相關(guān)性。

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