郭海林 綜述， 撒應龍 審校

(上海交通大學附屬第六人民醫(yī)院泌尿外科,上海　200233)

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·綜述·

組織工程尿道重建從基礎到臨床應用的反思

郭海林 綜述， 撒應龍 審校

(上海交通大學附屬第六人民醫(yī)院泌尿外科,上海200233)

摘要：外傷、經(jīng)尿道手術及尿道下裂等因素導致的尿道狹窄的治療一直是困擾泌尿外科的難題，特別是復雜性和長段尿道狹窄的治療更是棘手。組織工程技術在尿道狹窄修復重建治療中顯示了良好的應用前景，其主要內(nèi)容包括種子細胞、支架材料及兩者的有機結合。本文將從基礎和臨床兩個層面對組織工程在尿道狹窄修復重建中的應用做一綜述，并尋求出其存在的問題及發(fā)展方向。

關鍵詞：尿道狹窄；組織工程；種子細胞；支架材料；尿道重建

尿道損傷、炎癥、腫瘤、手術及先天性畸形等因素導致的尿道狹窄嚴重影響患者的生活質量[1-2]，其治療一直是泌尿外科最棘手的難題之一。既往以多種自體組織如口腔黏膜、陰莖陰囊皮瓣、會陰皮膚或腸自體移植物為重建材料的替代療法在尿道狹窄修復重建治療中顯示了良好的應用前景[3-7]，但是移植物替代以后所帶來的并發(fā)癥如移植物攣縮、狹窄、結石形成、毛發(fā)生長、憩室產(chǎn)生、腹腔臟器干擾等問題卻一直無法得到解決。這種“以犧牲正常組織為代價，以手術創(chuàng)傷修復組織缺損”的治療模式在臨床應用中受到嚴峻挑戰(zhàn)[8]。組織工程技術的興起和迅猛發(fā)展為尿道病變的修復開辟了新的治療途徑，并已逐漸成為目前最有前景的生理性修復技術。

組織工程學技術是根據(jù)細胞生物學、生物材料及生物工程學的基本原理，探尋用于改善或修復病損組織器官結構、功能的生物活性替代物的一門科學[9]，主要內(nèi)容包括種子細胞、支架材料及兩者的有機組合。本文將從基礎和臨床兩個層面對組織工程中的種子細胞、生物支架材料及兩者的有機結合在尿道狹窄修復重建中的應用進展及所遇到的問題做一綜述。

1種子細胞

組織工程尿道中常用的種子細胞大多取自自身組織，并在體外擴增培養(yǎng)后復合于支架材料上，與支架材料一起植入尿道缺損部位修復尿道缺損。根據(jù)細胞分化類型可分為已分化細胞和干細胞兩種。

1.1已分化的上皮組織種子細胞這些可作為上皮組織種子細胞的已分化成熟體細胞存在于特定的組織器官內(nèi)，免去了誘導分化的難題，可以作為種子細胞比較直接地用于尿道狹窄修復重建中，但其亦具有有限的自我更新潛能，且只可分化為一種特定的細胞類型等問題，且這類細胞只有在組織更新、老化和受到損傷時才可重新進行細胞分化并形成特定組織[10]。

1.1.1自身尿路上皮細胞通過活檢獲得尿路上皮細胞(如包皮細胞、尿道上皮細胞、膀胱移行上皮細胞等)是組織工程尿道中獲取種子細胞的傳統(tǒng)方法，但該方法亦存較多缺陷，如取材不便，操作或手術對泌尿道產(chǎn)生損傷較大等。針對上述問題，UDO NAGELE[11]和FOSSUM[12]分別探索了從尿液中和膀胱灌洗液中分離培養(yǎng)獲得自身尿路上皮細胞的具有較少侵入性操作的方法。但其方法亦存在取得細胞較困難、培養(yǎng)較繁瑣等缺點。近年來，包皮細胞由于來源豐富，取材相對容易，體外易于培養(yǎng)擴增，有利于其在臨床的運用[13]。FU等[14]將培養(yǎng)的包皮細胞與膀胱黏膜下脫細胞基質復合以后用于兔尿道缺損的構建，術后顯示尿道管腔通暢，未見明顯狹窄，組織學亦顯示分界的細胞層次，表明包皮細胞作為構建組織工程化尿道種子細胞的可行性，但對于做過包皮環(huán)切手術及陰莖手術的人此種方法亦存在組織材料的有限性等問題。

1.1.2自身口腔黏膜上皮細胞口腔黏膜細胞(包括頰黏膜和舌黏膜)因具有韌性大、抗感染力強，取材方便，創(chuàng)傷小等特點，而被作為種子細胞廣泛地用于組織工程尿道重建中[15]。且和表皮細胞相比,其與尿道黏膜細胞同屬黏膜組織來源,可最大程度模擬尿道黏膜的特點。我們既往實驗研究證實口腔黏膜上皮在尿液環(huán)境中有向尿路上皮轉化的潛能[16]，且我們將體外培養(yǎng)獲得的口腔黏膜細胞接種于BAMG上后發(fā)現(xiàn)其與BAMG顯示了良好的生物相容性，其很快在BAMG上黏附、生長，并伸出偽足，連接成片形成復層結構，為我們進一步將此復合材料用于構建組織工程尿道奠定了堅實基礎[17]。且LI[17]及BHARGAVA[15]均證實將口腔黏膜細胞作為尿道狹窄修復重建的種子細胞用于尿道狹窄修復重建中可取得較為理想的效果，是組織工程尿道重建較為理想的種子細胞。

1.2干細胞成熟體細胞取材不便，對取材部位造成創(chuàng)傷較大，且體外培養(yǎng)易老化，難以達到組織工程尿道重建中所需的種子細胞數(shù)量。干細胞在組織工程中的引入，為上述問題的解決提供了可能。干細胞是一類未分化細胞，具有自我更新、高效增殖及分化的潛能，可分化為成熟的不可再生細胞及可再生細胞[18]。當尿路上皮細胞有病變?nèi)绺稍镩]塞性龜頭炎(lichen sclerosis, LS)而不適宜用于或口腔黏膜細胞不足以提供組織工程化尿道所需的種子細胞時，干細胞可作為組織工程化尿道的種子細胞用于尿道狹窄的修復重建。雖然胚胎干細胞可作為尿道上皮細胞的來源，但其中涉及到的傳統(tǒng)倫理觀念、惡性增殖潛能及有效調控等問題限制了其進一步的研究應用。而成人干細胞如骨髓間充質干細胞(bone mesenchymal stem cells, BMSCs)、脂肪干細胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)及尿源性干細胞等由于可避免上述問題，使其近年來得到了廣泛關注[19,20]。雖然BMSCs能夠在體內(nèi)適合環(huán)境下向平滑肌細胞和尿路上皮細胞分化，但其獲取方式創(chuàng)傷性較大，細胞產(chǎn)量低，體外培養(yǎng)擴增時間長等問題限制了它的應用。ADSCs具有自我更新及定向分化潛能，可分化為多種細胞系，分化可調節(jié)、可重復進行，且材源豐富，取材創(chuàng)傷小，為組織工程尿道重建研究的種子細胞選擇提供了一種新的思路及可能。2009年，LIU等[21]將ADSCs與上皮細胞共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)兩種細胞的直接接觸能誘導ADSCs向尿路上皮細胞方向分化。證明了在離體模擬上皮系細胞生長微環(huán)境條件下，脂肪干細胞具有向上皮細胞方向分化的潛能。LI等[22]將向上皮細胞方向分化的ADSCs與膀胱脫細胞基質復合后，用于兔尿道缺損模型的替代重建，術后顯示ADSCs在體內(nèi)環(huán)境下能促進尿道修復部位的上皮組織再生，可抑制局部組織攣縮纖維化，證實了脂肪干細胞亦能夠作為組織工程化尿道材料的種子細胞。

2 支架材料

組織工程支架材料不僅能為種子細胞生長起到定位及定向的作用[23]，還可為新的再生組織提供機械支撐使器官按照預定的結構生長，并且最近還可通過加載生物活性標記物調節(jié)細胞功能來引導組織工程器官的重建。理想的支架材料應具有：①細胞相容性良好：可復合上皮細胞和平滑肌細胞；②可降解性及降解速率可控性：本身及其降解產(chǎn)物在體內(nèi)可吸收，不引起炎癥反應和毒性反應；③生物力學性能良好：能提供足夠的機械支撐促進周圍組織的長入。目前應用于組織工程尿道重建的支架材料主要有三種：

2.1天然細胞外基質天然提取物如絲素蛋白、角蛋白等作為天然的生物材料，其細胞相容性良好，有利于種子細胞粘附、增殖和分化，具有無毒性，且可被活性酶識別、標記、降解，降解產(chǎn)物可被機體吸收等優(yōu)點,而其本身的生物力學性能較差而難于塑形，各批次產(chǎn)品生化性質亦存在差異，在體內(nèi)降解過快而不利于周圍組織的長入。在前期的研究中，絲素蛋白和人發(fā)角蛋白均顯示出較為優(yōu)秀的組織相容性、生物降解率以及細胞粘附性，將兩者進行有效的混合后，其所制備的最終材料的生物力學性能明顯優(yōu)于單一的蛋白提煉所制備的支架，同時原有各獨立蛋白支架中優(yōu)良的生物相容性被很好的保留[24-25]。但這種膜樣材料在成品后往往具有一定厚度，并且缺乏適宜的孔徑和孔隙率，限制了氧氣和營養(yǎng)物質的彌散，可導致接種其上的種子細胞的生長狀態(tài)受到一定影響。

2.2脫細胞基質細胞外基質衍生材料包括膀胱黏膜下脫細胞基質(bladder acellular matrix graft, BAMG)、尿道細胞外基質(urethral extracellular matrix, UECM)、小腸黏膜下基質(small intestinal submucosa, SIS)等，這類材料不僅具有最接近細胞外基質的網(wǎng)架結構、生物力學性能，而且含有一些內(nèi)在生長因子，例如成纖維細胞生長因子，血管內(nèi)皮生長因子，轉化生長因子β1和上皮生長因子，這些生長因子有利于細胞粘附生長和分化[26]。然而，這些材料的主要缺點是各批次材料之間蛋白含量不一，在它們的實用性方面亦存在倫理方面的問題，由于它們大多取自豬，無法避免疾病傳播的可能性。

2.3合成聚合支架材料人工合成聚合材料主要包括：聚羥基乙酸(poly glycolic acid, PGA)、聚乳酸(poly lactic acid, PLA)及二者的共聚物(poly lactic acid-co-glycolic acid, PLGA)等，主要由生物大分子共價聚合而成。由于是人工合成材料，可避免組織獲取培養(yǎng)的難題。這種材料的優(yōu)點是能夠成規(guī)模低成本批量生產(chǎn)，其微結構、機械性能、降解率等可人為操控，能制造任何器官的三維結構，且該類材料具有良好的孔隙率，可包被產(chǎn)氧材料，主要經(jīng)水解作用達到自身的緩釋降解，降解產(chǎn)物物質通過與水逐步接觸，可達到長效釋氧的目的[27]，能夠適合種子細胞在其表面和內(nèi)部粘附并三維生長。缺點主要是自身降解過程中可能產(chǎn)生相關酸性產(chǎn)物，從而對生物材料及種子細胞的周邊微環(huán)境產(chǎn)生一定影響[28]。

3 組織工程技術重建尿道

組織工程尿道技術包括單純應用支架材料重建尿道、種子細胞與支架材料復合以后用于重建尿道。

3.1單純應用支架材料重建尿道當有部分健康的尿道床存在時可應用單純的支架材料重建尿道，這樣就可避免種子細胞培養(yǎng)的難題，也可節(jié)省大量的勞動和開支，也可避免獲取種子細胞帶來的創(chuàng)傷。

劉春曉等[29]用絲素蛋白膜修復1.5 cm的兔尿道缺損獲得較好效果，2003年，NUININGA等[30]采用小腸黏膜下基質(small intestinal submucosa, SIS)以鑲嵌補片方式修復兔的尿道缺損(0.5～1.0 cm)獲得成功。DORIN[31]等應用BAMG進行兔子尿道狹窄修復重建(<0.5 cm)的研究亦取得較為理想的效果。YANG等[32]也利用UECM補片進行了兔尿道修復重建(1.0～1.5 cm)的實驗，實驗結果較理想，表明單純支架材料可用于修復短段尿道狹窄。而XIE[24]等同樣應用絲素蛋白修復狗的5.0 cm的尿道黏膜缺損，6個月后尿道造影結果顯示狗出現(xiàn)明顯的尿道狹窄，組織學切片顯示了明顯的炎癥反應，尿道上皮細胞未完全覆蓋支架材料，并出現(xiàn)嚴重的纖維化，提示了絲素蛋白支架材料不可在長段尿道狹窄的修復重建中獲得滿意的效果。

如上所述，盡管采用單純支架材料以補片的方式進行短段(<2.0 cm)尿道狹窄的修復已取得較好的效果，但如果尿道損傷較長(>2.0 cm)甚至閉鎖，單純的全管狀材料修復會隨著體內(nèi)移植時間的推移可發(fā)生修復段尿道的攣縮，其原因可能是由于尿道的缺損過長，宿主的滋養(yǎng)血管延伸到缺損中心區(qū)域較為困難，缺乏血供的上皮細胞爬行能力減弱，難以覆蓋整個創(chuàng)面，并且支架降解較早，宿主的自體細胞尚未完全覆蓋其上所致，而復合種子細胞的移植物使長段尿道重建成為一種更好的選擇[33]。

3.2種子細胞與支架材料復合以后用于重建尿道種子細胞復合支架技術被認為是管狀尿道替代修復的較好選擇，在大量的動物實驗中顯示了良好的應用效果。

FU等[14]和LI[17]等分別采用兔自體包皮表皮細胞及口腔黏膜細胞復合BAMG修復兔尿道缺損，獲得成功，表明包皮表皮細胞和口腔黏膜細胞作為種子細胞復合管狀脫細胞膠原基質可以成功地用于構建組織工程化尿道。 LI等[22]研究結果表明自體脂肪干細胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)復合膀胱黏膜下脫細胞基質(bladder acellular matrix graft, BAMG)用于修復兔尿道缺損獲得良好效果，證實了ADSCs復合支架材料也可用于組織工程尿道重建。2013年，ORABI等[34]在一項臨床前的實驗中應用膀胱黏膜細胞及平滑肌細胞復合BAMG成功地修復了大量動物模型超長段尿道黏膜缺損(6 cm)，1年后行尿道造影檢查結果示尿道管腔通暢，組織學亦顯示植入的細胞仍然存活，并且在構成尿道管腔黏膜方面仍然發(fā)揮著作用。證實了種子細胞復合支架技術在尿道修復重建中的強大作用及良好的應用效果。

應用種子細胞復合支架技術在超長段尿道狹窄(6 cm)修復重建中獲得成功,表明種子細胞復合支架技術較單純應用支架材料修復尿道具有更好的效果，其原因可能為種子細胞為支架材料提供了避免尿液下滲到組織的屏障，可防止尿液的腐蝕作用，從而阻止尿道纖維化和尿道狹窄的發(fā)生。種子細胞復合支架技術為組織工程技術在尿道狹窄修復重建臨床中的應用奠定了良好的基礎。

4 組織工程技術在臨床中的應用

雖然泌尿外科是第一批將組織工程技術引入臨床實踐的專業(yè)學科，但組織工程尿道的臨床應用仍很有限。目前，組織工程尿道臨床修復重建主要有兩種方法：一種是單純支架材料修復，另一種是細胞復合支架材料修復。

4.1單純支架材料修復徐月敏等[35]采用4層豬SIS補片修復治療前尿道狹窄(3.5～7.0 cm)患者18例，術后平均隨訪10個月，17例排尿均通暢，未出現(xiàn)再狹窄，僅1例尿道下裂患者術后5個月出現(xiàn)輕度尿道狹窄癥狀，行尿道擴張治療后療效滿意。結果表明小腸黏膜下層可作為組織工程尿道重建材料修復部分尿道狹窄患者。但我們?nèi)哉J為SIS畢竟處于臨床試驗階段，還有很多問題需要解決，如狹窄部位、手術方式、合適的尿道狹窄段長度與寬度、周圍海綿體纖維化情況以及重建后的長期耐受性等，臨床應用SIS應嚴格掌握適應征。EL-KLASSABY等[36]應用人BAMG修復尿道狹窄(1.5～16.0 cm)患者28例，術后平均隨訪37個月，4例患者在吻合口出現(xiàn)狹窄，1例患者發(fā)生尿瘺但1年后自行修復，其他23例患者膀胱鏡檢查發(fā)現(xiàn)新尿道形成，活檢標本組織學檢查發(fā)現(xiàn)典型的尿道上皮。雖然文獻報道中BAMG修復重建尿道的臨床療效較理想，但相關文獻數(shù)量仍十分有限，盡快開展BAMG尿道構建的多中心臨床對照研究，BAMG有望應用于尿道組織工程。

4.2細胞復合支架材料目前，種子細胞復合支架材料技術已被應用于三項人類實驗研究，1項研究用于修復成人干燥閉塞性龜頭炎(lichen sclerosis, LS)[15]患者，其余2項研究用于修復兒童后尿道狹窄和兒童尿道下裂[37-38]。在成人的研究中，自身的口腔黏膜細胞和成纖維細胞取自患者頰黏膜并種植于尿道板，1例患者需全部切除，另1例患者需局部切除，其余3例患者需要尿道擴張等操作才可維持管腔通暢，其較高的失敗率可能歸因于干燥閉塞性龜頭炎患者本身的病理學改變和修復材料的攣縮[15]。在后尿道成形術的研究中，經(jīng)活檢取得5個兒童的頰黏膜組織，分離培養(yǎng)上皮細胞和成纖維細胞，種植于管狀的PLGA支架后用于后尿道成形術，術后隨訪6年，效果良好，管腔通暢[37]。在兒童尿道下裂的研究中，從6個兒童的膀胱灌洗液中分離培養(yǎng)獲得自身尿路上皮細胞并種植于脫細胞基質上，二者的復合材料用于修復6例尿道下裂的兒童患者，結果顯示5例患者在尿道修復部位管腔通暢，1例發(fā)生狹窄，經(jīng)過尿道內(nèi)切開后管腔通暢[38]。然而，這種種子細胞復合支架技術在一些復雜性的病例中，如殘廢性尿道下裂、膀胱外翻及復雜性和長段尿道狹窄的修復中亦有其局限性，修復效果值得商榷。

5 結論

組織工程研究是一項不斷發(fā)展的用于器官和組織替代的技術，種子細胞復合支架材料被認為是最佳的用于自身尿道狹窄修復重建的替代物。雖然組織工程技術在生物支架材料的開發(fā)、理想的種子細胞的找尋以及在支架上接種細胞構建仿真尿道等方面取得了很大的進步，但其在臨床應用中的報道仍很有限。組織工程技術在臨床的大規(guī)模應用前尚有很長的路要走。

參考文獻：

[1] ORABI H, BOUHOUT S, MORISSETTE A, et al．Tissue engineering of urinary bladder and urethra:advances from bench to patients[J]．Scientific World J, 2013, 2013(2013):154564．

[2] JACKSON MJ, IVAZ SL.Quality and length of life, money and urethral stricture disease[J].Curr Opin Urol, 2015, 25(4):346-351.

[3] DING J, LI Q, LI S, et al.Ten years’ experience for hypospadias repair: combined buccal mucosa graft and local flap for urethral reconstruction[J].Urol Int, 2014, 93(4) :454-459.

[4] SRIVASTAVA A, DUTTA A, JAIN DK.Initial experience with lingual mucosal graft urethroplasty for anterior urethral strictures[J].Med J Armed Forces India, 2013, 69(1):16-20.

[5] KIM KR, SUH JG, PAICK JS, et al.Surgical outcome of urethroplasty using penile circular fasciocutaneous flap for anterior urethral stricture[J].World J Mens Health, 2014, 32(2):87-92.

[6] XU YM, FENG C, SA YL, et al.Outcome of 1-stage urethroplasty using oral mucosal grafts for the treatment of urethral strictures associated with genital lichen sclerosus[J].Urology, 2014, 83(1):232-236.

[7] XU YM, QIAO Y, SA YL, et al.Urethral reconstruction using colonic mucosa graft for complex strictures[J]．J Urol, 2009, 182(3):1040-1043．

[8] 呂向國，徐月敏．組織工程技術在尿道重建中的應用[J]．中國組織工程研究，2013，17(11) : 2067-2074．

[9] XU Y, FU W, WANG Z, et al.Atissue-specific scaffold for tissue engineering-based ureteral reconstruction[J].PLoS One, 2015, 10(3):e0120244．

[10] GARDIN C, FERRONI L, BRESSAN E, et al.Adult stem cells properties in terms of commitment, aging and biological safety of grit-blasted and Acid-etched ti dental implants surfaces[J].Int J Mol Cell Med, 2014, 3(4):225-236.

[11] UDO NAGELE, SABINE MAURER, GERARD FEIL, et al.In vitro investigations of tissue-engineered multilayered urothelium established from bladder washings[J]．Eur Urol, 2008，54(6):1414-1422．

[12] FOSSUM M, NORDENSKJ?LD A.Tissue-engineered transplants for the treatment of severe hypospadias[J]．Horm Res Paediatr, 2010, 73(2):148-152．

[13] KIM BS, KIM JM, KIM WJ, et al.Circumcised foreskin may be useful as a donor tissue during an autologous, non-cultured, epidermal cell transplantation for the treatment of widespread vitiligo[J].J Dermatol, 2012, 39(6):558-559.

[14] FU Q, DENG CL, SONG XF, et al.Long-term study of male rabbit urethral mucosa reconstruction using epidermal cell[J]．Asian J Androl, 2008, 10(5): 719-722．

[15] BHARGAVA S, PATTERSON JM, INMAN RD, et al.Tissue-engineered buccal mucosa urethroplasty—clinical outcomes[J]．Eur Urol, 2008, 53(6):1263-1271．

[16] FU Q, DENG CL, ZHAO RY, et al.The effect of mechanical extension stimulation combined with epithelial cell sorting on outcomes of implanted tissue-engineered muscular urethras[J].Biomaterials, 2014, 35(1):105-112.

[17] LI C, XU YM, LIU ZS, et al．Urethral reconstruction with tissue engineering and RNA interference techniques in rabbits[J]．Urology, 2013, 81(5):1075-1080．

[18] FU Q, CAO YL.Tissue engineering and stem cell application of urethroplasty: from bench to bedside[J].Urology, 2012, 79(2):246-253.

[19] WU S, LIU Y, BHARADWAJ S, et al.Human urine-derived stem cells seeded in a modified 3D porous small intestinal submucosa scaffold for urethral tissue engineering[J].Biomaterials, 2011, 32(5):1317-1326.

[20] 王營, 傅強．組織工程與干細胞技術在尿道重建中的應用[J].中華男科學雜志, 2012, 18(3):266-270.

[21] LIU J, HUANG J, LIN T, et al.Cell-to-cell contact induces human adipose tissue-derived stromal cells to differentiate into urothelium-like cells in vitro[J]．Biochem Biophys Res Commun, 2009, 390(3):931-936．

[22] LI H, XU Y, XIE H, et al.Epithelial-differentiated adipose-derived stem cells seeded bladder acellular matrix grafts for urethral reconstruction: an animal model[J]．Tissue Eng Part A, 2014，20(3-4):774-784．

[23] SIMAIOFORIDIS V, DE JONGE P, SLOFF M, et al.Ureteral tissue engineering: where are we and how to proceed?[J].Tissue Eng Part B Rev, 2013,19(5):413-419.

[24] XIE M, XU Y, SONG L, et al．Tissue-engineered buccal mucosa using silk fibroin matrices for urethral reconstruction in a canine model[J].J Surg Res, 2014, 188(1):1-7．

[25] 馮超，李喆，呂向國，等．自產(chǎn)氧型人發(fā)角蛋白/絲素蛋白復合材料體外制備及生化評估[J]．中國組織工程研究, 2014, 18(52)：8480-8486．

[26] HUANG JW, XIE MK, ZHANG Y, et al.Reconstruction of penile urethra with the 3-dimensional porous bladder acellular matrix in a rabbit model[J].Urology, 2014, 84(6):1499-1505.

[27] RADISIC M, PARK H, CHEN F, et al．Biomimetic approach to cardiac tissue engineering：oxygen carriers and channeled scaffolds[J]．Tissue Eng, 2006, 12(8):2077-2091．

[28] Hayami JW, Surrao DC, Waldman SD, et al．Design and characterization of a biodegradable composite scaffold for ligament tissue engineering[J]．J Biomed Mater Res A, 2010，92(4):1407-1420．

[29] 劉春曉，林陽彥，李虎林，等．絲素蛋白膜修復兔尿道缺損的實驗研究[J]．南方醫(yī)科大學學報, 2007, 27(2):184-187．

[30] NUININGA JE, VAN MOERKERK H, HANSSEN A, et al.Rabbit urethra replacement with a defined biomatrix or small intestinal submucosa[J]．Eur Urol, 2003, 44(2):266-271．

[31] DORIN RP, POHL HG, DE FILIPPO RE, et al．Tubularized urethral replacement with unseeded matrices：what is the maximum distance for normal tissue Regeneration?[J].World J Urol, 2008, 26(4):323-326．

[32] YANG SX, YAO Y, HU YF, et al．Reconstruction of rabbit urethra using urethral extracellular matrix[J]．Chin Med J(Engl), 2004, 117(12):1786-1790．

[33] MANGERA A, CHAPPLE CR.Tissue engineering in urethral reconstruction-an update[J].Asian J Androl,2013, 15(1):89-92.[34] ORABI H, ABOUSHWAREB T, ZHANG Y, et al.Cell-seeded tubularized scaffolds for reconstruction of long urethral defects: a preclinical study[J].Eur Urol, 2013, 63(3):531-538.

[35] 徐月敏，張炯，傅強，等．小腸黏膜下脫細胞基質修復前尿道狹窄的療效分析[J]．中華泌尿外科雜志, 2011, 32(6):419-422．

[36] EL-KASSABY AW, RETIK AB, YOO JJ, et al．Urethral stricture repair with an off-the-shelf collagen matrix[J]．J Urol, 2003, 169(1):170-173．

[37] RAYA-RIVERA A, ESQUILIANO DR, YOO JJ, et al．Tissue-engineered autologous urethras for patients who need reconstruction：an observational study[J].Lancet, 2011, 377(9772): 1175- 1182．

[38] FOSSUM M, SVENSSON J, KRATZ G, et al.Autologous in vitro cultured urothelium in hypospadias repair[J].J Pediatr Urol, 2007, 3(1):10-18．

(編輯何宏靈)

收稿日期：2015-04-21修回日期：2015-09-08

通訊作者:撒應龍，主任醫(yī)師．E-mail：sayinglong331@sina.com

作者簡介:郭海林(1987-)，男(漢族)，碩士研究生.研究方向：尿道狹窄的修復與重建．E-mail：ghl8705@163.com

中圖分類號:R699.6

文獻標志碼:A

DOI：10.3969/j.issn.1009-8291.2016.02.022