林志新 余彬彬 馬 剛 莫梅珍 何 春 歸慶華 林曉琰 尹潔斯 梁 夏 黃澤青

(廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院1 婦產(chǎn)科，2 病理科，3 醫(yī)務部，南寧市 530003，E-mail：ellen0771@163.com)

論著·臨床研究

33 945例宮頸病變的篩查結果分析及DNA倍體定量分析技術的應用價值▲

林志新1余彬彬2馬 剛1莫梅珍2何 春2歸慶華1林曉琰1尹潔斯2梁 夏1黃澤青3

(廣西壯族自治區(qū)婦幼保健院1 婦產(chǎn)科，2 病理科，3 醫(yī)務部，南寧市 530003，E-mail：ellen0771@163.com)

目的 分析33 945例宮頸病變的篩查結果，并探討DNA倍體定量分析技術在宮頸病變篩查中的應用價值。方法 納入2012年至2015年該院行宮頸病變篩查的婦女33 945例，年齡18～74歲，取宮頸細胞標本，同時進行常規(guī)細胞學檢查診斷及DNA倍體定量分析，篩查結果陽性者再進一步行陰道鏡下宮頸活檢組織病理學診斷。結果 2012～2015年宮頸病變篩查陽性率呈降低趨勢(P<0.05)。DNA倍體分析系統(tǒng)篩查宮頸病變的陽性率為9.28%，高于常規(guī)細胞學的6.82%(P<0.05)。DNA倍體分析的活檢陽性率為30.52%，高于常規(guī)細胞學的18.22%(P<0.05) ；DNA定量分析的宮頸癌陽性檢出率為0.144%，也高于常規(guī)細胞學的0.076%(P<0.05)。結論 該院就診婦女宮頸病變檢出率有逐年下降趨勢。DNA定量分析法可提高宮頸癌及癌前病變的早期篩查率及活檢陽性率。

宮頸病變；宮頸癌；篩查；脫氧核糖核酸定量分析；常規(guī)細胞學診斷

宮頸癌嚴重危害婦女健康，其發(fā)病率位居婦科惡性腫瘤第二位，而85%的宮頸癌發(fā)生在發(fā)展中國家[1]。從宮頸上皮內瘤變(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)發(fā)展到浸潤癌，一般需要近10年的時間。CIN是宮頸癌的癌前病變，部分CIN是可逆并且是可以治愈的，在此階段或之前發(fā)現(xiàn)并進行相應的臨床治療，能降低宮頸癌的患病率和死亡率。因此，宮頸癌的防治尤為重要，而應用能檢測出癌前病變的有效可行方法是關鍵。我院門診及體檢中心于2012～2015年期間同時應用常規(guī)細胞學檢查及DNA倍體定量分析檢查進行宮頸癌篩查，現(xiàn)報告如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2012年9月至2015年6月在我院婦科門診進行宮頸癌篩查的婦女33 945例，年齡(35.68±2.35)歲。納入條件：18歲≤年齡≤74歲的婦女，排除宮頸系統(tǒng)外的惡性腫瘤患者。

1.2 取材及制片 患者取膀胱截石位在陰道窺器直視下用宮頸刷伸入宮頸管內，抵觸在宮頸黏膜面，順時針或逆時針旋轉3～5圈。取出宮頸刷，取下刷頭，并將其浸泡在細胞保存液內，旋緊管蓋后震蕩搖晃，貼標簽后送至細胞實驗室制片。將裝有細胞保存液和刷頭的標本收集管振蕩1 h，將保存液轉入離心管，800 r/min離心5 min，棄上清液后清洗5 min×2次(800 r/min)，采用分散液懸浮細胞沉淀；按照合適的細胞懸液濃度制成細胞標本片2張，其中1張行巴氏染色做常規(guī)細胞學診斷，另l張行Feulgen染色做細胞DNA定量測定。

1.3 常規(guī)細胞學診斷 根據(jù)《宮頸/陰道細胞學診斷報告》[2]，宮頸(陰道)細胞學診斷的分為6組：(1)未見上皮內病變細胞或惡性細胞(negative for intraepithelial lesion or malignancy，NILM)；(2)意義不明確的非典型鱗狀上皮細胞(atypical squamous cells of undetermined significance，ASC-US)；(3)意義不明確的非典型鱗狀上皮細胞不除外高度鱗狀上皮內病變(atypical squamous cells，can′t exclude high-grade squamous intraepithelial lesion，ASC-H)；(4)低度鱗狀上皮內病變(low-grade squamous intraepithelial lesion，LSIL)；(5)高度鱗狀上皮內病變(high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL)；(6)鱗狀細胞癌(squamous cell carcinoma，SCC)。其中NILM歸為陰性，其余類型均歸為陽性。

1.4 DNA定量分析 Feulgen染色玻片用AcCell全自動細胞圖像分析系統(tǒng)(麥克奧迪公司)進行掃描處理。定量分析陰性即以正常2C細胞為主，未見異倍體細胞及異倍體細胞峰。定量分析陽性有兩種情況：(1)少量異倍體細胞：包括可見少量(1～2個)DNA指數(shù) (DNA index，DI)≥2.5的細胞和少量細胞增生(指DI為1～2的細胞數(shù)高于被檢測細胞總數(shù)的5%～10%)；(2)大量異倍體細胞：包括出現(xiàn)異倍體細胞峰或大量(≥3個)DI≥2.5的細胞或細胞異常增生≥10% 。DI≥2.5的玻片要經(jīng)細胞診斷學專業(yè)的醫(yī)師在顯微鏡下再次核實，以排除系統(tǒng)將重疊、炎性細胞或片上的垃圾判定為癌細胞或異常細胞。

1.5 組織病理學檢查 對常規(guī)細胞學診斷和(或)DNA定量分析結果為陽性的婦女在陰道鏡引導下行宮頸活組織檢查，在月經(jīng)干凈后3～7 d內進行，經(jīng)陰道鏡下定位，對宮頸可疑部位進行 4 點以上的組織活檢。組織病理學檢查結果分為：正?；蜓装Y、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宮頸癌。CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、宮頸癌為宮頸活組織檢查陽性。

1.6 統(tǒng)計學分析 應用SPSS軟件進行統(tǒng)計學分析。計數(shù)資料比較及趨勢分析均采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 2012～2015年宮頸病變檢出情況 33 945例進行篩查的婦女中，DNA倍體定量分析及常規(guī)細胞學檢查共篩查出陽性病例3 416例，總陽性率10.06%。2012～2015年，宮頸病變篩查陽性率呈逐年降低趨勢(χ2=1.093，P<0.001)，見表1。

表1 2012～2015 年宮頸病變篩查情況

2.2 DNA倍體定量分析系統(tǒng)與常規(guī)細胞學篩查陽性率比較 33 945例婦女中，DNA定量分析的篩查陽性率為9.28%(3149/33 945)，常規(guī)細胞學檢查的篩查陽性率為6.82%(2316/33 945)，DNA定量分析系統(tǒng)篩查陽性率高于常規(guī)細胞學診斷(χ2=1.382，P<0.001)。

2.3 DNA倍體定量分析系統(tǒng)與常規(guī)細胞學宮頸病變篩查結果比較 常規(guī)細胞學篩查中，活檢率為5.08%(1 723/33 945)，活檢陽性率為18.22%(314/1 723)，宮頸癌檢出率為76/10萬(26/33 945)。DNA定量分析篩查中，活檢率為6.06%(2 058/33 945)，活檢陽性率為30.52%(628/2 058)，宮頸癌檢出率為144/10萬(49/33 945)。DNA定量分析的活檢陽性率、宮頸癌陽性檢出率均高于常規(guī)細胞學(χ2=75.743，P<0.001；χ2=7.061，P<0.001)。見表2。

表2 DNA定量分析檢測與常規(guī)

3 討 論

隨著全球宮頸癌發(fā)病年齡的提前和患病率的增加，宮頸癌篩查越來越普及，其手段也越來越完善。目前，臨床上常用的宮頸細胞學篩查方法主要有DNA定量分析系統(tǒng)和常規(guī)細胞學檢查兩種。由于常規(guī)細胞學作為細胞形態(tài)學檢測，讀片工作量大、細胞病理學醫(yī)師判讀水平存在差異等，無法避免假陽性和假陰性的出現(xiàn)。采用全自動DNA定量分析系統(tǒng)進行宮頸癌及癌前病變的診斷及預測在國內外已有大量報道，尤其在北美及歐洲，DNA 定量分析已是常規(guī)的臨床檢測方法之一[3-5]，該方法利用全自動細胞圖像分析系統(tǒng)進行掃描閱片，對細胞DNA進行定量分析，根據(jù)細胞核DNA含量的改變而做出客觀的判斷，是一種有效的宮頸細胞學篩查手段。通過對細胞核內DNA的測定，了解正常細胞(DNA二倍體、2C細胞)的周期變化及有無惡性增殖的腫瘤細胞，如有異倍體細胞的出現(xiàn)，則提示染色體結構和數(shù)量出現(xiàn)異常變化，是細胞惡變的開始[6-7]。

本研究結果顯示，DNA倍體分析檢測的篩查陽性率(9.28%)高于常規(guī)細胞學檢查(6.82%)(P<0.05)，與國內外文獻報道[3，8]相似。在細胞惡變過程中，DNA含量的改變早于形態(tài)學改變，因此，DNA含量的檢測更能早期診斷癌前病變，從而有更多的早期子宮頸病變患者被發(fā)現(xiàn)。本研究對篩查的陽性病例進行組織學活檢，發(fā)現(xiàn)DNA倍體分析檢測出的陽性病例的活檢陽性率及宮頸癌陽性檢出率均高于常規(guī)細胞學檢查(P<0.05)，提示單用DNA定量分析檢查法對宮頸病變具有較高的診斷價值，可提高宮頸癌的篩查陽性及診斷率。

此外，本研究結果顯示，與2012年宮頸病變篩查陽性率(13.85%)比較，2013～2015年篩查陽性率逐年降低(P<0.05)，這可能是因為近5年來廣西各地區(qū)在國家倡導下，積極開展國家衛(wèi)生部農(nóng)村婦女宮頸癌檢查項目，并大力度地開展宮頸癌的普查，醫(yī)療技術也不斷進步，廣西地區(qū)婦女的宮頸癌發(fā)病率得到有效的遏制。

綜上所述，DNA倍體定量分析法彌補了液基細胞學診斷的不足，大量的臨床研究也表明，采用DNA倍體定量分析技術聯(lián)合細胞學診斷能夠對宮頸腫瘤的篩查和治療指導提供科學準確的依據(jù)[8-9]。DNA倍體定量分析法在宮頸癌及癌前病變的早期篩查中具有非常高的臨床價值，該技術與液基薄層細胞學技術相結合，可用于宮頸癌及癌前病變的篩查與診斷，值得在臨床進一步推廣應用。

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Analysis on result of 33 945 cases of cervical diseases screening and application value of DNA quantitative cytology

LINZhi-xin1,YUBin-bin2,MAGang1,MOMei-zhen2,HEChun2,GUIQing-hua1,LINXiao-yan1,YINJie-si2,LIANGXia1,HUANGZe-qing3

(1DepartmentofGynaecology,2DepartmentofPathology,3MedicalDepartment,theMaternalandChildHealthHospitalofGuangxiZhuangAutonomousRegion,Nanning530003,China)

Objective To analyze the result of 33 945 cases of cervical diseases screening,and to explore the application value of DNA quantitative cytology.Methods A total of 33 945 women,aged 18 to 74 years,receiving cervical diseases screening from 2012 to 2015 were enrolled.The specimens of cervical cells were collected and assayed using and routine cytology examination and DNA quantitative cytology analysis.The patients with positive screening result received cervical biopsy under colposcope for histopathological diagnosis.Results The positive screening rate for cervical diseases from 2012 to 2015 tended to decrease(P<0.05).The positive rate of DNA quantitative cytology for cervical diseases screening was 9.28%,higher than that of routine cytology(6.82%,P<0.05).The biopsy positive rate of DNA quantitative cytology was 30.52%,higher than that of routine cytology(18.22%,P<0.05).The positive detection rate of DNA quantitative cytology for cervical cancer was 0.144%,higher than that of routine cytology(0.076%,P<0.05).Conclusion The detection rate of cervical disease shows a decreasing tendency year by year in this hospital.DNA quantitative cytology can improve early screening positive rate and biopsy positive rate of patients of both cervix cancer and precancerous lesions.

Cervical disease,Cervical cancer,Screening,DNA quantitative cytology,Routine cytology diagnosis

國家計劃生育委員會科研基金資助項目(W2011GI27)

林志新(1966～)，女，碩士，主任醫(yī)生，研究方向：婦科腫瘤、宮頸癌防治。通信作者：馬剛(1962～)，男，碩士，主任醫(yī)師，研究方向：宮頸癌、子宮內膜癌、卵巢癌等婦科惡性腫瘤，E-mail：Magang133@126.com。

R 711.74

A

0253-4304(2016)12-1646-03

10.11675/j.issn.0253-4304.2016.12.05

2016-07-30

2016-10-19)