姜 燕 李和勤 白亞飛 曹 博

(陜西省寶雞市婦幼保健院兒童醫(yī)院新生兒科，寶雞市 721000，E-mail：jiangyan9006@sina.com)

論著·臨床研究

尿腸型脂肪酸結合蛋白與糞鈣衛(wèi)蛋白在診斷早產(chǎn)兒喂養(yǎng)不耐受及壞死性小腸結腸炎中的價值

姜 燕 李和勤 白亞飛 曹 博

(陜西省寶雞市婦幼保健院兒童醫(yī)院新生兒科，寶雞市 721000，E-mail：jiangyan9006@sina.com)

目的 探討尿腸型脂肪酸結合蛋白(UIFABP)與糞鈣衛(wèi)蛋白(FC)在診斷早產(chǎn)兒喂養(yǎng)不耐受(FI)及其并發(fā)壞死性小腸結腸炎(NEC)的臨床價值。方法 240例早產(chǎn)兒，其中120例發(fā)生FI(A組)，120例未發(fā)生FI(B組)。分別于開始喂養(yǎng)前(S1期)、發(fā)生FI當天(S2期)和第5天(S3期)、發(fā)生NEC當天(S4期)收取兩組尿液、糞便，采用酶聯(lián)免疫法檢測UIFABP和FC濃度。結果 A組與B組UIFABP濃度、FC濃度比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，A組的UIFABP及FC濃度均隨觀察時間延長而升高(P<0.05)。各個時間點NEC組的UIFABP濃度高于無NEC組，S2至S4期NEC組的FC濃度均高于無NEC組；NEC組的UIFABP和FC濃度隨觀察時間延長而升高(P<0.05)。S3期UIFABP診斷早產(chǎn)兒發(fā)生NEC的界限值為1.892 mg/ml，敏感度為93.0%、特異性為56.8%；S4期UIFABP濃度診斷早產(chǎn)兒發(fā)生NEC的界限值為2.563 mg/ml，靈敏度為76.7%，特異度為97.3%。S3期FC濃度對早產(chǎn)兒發(fā)生NEC的診斷界限值為198.9 μg/g，靈敏度為96.5%，特異度為79.6%。S4期FC濃度對早產(chǎn)兒發(fā)生NEC的診斷界限值為254.4 μg/g，靈敏度為94.7%，特異度為61.2%。結論 FI早產(chǎn)兒的UIFABP與FC濃度持續(xù)升高。FI早產(chǎn)兒出現(xiàn)NEC可能性較大。早產(chǎn)兒發(fā)生FI第5天FC濃度、UIFABP異常升高，提示有發(fā)生NEC可能，對診斷NEC具有積極作用。

喂養(yǎng)不耐受；尿腸型脂肪酸結合蛋白；糞鈣衛(wèi)蛋白；壞死性小腸結腸炎

喂養(yǎng)不耐受(feeding intolerance，F(xiàn)I)是早產(chǎn)兒中常見的一類疾病，常表現(xiàn)為喂養(yǎng)物殘留、腹部脹滿、嘔吐甚至發(fā)生嘔血[1-3]。該病可對早產(chǎn)兒的發(fā)育造成諸多不良影響，如FI后期常?？砂l(fā)生壞死性小腸結腸炎(necrotizing enterocolitis，NEC)等[4]。目前多數(shù)學者多關注于尿腸型脂肪酸結合蛋白(urine intestinal fatty acid binding protein，UIFABP)和糞鈣衛(wèi)蛋白(fecal calprotectin，F(xiàn)C)水平對已發(fā)生NEC患兒的影響[5-7]。而關于兩者在發(fā)生NEC前的FI患兒的研究報告較少。因此，本文通過對比喂養(yǎng)耐受早產(chǎn)兒與FI早產(chǎn)兒在不同時間點的UIFABP與FC水平，探討UIFABP與FC水平的變化及其對FI早產(chǎn)兒發(fā)生NEC的臨床意義，旨在為早產(chǎn)兒NEC的臨床診斷和預防提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2010年3月至2015年3月我院新生兒科收治的500例早產(chǎn)兒作為研究對象，將500例早產(chǎn)兒隨機配對，共計250對。納入標準 (1)患兒出生胎齡<34周；(2)出生體重<2.5 kg；(3)本研究進行期間所有患兒均為在院治療；(4)所有觀察對象監(jiān)護人知情同意并自愿參加。排除標準 (1)伴有嚴重呼吸系統(tǒng)疾病者；(2)伴有嚴重心血管疾病者；(3)伴有肝炎、黃疸等疾患者；(4)伴有先天性胃腸疾患者；(5)伴有代謝障礙性疾病者；(6)具有心臟病、代謝病等家族遺傳病者。根據(jù)早產(chǎn)兒住院期間是否發(fā)生FI對研究對象進行二次剔除，符合以下4點中任意一點則需剔除：(1)住院期間配對的兩個早產(chǎn)兒均未發(fā)生FI；(2)住院期間兩組早產(chǎn)兒均發(fā)生FI；(3)觀察期間，配對的兩個早產(chǎn)兒未能全部完成相關檢查者；(4)兩組均發(fā)生NEC者；(5)不符合納入標準者。二次剔除后，最終納入240例早產(chǎn)兒。將120例住院期間發(fā)生FI的早產(chǎn)兒設為A組，120例未發(fā)生FI的早產(chǎn)兒為B組。其中，A組男58例、女62例，胎齡(31.2±1.7)周，出生體重(1.38±0.46)kg。B組中男68例、女52例，胎齡(31.4±1.6)周，出生體重(1.52±0.39)kg。兩組的性別、胎齡及出生體重比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。所有早產(chǎn)兒納入觀察對象前均經(jīng)監(jiān)護人知情同意，并自愿參加。

1.2 相關診斷標準 FI診斷標準：(1)胃內殘余量增加,符合以下任意一點即可：① 胃內殘余量>50%前次喂養(yǎng)量；② 胃內殘余量>30%前次喂養(yǎng)量，多次發(fā)生。③ 胃內殘余量>10%日喂養(yǎng)總量。(2)排除敗血癥和NEC導致的血便。新生兒NEC診斷標準：(1)體溫波動較大、呼吸微弱或驟停；(2)呼吸性酸中毒；(3)腹脹、大便隱血、腸壁積氣、腹部按壓時患兒哭鬧劇烈；(5)腹部X線提示腸梗阻。

1.3 研究方法 分別于開始喂養(yǎng)前(S1期)、A組患兒發(fā)生FI當天(S2期)和第5天(S3期)收取兩組早產(chǎn)兒尿液、糞便。于患兒確診為NEC當天(S4期)收取早產(chǎn)兒的尿液、糞便，同時收取與其配對的早產(chǎn)兒的尿液、糞便。尿液標本不少于8 ml，糞便標本不少于4 g，所有標本分別收集于無菌塑料瓶內，并對塑料瓶進行組別、日期標記。于標本收集后12 h內置于-80℃冰箱內冷存。采用酶聯(lián)免疫法檢測，分別采用UIFABP試劑盒(美國Abcom公司)、FC試劑盒(德國AG公司)檢測UIFABP和FC濃度。

1.4 統(tǒng)計學分析 采用19.0軟件進行統(tǒng)計學分析，計量資料以(x±s)表示，組間比較采用t檢驗，重復測量資料采用重復測量方差分析。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗。UIFABP和FC水平對診斷NEC的意義采用受試者工作特征(receiver operating characteristic，ROC)曲線進行分析。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 兩組UIFABP和FC濃度比較 兩組的UIFABP濃度比較，差異無統(tǒng)計學意義(F分組=0.837，P分組=0.257)；兩組的UIFABP濃度均隨時間變化而上升趨勢(F時間=81.718，P時間<0.001)，其中A組的UIFABP濃度隨觀察時間延長而升高；時間與分組之間存在交互作用(F交互=6.471，P交互=0.031)。見表1。兩組FC濃度比較，差異無統(tǒng)計學意義(F分組=0.711，P分組=0.327)；兩組的FC濃度均有隨時間變化的趨勢(F時間=143.187，P時間<0.001)，其中A組的FC濃度隨觀察時間延長而升高；時間與分組之間存在交互作用(F交互=8.319，P交互=0.021)。見表2。

表1 兩組UIFABP濃度的比較(x±s，mg/ml)

表2 兩組FC濃度的比較(x±s，μg/g)

2.2 NEC者及無NEC者UIFABP和FC濃度比較 240例觀察對象中發(fā)生NEC患者57例，其中A組36例(30.0%)，B組21例(17.5%)。A組NEC發(fā)生率高于B組(χ2=5.177，P=0.023)。

NEC組與無NEC組的UIFABP濃度比較，差異有統(tǒng)計學意義(F分組=7.159，P分組=0.027)，在各個時間點前者均高于后者；兩組的UIFABP濃度有隨時間變化的趨勢(F時間=172.098，P時間<0.001)，其中NEC組的UIFABP濃度隨觀察時間延長而升高；時間與分組之間存在交互作用(F交互=14.258，P交互=0.007)。見表3。 兩組間的FC濃度比較，差異有統(tǒng)計學意義(F分組=6.027，P分組=0.037)，S2至S4期，NEC組的FC濃度均高于無NEC組；兩組的FC濃度有隨時間變化的趨勢(F時間=180.289，P時間<0.001)，其中NEC組的FC濃度隨觀察時間延長而升高；時間與分組之間存在交互作用(F交互=11.038，P交互=0.014)。見表4。

表3 NEC者及無NEC者UIFABP濃度的比較(x±s，mg/ml)

表4 NEC者及無NEC者FC濃度(x±s，μg/g)

2.3 UIFABP和FC濃度診斷早產(chǎn)兒發(fā)生NEC的ROC曲線分析 S3期UIFABP濃度為1.892 mg/ml時，診斷早產(chǎn)兒發(fā)生NEC的敏感度為93.0%、特異性為56.8%，曲線下面積為0.740；S4期UIFABP濃度為2.563 mg/ml時，診斷早產(chǎn)兒發(fā)生NEC的靈敏度為76.7%、特異度為97.3%，曲線下面積為0.842。S3期FC濃度為198.9 μg/g時，診斷早產(chǎn)兒發(fā)生NEC的靈敏度為96.5%、特異度為79.6%；S4期時FC濃度為254.4 μg/g時，診斷早產(chǎn)兒發(fā)生NEC的靈敏度為94.7%、特異度為61.2%，曲線下面積為0.799。

3 結 論

隨著醫(yī)療技術的不斷提高，我國早產(chǎn)兒的出生比例逐年增長[8]。早產(chǎn)兒由于組織功能、肌肉、骨骼的發(fā)育尚不完全，因此較易引起FI現(xiàn)象的發(fā)生[9-11]。FI是早產(chǎn)兒中常見的疾病，其不僅影響新生兒的生長發(fā)育，而且不能保證新生兒內環(huán)境的穩(wěn)定[12]。有研究表明，F(xiàn)I的早產(chǎn)兒往往可出現(xiàn)細菌感染，繼而導致NEC的發(fā)生[13]。而自1964年美國學者提出NEC以來，關于其形成的病因病機尚存在爭議。目前多數(shù)學者認為，NEC的發(fā)生多是由于食物積存、腸道蠕動無力、細菌滋生導致[14-16]。此外，目前關于NEC發(fā)病前的研究較為少見。

本研究結果顯示，兩組患者的UIFABP濃度、FC濃度無差異(P>0.05)，但兩組患者的UIFABP濃度、FC濃度變化趨勢不同，A組患者的UIFABP濃度均隨觀察時間延長而升高，而B組患者在S3期時即開始下降；A組患者的FC濃度均隨觀察時間延長而升高，而B組患者呈現(xiàn)先升高后降低的變化趨勢。該結果表明FI患兒在發(fā)生FI時，UIFABP和FC濃度升高，而發(fā)生NEC時，F(xiàn)I患兒UIFABP、FC濃度仍持續(xù)升高，但未發(fā)生FI的早產(chǎn)兒則出現(xiàn)下降趨勢。引起該現(xiàn)象的原因可能是由于FI早產(chǎn)兒腸道內食物殘渣長期積存，促進細菌繁殖，以導致UIFABP和FC分別在尿液及糞便中的濃度大幅度升高；同時，UIFABP和FC濃度升高可能對發(fā)生NEC具有一定的影響作用，因此兩指標在NEC發(fā)生時及發(fā)病前具有不同的表現(xiàn)特征[17-18]。

由于新生兒生理特點的限制，新生兒疾病進展較快，而早產(chǎn)兒在發(fā)生NEC時往往在數(shù)小時內可演變?yōu)槟c壞死等危重疾病，嚴重者甚至危及患兒生命。目前對NEC的診斷主要是血常規(guī)、糞便隱血試驗以及C-反應蛋白等實驗室指標，雖然以上指標是目前診斷該病的主要指標，但血常規(guī)、糞便隱血試驗以及C-反應蛋白等的異常，往往是在病情發(fā)展的后期出現(xiàn)，因此，尋找NEC早期的敏感指標，能夠幫助該病的預防與治療。本研究結果發(fā)現(xiàn)，A組NEC發(fā)生率高于B組(P<0.05)，提示FI早產(chǎn)兒較喂養(yǎng)耐受早產(chǎn)兒更易發(fā)生NEC。此外，在各個時間點NEC組的UIFABP濃度高于無NEC組，S2至S4期NEC組的FC濃度均高于無NEC組(P<0.05)；NEC組的UIFABP和FC濃度均隨觀察時間延長而升高(P<0.05)，而無NEC組的UIFABP和FC在S3或S4期時開始下降。UIFABP是一種常見的脂肪酸結合蛋白，該蛋白常存在于消化道的黏膜層[19]。當消化道受損時，尤其是小腸發(fā)生缺血壞死時，可通過血循環(huán)直接由尿液排出，因此在發(fā)生NEC時，UIFABP濃度升高。FC為感染發(fā)生時的保護蛋白，有研究指出，F(xiàn)C在糞便中的濃度最高，比血液中濃度約高5倍[20]，因而在炎癥發(fā)生過程中或癥狀出現(xiàn)前，F(xiàn)C濃度即開始異常升高。

本研究進一步分析了UIFABP和FC濃度在診斷NEC中的價值，結果顯示，當S3期(FI第5天)時，UIFABP對診斷NEC的敏感性較高；當S3期(FI第5天)時，F(xiàn)C濃度的升高對診斷NEC的敏感性與特異性較高。因此，筆者認為，由于UIFABP和FC濃度在早產(chǎn)兒發(fā)生NEC的早期便可出現(xiàn)異常升高，通過對UIFABP和FC濃度的檢測，有可能成為日后研究新生兒發(fā)生NEC早期診斷的新突破。

綜上所述，F(xiàn)I早產(chǎn)兒的UIFABP、FC濃度持續(xù)升高。FI早產(chǎn)兒出現(xiàn)NEC可能性較大。同時，早產(chǎn)兒發(fā)生FI第5天FC濃度、UIFABP異常升高，提示有發(fā)生NEC可能，需提前預防，指標的異常變化對診斷NEC具有積極作用。

[1] 丁雪晶,王金秀.早產(chǎn)兒營養(yǎng)支持的研究[J].實用臨床醫(yī)藥雜志,2013,17(23):191-193.

[2] 黃綺文,熊佳華,陳少藩.早產(chǎn)兒喂養(yǎng)不耐受影響因素分析及對策[J].中國醫(yī)藥科學,2014,4(12):31-34,55.

[3] 楊曉燕,陳 超,唐 軍,等.我國早產(chǎn)兒營養(yǎng)研究現(xiàn)狀的可視化研究[J].中國當代兒科雜志,2013,15(10):835-840.

[4] 楊 坤,張玉霞.早產(chǎn)兒喂養(yǎng)不耐受的影響因素分析[J].中國實用醫(yī)藥,2015,10(4):239-241.

[5] 杜素英.喂養(yǎng)不耐受早產(chǎn)兒靜脈營養(yǎng)補鉀時機的臨床分析[J].中國藥物經(jīng)濟學,2015,10(2):153-153,160.

[6] 尚青霞.住院早產(chǎn)兒106例喂養(yǎng)干預現(xiàn)狀分析[J].山西醫(yī)藥雜志,2015,43(1):69-71.

[7] Ng PC,Chan KY,Poon TC.Biomarkers for prediction and diagnosis of necrotizing enterocolitis[J].Clin Perinatol,2013,40(1):149-159.

[8] 路軍英,劉 丹.早產(chǎn)兒喂養(yǎng)不耐受的臨床特征及影響因素[J].實用臨床醫(yī)藥雜志,2015,19(3):151-152.

[9] 李季蘭.新生兒壞死性小腸結腸炎10年臨床療效分析[D].上海:復旦大學,2012.

[10]孫 琦.莫沙必利聯(lián)合酪酸梭菌-嬰兒型雙歧桿菌二聯(lián)活菌防治早產(chǎn)兒喂養(yǎng)不耐受的臨床觀察[D].合肥:安徽醫(yī)科大學,2013.

[11]蔡勉珊.早產(chǎn)兒血漿ghrelin和CCK水平與喂養(yǎng)不耐受的臨床研究[D].廣州:暨南大學,2013.

[12]秦嘉麗.血清腸型脂肪酸結合蛋白在診斷新生兒壞死性小腸結腸炎中的意義[D].重慶:重慶醫(yī)科大學,2012.

[13]Reisinger KW,Van der Zee DC,Brouwers HA,et al.Noninvasive measurement of fecal calprotectin and serum amyloid A combined with intestinal fatty acid-binding protein in necrotizing enterocolitis[J].J Pediatr Surg,2012,47(9):1 640-1 645.

[14]王葉青.腸脂肪酸結合蛋白和二胺氧化酶與窒息新生兒胃腸功能障礙關系的研究[D].石家莊:河北醫(yī)科大學,2012.

[15]王廣州.新生兒壞死性小腸結腸炎的超早期診斷探討[J].中國實用醫(yī)藥,2015,10(7):84-85.

[16]萬 倩.糞鈣衛(wèi)蛋白與新生兒壞死性小腸結腸炎的相關性研究[D].蘭州:蘭州大學,2014.

[17]尹 芳.新生兒壞死性小腸結腸炎97例臨床分析[D].南寧:廣西醫(yī)科大學,2013.

[18]陸 妹,朱小瑜,劉登禮,等.新生兒壞死性小腸結腸炎危險因素臨床分析[J].中國新生兒科雜志,2012,27(6):382-385.

[19]林慧佳,施麗萍,羅 芳,等.腹部X線量表在新生兒壞死性小腸結腸炎中的應用價值[J].中國當代兒科雜志,2012,14(2):97-100.

[20]Gaudin A,Farnoux C,Bonnard A,et al.Necrotizing enterocolitis(NEC) and the risk of intestinal stricture:the value of C-reactive protein[J].PLoS One,2013,8(10):e76 858.

Clinical value of urine intestinal fatty acid binding protein and fecal calprotectin for diagnosis of feeding intolerance and necrotizing enterocolitis in preterm neonates

JIANGYan,LIHe-qin,BAIYa-fei,CAOBo

(DepartmentofNeonatology,theChidren′sHospital,theMaternalandchildHealthCareofBaojiCity,ShannxiProvince,Baoji721000,China)

Objective To explore the clinical value of urine intestinal fatty acid binding protein(UIFABP) and fecal calprotectin(FC) for the diagnosis of feeding intolerance(FI) and necrotizing enterocolitis(NEC) in preterm neonates.Methods Two hundred and forty preterm neonates included 120 preterm neonates with FI in Group A and 120 preterm neonates without FI in Group B.The urine and stool were collected before starting feeding(S1),when FI occurred(S2) and on the 5th day of FI(S3) in Group A,and when diagnosed as NEC(S4).Then the concentrations of intestinal fatty acid binding protein and FC were detected using enzyme-linked immunosorbent assay.Results There was no significant difference in the concentration of UIFABP or FC between Group A and Group B(P>0.05).The concentrations of UIFABP and FC of Group A increased with the increase of observation time(P<0.05).The concentration of UIFABP in the group with NEC was higher than that in the group without NEC at each time point,and the concentration of FC in the group with NEC was higher than that in the group without NEC from S2 to S4.The concentrations of UIFABP and FC of the group with NEC increased with the increase of observation time(P<0.05).The diagnostic boundary value of UIFABP for NEC was 1.892 mg/ml at S3,the sensitivity and specificity were 93.0% and 56.8% respectively.The diagnostic boundary value of UIFABP for NEC was 2.563 mg/ml at S4,the sensitivity and specificity were 76.7% and 97.3% respectively.The diagnostic boundary value of FC for NEC was 198.9 μg/g at S3,the sensitivity and specificity were 96.5% and 79.6 % respectively.The diagnostic boundary value of FC for NEC was 254.4 μg/g at S4,the sensitivity and specificity were 94.7% and 61.2% respectively.Conclusion The concentration of UIFABP or FC constantly rises in the preterm neonates with FI.And the preterm neonates with FI are prone to develop NEC.For the preterm neonates,the abnormal increase of UIFABP and FC on the 5th day of FI probably suggests the NEC,which is valuable for the diagnosis of NEC.

Feeding intolerance,Urine intestinal fatty acid binding protein,Fecal calprotectin,Necrotizing enterocolitis

姜燕(1979～)，女，本科，主治醫(yī)師，研究方向：新生兒呼吸窘迫。

R 174.4

A

0253-4304(2016)05-0660-05

10.11675/j.issn.0253-4304.2016.05.17

2015-11-27 2016-02-22)