趙爾軍，金　剛（.甘肅省肅北縣畜牧獸醫(yī)局，甘肅 肅北 736300；.甘肅省肅北縣鹽池灣鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站，甘肅 肅北 736300）

黃牛精液冷凍技術(shù)探討

趙爾軍1，金剛2
（1.甘肅省肅北縣畜牧獸醫(yī)局，甘肅 肅北 736300；2.甘肅省肅北縣鹽池灣鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站，甘肅 肅北 736300）

甘肅省黃牛地方品種優(yōu)良，黃牛養(yǎng)殖業(yè)已經(jīng)成為農(nóng)業(yè)經(jīng)濟的主要來源。為了促進養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展，人工授精技術(shù)已經(jīng)普遍推廣，尤其是冷凍精液的保存技術(shù)的成功研制及推廣，對養(yǎng)牛業(yè)有非常重要的意義。本文詳細闡述了牛精液的冷凍技術(shù)，和同行們共同探討，共同提高。

冷凍精液；意義；原理；保護劑；冷凍技術(shù)

甘肅省黃牛地方品種優(yōu)良，發(fā)展前景看好，養(yǎng)牛業(yè)發(fā)展迅速。為了促進黃牛養(yǎng)殖的發(fā)展，黃牛的人工授精技術(shù)早在20世紀70年代左右逐漸普及推廣，尤其是精液冷凍技術(shù)的成功研制，使得精液能夠長期保存，對促進甘肅省養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展起了很大的作用。

1　黃牛冷凍精液的意義

用黃牛冷凍精液進行品種改良，可以最大限度的發(fā)揮種公牛的種用價值，冷凍精液可以長期保存，這樣1頭良種公牛的精液就可以用于1萬頭以上的母牛配種；縮短品種改良的時間；冷凍精液不受時間、地域的限制，可以大范圍的利用良種種公牛，同時種公牛的飼養(yǎng)數(shù)量可以減少，飼養(yǎng)成本降低了。

2　精液冷凍保存的原理

精液的冷凍就是就是將精液經(jīng)過特殊處理，能夠達到長期保存的目的。生產(chǎn)中常用液氮（-196℃）、干冰（-79℃）為冷源，在超低溫下保存經(jīng)過處理的精液，此時精子的生理代謝活動受到抑制，升溫后精子的活力又可以恢復，這樣就達到了長期保存利用的目的。

3　精液冷凍保護劑

生產(chǎn)中最常用的冷凍精液保護劑就是甘油，甘油可以保護精子，提高精子的存活力和活動力，但是也會對精子有一定的損傷，新型的保護劑的開發(fā)一直是研究的重要課題。冷凍稀釋液是精子的載體，要為精子提供代謝物質(zhì)，調(diào)節(jié)精子的受精能力，其成份對精子有很大的影響。例如，牛冷凍精液稀釋液中添加VB12可以顯著提高精子活力、頂體完整率和質(zhì)膜完整率；添加某些氨基酸如添加半胱氨酸和谷胱甘肽可以降低在冷凍過程對精子的DNA產(chǎn)生損害。

4　冷凍保存技術(shù)

4.1采精及精液品質(zhì)檢查精液的品質(zhì)直接關(guān)系著精液冷凍效果，做好采精的準備工作并規(guī)范采精操作技術(shù)，才可以獲得高質(zhì)量的精液。采集精液以后，要對精液的品質(zhì)進行鑒定，不合格的產(chǎn)品要廢棄。牛精液的精子活率要不低于0.7，并保存在30℃的水浴中。

4.2精液稀釋選擇合適的稀釋液，按照科學的稀釋方法，規(guī)范操作程序來對精液進行稀釋。稀釋以后取樣，在38～40℃的條件下進行鏡檢，稀釋后的精液活率要不低于原精液的活率。

4.3降溫和平衡降溫就是在精液稀釋以后，用12～16層的紗布包裹，放到0～5℃的冰箱內(nèi)經(jīng)過1～2h的時間將精液緩慢降溫的過程。平衡就是將降溫后的精液放在冰壺內(nèi)，放入0～5℃的冰箱內(nèi)平衡2～4h，以便精液的保護劑充分的進入精子的內(nèi)部，發(fā)揮保護精子的質(zhì)量的作用。在操作過程中要注意降溫、平衡過程中要避光操作，已經(jīng)降溫、平衡后的精液溫度不能在回升了。

4.4精液的分裝目前常用的分裝設(shè)備為細管精液分裝一體機，這是一套灌裝、封口、噴墨印字的一條龍式作業(yè)的一體化設(shè)備，這種設(shè)備的自動化程度高，可以確保精液不被外界污染。如果單獨使用細管分裝機操作，要在分裝前做好細管上的標記，如種公牛的詳細信息，自己要清楚，信息要準確、全面。

4.5冷凍（1）冷凍溫度冷凍溫度是影響牛精液品質(zhì)的關(guān)鍵因素，精液冷凍剛開始的溫度一般為－120～－140℃之間，盡量在8min內(nèi)達到和維持這個溫度區(qū)域后，繼續(xù)降溫倒入液氮。生產(chǎn)中由于冷凍精液的數(shù)量不同，有時溫度稍有回升，同時由于采精的季節(jié)、稀釋液的成分、甘油的濃度、冷凍劑型的不同，降溫的速度和時間也會稍有差異。

（2）冷凍方法目前我國對牛精液的冷凍方法根據(jù)設(shè)備的不同可以分為兩種：精液自動冷凍儀法和簡易細管精液冷凍箱法。精液自動冷凍儀法是一種科技含量比較高的方法，冷凍儀是由計算機控制的全自動冷凍容器，人工做好各種準備工作，設(shè)定好參數(shù)，啟動程序，有計算機控制來完成精液的冷凍過程。簡易細管精液冷凍箱法是生產(chǎn)中常用的方法，投資少，操作簡單。首先要有一個隔熱性能較好的、深度在50cm以上的冷凍箱，使用前先加入液氮制冷，根據(jù)冷凍細管精液量的多少確定液氮的使用量。然后把冷凍細管精液放在冷凍架上，迅速放入冷凍箱中進行冷凍，整個的冷凍過程一般為8min以內(nèi)。

4.6牛冷凍精液保存牛的冷凍精液保存在液氮罐中，液氮罐要放在干燥、通風的室內(nèi)，底部要墊上木板或者毛氈，以防潮濕。儲存精液后，要熟知罐的空重和液氮的多少，及時測量，及時補充，盡量減少開罐的次數(shù)，開罐后及時蓋好。取放精液的時候，速度要快，不要把盛凍精的提桶提到罐口之外，只能到頸基部，開罐時間控制在5s以內(nèi)為好。

10.3969/J.ISSN.1671-6027.2016.08.056