湯菊芬，黃瑜，蔡佳，廖建萌，秦青英，簡(jiǎn)紀(jì)常*

(1.廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，廣東湛江 524088；2.廣東省水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物病原生物學(xué)及流行病學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東湛江 524088；3.廣東省湛江市質(zhì)量計(jì)量監(jiān)督檢測(cè)所，廣東湛江 524022)

諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑在眼斑擬石首魚(yú)體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)和殘留消除規(guī)律研究

湯菊芬1, 2，黃瑜1, 2，蔡佳1, 2，廖建萌3，秦青英1, 2，簡(jiǎn)紀(jì)常1, 2*

(1.廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，廣東湛江 524088；2.廣東省水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物病原生物學(xué)及流行病學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣東湛江 524088；3.廣東省湛江市質(zhì)量計(jì)量監(jiān)督檢測(cè)所，廣東湛江 524022)

研究諾氟沙星鹽酸小檗堿在眼斑擬石首魚(yú)體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)和殘留消除規(guī)律。在水溫28±2℃、鹽度28條件下，將諾氟沙星(Norfloxacin，NFLX)鹽酸小檗堿(Berberine hydrochloride，BBH)預(yù)混劑按450 mg/kg的劑量口灌眼斑擬石首魚(yú)后，其血漿、肌肉、肝臟和腎臟中的藥物濃度采用HPLC-MS/MS測(cè)定，藥時(shí)數(shù)據(jù)用DAS3.0軟件分析。結(jié)果顯示：?jiǎn)蝿┝靠诠嘟o藥后，眼斑擬石首魚(yú)血漿中NFLX和BBH的藥時(shí)數(shù)據(jù)均符合一級(jí)吸收二室模型；血藥達(dá)峰時(shí)間(tp)分別為1.20、1.79 h，血藥濃度峰值(Cmax)分別為358.40、144.89 μg/L，藥時(shí)曲線(xiàn)下面積(AUC0-∞)分別為8252.80、6454.52 μg/(L·h)，消除半衰期(t1/2β)分別為43.26、27.30 h；NFLX和BBH在魚(yú)體各組織中的分布較廣，灌服給藥后，肌肉、肝臟和腎臟中NFLX和BBH的Cmax分別為418.05、230.76 μg/kg；1745.94、901.09 μg/kg；1143.45、997.09 μg/kg，tp分別為1.5和1.5 h、1.5和2.0 h、1.5和2.0 h，AUC0-∞分別為7682.00、5596.30 μg/(kg·h)；31236.90、19096.85 μg/(kg·h)；22593.93、37509.17 μg/(kg·h)；NFLX和BBH在眼斑擬石首魚(yú)體內(nèi)消除速度較慢，灌服給藥后肌肉、肝臟和腎臟的t1/2β分別為33.41、61.81 h；20.44、15.04 h；30.28、23.43 h。按450 mg/kg劑量連續(xù)5 d口灌給藥后，眼斑擬石首魚(yú)血漿、肌肉、肝臟、腎臟中的NFLX和BBH殘留消除半衰期(t1/2)分別為30.24、33.33 h；40.76、61.60 h；38.68、36.96 h；43.77、59.40 h。以10 μg/kg為最高殘留限量，肌肉作為食用靶組織，在本試驗(yàn)條件下，建議休藥期不得少于12 d。

諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑；眼斑擬石首魚(yú)；藥代動(dòng)力學(xué)；殘留消除

諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑(NFLX and BBH premix)為農(nóng)業(yè)部《獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》2003版[1]中收錄的抗菌藥物，用于治療由弧菌、嗜水氣單菌、愛(ài)德華氏菌、柱狀黃桿菌等引起養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)的出血病、爛鰓病、腸炎、腹水病、敗血癥等疾病?！缎戮帩O藥手冊(cè)》中規(guī)定其休藥期為500度日[2]。目前，諾氟沙星在大黃魚(yú)[3]、鯉魚(yú)[4]、草魚(yú)[5]、羅非魚(yú)[6]、鰻魚(yú)[7]等水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)均有研究報(bào)道，鹽酸小檗堿僅在草魚(yú)[8]、羅非魚(yú)[9]有研究報(bào)道。而諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑在動(dòng)物體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)和殘留消除方面的研究還未見(jiàn)報(bào)道。本研究以南方重要的海水魚(yú)養(yǎng)殖品種眼斑擬石首魚(yú)為研究對(duì)象，研究諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑在其體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)和殘留消除規(guī)律，以期為諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑在石首魚(yú)科魚(yú)類(lèi)疾病防治中的規(guī)范應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 實(shí)驗(yàn)魚(yú)：購(gòu)自湛江市南三島張老板魚(yú)排，預(yù)先檢測(cè)確認(rèn)魚(yú)體內(nèi)無(wú)諾氟沙星、鹽酸小檗堿殘留。暫養(yǎng)1周后，挑選健康、規(guī)格整齊(體質(zhì)量為256.35±9.18 g)的魚(yú)作為實(shí)驗(yàn)用魚(yú)。

諾氟沙星標(biāo)準(zhǔn)品純度為99.5%，由中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所提供，批號(hào)20102；鹽酸小檗堿標(biāo)準(zhǔn)品純度為98%，批號(hào)275920，購(gòu)自J&K百靈威科技有限公司；諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑(每100 g預(yù)混劑中含諾氟沙星9 g，鹽酸小檗堿2 g)，購(gòu)自蘇州科牧動(dòng)物藥品有限公司；肝素鈉，購(gòu)自江蘇萬(wàn)邦生化醫(yī)藥股份有限公司；HPLC級(jí)甲醇，購(gòu)自天津四友精細(xì)化學(xué)品有限公司；甲酸、乙酸、無(wú)水硫酸鈉等均為分析純；超純水由實(shí)驗(yàn)室制備。

1.2 儀器設(shè)備 TSQ QUANTUMN ACESSES液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀：美國(guó)Thermo Fisher公司；電子天平(XS-205)：METTLER-TOLEDO公司；IKA-T25均質(zhì)機(jī)(德國(guó))，購(gòu)于上海珂淮儀器有限公司；Sartorius arium-611VF超純水機(jī)：購(gòu)自上海摩速科學(xué)器材有限公司；HR2860勻漿機(jī)：荷蘭皇家飛利浦電子公司；XW-80A漩渦儀：上海比朗儀器有限公司；HU3120B超聲波清洗器：海比朗儀器有限公司；TDL-5-A離心機(jī)：上海安亭科學(xué)儀器廠(chǎng)；美國(guó)N-EVAP111氮吹儀：美國(guó)Organomation公司。

1.3 方法

1.3.1 諾氟沙星、鹽酸小檗堿標(biāo)準(zhǔn)溶液配置 分別準(zhǔn)確稱(chēng)取諾氟沙星和鹽酸小檗堿標(biāo)準(zhǔn)品各10 mg(精確至0.0001 g)，分別置于2個(gè)10 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容到10 mL,配成質(zhì)量濃度1.0 mg/mL，再用甲醇稀釋100倍成質(zhì)量濃度10 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，-4 ℃冰箱儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>

諾氟沙星、鹽酸小檗堿標(biāo)準(zhǔn)工作液：分別準(zhǔn)確

量取10 μg/mL的諾氟沙星和鹽酸小檗堿標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用甲醇：水(V/V=1∶1)分別稀釋成濃度為0、1、2、5、10、20、50、100 ng/mL等8個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液。

1.3.2 色譜條件和質(zhì)譜條件 色譜條柱和質(zhì)譜條件參考文獻(xiàn)[10](表1、表2)。

表1 梯度洗脫程序

表2 諾氟沙星、鹽酸小檗堿的保留時(shí)間和質(zhì)譜條件

1.3.3 給藥及樣品采集 藥物代謝組：將眼斑擬石首魚(yú)(試驗(yàn)前停喂24 h)隨機(jī)分成15個(gè)組(分別與采樣時(shí)間點(diǎn)對(duì)應(yīng))，每組10尾魚(yú)置于0.3 m3的玻璃鋼桶中，設(shè)1個(gè)空白對(duì)照組。諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑按450 mg/(kg.bw)劑量用醫(yī)用輸液管口灌實(shí)驗(yàn)魚(yú)，于給藥后0.15、0.25、0.5、1、1.5、2、4、6、8、12、24、48、72、96、120 h取樣，每組隨機(jī)抽取5尾魚(yú)，尾靜脈采血后快速取肝臟、腎臟、背部肌肉樣品適量。每尾魚(yú)血液分別置于抗凝離心管中，5000 r/min離心8 min，取上清液于離心管中于-20 ℃冰箱保存。肝臟、腎臟、肌肉分別用錫紙包好放-20 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

殘留消除組：眼斑擬石首魚(yú)隨機(jī)分成8個(gè)組(設(shè)1個(gè)空白對(duì)照組)，每組10尾魚(yú)，連續(xù)5 d在上午9點(diǎn)鐘，按450 mg/(kg.bw)劑量口灌諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑，分別在最后一次給藥后0.5、1、2、3、5、7、10 d采樣，采樣方法同藥代組。

1.3.4 樣品處理 參照文獻(xiàn)[4]進(jìn)行。

1.3.5 數(shù)據(jù)處理 用Excel2010處理藥時(shí)數(shù)據(jù)和藥物殘留消除數(shù)據(jù)的回歸處理，模型的擬合和參數(shù)推算用DAS3.0軟件處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 諾氟沙星和鹽酸小檗堿在眼斑擬石首魚(yú)體內(nèi)的藥-時(shí)曲線(xiàn) 眼斑擬石首魚(yú)按450 mg/(kg.bw)口灌諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑后，NFLX和BBH藥-時(shí)曲線(xiàn)見(jiàn)圖1。從圖1可以看出：血漿和組織中的藥-時(shí)曲線(xiàn)均呈現(xiàn)雙峰現(xiàn)象，血漿、肌肉、肝臟、腎臟中的NFLX兩次出峰時(shí)間(tp)分別為1、6 h；1.5、8 h；1.5、8 h；1.5、8 h，兩次Cmax分別為670.58、603.98 μg/L；418.05、391.36 μg/kg；1745.94、1665.33 μg/kg；1143.45、1096.25 μg/kg，兩峰相距5～6.5 h，藥物主要分布在肝臟和腎臟中，血漿和肌肉中分布較少；BBH在血漿、肌肉、肝臟均分別為1.5和8 h、在腎臟中兩次出峰時(shí)間(tp)分別為2 h和12 h，兩次Cmax分別為267.21、251.05 μg/L；230.76、220.52 μg/kg；1315.048、1211.25 μg/kg；997.09、936.39 μg/kg，兩峰相距時(shí)間為6.5～10 h，藥物主要分布于肝臟和腎臟中，血漿和肌肉中分布較少。

圖1 口灌給藥后眼斑擬石首魚(yú)血漿和組織中NFLX和BBH的c-t曲線(xiàn)

2.2 諾氟沙星和鹽酸小檗堿在眼斑擬石首魚(yú)血漿中的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù) 經(jīng)DAS3.0軟件分析，諾氟沙星和鹽酸小檗堿在血漿中的藥-時(shí)數(shù)據(jù)均符合一級(jí)吸收二室模型，其藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)見(jiàn)表3，理論方程分別為：CNFLX=398.53e-0.08t+52.59e-0.02t-451.12e-2.34t，CBBH=67.02e-0.05t+134.74e-0.02t-201.76e-0.84t。

表3 口灌給藥后眼斑擬石首魚(yú)血漿中NFLX和BBH的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

2.3 諾氟沙星和鹽酸小檗堿在眼斑擬石首魚(yú)組織中的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù) 用統(tǒng)計(jì)矩原理推算出NFLX和BBH在眼斑擬石首魚(yú)體內(nèi)組織中的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)(表4)。NFLX的Cmax：肝臟>腎臟>肌肉，AUC0-∞：肝臟>腎臟>肌肉，MRT0-∞：肌肉>腎臟>肝臟，t1/2：肌肉>腎臟>肝臟；BBH的Cmax：腎臟>肝臟>肌肉，AUC0-∞：腎臟>肝臟>肌肉，MRT0-∞：肌肉>腎臟>肝臟，t1/2：肌肉>腎臟>肝臟。結(jié)果說(shuō)明諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑口灌給藥后NFLX和BBH主要分布在肝臟和腎臟中，肌肉中分布較少；平均駐留時(shí)間在肌肉中最長(zhǎng)，腎臟次之，肝臟最短；消除半衰期也是在肌肉中最長(zhǎng)，腎臟次之，肝臟最短。

表4 口灌給藥后眼斑擬石首魚(yú)組織中NFLX和BBH的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

2.4 諾氟沙星和鹽酸小檗堿在眼斑擬石首魚(yú)體內(nèi)的消除 眼斑擬石首魚(yú)按450 mg/kg.bw劑量連續(xù)5 d口灌諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑后，藥物的消除曲線(xiàn)見(jiàn)圖2。藥-時(shí)數(shù)據(jù)用Excel 2010回歸處理后得到藥物濃度與時(shí)間的消除曲線(xiàn)方程及相關(guān)參數(shù)(表5)。從圖2和表5可看出，停藥后，NFLX殘留量在腎臟中最高，血漿中次之，肌肉中最低，t1/2(h)：腎臟>肌肉>肝臟>血漿，說(shuō)明NFLX殘留在腎臟中消除最慢，肌肉次之，在血漿中消除最快。BBH殘留量在腎臟中最高，肝臟中次之，肌肉中最低，t1/2(h)：肌肉>腎臟>肝臟>血漿，說(shuō)明BBH殘留在肌肉中消除最慢，腎臟中次之，血漿中消除最快。在停藥后第10天，各組織中仍能檢測(cè)到NFLX和BBH殘留量，但肌肉和血漿中的NFLX和BBH殘留量已低于0.01 mg/kg。

表5 口灌給藥后眼斑擬石首魚(yú)血漿和組織中NFLX和BBH的消除曲線(xiàn)方程及參數(shù)

圖2 眼斑擬石首魚(yú)按450 mg/(kg.bw)劑量連續(xù)5 d口灌給藥后血漿和組織中NFLX和BBH的消除曲線(xiàn)

3 討論與小結(jié)

3.1 NFLX和BBH在眼斑擬石首魚(yú)血漿和組織中的藥時(shí)曲線(xiàn)特征 許多藥物口服后的藥-時(shí)曲線(xiàn)均呈雙峰現(xiàn)象[11-12]?？诜幬镞M(jìn)入動(dòng)物機(jī)體內(nèi)，先經(jīng)肝臟攝取后，以代謝物或原藥形式進(jìn)入膽汁和腸道，一部分被腸道細(xì)菌水解重吸收，借靜脈血液返回肝臟，形成肝腸循環(huán)，出現(xiàn)雙峰現(xiàn)象。由于胃腸道上下兩個(gè)部位管壁對(duì)藥物的通透性不同、吸收時(shí)間和吸收速率并不一致，也可能引起雙峰現(xiàn)象。孫銘等[13]報(bào)道NFLX按10 mg/L 藥浴和30 mg/kg藥餌連續(xù) 5 d給藥后，中國(guó)對(duì)蝦血淋巴和肝臟、肌肉、鰓組織中的藥-時(shí)數(shù)據(jù)均出現(xiàn)雙峰現(xiàn)象。秦青英[8]按30 mg/(kg.bw)劑量口灌給藥后，羅非魚(yú)血漿、肌肉、肝臟和腎臟等組織中的藥-時(shí)數(shù)據(jù)也都出現(xiàn)雙峰現(xiàn)象。本試驗(yàn)在水溫28±2 ℃、鹽度28條件下，眼斑擬石首魚(yú)以450 mg/(kg.bw)單劑量口灌諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑后，NFLX和BBH在血漿和組織中的藥時(shí)曲線(xiàn)均出現(xiàn)明顯的雙峰現(xiàn)象，與上述研究結(jié)果相符，該現(xiàn)象很可能與肝腸循環(huán)和非齊性吸收有關(guān)[13-14]。

3.2 NFLX和BBH在眼斑擬石首魚(yú)體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征 諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑按450 mg/(kg.bw)劑量口灌給藥后，NFLX和BBH在眼斑擬石首魚(yú)血漿中的藥時(shí)曲線(xiàn)均符合一級(jí)吸收二室模型。與NFLX在鯉魚(yú)[4]、草魚(yú)[5]、羅非魚(yú)[6]、鰻鱺[7]等水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)房室模型一致，與BBH在羅非魚(yú)[8]、狗[15]、兔[16]、鼠[17]等動(dòng)物體內(nèi)的房室模型一致，而與在健康人[18]和草魚(yú)[9]體內(nèi)的房室模型不一致，可能與研究對(duì)象不同有關(guān)。

NFLX和BBH在血漿、肌肉、肝臟、腎臟中的藥物濃度均在1.5 h和2 h左右出現(xiàn)峰值，其Cmax分別為385.40、144.89 μg/L；418.05、230.76 μg/kg；1745.94、901.09 μg/kg；1143.45、997.09 μg/kg，AUC0-∞分別為8252.80、6454.52 μg/(L.h)；7682.00、5596.30 μg/(kg.h)；31236.90、19096.85 μg/(kg.h)；22593.93、37509.17 μg/(kg.h)。NFLX和BBH藥物在肝臟和腎臟中分布較多，血漿、肌肉中分布較少。諾氟沙星在大黃魚(yú)[19]和大菱鲆[20]血漿中達(dá)峰時(shí)間均為2 h左右，峰濃度分別為0.89 μg/mL和8.36 μg/mL。羅非魚(yú)[8]口灌鹽酸小檗堿后血漿中的達(dá)峰時(shí)間為1 h，峰濃度為3.50 μg/mL。本試驗(yàn)中諾氟沙星在眼斑擬石首魚(yú)血漿中的達(dá)峰時(shí)間比大黃魚(yú)和大菱鲆早，峰濃度比大黃魚(yú)和大菱鲆低；鹽酸小檗堿在眼斑擬石首魚(yú)血漿中的達(dá)峰時(shí)間比在羅非魚(yú)血漿中晚，但峰濃度比羅非魚(yú)高很多。說(shuō)明諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑口灌給藥后，NFLX在眼斑擬石首魚(yú)體內(nèi)吸收比大黃魚(yú)和大菱魚(yú)快，但藥物吸收效果比大黃魚(yú)和大菱魚(yú)要差一些，BBH在眼斑擬石首魚(yú)體內(nèi)吸收比羅非魚(yú)慢，但吸收效果比羅非魚(yú)好。

NFLX的t1/2β分別為：血漿(43.26 h)>肌肉(33.41 h)>腎臟(30.28 h)>肝臟(20.44 h)，MRT0-∞分別為：肌肉(31.80 h)>腎臟(27.837 h)>血漿(27.06 h)>肝臟(23.04 h)；BBH的t1/2β分別為：肌肉(61.81 h)>血漿(27.30 h)>腎臟(23.43 h)>肝臟(15.04 h)，MRT0-∞分別為：肌肉(51.02 h)>腎臟(35.51 h)>血漿(32.41 h)>肝臟(26.15 h)。說(shuō)明NFLX在眼斑擬石首魚(yú)肌肉中平均駐留時(shí)間最長(zhǎng)，在血漿中消除最慢；BBH則肌肉中平均駐留時(shí)間最長(zhǎng)、消除最慢。與NFLX在大菱鲆和羅非魚(yú)血漿和組織中的t1/2β和MRT0-∞比較，諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑口灌給藥后，NFLX在眼斑擬石首魚(yú)血漿和組織中的殘留消除比在大菱鲆(血漿23.22 h、肌肉12.39 h、肝臟8.81 h、腎臟23.55 h)中慢一些，BBH消除卻比在羅非魚(yú)(血漿63.84 h、肌肉392.02 h、肝臟90.64 h、腎臟38.11 h)中要快很多，這可能與研究對(duì)象、環(huán)境條件、藥物純度等不同有關(guān)。

3.3 眼斑擬石首魚(yú)連續(xù)口灌諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑后的殘留消除及休藥期 曲曉榮等[20]報(bào)道NFLX按30 mg/(kg.bw)劑量連續(xù)5 d混飼灌胃給藥后，大菱鲆腎臟中殘留量最高，消除最慢，停藥30 d殘留量仍為0.051 μg/g，肌肉中殘留消除最快，在停藥后第8天，藥物殘留濃度為0.017 μg/g，第10天低于檢測(cè)限。劉秀紅等[21]研究牙鲆按30 mg/(kg.bw)劑量連續(xù)5 d混飼灌胃給藥后，腎臟中的NFLX殘留量最為明顯，停藥28 d后藥物殘留量仍接近0.05 μg/g，肌肉中藥物消除最快，停藥后4 d殘留濃度為0.015 μg/g，8 d后低于檢測(cè)限。羅非魚(yú)[8]按30 mg/(kg.bw)劑量連續(xù)5 d口灌鹽酸小檗堿，在停藥后第10天，羅非魚(yú)肝臟中的殘留量高(0.091 μg/g)，腎臟中次之(0.059 μg/g)，肌肉中為0.008 μg/g、血漿最低(0.001 μg/mL)。本試驗(yàn)諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑按450 mg/(kg.bw)劑量連續(xù)5 d口灌給藥后，NFLX和BBH在眼斑擬石首魚(yú)體內(nèi)殘留消除較慢，在停藥后第10天，各組織中均能檢測(cè)到NFLX和BBH殘留量，NFLX和BBH在腎臟、肝臟、肌肉、血漿中的殘留量分別為0.019和0.091 μg/g、0.008和0.013 μg/g、0.009和0.007 μg/g、0.005和0.003 μg/mL，NFLX在腎臟的殘留量已接近于大菱鲆(30 d)和牙鲆(28 d)殘留量，在肌肉中的殘留量略高于大菱鲆(8 d)和牙鲆(4 d)的殘留水平；BBH殘留量在腎臟中高于羅非魚(yú)的殘留水平，在肝臟、肌肉和血漿中的殘留量均低于或按近在羅非魚(yú)相應(yīng)組織中的殘留水平。說(shuō)明NFLX和BBH在眼斑擬石首魚(yú)腎臟中的藥物殘留消除要比大菱鲆和牙鲆快，比羅非魚(yú)稍慢，但在肌肉中的殘留消除卻比大菱鲆、牙鲆和羅非魚(yú)稍慢，這可能與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、給藥劑量、實(shí)驗(yàn)條件等不同有關(guān)。

休藥期是根據(jù)藥物允許殘留量及藥物在食用組織中消除速度來(lái)確定[22]。目前，我國(guó)和歐盟等國(guó)家對(duì)水產(chǎn)品中諾氟沙星和鹽酸小檗堿均暫無(wú)明確的殘留限量要求。根據(jù)日本“肯定列表制度”[23]規(guī)定，本研究將諾氟沙星和鹽酸小檗堿的最高殘留限量暫定為0.01 mg/kg，在停藥后第10天，眼斑擬石首魚(yú)肌肉中諾氟沙星和鹽酸小檗堿的藥物濃度為9.44 μg/kg和6.91 μg/kg，已經(jīng)低于設(shè)定的最大殘留限量(0.01 mg/kg)。若以肌肉作為食用靶組織，休藥期就為10 d，考慮本實(shí)驗(yàn)未檢測(cè)皮膚中的藥物含量，為充分保證消費(fèi)者的安全，應(yīng)將休藥期適當(dāng)延長(zhǎng)。因此，在本試驗(yàn)條件下，建議諾氟沙星鹽酸小檗堿預(yù)混劑在眼斑擬石首魚(yú)體內(nèi)的休藥期不得少于12 d。

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(編輯：侯向輝)

Pharmacokinetics and the Residues Elimination Regularity of Norfloxacin and Berberine Hydrochloride Premix inSciaenopsocellatus

TANG Ju-fen1,2, HUANG Yu1,2,CAI Jia1,2, LIAO Jian-meng3, QIN Qing-ying1,2, JIAN Ji-chang1,2*

(1.GuangdongOceanUniversity,FisheriesCollege,Zhanjiang,Guangdong524088,China;2.GuangdongProvincialKeyLaboratoryofPathogenicBiologyandEpidemiologyforAquaticEconomicAnimals,Zhanjiang,Guangdong524088,China; 3.GuangdongZhanjiangInstituteofSupervisionandTestonQualityandMeasure,Zhanjiang,Guangdong524022,China)

To investigate the pharmacokinetics and elimination regularity of residues in plasma and tissue ofSciaenopsocellatuswith a single dose of 450 mg/kg body weight after oral administration at the water temperature of 28±2 ℃ and salinity of 28 by HPLC-MS/MS method， Pharmacokinetics parameters were calculated by DAS3.0 software．Results showed that norfloxacin (NFLX) and berberine hydrochloride (BBH) premix concentration-time date in plasma ofS.ocellatuswere described as a two-compartment model with first-order absorption. The peak time (tp), the maximum concentration (Cmax), the area under the concentration-time curve (AUC0-∞) and the elimination half-life (tl/2β) of NFLX and BBH in plasma were 1.20 and 1.79 h, 358.40 and 144.89 μg/L, 8252.80 and 6454.52 μg/(L·h), 43.26 and 27.30 h, respectively. The present results indicated that NFLX and BBH inS.ocellatusafter oral administration had the ability to distribute widely to diverse tissues and eliminated slowly. TheCmaxof NFLX and BBH in muscle, liver and kidney were 418.05 and 230.76 μg/kg, 1745.94 and 901.09 μg/kg, 1143.45 and 997.09 μg/kg,tpwere 1.5 and 1.5 h, 1.5 and 2.0 h, 1.5 and 2.0 h,AUC0-∞were 7682.00 and 5596.30 μg/(kg·h), 31236.90 and 19096.85 μg/(kg·h), 22593.93 and 37509.17 μg/(kg·h),t1/2βwere 33.41 and 61.81 h, 20.44 and 15.04 h, 30.28 and 23.43 h, respectively.S.ocellatusafter oral administration continuous with 450 mg/kg dose for 5 days, Thet1/2of NFLX and BBH in plasma, muscle, liver and kidney were 30.24 and 33.33 h, 40.76 and 61.60 h, 38.68 and 36.96 h, 43.77 and 59.40 h, respectively. If the maximum residue limits (MRL) for 0.01 mg/kg and the muscles as edible target tissue, the withdraw period should be no less than 12 days under this experimental condition.

norfloxacin and berberine hydrochloride premix；Sciaenopsocellatus；pharmacokinetics；elimination of residues

農(nóng)業(yè)部公益性行業(yè)專(zhuān)項(xiàng)(20120385)；廣東省科技計(jì)劃(農(nóng)村科技領(lǐng)域)項(xiàng)目(2015A020209181)

湯菊芬，高級(jí)工程師，從事水產(chǎn)動(dòng)物病害防治研究。

簡(jiǎn)紀(jì)常。E-mail：jianjc@gmail.com

2016-06-20

A

1002-1280 (2016) 09-0034-07

S859.796