葉華春

(永修縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西九江 330304)

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·論著·

線粒體型天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶同工酶試劑檢測(cè)性能初步評(píng)價(jià)

葉華春

(永修縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江西九江 330304)

摘要:目的利用CLSI EP 10-A2文件初步評(píng)價(jià)線粒體型天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶同工酶(mAST)試劑的臨床應(yīng)用性能。方法按照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)頒布的EP10-A2文件，連續(xù)5天按特定順序測(cè)定高、中、低濃度mAST樣本，計(jì)算測(cè)定結(jié)果的偏差、總不精密度，對(duì)截距、斜率、非線性、攜帶污染和漂移進(jìn)行多元回歸分析。結(jié)果低、中、高濃度mAST樣本偏差分別為-0.6、-0.4和0.6 U/L，總不精密度分別為3.33%、1.10%和0.92%，截距、斜率、非線性、攜帶污染、漂移分別為-1.040、1.011、-0.196、0.000和-0.073，其t值分別為-3.215、1.060、-0.191、0.217和-0.569，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.01)。結(jié)論mAST試劑盒測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度、精密度良好，線性良好，攜帶污染率較低，穩(wěn)定性好，能滿足臨床應(yīng)用要求。

關(guān)鍵詞:線粒體型天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶同工酶；EP 10-A2；初步評(píng)價(jià)

線粒體型天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶同工酶(mitochondria aspartate aminotransferase，mAST)廣泛存在于人體各組織細(xì)胞中，經(jīng)研究，心、肝疾病患者血清mAST都有不同程度的升高，升高程度與疾病的嚴(yán)重程度有關(guān)，血清mAST的活力測(cè)定有助于臨床對(duì)心肌、肝細(xì)胞破壞的評(píng)估，可預(yù)示病情的發(fā)展趨勢(shì)，評(píng)價(jià)療效和判斷疾病預(yù)后[1-3]，具有重要的臨床意義。本文參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)頒布的《定量臨床檢驗(yàn)方法的初步評(píng)價(jià)：批準(zhǔn)指南EP10-A2》文件，對(duì)其偏差、總不精密度、截距、斜率、非線性、攜帶污染和漂移進(jìn)行分析， 初步評(píng)價(jià)其是否適用于臨床檢驗(yàn)工作[4-6]。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1儀器與試劑7600全自動(dòng)生化分析儀：購(gòu)自日本日立公司；mAST試劑盒：購(gòu)于寧波美康生物科技股份有限公司， 批號(hào)： 20140512。

1.1.2測(cè)定樣本使用寧波美康生物科技股份有限公司生產(chǎn)的質(zhì)控血清。低值樣本：選擇美康公司質(zhì)控血清(批號(hào)20140622，濃度：22.3 U/L)；高值樣本：選擇美康公司質(zhì)控血清(批號(hào)20140622，濃度：150.2 U/L)；中值樣本：將上述低值樣本與高值樣本按1∶1等比例混合。各濃度樣本分裝成6管，置-20 ℃冰凍保存。

1.2方法

1.2.1測(cè)定前準(zhǔn)備參數(shù)設(shè)置和操作程序嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。測(cè)定前樣本室溫放置30 min，使用前充分混勻。

1.2.2樣本測(cè)定根據(jù) CLSI EP 10-A2，每天按中、高、低、中、中、低、低、高、高、中的順序測(cè)定各濃度樣本一批，連續(xù)測(cè)定5 d。第一個(gè)樣本作為灌注系統(tǒng)用，不做統(tǒng)計(jì)。每批測(cè)定為連續(xù)測(cè)定，在測(cè)定過程中無論何種原因，如果后面的9個(gè)數(shù)據(jù)中的任何一個(gè)被拒絕、丟失或沒有報(bào)告，整個(gè)過程就必須重做。

1.2.3繪圖，數(shù)據(jù)處理以樣本的靶值(X)作為橫坐標(biāo)、實(shí)測(cè)值與靶值差值(Y-X)為縱坐標(biāo)作圖作偏差圖，以標(biāo)準(zhǔn)品的靶值(X)作為橫坐標(biāo)、實(shí)測(cè)值(Y)為縱坐標(biāo)作圖作散點(diǎn)圖，觀察有無離群點(diǎn)和線性情況；計(jì)算偏差、總不精密度，偏差允許范圍設(shè)定為靶值的±5%，總不精密度的允許范圍設(shè)定為5%；對(duì)截距、斜率、非線性、攜帶污染、漂移作回歸分析。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用Excel統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，校正回歸值作t檢驗(yàn)，當(dāng)t>4.6或t<-4.6時(shí)，P<0.01，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1繪圖、目測(cè)離群點(diǎn)和線性mAST試劑盒的偏差圖和線性趨勢(shì)圖見圖1、2，目測(cè)各濃度樣本測(cè)定結(jié)果無離群點(diǎn)，精密度良好，實(shí)測(cè)值與靶值間線性良好。

圖1　　mAST試劑盒實(shí)測(cè)值與靶值偏差圖

圖2　　mAST試劑盒實(shí)測(cè)值與靶值線性趨勢(shì)圖

2.2數(shù)據(jù)分析按照NCCLS EP10-A2文件所設(shè)計(jì)的數(shù)據(jù)處理表格中要求進(jìn)行計(jì)算，得出最后統(tǒng)計(jì)結(jié)果。

2.2.1偏差評(píng)估以各濃度5 d的測(cè)定結(jié)果均值與其對(duì)應(yīng)靶值之差計(jì)算偏差，偏差均未超過設(shè)定的±5%范圍，臨床均可接受，見表1。

項(xiàng)目低值中值高值121.4±0.986.3±0.5151.4±1.0221.5±0.986.0±1.3150.9±0.4321.3±0.885.9±0.9151.7±1.8422.4±0.685.8±0.9151.2±1.0521.7±0.785.2±0.9149.0±0.6總均值(Y)21.785.9150.8靶值(X)22.386.3150.2偏差(Y-X)-0.6-0.40.6允許偏差±1.1±4.3±7.5可接受性評(píng)價(jià)可接受可接受可接受

表2　　mAST試劑盒不精密度分析結(jié)果

2.2.2總不精密度分析按照 EP10-A2文件提供的方法，計(jì)算總不精密度。各濃度總精密度均未超過允許誤差， 臨床均可接受，結(jié)果見表2。

2.2.3測(cè)定結(jié)果多重回歸分析表：每天結(jié)果回歸分析，計(jì)算每天測(cè)定結(jié)果的截距、斜率、非線性、攜帶污染、漂移，結(jié)果見表3。結(jié)果顯示，截距、斜率、非線性、攜帶污染、漂移均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(-4.60.01)。

表3　　mAST試劑盒多元回歸分析匯總

3討論

研究顯示，mAST在心肌梗死患者血清的升高幅度明顯大于其他心肌疾病，是診斷心肌梗死最有價(jià)值的指標(biāo)之一，不同的肝病患者血清mAST均有不同程度的升高，與其他指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)可為臨床具體疾病提供依據(jù)，具有重要的臨床意義[1-3]。我們參照EP10-A2對(duì)其進(jìn)行了初步評(píng)估，以探討其在臨床的應(yīng)用價(jià)值。偏差評(píng)價(jià)結(jié)果顯示低、中、高濃度的絕對(duì)偏差均在允許偏差范圍之內(nèi)，故其偏差是可接受的，并且多元回歸總結(jié)分析結(jié)果顯示斜率、截距的t值均在-4.6～4.6，其差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，說明試劑測(cè)定的準(zhǔn)確度較好?？偛痪芏仍u(píng)價(jià)中，低、中、高濃度的總不精密度均小于最大允許總不精密度，說明其總不精密度也可以接受。多元回歸總結(jié)分析結(jié)果顯示攜帶污染、非線性的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，試劑線性能力良好，攜帶污染率低，能較好地滿足臨床常規(guī)檢測(cè)要求。

參考文獻(xiàn)

[1]杜宗孝，李富榮，樸文花.線粒體型天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶同工酶對(duì)肝臟疾病診斷價(jià)值的探討[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志,2013,35(4),303-304.

[2]于海波,郭其峰.肝病患者血清m-AST測(cè)定及臨床意義探討[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2010,31(17):2711-2713.

[3]陳美儀,陳泳暉,馮景霞.天門冬氨酸鳥氨酸對(duì)慢性黃疸型肝炎的臨床療效及肝功能指標(biāo)變化[J].中國(guó)醫(yī)院用藥評(píng)價(jià)與分析,2015,15(4):457-459.

[4]NCCLS．EP10-A2 Preliminary Evaluation of Quantitative Clinical Laboratory Methods[S]．Approved Guideline EP10-A2．2002．

[5]陳忠余,趙世巧,梁華,等．應(yīng)用NCCLS EP10-A2文件對(duì)五種半胱氨酸蛋白酶抑制劑C試劑進(jìn)行初步評(píng)價(jià)[J]．國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33(2)：157-159．

[6]劉懷平，劉樹業(yè)．實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可中封閉檢測(cè)系統(tǒng)的性能驗(yàn)證及評(píng)價(jià)[J]．現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2011，38 (19)：3981-3984．

Preliminary evaluation on detection performance of mitochondria aspartate aminotransferase isoenzyme reagent

YeHuachun

(DepartmentofClinicalLaboratory,YongxiuCountyPeople′sHostipal,Jiujiang,Jiangxi330304,China)

Abstract:ObjectiveTo preliminarily evaluate the clinical application performance of mitochondria aspartate aminotransferase (mAST) isoenzyme reagent by using the EP 10-A2 document of the Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI).MethodsAccording to the EP10-A2 document promulgated by CLSI,the high,middle and low concentrations of mAST samples were measured by the specific order for continuous 5 d.The bias and the total imprecision of the detection results were calculated,the intercept,slope rate,non-linearity,carryover contamination and drift were performed the multiple regression analysis.ResultsThe biases of the low,middle and high concentrations of mAST samples were -0.6,-0.4,0.6 U/L respectively,the total imprecisions were 3.33%,1.10% and 0.92% respectively,the intercept,slope rate,non- linearity,carryover contamination and drift were -1.040,1.011,-0.196,0.000 and -0.073 respectively,their t values were -3.215,1.060,-0.191,0.217 and -0.569 respectively,the difference showing no statistical significance(P>0.01).ConclusionThe detection of mAST reagent kit shows good accuracy,good precision and good linearity,low carryover contamination rate and good stability,which can meet clinical application requirement.

Key words:mitochondria aspartate aminotransferase isoenzyme;EP 10-A2;preliminary evaluation

(收稿日期：2015-09-28)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.01.014

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)01-0033-02

作者簡(jiǎn)介：葉華春，女，主任技師，主要從事臨床生物化學(xué)與檢驗(yàn)研究。