王耀幫，詹偉慧，麻秋霞，吳永平，陳偉南，胡海濤

(1.縉云縣畜牧獸醫(yī)局，浙江縉云 321400； 2.縉云縣白力岙豬場)

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PCV2和PRRSV對豬瘟疫苗的免疫抑制作用和預防控制試驗

王耀幫1，詹偉慧1，麻秋霞1，吳永平2，陳偉南1，胡海濤1

(1.縉云縣畜牧獸醫(yī)局，浙江縉云 321400； 2.縉云縣白力岙豬場)

摘要：PCV2和PRRSV是影響豬瘟防疫中最重要的免疫抑制因素。以1∶32為免疫抗體合格率，兩毒自然感染豬，用2倍量的豬瘟脾淋苗，于30日齡首免、44日齡二免，72日齡時用4倍量強免，經87日齡、102日齡采血檢測，其抗體合格率仍為零。若以PCV 2型滅活疫苗和豬藍耳病滅活疫苗對仔豬進行免疫保護，即可明顯提高豬瘟免疫合格率至90﹪以上?；趦刹《緦ωi瘟弱毒疫苗的免疫抑制作用，設計以豬瘟免疫抗體反應為指示系統(tǒng)：用免疫球蛋白PCV2-PRRSV-RRPSV- IgG和豬瘟苗對仔豬進行免疫，在豬瘟疫苗末免3周后采血檢測，其抗體合格率達到100%。

關鍵詞：PCV2；PRRSV；免疫抑制因素；豬

豬瘟的免疫效果與其免疫抗體水平密切相關，當豬瘟受免豬的抗體滴度在1∶32～1∶64時攻毒可獲得100%保護，當抗體水平降至1∶8以下時則完全不能保護[1]。然而當受免豬遭受豬圓環(huán)病毒(PCV2)和豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒(PRRSV)感染時，則可抑制其免疫抗體的產生。

有關豬PCV2和PRRSV對豬瘟疫苗的免疫抑制作用，曾有專家學者研究指出，經PRRSV感染的SPF豬對豬瘟弱毒疫苗的免疫效果不佳，豬瘟抗體水平明顯低于對照豬[2]，且兩毒均能干擾豬瘟疫苗的免疫效果，導致豬群豬瘟抗體水平下降或嚴重不足[3]。

筆者為探討有效提高豬瘟疫苗免疫質量的途徑，特進行PCV2和PRRSV對豬瘟疫苗的免疫抑制作用和預防控制試驗，現將試驗結果簡要介紹如下，供參考。

1材料與方法

1.1試驗動物試驗在縉云縣某規(guī)模豬場進行，選擇無PCV2和PRRSV疫苗免疫史的20日齡仔豬80頭。遠離該試驗場，經PRRSV抗體、抗原檢測為雙陰性試驗豬10頭(供對照試驗用)。

1.2供試疫苗豬瘟脾淋苗(杭州某生物藥廠生產)，口蹄疫合成肽疫苗(上海某生物醫(yī)藥有限公司生產)，PCV2滅活疫苗(哈爾濱維科生物技術開發(fā)公司生產)，PRRSV滅活疫苗(NVDC-JXA1株，杭州某生物藥廠生產)。

1.3檢測試劑盒PCV2型抗體酶聯(lián)免疫檢測試劑盒(北京某動物防疫技術有限公司生產)，LSI PRRSV抗體檢測試劑盒(法國產品)，PRRSV通用RT-PCR檢測試劑盒(北京某動物防疫技術有限公司生產)。

1.4免疫球蛋白PCV2-PRRSV-IgG(由實驗室自備)，球蛋白含量113 mg/mL。PCV2-IgG效價1∶1280，PRRSV-IgG效價1∶1600。

1.5試驗設計

1.5.1PCV2和PRRSV對豬瘟免疫的抑制試驗試驗設Ⅰ、Ⅱ、 Ⅲ、Ⅳ組，每組供試仔豬10頭。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組為超免組；Ⅳ組為健康對照組(遠離試驗場，經豬普藍PCR和豬藍耳抗體檢測雙陰豬)。仔豬于25日齡、30日齡分別采集自身及相應母豬靜脈血檢測母源抗體(選擇較適免疫時間)。第Ⅲ組為豬零日齡2頭份豬瘟脾淋苗超免；第Ⅰ、第Ⅱ、第Ⅳ組豬30日齡首免，同時分點肌注豬瘟脾淋苗2 mL/頭，O型口蹄疫合成肽苗2 mL/頭。各組以首免相同劑量于44日齡二免，72日齡時以豬瘟4倍劑量三免，首免后7 d，14 d，28 d，二免后28 d，三免后14 d，28 d采血分離血清，用正向間接血凝法檢測豬瘟抗體效價，以5log2為合格。

1.5.2PCV2和PRRSV滅活苗提升(兩毒受感豬)豬瘟免疫的效果試驗試驗設4組，每組仔豬10頭，免疫程序：第1、2、3組仔豬均于21日齡首免，每頭肌注1 mL，首免3周后二免。第1組：30日齡首免豬瘟脾淋苗肌注2 mL，58日齡二免肌注2 mL；35日齡首免高致病性藍耳病滅活苗2 mL，58日齡二免2 mL。第2組：30日齡分點肌注高致病性藍耳病滅活苗、豬瘟脾淋苗和O型口蹄疫合成肽苗各2 mL，58日齡二免各2 mL。第3組：30日齡首免豬瘟脾淋苗、O型口蹄疫合成肽苗各2 mL， 58日齡二免各2 mL。第4組：30日齡首免高致病性豬藍耳病滅活苗、豬瘟脾淋苗各2 mL，58日齡二免各2 mL。各組于二免2-3周后采血分離血清，采用正向間接血凝法檢測豬瘟抗體水平。

1.5.3免疫球蛋白PCV2-PRRSV-IgG的抗毒效果試驗以兩毒受感豬的豬瘟免疫抗體反應為指示系統(tǒng)，設試驗組和對照組，每組供試仔豬10頭。免疫程序：30日齡首免球蛋白2 mL/頭，35日齡首免豬瘟脾淋苗1 mL/頭，40日齡二免免疫球蛋白2 mL/頭，56日齡二免豬瘟脾淋苗1 mL/頭；對照組除不用免疫球蛋白外，豬瘟免疫方法與試驗組相同。各組于二免2-3周后采血分離血清，采用正向間接血凝法檢測豬瘟免疫抗體水平。

2結果與分析

2.1PCV2和PRRSV對豬瘟防疫的免疫抑制作用詳見表1、圖1。

表1　PCV2和PRRSV對豬瘟免疫的效果檢測

注：表中效價為每組的10個樣本平均數。第Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ試驗組對應母豬的母源抗體分別為11，7， 10，因母豬是以8倍量豬瘟疫苗進行免疫，故母源抗體較高。

圖1　PCV2和PRRSV對豬瘟免疫的抑制作用

由表1、圖1可見，首免時第Ⅱ組的母源抗體效價為1∶16，是較適首免時間。但經二免2周后檢測，其效價卻低于其他各組，當發(fā)現Ⅰ、Ⅱ、 Ⅲ三組二免2周后效價下降時，采用加大疫苗劑量(4倍量)進行第3次免疫時，Ⅱ組抗體效價仍繼續(xù)下降，而同期應用疫苗、劑量和免疫程序相同的Ⅳ組(對照組)則得到了滿意的免疫效果。試驗中低下的抗體狀況與母源抗體、首免時間、疫苗質量、應用劑量、疫苗組合、免疫次數、免疫方法無關，似由PCV2、PRRSV的免疫抑制因素存在。

2.2PCV2和PRRSV滅活疫苗提升(兩毒受感豬)豬瘟免疫的效果試驗詳見表2。

表2　豬瘟免疫抗體變化對比

由表2可見，第1組豬瘟抗體效價最高(9.3log2),第2組次之(9log2),第3組最低(2.9log2)，組間差異顯著(P<0.05)。

2.3免疫球蛋白PCV2-PRRSV-IgG抗毒效果試驗詳見表3。

表3　免疫球蛋白PCV2-PRRSV-IgG抗毒效果

由表3可見，免疫球蛋白PCV2-PRRSV-IgG抗毒效果顯著，試驗組豬瘟抗體合格率達100%，對照組則為0。

3小結與討論

3.1PCV2和PRRSV是影響豬瘟免疫效果的最重要免疫抑制因素，由此持續(xù)感染引起的免疫抑制值得高度重視[4]，筆者認為102日齡內兩毒感染豬，如以常規(guī)用量的豬瘟弱毒苗進行免疫，其抗體合格率仍可能為0。

3.2增加免疫次數，加大免疫劑量，然而免疫抗體水平依然低下的免疫耐受現象[5]，是當地豬群自然感染PCV2和PRRSV后的主要病理特征，以免疫抑制為主征的隱性感染雖較難發(fā)現，但其感染率之高，卻大有超過有關資料介紹的自然感染率達75%之勢[6-7]。

3.3試驗表明，PCV2和PRRSV自然感染豬的豬瘟抗體水平與豬藍耳病滅活苗免疫與否呈正相關，應用者免疫效果良好，反之則效果不佳。由此可推斷，豬藍耳病滅活疫苗和免疫球蛋白PCV2,PRRSV-IgG可為凈化被PRRSV污染的環(huán)境發(fā)揮重要作用。

參考文獻

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[2]楊漢春，豬免疫抑制性疾病的流行特點與控制對策[J]中國畜牧獸醫(yī)，2004，31(5)：42.

[3]趙坤，李培慶，李敬璽等，豬免疫抑制綜合癥的發(fā)生與防制 [J]．安徽農業(yè)科學，2005，33(11)：2074-2075.

[4]曲祖乙，李冰主編.豬瘟[M]．豬病防治技術，北京：中國農業(yè)出版社，2010，31.

[5]劉健，潘鴻昌，么忠生 導致豬免疫抑制的因素及其防制對策[J]中國豬業(yè)進展，2008，188.

[6]文萍萍，陳代平，李金海等，豬瘟脾淋苗、O型口蹄疫和豬藍耳病滅活苗兩兩聯(lián)合應用的免疫效果觀察[J]．四川畜牧獸醫(yī)，2010，37(1)：24.

[7]楊治齊，不同免疫劑量與次數對豬瘟抗體水平影響[J]畜牧獸醫(yī)雜志，2011，30(1).

農業(yè)部啟動全國獸藥(抗菌藥)綜合治理五年行動

最近，為進一步規(guī)范獸用抗菌藥生產、經營和使用，全面提升獸用抗菌藥濫用及非法獸藥管控能力，促進養(yǎng)殖業(yè)持續(xù)健康發(fā)展，努力確保不發(fā)生重大動物產品質量安全事件。農業(yè)部印發(fā)《全國獸藥(抗菌藥)綜合治理五年行動方案(2015-2019年)》，將利用五年時間開展系統(tǒng)全面的綜合治理行動，嚴厲打擊違法違規(guī)行為。

治理行動以突出問題整治為核心，以落實主體責任為重點，以轉變養(yǎng)殖方式為根本，以群眾滿意為目標，實施系統(tǒng)、全面的綜合治理。

一是明確工作目標，通過五年的綜合治理，主體責任進一步落實，生產經營使用行為進一步規(guī)范，政府監(jiān)管水平進一步提升，畜禽標準化養(yǎng)殖率、水產健康養(yǎng)殖率明顯提高，生產方式加快轉變。假劣獸藥生產經營行為得到有效遏制，獸用抗菌藥質量合格率達到97%以上、動物產品(含水產品)獸藥殘留監(jiān)測合格率保持在97%以上、違法違規(guī)行為線索處理率達100%、行政處罰案件信息公開率達100%。

二是明確治理重點，以風險隱患高、事故易發(fā)多發(fā)、問題突出的4類區(qū)域、7類產品和7類對象為重點，集中力量治理違法違規(guī)行為，形成高壓嚴打態(tài)勢。

三是明確治理任務，提出集中清繳、加強獸用抗菌藥生產經營使用監(jiān)管、加大非法獸藥辦案力度、推進標準化和健康養(yǎng)殖、強化長效機制建設等9大任務。

四是明確保障措施，要求各地農業(yè)(畜牧獸醫(yī)、漁業(yè))部門加強領導、落實責任、強化配合、廣泛宣傳，為綜合治理提供有力保障。

《浙牧》摘

中圖分類號：S858.28

文獻標識碼：A

文章編號：1005-7307(2016)01-0008-003

作者簡介：王耀邦(1958-)，男，高級獸醫(yī)師，主要從事獸醫(yī)防疫檢測工作，E-mail:Jywyb01@163.com

收稿日期：2015-07-08