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        桂枝湯對(duì)體溫雙向調(diào)節(jié)作用的研究進(jìn)展

        2016-02-18 02:09:08王亭曄劉玥蕓陳家旭
        關(guān)鍵詞:調(diào)節(jié)作用桂枝湯下丘腦

        王亭曄 劉玥蕓 陳家旭

        北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,北京100029

        桂枝湯對(duì)體溫雙向調(diào)節(jié)作用的研究進(jìn)展

        王亭曄 劉玥蕓 陳家旭

        北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,北京100029

        桂枝湯作為常用經(jīng)方,在臨床治療中使用十分廣泛?,F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)桂枝湯除了可解肌發(fā)表、調(diào)和營(yíng)衛(wèi)用于治療發(fā)熱,具有降低體溫的作用以外,還具有升高體溫的作用,對(duì)體溫調(diào)節(jié)具有雙向作用。本文通過(guò)對(duì)近年來(lái)關(guān)于桂枝湯及其有效部位對(duì)體溫的雙向調(diào)節(jié)作用的文章進(jìn)行整理分析,從對(duì)前列腺素E2及相關(guān)酶、一氧化氮合酶、腺苷酸環(huán)化酶、磷酸二酯酶、環(huán)磷酸腺苷、神經(jīng)遞質(zhì)、蛙皮素、精氨酸加壓素、神經(jīng)降壓素、相關(guān)作用蛋白幾個(gè)方面探討桂枝湯雙向調(diào)節(jié)體溫的機(jī)制,同時(shí)探討桂枝湯中各單味藥對(duì)體溫調(diào)節(jié)的作用及其作用的有效部位A(Fr.A)的化學(xué)成分,以期為擴(kuò)大桂枝湯的使用范圍提供基礎(chǔ)。

        桂枝湯;體溫雙向調(diào)節(jié);研究進(jìn)展

        桂枝湯出自《傷寒論·辨太陽(yáng)病脈證并治上第五》[1],桂枝湯的主要功效是解肌發(fā)表、調(diào)和營(yíng)衛(wèi),對(duì)于外感發(fā)熱有不錯(cuò)的治療效果?,F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn),桂枝湯除了原書(shū)記載可降低體溫治療發(fā)熱的作用之外,還能升高體溫,對(duì)體溫調(diào)節(jié)具有雙向作用[2]。本文將對(duì)桂枝湯體溫雙向調(diào)節(jié)的作用研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

        1 桂枝湯體溫雙向調(diào)節(jié)作用機(jī)制

        1.1 對(duì)前列腺素E2及相關(guān)酶的作用

        前列腺素(prostaglandin)是花生四烯酸在環(huán)氧化酶作用下產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物,根據(jù)其結(jié)構(gòu)的不同,可分14個(gè)不同的天然前列腺素[3]。大量實(shí)驗(yàn)證明,在這些不同的天然前列腺素中,前列腺素E2(PGE2)與發(fā)熱的產(chǎn)生關(guān)系最為密切[4],是人體內(nèi)最重要的中樞發(fā)熱介質(zhì)之一[5]。富杭育等[6]通過(guò)實(shí)驗(yàn)證明桂枝湯能使酵母發(fā)熱模型大鼠體溫下降,同時(shí)使安定痛低體溫模型大鼠體溫升高,提前恢復(fù)到正常水平,對(duì)于體溫具有雙向調(diào)節(jié)作用。同時(shí)實(shí)驗(yàn)測(cè)得實(shí)驗(yàn)組大鼠下丘腦及血漿PGE2水平亦有類似變化:桂枝湯能使發(fā)熱模型大鼠下丘腦與血漿中的PGE2含量下降,同時(shí)使低體溫模型大鼠下丘腦與血漿中的PGE2含量升高。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明桂枝湯對(duì)體溫的調(diào)節(jié)作用可能與PGE2作用有關(guān)。譚余慶等[7]研究桂枝湯有效部位A(Fr.A)對(duì)體溫的雙向調(diào)節(jié)作用發(fā)現(xiàn),給予注射酵母所致發(fā)熱大鼠灌胃Fr.A后可使其體溫降低,下丘腦內(nèi)升高的PGE2含量降低;使注射安定痛所致低體溫大鼠的體溫升高,下丘腦內(nèi)降低的PGE2含量升高,然而最終兩組模型大鼠體內(nèi)的PGE2含量均趨向正常,表明桂枝湯對(duì)體溫調(diào)節(jié)作用機(jī)制與PGE2有關(guān),同時(shí)桂枝湯對(duì)體溫雙向調(diào)節(jié)的物質(zhì)基礎(chǔ)可能是Fr.A。

        在PGE2生成過(guò)程中最重要的限速酶是環(huán)加氧酶(COX)。齊云等[8]的實(shí)驗(yàn)表明桂枝湯對(duì)酵母誘導(dǎo)大鼠的體溫升高有明顯的抑制作用,對(duì)安痛定誘導(dǎo)大鼠體溫降低有明顯的回升作用,表明桂枝湯具有對(duì)體溫調(diào)節(jié)的雙向作用;對(duì)發(fā)熱大鼠下丘腦中異常升高的PGE2含量有明顯的降低作用,而對(duì)低體溫大鼠下丘腦中異常降低的PGE2含量又有明顯的升高作用。但是桂枝湯對(duì)兩組模型大鼠下丘腦中COX活性并沒(méi)有明顯的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示桂枝湯體溫雙向調(diào)節(jié)作用機(jī)制與PGE2有關(guān),但與環(huán)加氧酶的關(guān)聯(lián)不大。

        15-羥基前列腺素脫氫酶(15-hydroxyprostaglandindehydrogenase,15-PGDH)是PGE2生物轉(zhuǎn)化或生物轉(zhuǎn)運(yùn)環(huán)節(jié)中的一種代謝/轉(zhuǎn)運(yùn)酶,對(duì)體內(nèi)的PGE2含量有影響[9]。李滄海等[10]在研究桂枝湯對(duì)發(fā)熱和低體溫大鼠下丘腦組織內(nèi)15-PGDH活性的影響實(shí)驗(yàn)中,結(jié)果表明酵母發(fā)熱模型大鼠下丘腦15-PGDH較之正常組活性下降,灌服桂枝湯可加速模型大鼠體溫恢復(fù)正常,并使其下丘腦部位降低的15-PGDH活性也趨向恢復(fù),表明桂枝湯可能通過(guò)升高下丘腦部位15-PGDH活性實(shí)現(xiàn)解熱作用。在加速安定痛低體溫模型大鼠體溫升高的同時(shí),其下丘腦部位15-PGDH活性有上升趨勢(shì),然而桂枝湯雖能抑制該部位15-PGDH的活性,但該酶活性的改變程度與體溫變化相關(guān)性不強(qiáng),提示桂枝湯對(duì)體溫的雙向調(diào)節(jié)作用機(jī)制與下丘腦部位15-PGDH關(guān)系不緊密。

        1.2 對(duì)一氧化氮合酶(NOS)的影響

        一氧化氮(NO)是生物體細(xì)胞內(nèi)及細(xì)胞間的重要信號(hào)分子,由不同類型的NOS催化生成[11],并可通過(guò)與COX-PGE系統(tǒng)的相互作用,不僅能參與注射酵母誘導(dǎo)的發(fā)熱和注射安痛定誘導(dǎo)的低體溫的調(diào)節(jié),也能參與正常體溫的調(diào)節(jié)過(guò)程[12]。李滄海等[13]研究顯示皮下注射酵母后發(fā)熱大鼠下丘腦組織內(nèi)NOS活性顯著升高,而腹腔注射安痛定可導(dǎo)致低體溫大鼠該部位NOS活性明顯降低,且與體溫變化呈正比關(guān)系;同時(shí)桂枝湯可劑量依賴性地對(duì)抗酵母誘導(dǎo)的大鼠下丘腦NOS活性升高,與其解熱作用呈現(xiàn)平行關(guān)系;但在低體溫模型大鼠上可進(jìn)一步降低下丘腦NOS活性,該作用與抗低體溫作用呈負(fù)相關(guān)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示桂枝湯抑制酵母誘導(dǎo)的下丘腦NOS活性升高可能是其解熱作用的機(jī)制之一,但其對(duì)低體溫的拮抗作用機(jī)制可能與下丘腦部位NOS變化無(wú)關(guān)。

        1.3 對(duì)腺苷酸環(huán)化酶、磷酸二酯酶以及環(huán)磷酸腺苷的作用

        之前的實(shí)驗(yàn)研究表明環(huán)磷酸腺苷(cAMP)是人體內(nèi)一種重要的中樞發(fā)熱介質(zhì),其含量與腺苷酸環(huán)化酶(AC)和磷酸二酯酶(PDE)兩種酶的活性有關(guān)[14]。齊云等[15-16]研究桂枝湯對(duì)發(fā)熱和低體溫模型大鼠下丘腦AC和PDE活性的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示桂枝湯可使酵母誘導(dǎo)的發(fā)熱模型大鼠下丘腦中AC活性明顯降低,同時(shí)降低異常升高的cAMP含量;又能使安定痛誘導(dǎo)模型大鼠下丘腦中AC活性明顯增強(qiáng),同時(shí)增加異常降低的cAMP含量。然而在兩種模型中,桂枝湯對(duì)PDE活性的影響均不明顯。實(shí)驗(yàn)表明桂枝湯對(duì)體溫雙向調(diào)節(jié)的作用機(jī)制可能部分通過(guò)影響下丘腦中AC的活性進(jìn)而改變cAMP含量來(lái)實(shí)現(xiàn)。富杭育等[17]的實(shí)驗(yàn)研究顯示酵母誘致發(fā)熱模型大鼠下丘腦組織以及血漿中cAMP含量增加,血漿中cGMP含量降低,cAMP/cGMP比值明顯升高;安痛定誘致低體溫模型大鼠下丘腦中的cAMP含量減少,血漿中cAMP含量下降,cGMP含量上升,cAMP/cGMP比值顯著降低,提示桂枝湯對(duì)體溫的雙向調(diào)節(jié)作用是部分通過(guò)影響體溫中樞中環(huán)核苷酸實(shí)現(xiàn)的。

        1.4 對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)的作用

        霍海如等[18]研究Fr.A對(duì)神經(jīng)遞質(zhì)5羥色胺(5-HT)、去甲腎上腺素(NE)、多巴胺(DA)的影響,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示對(duì)酵母誘導(dǎo)的發(fā)熱大鼠體溫有明顯的降低作用,對(duì)安痛定誘致的低體溫大鼠體溫有顯著的升高作用,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明Fr.A是桂枝湯雙向調(diào)節(jié)體溫的有效部位。酵母組大鼠灌胃給予Fr.A可使下丘腦組織中NE和DA含量降低,安痛定組大鼠灌胃給予Fr. A后NE和DA含量無(wú)明顯變化;酵母組大鼠體內(nèi)5-HT含量升高,安痛定組大鼠體內(nèi)5-HT含量降低,灌服Fr.A之后酵母組大鼠下丘腦中5-HT含量降低,安定痛組大鼠下丘腦中5-HT含量升高。提示桂枝湯對(duì)體溫雙向調(diào)節(jié)的作用機(jī)制之一是通過(guò)影響中樞神經(jīng)遞質(zhì)5-HT的水平實(shí)現(xiàn)的,其解熱作用與影響中樞神經(jīng)遞質(zhì)NE和DA的含量有關(guān)。富杭育等[19]研究表明桂枝湯在一定程度上能拮抗腦室注射過(guò)量NE引起的降溫作用,能抑制下丘腦性乙酰膽堿所致的體溫升高,提示桂枝湯對(duì)體溫雙向調(diào)節(jié)的作用機(jī)制可能是通過(guò)促進(jìn)含量過(guò)高的中樞神經(jīng)遞質(zhì)的失活,從而對(duì)它們的降溫或發(fā)熱作用實(shí)現(xiàn)拮抗。

        1.5 對(duì)蛙皮素的影響

        蛙皮素是從蟾蜍皮膚中分離出的一種多肽,后發(fā)現(xiàn)它也存在于腦內(nèi),屬于神經(jīng)調(diào)質(zhì),能參與體溫的調(diào)節(jié),是影響體溫最有效的物質(zhì)之一[20]。實(shí)驗(yàn)表明桂枝湯對(duì)于蛙皮素對(duì)冷環(huán)境中大鼠的體溫下降有抑制作用,但并不影響等效價(jià)蛙皮素及其受體拮抗劑D-苯丙12-蛙皮素合并腦室注射所導(dǎo)致的大鼠體溫改變,亦能翻轉(zhuǎn)其受體拮抗劑對(duì)發(fā)熱大鼠的體溫上升作用,提示桂枝湯對(duì)體溫雙向調(diào)節(jié)的作用可能是部分通過(guò)調(diào)節(jié)下丘腦體溫調(diào)節(jié)中樞中蛙皮素受體實(shí)現(xiàn)的[21]。

        1.6 對(duì)精氨酸加壓素和神經(jīng)降壓素的作用

        精氨酸加壓素(AVP)是一種在下丘腦合成的神經(jīng)肽,近年來(lái)AVP作為一種內(nèi)源性降溫物質(zhì)受到廣泛關(guān)注與研究[22]。神經(jīng)降壓素(NT)是一種多肽,向多種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的腦內(nèi)注射NT可導(dǎo)致體溫下降,因此現(xiàn)多認(rèn)為NT是一種內(nèi)源性的降溫多肽[24]。霍海如等[24-25]實(shí)驗(yàn)表明在酵母誘導(dǎo)的發(fā)熱模型大鼠中,F(xiàn)r.A可以降低隔區(qū)AVP以及下丘腦中的NT含量,但其對(duì)下丘腦AVP含量無(wú)影響;在安痛定誘導(dǎo)的低體溫模型大鼠中,F(xiàn)r.A能提高下丘腦和隔區(qū)的AVP含量,同時(shí)提高下丘腦NT含量。結(jié)果表明Fr.A的解熱作用與其影響下丘腦NT和隔區(qū)AVP的含量有關(guān);Fr.A對(duì)低體溫的調(diào)節(jié)作用可能是通過(guò)對(duì)中樞AVP和NT的釋放抑制實(shí)現(xiàn)的。

        1.7 對(duì)下丘腦熱休克蛋白含量的影響

        霍海如等[25]用Fr.A提取物對(duì)酵母致高體溫和安痛定致低體溫的模型大鼠灌胃,運(yùn)用Western blot分析其對(duì)模型大鼠下丘腦熱休克蛋白(HSP)的影響。結(jié)果顯示Fr.A對(duì)HSP70蛋白有影響,F(xiàn)r.A能明顯抑制安痛定導(dǎo)致的低體溫大鼠下丘腦HSP70含量降低,對(duì)酵母導(dǎo)致的發(fā)熱大鼠下丘腦HSP70含量具有降低作用,提示Fr.A對(duì)體溫雙向調(diào)節(jié)的作用機(jī)制之一可能是影響下丘腦熱休克蛋白含量。

        1.8 對(duì)下丘腦三磷酸肌醇和鈣調(diào)蛋白含量的影響

        霍海如等[26]研究Fr.A對(duì)下丘腦三磷酸肌醇(IP3)和鈣調(diào)蛋白(CaM)的調(diào)節(jié)作用。實(shí)驗(yàn)用Fr.A提取物對(duì)酵母致高體溫和安痛定致低體溫的模型大鼠灌胃,觀察灌胃前后IP3、CaM含量變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明Fr.A在促使安定痛低溫模型大鼠體溫上升的同時(shí),也使下丘腦中IP3含量下降;降低酵母發(fā)熱模型大鼠體溫的同時(shí)使下丘腦重IP3含量回升,此外使高體溫大鼠下丘腦CaM含量升高,低體溫大鼠CaM含量降低。結(jié)果提示Fr.A對(duì)體溫具有雙向調(diào)節(jié)作用,F(xiàn)r.A可通過(guò)對(duì)細(xì)胞內(nèi)信息傳遞系統(tǒng)的影響對(duì)體溫進(jìn)行雙向調(diào)節(jié)。

        1.9 對(duì)下丘腦組織中磷酸化cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(pCREB)的影響

        周軍等[27]選用前列腺素受體3導(dǎo)致的發(fā)熱大鼠模型以及氨基比林導(dǎo)致的低體溫大鼠模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn),采用比色法測(cè)定灌服桂枝湯前后模型大鼠下丘腦中的pCREB活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)兩種模型大鼠下丘腦中的pCREB活性均有上升傾向,尤以發(fā)熱模型大鼠組更為明顯;而給予灌服桂枝湯后可使發(fā)熱模型大鼠下丘腦內(nèi)的pCREB活性降低,低體溫模型大鼠下丘腦內(nèi)的pCREB活性變化不明顯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明pCREB參與了大鼠體溫變化的調(diào)節(jié)過(guò)程,桂枝湯的解熱作用可能與降低pCREB活性有關(guān);但pCREB基本上不參與或僅對(duì)低體溫具有微弱的調(diào)節(jié)作用,桂枝湯的升溫作用與pCREB關(guān)系不緊密。

        2 桂枝湯中單味藥對(duì)體溫的影響

        陳紅等[28]探討桂枝湯中單味藥對(duì)體溫是否也具有雙向調(diào)節(jié)作用,實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明桂枝、芍藥兩味藥的不同劑量均可使酵母所致發(fā)熱大鼠體溫降低,同時(shí)能使安痛定所致低體溫大鼠體溫回升,提示桂枝湯中桂枝、芍藥兩味藥對(duì)體溫有明顯的雙向調(diào)節(jié)作用;一般劑量的生姜對(duì)酵母所致發(fā)熱大鼠的體溫升高并無(wú)明顯抑制作用,而大劑量生姜對(duì)安痛定所致低體溫大鼠的體溫回升有明顯的促進(jìn)作用,表明生姜對(duì)體溫調(diào)節(jié)僅具有單向升溫作用;大劑量的大棗對(duì)酵母所致發(fā)熱大鼠體溫的升高有抑制作用,但對(duì)低體溫大鼠的體溫升高沒(méi)有明顯促進(jìn)作用,表明大棗僅具有一定程度的單向解熱作用。大、中兩個(gè)不同劑量的炙甘草對(duì)酵母所致發(fā)熱大鼠的體溫升高有抑制作用,小劑量未表現(xiàn)出解熱作用,小劑量炙甘草對(duì)安痛定所致低體溫大鼠的體溫降低有抑制作用,表明炙甘草對(duì)體溫具有一定的雙向調(diào)節(jié)作用,其調(diào)節(jié)作用與炙甘草的使用劑量有相關(guān)性。

        3 Fr.A成分研究

        周碩等[29]對(duì)Fr.A化學(xué)成分進(jìn)行了研究,分離并確定了9種化合物并對(duì)分離得到的部分化學(xué)成分進(jìn)行了體溫調(diào)節(jié)活性研究。同時(shí)實(shí)驗(yàn)也確定了桂皮醛、反式桂皮醇、反式桂皮酸、鄰甲氧基桂皮醛以及鄰甲氧基桂皮醇是通過(guò)影響下丘腦PGE2的含量從而實(shí)現(xiàn)對(duì)體溫的調(diào)節(jié)作用;桂皮醛、反式桂皮醇、鄰甲氧基桂皮醛以及鄰甲氧基桂皮醇對(duì)環(huán)氧酶2(COX-2)有抑制作用,其中桂皮醛作用最強(qiáng)。馬悅穎[30]通過(guò)LC/MS、GC/ MS等方法確定了Fr.A中內(nèi)含十余種苯丙烯類化合物,此類化合物為該部位的主要成分,這些苯丙烯類化合物可降低發(fā)熱動(dòng)物下丘腦PGE2含量。

        4 結(jié)語(yǔ)

        桂枝湯作為臨床常用經(jīng)方,其現(xiàn)代藥理研究已取得許多成就,尤其是在桂枝湯的雙向調(diào)節(jié)方面,如對(duì)汗腺分泌、免疫功能、胃腸運(yùn)動(dòng)以及血壓的雙向調(diào)節(jié)作用[31],以及本文所探討的桂枝湯對(duì)體溫的雙向調(diào)節(jié)作用,這些現(xiàn)代藥理研究成果不僅明確了桂枝湯的作用機(jī)制、物質(zhì)基礎(chǔ),同時(shí)還擴(kuò)大了桂枝湯的臨床使用范圍,對(duì)臨床使用有巨大的指導(dǎo)意義,同時(shí)桂枝湯在雙向調(diào)節(jié)方面的研究可為其他方劑研究提供新思路。近年來(lái)關(guān)于桂枝湯對(duì)體溫雙向調(diào)節(jié)作用的相關(guān)研究已基本明確其調(diào)節(jié)體溫的相關(guān)作用機(jī)制以及物質(zhì)基礎(chǔ)。然而桂枝湯調(diào)節(jié)體溫的某些作用機(jī)制尚未完全闡釋明白,有待今后進(jìn)一步研究,使桂枝湯這一經(jīng)方在臨床發(fā)揮更大的作用。

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        Research progress of Guizhi Decoction on dual-directional thermoregulation

        WANG TingyeLIU YueyunCHEN Jiaxu
        School of Basic Medicine,Beijing University of Chinese Medicine,Beijing100029,China

        As common classical prescription,Guizhi Decoction is widely used in clinical therapy.Modern pharmacological studies have found that Guizhi Decoction can not only expelling pathogenic factors from muscles,harmonizing yingfen and weifen for treating fever,with the function of lowering body temperature,but also has the function of raising body temperature,which plays a dual role in body temperature regulation.Through sorting and analyzing the articles about dual-directional regulation of Guizhi Decoction and its active fractions on body temperature in recent years,this paper discusses the mechanism of Guizhi Decoction on dual-directional thermoregulation from the aspects of prostaglandin E2and its related enzyme,nitric oxide synthase,adenylyl cyclase,phosphodiesterase,cyclic adenosine monophosphate,neurotransmitter,bombesin,arginine vasopressin,neurotensin and related proteins,which also discusses the function of single herbs of Guizhi Decoction for the thermoregulation,and the chemical components of effective part(Fr.A),so as to provide basis for expanding the using range of Guizhi Decoction.

        Guizhi Decoction;Dual-directional thermoregulation;Research progress

        R284

        A

        1673-7210(2016)07(b)-0044-04

        2016-03-28本文編輯:張瑜杰)

        王亭曄(1993-),北京中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院2015級(jí)中醫(yī)診斷學(xué)在讀碩士研究生;研究方向:中醫(yī)證候的生物學(xué)基礎(chǔ)。

        陳家旭(1966-),醫(yī)學(xué)博士,教授,博士生導(dǎo)師;研究方向:中醫(yī)證候的生物學(xué)基礎(chǔ)、中醫(yī)診斷的規(guī)范化。

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