文│由佳 孔凡虎 許海軍（山東省煙臺(tái)市畜牧獸醫(yī)工作站）

劉文東（山東省煙臺(tái)民生家禽養(yǎng)殖專(zhuān)業(yè)合作社）

中草藥制劑對(duì)肉仔雞免疫效果的影響

文│由佳 孔凡虎 許海軍（山東省煙臺(tái)市畜牧獸醫(yī)工作站）

劉文東（山東省煙臺(tái)民生家禽養(yǎng)殖專(zhuān)業(yè)合作社）

隨著肉雞業(yè)迅猛發(fā)展，養(yǎng)殖規(guī)模和數(shù)量不斷增加，養(yǎng)殖場(chǎng)在傳統(tǒng)飼養(yǎng)模式下，如大劑量使用或?yàn)E用抗生素等化學(xué)藥品，會(huì)造成病原菌耐藥性增加、飼養(yǎng)環(huán)境惡化、雞病增多、雞產(chǎn)品藥殘超標(biāo)等問(wèn)題日益突出，給肉雞業(yè)帶來(lái)很大隱患，也嚴(yán)重影響食品質(zhì)量安全和人類(lèi)身體健康。

中草藥資豐價(jià)廉，耐藥性低，殘留少，毒副作用小，而且中草藥源于天然，飽含多種有效成分，將其作用于機(jī)體可產(chǎn)生多元組合效應(yīng)，在動(dòng)物疾病防治中的地位逐漸升高，成為一種綠色環(huán)保的免疫增強(qiáng)劑。由黃芪、丹參、虎杖組成的中草藥復(fù)方制劑，可提升機(jī)體非特異性免疫力，提高肉仔雞免疫抗體保護(hù)水平，促進(jìn)免疫器官發(fā)育及功能的協(xié)調(diào)和穩(wěn)定，增強(qiáng)雞群抗病能力。

本試驗(yàn)主要是將中草藥復(fù)方制劑以不同劑量添加入飼料中，通過(guò)對(duì)不同日齡雞新城疫抗體效價(jià)、法氏囊和脾臟指數(shù)的測(cè)定，研究中草藥復(fù)方制劑對(duì)肉仔雞免疫抗體水平及免疫器官的影響，掌握該中草藥復(fù)方制劑最佳添加量，為中草藥在肉雞養(yǎng)殖和疫病防控應(yīng)用方面提供一定的理論依據(jù)。

一、材料和方法

1.材料。

（1）試驗(yàn)場(chǎng)地及動(dòng)物。選擇山東煙臺(tái)萊陽(yáng)市商品肉雞規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)作為試驗(yàn)場(chǎng)地；健康A(chǔ)A肉仔雞（公母混合飼養(yǎng)）2000只，由民生合作社肉種雞場(chǎng)提供。

（2）中草藥復(fù)方制劑。中草藥復(fù)方制劑組方成分為黃芪400克、丹參300克、虎杖300克，草藥均選購(gòu)于煙臺(tái)市中藥材公司經(jīng)銷(xiāo)部。將以上三種草藥，置65℃烘箱中烘干，粉碎為細(xì)末，過(guò)200目篩，按配方混合均勻，分裝后存放于通風(fēng)干燥處備用。

（3）供試材料。新城疫（ND）血凝抗原：購(gòu)自哈爾濱獸醫(yī)研究所（批號(hào)為：20150420）。0.5%雞紅細(xì)胞：自配，采集3只無(wú)禽流感和新城疫抗體健康非免疫公雞血液，針管吸取3.8%的檸檬酸鈉溶液少許。以pH7.2～7.4、濃度0.01摩爾/升的PBS液混勻，1800轉(zhuǎn)/分鐘離心5～10分鐘，去掉血漿和白細(xì)胞層，重復(fù)以上過(guò)程，反復(fù)洗滌離心3次，配成0.5%的紅細(xì)胞懸液，于4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

2.方法。

（1）試驗(yàn)設(shè)計(jì)。本試驗(yàn)采用單因子隨機(jī)分組設(shè)計(jì)，選取健康A(chǔ)A肉仔雞2000只，公母混合飼養(yǎng)，隨機(jī)分為4組，每組500只，1組為對(duì)照組，2、3、4組為試驗(yàn)組，各組中草藥復(fù)方制劑添加量分別為0、0.05%、0.1%、0.15%。重復(fù)試驗(yàn)在另外一規(guī)模場(chǎng)選取2000只肉仔雞，采取以上相同方法進(jìn)行研究。

表1 疫苗免疫程序

（2）飼養(yǎng)管理和中草藥復(fù)方制劑使用方法。各組均飼喂相同的優(yōu)質(zhì)全價(jià)飼料（不添加任何藥物），采取嚴(yán)格的環(huán)境控制、消毒防疫、飼養(yǎng)管理等標(biāo)準(zhǔn)化管理模式進(jìn)行飼養(yǎng)。中草藥復(fù)方制劑為1～42日齡全程添加于飼料中。使用的疫苗均為哈藥集團(tuán)生物疫苗有限公司的合格疫苗，免疫程序見(jiàn)表1。

（3）檢測(cè)項(xiàng)目及方法。新城疫（ND）抗體效價(jià)測(cè)定：采用血凝——血凝抑制試驗(yàn)（HA-HI test）檢測(cè)，分別在1、14、28、42日齡隨機(jī)抽取血清樣品4次（1日齡雛雞為出殼時(shí)心臟采血，其他日齡均采用翅靜脈采血），樣品份數(shù)為每次每組抽取飼養(yǎng)組數(shù)量的5%，即取25份血樣。檢測(cè)依據(jù)ND抗體檢測(cè)操作和判定法按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《新城疫診斷技術(shù)》（GB/ T16550-2008），試驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件進(jìn)行分析處理。

法氏囊和脾臟指數(shù)測(cè)定：分別在試驗(yàn)雞28、42日齡，每次每組隨機(jī)抽取20只雞頸靜脈放血致死，摘取脾臟、法氏囊，剔除脂肪后稱(chēng)重，利用免疫器官指數(shù)計(jì)算公式計(jì)算每組不同日齡的法氏囊和脾臟指數(shù)。免疫器官指數(shù)=免疫器官重（毫克）/體重（克）。

表2 不同日齡雞ND抗體效價(jià)

表3 不同日齡雞法氏囊和脾臟指數(shù)

二、結(jié)果

對(duì)各組雞不同日齡新城疫抗體效價(jià)、法氏囊和脾臟指數(shù)進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2、表3。

從表2得出，雞群1日齡各組母源抗體水平較高，滴度在6.33～7.30范圍內(nèi)；14日齡，試驗(yàn)2、3、4組抗體水平分別比對(duì)照組高1.07、1.2、 1.06個(gè)滴度，差異顯著（P＜0.05），試驗(yàn)組間差異不顯著（P＞0.05），以試驗(yàn)3組保護(hù)效果最好；在28日齡各組抗體水平都達(dá)到峰值，試驗(yàn)2、3、4組平均抗體水平分別達(dá)到6.1、6.15和6.35個(gè)滴度，比對(duì)照組分別高出1.1、1.5、1.35個(gè)滴度，差異顯著（P＜0.05），試驗(yàn)組間差異不顯著（P＞0.05），以試驗(yàn)3組保護(hù)效果最好。28日齡開(kāi)始各組抗體水平逐漸下降，但到42日齡抗體水平均在4以上的有效保護(hù)范圍內(nèi)，其中試驗(yàn)2、3、4組在28日齡后分別下降了0.57、0.39、0.43個(gè)滴度，比對(duì)照組下降幅度分別減少0.41、0.59、0.43個(gè)滴度，以試驗(yàn)3組保護(hù)效果最好。重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果基本相似。

由表3得出，肉仔雞在28日齡，試驗(yàn)3、4組的法氏囊指數(shù)分別為2.1、2.16，比對(duì)照組分別高0.66、0.72，差異顯著（P＜0.05）；脾臟指數(shù)分別為1.55、1.54，比對(duì)照組分別高0.85、0.84，差異顯著（P＜0.05），以試驗(yàn)3組最高。42日齡試驗(yàn)2、3、4組的脾臟、法氏囊指數(shù)都高于對(duì)照組，但差異不顯著（P＞0.05）。重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果基本相似。

三、討論

1.中草藥復(fù)方制劑對(duì)肉仔雞抗體水平的影響。目前已發(fā)現(xiàn)許多中草藥的藥效成分如黃芪、黨參、板藍(lán)根、甘草等具有誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞分化、促進(jìn)抗體產(chǎn)生、預(yù)防某些病毒感染及抵抗免疫抑制因子等免疫學(xué)活性。劉明生等研制的復(fù)方黃芪中藥，能夠明顯提高雛雞的新城疫HI抗體水平，改善雛雞的免疫機(jī)能。楊斌等研究的兩種復(fù)方中藥制劑，能夠有效延長(zhǎng)新城疫免疫抗體消長(zhǎng)水平。于金玲等研究的中草藥復(fù)方制劑——熱毒效，對(duì)新城疫抗體水平影響顯著，可明顯提高抗體滴度，提高機(jī)體的特異性免疫能力。從表2中可以看出，肉仔雞在28日齡抗體水平達(dá)到峰值，試驗(yàn)2、3、4組抗體水平比對(duì)照組分別高1.1、1.5、1.35個(gè)滴度；14、42日齡，試驗(yàn)2、3、4組抗體水平也均比對(duì)照組高，存在顯著差異（P＜0.05），試驗(yàn)組間差異不顯著（P＞0.05）。這與以上多項(xiàng)研究結(jié)果基本一致。

2.中草藥復(fù)方制劑對(duì)肉仔雞免疫器官指數(shù)的影響。免疫器官的臟體系數(shù)是衡量機(jī)體免疫功能的重要指標(biāo)。法氏囊是禽類(lèi)特有的體液免疫中樞器官，它能將淋巴干細(xì)胞誘導(dǎo)成為具有免疫活性的細(xì)胞，是B細(xì)胞分化發(fā)育后到達(dá)外周免疫器官的輸送場(chǎng)所。脾臟作為體內(nèi)最大的外周免疫器官，是產(chǎn)生致敏淋巴細(xì)胞和抗體的場(chǎng)所之一，對(duì)于機(jī)體防御和清除功能起著重要作用。有研究表明中草藥飼料添加劑均可顯著提高脾臟和法氏囊指數(shù)。從表3中可以看出，肉仔雞在28日齡，試驗(yàn)2、3、4組的脾臟、法氏囊指數(shù)都高于對(duì)照組，存在顯著差異（P＜0.05），各試驗(yàn)組間差異不顯著（P＞0.05）；42日齡，試驗(yàn)2、3、4組的脾臟、法氏囊指數(shù)都高于對(duì)照組，但各組間差異不顯著（P＞0.05）。這與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道基本一致。

四、結(jié)論

試驗(yàn)表明，在飼料中以0.1%的量長(zhǎng)期添加黃芪400克、丹參300克、虎杖300克制成的中草藥復(fù)方制劑，可明顯提高抗體滴度，提升新城疫抗體水平，還能夠促進(jìn)免疫器官良好生長(zhǎng)發(fā)育及功能協(xié)調(diào)和穩(wěn)定，延緩免疫器官萎縮，增強(qiáng)雞群抗病能力，降低死淘率，從而提高經(jīng)濟(jì)收益。