王珊

“你看，這是頭，這是身體，這是尾巴?！?3歲的陳大元指著一張老照片說(shuō)。這是一張黑熊子宮剖面圖，圖上有一個(gè)正在被子宮吸收的大熊貓?jiān)缙谔海掌傇谝粋€(gè)原木色的相框里。

這是一項(xiàng)異種克隆實(shí)驗(yàn)，胎兒的母體是一只身強(qiáng)體壯、有繁殖能力的黑熊，如果一切順利的話，它將產(chǎn)下一只熊貓寶寶。不過(guò)，可惜的是，胎兒最后卻安放在這四四方方的相框里了：它停止了發(fā)育，如果不仔細(xì)辨認(rèn)，已經(jīng)很難看清它的模樣。

這是一項(xiàng)名為“異種克隆大熊貓”的項(xiàng)目。陳大元正是這個(gè)項(xiàng)目的負(fù)責(zé)人。耄耋之年的他穿著一件灰色的毛衣，戴著一副金邊眼鏡，眼睛炯炯有神。1998年，作為中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所首席科學(xué)家、動(dòng)物克隆與受精生物學(xué)學(xué)科帶頭人，陳大元首次正式提出克隆大熊貓，直到現(xiàn)在，已過(guò)去18年。

由于前期申請(qǐng)的國(guó)家項(xiàng)目已到期，這項(xiàng)當(dāng)初被視為“驚人之舉”的工作曾因?yàn)榻?jīng)費(fèi)等問(wèn)題一度暫停。如今，這個(gè)項(xiàng)目依靠自籌經(jīng)費(fèi)的形式重新啟動(dòng)，對(duì)于陳大元來(lái)說(shuō)，這是一個(gè)未了的心愿。

僅靠人工授精是不夠的

陳大元是中國(guó)異種克隆大熊貓第一人。然而，進(jìn)入克隆領(lǐng)域的時(shí)候，他已經(jīng)63歲。

陳大元對(duì)科學(xué)前沿的嗅覺(jué)極為敏感。1995 年，他就創(chuàng)建了“動(dòng)物體細(xì)胞克隆”科技平臺(tái)，著手進(jìn)行體細(xì)胞克隆的研究。他發(fā)現(xiàn)，用已掌握的顯微操作技術(shù)，可以做克隆。中國(guó)科學(xué)院上海生科院細(xì)胞生物學(xué)與生物化學(xué)研究所研究員李勁松告訴《中國(guó)新聞周刊》，陳大元做科研的魄力讓他很震動(dòng)，動(dòng)物體細(xì)胞克隆作為一個(gè)新的前沿領(lǐng)域，讓很多人望而卻步。

1997年，看到多利羊誕生的消息后，陳大元更堅(jiān)定了他進(jìn)行研究的決心。

克隆是指通過(guò)把供體細(xì)胞核移植到成熟的去核卵母細(xì)胞中進(jìn)行個(gè)體“復(fù)制”所獲得的后代，其遺傳性狀與供體細(xì)胞是一致的。用未分化的胚胎細(xì)胞進(jìn)行核移植，稱為胚胎細(xì)胞克隆;若用已分化的體細(xì)胞進(jìn)行核移植，稱為體細(xì)胞克隆。

多利羊就是通過(guò)體細(xì)胞的方式獲得的，這是一種全新的獲得生命個(gè)體的方式，這甚至意味著以往科幻小說(shuō)中獨(dú)裁狂人克隆自己的想法是完全可以實(shí)現(xiàn)的。

陳大元斜靠在椅子上，除了偶爾手上做一兩個(gè)動(dòng)作外，他很少變換姿勢(shì)?！翱寺【褪菬o(wú)性繁殖。”陳大元告訴《中國(guó)新聞周刊》。由受精領(lǐng)域轉(zhuǎn)向克隆很自然，也是國(guó)際科技發(fā)展的一個(gè)潮流。

大熊貓是陳大元選中的克隆對(duì)象。他有兩個(gè)理由：一是大熊貓作為瀕危保護(hù)動(dòng)物，已有的有性繁殖手段還不能完全達(dá)到擴(kuò)大其種群的目的;二是他曾經(jīng)與大熊貓繁育基地合作，做過(guò)16年的大熊貓有性繁殖，對(duì)其習(xí)性和生殖規(guī)律比較了解。

1964年，北京動(dòng)物園誕生了第一個(gè)人工授精繁殖的大熊貓，一時(shí)間，大熊貓的人工授精成為一種潮流。然而，由于當(dāng)時(shí)技術(shù)還不很成熟，很多人對(duì)受精機(jī)理不清楚，大熊貓經(jīng)人工授精后，并沒(méi)有產(chǎn)下胎兒。以四川大熊貓基地為例，曾經(jīng)連續(xù)3年沒(méi)有一只大熊貓誕生，這種現(xiàn)象叫做“空懷”。

在人工授精過(guò)程中，取出的精子需要制成冰球冷凍保存。陳大元發(fā)現(xiàn)，冰球解凍后，很多精子都是死的，“正常的精子，在顯微鏡下，你能夠看到它們?cè)谟蝿?dòng)，優(yōu)質(zhì)的精子都是在直線運(yùn)動(dòng)。”

為了幫助大熊貓生產(chǎn)，陳大元開始帶著小組在四川大熊貓基地進(jìn)行大熊貓的受精機(jī)理研究。這一合作就是16年，陳大元不僅解決了人工授精中存在的各種問(wèn)題，還對(duì)雌性大熊貓補(bǔ)充外源促性腺激素，促進(jìn)其卵子成熟和發(fā)情排卵?！坝?年，基地生下了7對(duì)雙胞胎，9只單胞胎。” 這是陳大元自豪的事情，也正是這幾年的經(jīng)驗(yàn)讓他意識(shí)到，單純依靠這些方法來(lái)拯救大熊貓是不夠的。

“克隆會(huì)是一個(gè)很好的保護(hù)手段?！倍嗬虻恼Q生，讓陳大元看到了一絲光亮，但問(wèn)題也來(lái)了。當(dāng)時(shí)，大熊貓是國(guó)寶，不可能從它身上獲得卵母細(xì)胞，更不可能用它來(lái)做寄母;我國(guó)大熊貓的數(shù)量不到千只，每年也只發(fā)情一次，“進(jìn)行同種克隆實(shí)驗(yàn)是絕對(duì)不可能的”。

基于這些考慮，陳大元設(shè)計(jì)的方案與克隆羊的實(shí)驗(yàn)有很大不同：克隆羊?qū)嶒?yàn)中供體和受體細(xì)胞是同種的，屬同種克隆;而他設(shè)計(jì)的克隆大熊貓實(shí)驗(yàn)則將取自不同種的動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行核移植，屬異種克隆。

李勁松猶記得自己當(dāng)時(shí)的吃驚和擔(dān)心，當(dāng)時(shí)哺乳動(dòng)物異種克隆在世界上還從未有過(guò)成功的先例。不過(guò)，他們也看到，當(dāng)時(shí)美國(guó)已有科學(xué)小組成功地把綿羊、豬、鼠、猴的細(xì)胞核移植到去核的牛卵細(xì)胞中。

“他對(duì)科學(xué)前沿的把握相當(dāng)?shù)鼐珳?zhǔn)。那時(shí)，克隆大熊貓，大家都不敢想?！碧K州大學(xué)教授姜巖告訴《中國(guó)新聞周刊》，即使到現(xiàn)在，異種克隆依然是生命科學(xué)前沿的領(lǐng)域。

陳大元的果敢似乎傳承于他的老師、中國(guó)著名實(shí)驗(yàn)胚胎學(xué)家童第周。童第周是中國(guó)克隆的先驅(qū)，早在上世紀(jì)60年代，他就在中國(guó)成功獲得了第一批具有“發(fā)育全能性”的克隆魚。

“他早就跟我們講體細(xì)胞克隆，他甚至把洋蔥的細(xì)胞放到魚卵子里去，看洋蔥細(xì)胞核能否在里面發(fā)育，非常有想法?！标惔笤f(shuō)。

異種克隆的三道坎

一直到現(xiàn)在，陳大元還是念念不忘異種克隆的三道坎：異種核質(zhì)能否相容，囊胚能否著床成功，胚胎能否發(fā)育?！拔覀円呀?jīng)過(guò)了兩道半，但是在胎兒發(fā)育上一直邁不過(guò)去?！标惔笤f(shuō)。

陳大元的第一筆資金來(lái)自中科院生物局，數(shù)目不大，只有10萬(wàn)元。這并不是一個(gè)正式的立項(xiàng)，“領(lǐng)導(dǎo)也是抱著讓我試試的態(tài)度，錢主要用于無(wú)菌培養(yǎng)室的修建?！标惔笤f(shuō)。

第一道坎是異種核質(zhì)能否相容，即大熊貓的體細(xì)胞核放到其他動(dòng)物的卵細(xì)胞里，能否發(fā)育成基本的囊胚。實(shí)驗(yàn)的第一個(gè)難題是如何獲得大熊貓的體細(xì)胞。作為國(guó)寶，提取體細(xì)胞的過(guò)程只能在大熊貓死后不久，細(xì)胞活性尚未消失時(shí)進(jìn)行。“如果在生活狀態(tài)取材，國(guó)家是不允許的?！标惔笤f(shuō)。

第一批大熊貓的體細(xì)胞來(lái)自福建。當(dāng)時(shí)已經(jīng)為此事焦急的陳大元突然接到了福州大熊貓研究中心打來(lái)電話。內(nèi)容簡(jiǎn)單的像一份電報(bào)：有一只大熊貓奄奄一息，立即來(lái)取細(xì)胞樣本?！叭〔臅r(shí)，那只大熊貓剛剛咽氣幾分鐘。”陳大元回憶道。

在獲取了大熊貓?bào)w細(xì)胞后，陳大元和研究團(tuán)隊(duì)將大熊貓?bào)w細(xì)胞的細(xì)胞核移植到去核的家兔卵母細(xì)胞中。為了進(jìn)行比對(duì)，陳大元選擇了熊貓身上骨骼肌、子宮上皮、乳腺組織的體細(xì)胞。經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)，他們發(fā)現(xiàn)，大熊貓的3種體細(xì)胞移植到家兔去核卵母細(xì)胞中均可以發(fā)育成囊胚，囊胚率以乳腺細(xì)胞最高，骨骼肌細(xì)胞最低。這標(biāo)志著異種核質(zhì)相容的問(wèn)題得到解決，異種克隆大熊貓邁過(guò)了第一道“坎”。

論文的成果發(fā)表在《中國(guó)科學(xué)》上，《自然》雜志隨即報(bào)道了這一成果，1999年，這項(xiàng)成果還被中國(guó)兩院院士評(píng)為中國(guó)十大科技進(jìn)展之一。

第一步成功之后，需要為這些囊胚選擇一個(gè)合適的代孕“母體”。陳大元選擇了貓，貓容易掌握且生殖規(guī)律與熊貓相近。貓的懷孕時(shí)間一般為兩個(gè)月，大熊貓?jiān)衅陔m然很長(zhǎng)，但是其中有一段時(shí)間胚胎都會(huì)在輸卵管中，真正到子宮中的發(fā)育時(shí)間也不過(guò)兩個(gè)多月。另外，“兩種動(dòng)物幼仔從母體生出來(lái)時(shí)都只有一巴掌大?！崩顒潘筛嬖V《中國(guó)新聞周刊》。

大熊貓很容易流產(chǎn)。陳大元想了一個(gè)辦法，在將異種囊胚移植入貓子宮里的同時(shí)，也會(huì)將貓自己的受精胚胎移植進(jìn)去，以此來(lái)“誘導(dǎo)”貓，讓大熊貓囊胚在貓的子宮中正常發(fā)育。

最終有兩只貓懷孕了。經(jīng)過(guò)檢測(cè)，陳大元發(fā)現(xiàn)，其中一只子宮內(nèi)的六個(gè)胚胎中，有兩只遺傳物質(zhì)來(lái)自大熊貓。這標(biāo)志著大熊貓克隆邁過(guò)了第二道坎——異種克隆大熊貓的囊胚能在家貓的子宮中著床。

類似的實(shí)驗(yàn)，國(guó)外尚沒(méi)有先例，很多細(xì)節(jié)，都需要摳得很細(xì)。在這個(gè)過(guò)程中，陳大元經(jīng)常自己動(dòng)手?！瓣愊壬氖趾芮?，他縫合的傷口讓我們嘆為觀止?！苯獛r說(shuō)。

陳大元的觀察力也讓學(xué)生們佩服。做實(shí)驗(yàn)前，學(xué)生都要在門外面換鞋子，陳大元會(huì)從大家鞋子擺放的姿勢(shì)和角度判斷出誰(shuí)來(lái)得早，誰(shuí)來(lái)得晚，然后囑咐來(lái)得早的人早點(diǎn)兒回去休息。

出于偶然的機(jī)會(huì)，他們獲得了與牡丹江某黑熊養(yǎng)殖場(chǎng)合作的機(jī)會(huì)，陳大元認(rèn)為，大熊貓與黑熊的生殖規(guī)律更接近，成功的可能性會(huì)更大。

不過(guò)，黑熊實(shí)驗(yàn)也很辛苦。黑熊很兇，體積龐大，脂肪也很厚，麻醉后需要四個(gè)年輕的小伙才能抬得動(dòng)。實(shí)驗(yàn)沒(méi)有想象得順利，李勁松記得有一次B超檢查，發(fā)現(xiàn)黑熊都懷孕了，但是隔一個(gè)月后再次檢查的時(shí)候卻沒(méi)有了。過(guò)了大概有三年的時(shí)間，終于有一只黑熊懷孕了，也可以從B超看到早期胎兒?？上?，就連這只也停止了發(fā)育。

直到現(xiàn)在，陳大元還沒(méi)有弄清楚，到底是什么原因使它停止發(fā)育了。“我也在總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)，到底這半步差在哪里了？”陳大元的眼睛緩緩地合了一下，若有所思。

“三分之二都是反對(duì)你的”

陳大元沒(méi)有想到的是，與實(shí)驗(yàn)難度一直相伴的竟會(huì)是來(lái)自整個(gè)社會(huì)的巨大關(guān)注和異議。在異種大熊貓重構(gòu)胚成功發(fā)育到囊胚后，陳大元打算申請(qǐng)科技部攀登項(xiàng)目以獲得更多的支持。就在這時(shí)，媒體紛沓而至，在一天的時(shí)間里，陳大元甚至接待了20家媒體，他已經(jīng)口干舌燥，光“三道坎”的理論，他就解釋了不下數(shù)十遍。即使如此，他依然很耐心，對(duì)媒體的提問(wèn)從不回避，有問(wèn)即答。

與后面如潮的反對(duì)聲相比，這還不算什么?！巴米拥穆炎雍痛笮茇埖捏w細(xì)胞結(jié)合怎么可能發(fā)育呢”“用大熊貓克隆，你買得起嗎？大熊貓是無(wú)價(jià)之寶，一只多少錢……”

最大的反對(duì)聲音當(dāng)來(lái)自被譽(yù)為“熊貓之父”的北大教授潘文石。從1980年起，潘文石就在臥龍和秦嶺的野地中對(duì)野生大熊貓進(jìn)行野外研究，探尋大熊貓瀕臨滅絕的真正原因。他堅(jiān)決反對(duì)克隆大熊貓，并認(rèn)為“錢要用在刀刃上，應(yīng)該把錢用在大熊貓生態(tài)研究或保護(hù)上”，且克隆大熊貓會(huì)“影響物種多樣性”。

他甚至寫了一篇文章“我為什么反對(duì)克隆大熊貓”，直指陳大元。而讓局面變得更加混亂的是，很多單位看到陳大元的成果，也躍躍欲試，準(zhǔn)備申請(qǐng)項(xiàng)目進(jìn)行大熊貓的克隆。為此，科技部專門舉辦了一次答辯會(huì)。

一位當(dāng)時(shí)參與競(jìng)爭(zhēng)的項(xiàng)目申請(qǐng)人曾經(jīng)明確表示，實(shí)驗(yàn)室不具備做克隆大熊貓的能力，但是領(lǐng)導(dǎo)給予的答復(fù)是，“去了把錢弄回來(lái)，我們做別的還不行嗎？武裝我們的實(shí)驗(yàn)室，做別的工作。”

答辯當(dāng)天，陳大元去得很早，在門口，他遇到了當(dāng)時(shí)的科技部部長(zhǎng)徐冠華?！瓣愊壬?，你知道今天來(lái)的專家都是誰(shuí)嗎？我告訴你，你不要緊張，三分之二都是反對(duì)你的?！?/p>

來(lái)的專家有二十多位，涵蓋了農(nóng)口、醫(yī)口、教育口以及中科院等五大部門的專家。陳大元很平靜，他摸了摸腦門，沖陪他來(lái)答辯的學(xué)生笑了笑，成竹在胸。

和他預(yù)料的一樣，七嘴八舌，反對(duì)聲音撲面而來(lái)。陳大元一一作答，包括經(jīng)費(fèi)的如何設(shè)置以及使用，都很詳細(xì)。很多專家最后都不說(shuō)話了。最后，專家投票，他獲得了科技部600萬(wàn)的經(jīng)費(fèi)。

也有來(lái)參加答辯的項(xiàng)目申請(qǐng)人，被在座專家問(wèn)得啞口無(wú)言，有一個(gè)大學(xué)教授提出申請(qǐng)的經(jīng)費(fèi)為8000萬(wàn)，是所有提出的項(xiàng)目申請(qǐng)中最高的。

（資料圖片）如今克隆大熊貓要面對(duì)技術(shù)和經(jīng)費(fèi)的雙重困難。

“8000萬(wàn)怎么用？你是要買熊貓嗎？”評(píng)審的一個(gè)專家問(wèn)他。申請(qǐng)人回答：“是的，要買幾只大熊貓，需要大量費(fèi)用?！睂＜艺f(shuō)：“大熊貓是國(guó)寶，是無(wú)價(jià)的?！鄙暾?qǐng)人回答：“不不不……”無(wú)言以對(duì)，就離開了會(huì)場(chǎng)。

即使承受再多壓力，陳大元也從沒(méi)有將其轉(zhuǎn)移給他的學(xué)生。“陳老師從來(lái)都很平靜，和以往一樣樂(lè)呵呵地指導(dǎo)我們實(shí)驗(yàn)?！睎|北農(nóng)業(yè)大學(xué)教授劉忠華告訴《中國(guó)新聞周刊》。

克隆牛第一人

陳大元的克隆工作不只是在大熊貓，他還是中國(guó)第一頭體細(xì)胞克隆牛的創(chuàng)造者，被稱為“中國(guó)體細(xì)胞克隆牛第一人”。1999年，在大熊貓工作緩慢的推進(jìn)過(guò)程中，他同時(shí)開始進(jìn)行克隆牛的研究。

要想做克隆牛，必須要有一個(gè)好的基地。陳大元四處尋找可以合作的養(yǎng)牛基地。盡管沒(méi)有遭受克隆大熊貓那么大的壓力，但是科學(xué)界對(duì)中國(guó)是否能做出體細(xì)胞克隆動(dòng)物尚有爭(zhēng)論。

幾經(jīng)周折，2001年，陳大元團(tuán)隊(duì)將270枚克隆胚胎移植到135頭母牛的子宮里，每頭牛的子宮里移植兩枚。

2002年1月19日，中國(guó)第一頭克隆牛誕生，取名 “委委”，體重有62公斤。委委躺在篝火前，有點(diǎn)虛弱，它的頭部和背部有大面積的黑色花斑，身上都是血跡，有十多名值班人員一直在照顧它。

李勁松仍然記得當(dāng)時(shí)的情形，當(dāng)時(shí)所有待產(chǎn)的母牛都被帷帳圍著，五十多家媒體記者的相機(jī)、攝像機(jī)從帷帳的上面探出頭，對(duì)著他們。“只覺(jué)得人很多，場(chǎng)景很混亂”。

出生的委委一動(dòng)也不愿意動(dòng)，頭耷拉在脖子上，偶爾弱弱地發(fā)出一些聲音。不到一個(gè)小時(shí)，它就斷了氣。李勁松一下子慌了，他慌亂地望了陳大元一眼。

“大家沉住氣，實(shí)驗(yàn)總有失敗。”陳大元的話，讓李勁松有了底氣，“他一直坐在那里等著，就像我們心中的定海神針。”

還好，隔了四天，剩下的小牛陸續(xù)出生，總共生了有14頭，活了5頭。到現(xiàn)在陳大元還保存著5頭小牛的合影：4頭黑白花的母牛，還有1頭全身黃燦燦的公牛。到現(xiàn)在，牛廠里還有黑白花的后代。

“我其實(shí)不緊張，第一次做，總會(huì)有成敗。沒(méi)想到居然成功了。”陳大元樂(lè)呵呵地告訴《中國(guó)新聞周刊》。

事后，分析小牛的死因，陳大元發(fā)現(xiàn)，這些牛存在先天發(fā)育不良的現(xiàn)象，體重高，體型大。這也是國(guó)外克隆動(dòng)物面臨的同樣問(wèn)題，體細(xì)胞是已分化的細(xì)胞，在被移入去核的卵母細(xì)胞后，遺傳物質(zhì)重編程不完全是導(dǎo)致克隆牛死亡的主要原因。

“我不敢說(shuō)能不能成功”

克隆牛成功的經(jīng)驗(yàn)，增加了陳大元對(duì)異種克隆大熊貓的信心。與此同時(shí)，世界范圍內(nèi)不少科學(xué)家開始把克隆技術(shù)用在瀕臨滅絕的哺乳動(dòng)物上。

2001年，意大利科學(xué)家們從兩只死于撒丁島的雌性歐洲盤羊體內(nèi)抽取出體細(xì)胞核，再把細(xì)胞核內(nèi)的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移到普通羊只的卵細(xì)胞里，最后誕生了一只雌性歐洲盤羊。

這是異種克隆成功的先例?！皻W洲盤羊和普通的羊是兩個(gè)種屬，但是生理構(gòu)成依然很接近?！崩顒潘筛嬖V《中國(guó)新聞周刊》，相比于這些成功的案例，陳大元的異種克隆大熊貓的難度更大。

2005年經(jīng)費(fèi)用完之后，已經(jīng)72歲的陳大元無(wú)法再申請(qǐng)經(jīng)費(fèi)，項(xiàng)目也因此停了。但陳大元的研究工作并未止步，2012年起，他甚至把國(guó)家自然科學(xué)獎(jiǎng)的獎(jiǎng)金和中國(guó)科學(xué)院給他的100萬(wàn)元獎(jiǎng)金也用在培養(yǎng)博士生和大熊貓克隆工作上。

事實(shí)上，因?yàn)楸谎悠负头灯噶撕脦状危?0歲的時(shí)候，陳大元才從動(dòng)物所真正退休，當(dāng)時(shí)的中科院院長(zhǎng)路甬祥特批他繼續(xù)工作：“陳先生退了，關(guān)于受精和克隆的工作沒(méi)有人主持?！标惔笤约阂膊簧岬梅畔庐惙N克隆大熊貓研究。

按照計(jì)劃，2016年一開春，陳大元要去福建一趟。他要與福州大熊貓研究中心合作繼續(xù)異種克隆大熊貓的實(shí)驗(yàn)。

黑熊作為代孕母體的昂貴費(fèi)用，他們已經(jīng)負(fù)擔(dān)不起。陳大元繼續(xù)選擇貓來(lái)做實(shí)驗(yàn)。冬末春初是貓發(fā)情的季節(jié)，也是進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的好時(shí)機(jī)。陳大元要趁這個(gè)時(shí)候，將大熊貓異種克隆胚胎移入貓的子宮里。

“如果，最后做不成功會(huì)怎樣？”很多人都會(huì)問(wèn)陳大元這樣一個(gè)問(wèn)題。

“那起碼能告訴后人，以后不要走彎路，若是問(wèn)題出在科技水平上，只好讓后人再用高科技來(lái)解決?！标惔笤f(shuō)。

盡管很多人認(rèn)為這是他最后一搏，但他的回答一如往日的嚴(yán)謹(jǐn)?！澳懿荒苌鰜?lái)，我不敢說(shuō)，生下來(lái)能不能活，我也不敢說(shuō)?！?