郭冰琪

再生障礙性貧血患者血清IL-17及IL-6表達及臨床意義

郭冰琪

再生障礙性貧血；白細胞介素-17；白細胞介素-6

再生障礙性貧血（aplastic anemia）是指由多種病因所致的造血功能障礙并由此而引起全血細胞減少的血液系統(tǒng)疾病，臨床表現(xiàn)主要為骨髓組織增生異常低下以及全血細胞的減少[1]。關(guān)于再生障礙性貧血的發(fā)生機制，目前相關(guān)的研究還尚無明確定論，有研究表明免疫功能的紊亂以及細胞因子的失調(diào)可能參與了其發(fā)生發(fā)展過程[2]。白細胞介素-17（interleukin-17，IL-17）是由Th17細胞所分泌的細胞因子，有研究證實它在自身免疫性疾病、腫瘤以及感染等疾病的發(fā)病機制中具有重要的作用[3]。白細胞介素-6 （interleukin-6，IL-6）作為由骨髓基質(zhì)細胞所分泌的細胞因子，在急性期反應(yīng)、免疫應(yīng)答以及造血調(diào)節(jié)等過程中均發(fā)揮重要的作用[4]。本研究通過檢測血清IL-17和IL-6在再生障礙性貧血患者外周血中的水平，探討兩種細胞因子在再生障礙性貧血發(fā)生機制中的作用?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2012年5月—2015年5月我院收治的再生障礙性貧血患者為本研究對象，納入標準：（1）經(jīng)骨髓細胞學及實驗室檢查證實符合再生障礙性貧血的診斷標準[5]；（2）近期內(nèi)未接受過糖皮質(zhì)激素以及免疫抑制劑等藥物的治療；（3）符合醫(yī)學倫理學要求；（4）患者及家屬知情同意，并簽署知情同意書。排除標準：（1）孕產(chǎn)婦、哺乳期婦女；（2）合并有其它自身免疫性疾病者；（3）合并有肝、腎功能障礙者；（4）近期有發(fā)生感染、發(fā)熱等癥狀；（5）合并有其他可能影響本研究結(jié)果的疾病如惡性腫瘤等。

符合納入標準患者共79例，其中急性再生障礙性貧血患者組37例，男22例，女15例；年齡34～58歲，平均（43.6±5.8）歲；慢性再生障礙性貧血患者組42例；男28例，女14例；年齡23～61歲，平均（41.7± 6.9）歲。同期隨機選取80名健康體檢者作為對照，其中男49名，女31名；年齡33～64歲，平均（45.2±5.5）歲。三組的性別、年齡差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方 法 于清晨空腹狀態(tài)下抽取肘部靜脈血3mL，然后以2000rpm的轉(zhuǎn)速離心，將分離得到的血清置于-80℃下保存，留待后用。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測三組對象的血清IL-17和IL-6水平。ELISA試劑盒由北京中山生物技術(shù)公司提供，嚴格按照試劑盒上的操作說明進行相關(guān)操作。

1.3 統(tǒng)計學方法 應(yīng)用SPSS19.0軟件進行數(shù)據(jù)錄入及統(tǒng)計分析，計量資料采用（±s） 表示，多組獨立樣本的比較采用方差分析，兩兩比較采用Dunnett-t檢驗，相關(guān)性采用Pearson直線相關(guān)分析，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 三組血清IL-17和IL-6水平比較 三組血清IL-17、IL-6水平經(jīng)方差分析比較，差異有統(tǒng)計學意義（F=12.068，10.175，P＜0.05）。兩兩比較，急性再生障礙性貧血組和慢性再生障礙性貧血組患者血清IL-17、IL-6水平高于健康對照組，急性再生障礙性貧血組與慢性再生障礙性貧血組患者血清IL-17、IL-6水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 三組血清IL-17和IL-6表達水平（pg/mL±s）

表1 三組血清IL-17和IL-6表達水平（pg/mL±s）

注：與健康對照組比較，△P＜0.05

組別急性再生障礙性貧血組慢性再生障礙性貧血組健康對照組例數(shù)37 42 80 F P IL-17 213.72±21.62△202.58±23.05△86.36±22.89 12.068 0.023 IL-6 21.04±2.97△20.68±3.11△11.70±3.32 10.175 0.039

2.2 再生障礙性貧血患者血清IL-17、IL-6水平相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson直線相關(guān)分析，再生障礙性貧血患者的血清IL-17與IL-6水平呈正相關(guān)關(guān)系，r= 0.672，有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

3 討論

再生障礙性貧血作為臨床常見、骨髓組織造血生理功能嚴重衰竭的自身免疫性疾病，嚴重威脅患者的健康。目前多數(shù)研究者認為T淋巴細胞所介導(dǎo)的骨髓造血干細胞特異性免疫功能方面的異常是導(dǎo)致其發(fā)病的主要機制[6]。

Th17細胞是一群可以合成和分泌大量IL-17細胞因子的T淋巴細胞亞群，研究證實它在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展、自身免疫性疾病以及移植排斥反應(yīng)等過程中具有重要的作用[7]。IL-17是由155個氨基酸所構(gòu)成的同型二聚體，主要通過活化絲裂原激活蛋白激酶以及核因子途徑，促進各種趨化細胞因子以及黏附分子的合成和釋放，以使嗜中性粒細胞大量聚集并發(fā)揮生物學效應(yīng)，并最終影響炎癥感染反應(yīng)，自身免疫性疾病以及惡性腫瘤等的病理發(fā)生及發(fā)展過程[8]。本研究結(jié)果顯示，急、慢性再生障礙性貧血組患者血清IL-17水平高于對照組。提示血清IL-17可能通過直接或者間接作用而抑制骨髓造血，從而在再生障礙性貧血的發(fā)生機制中發(fā)揮重要作用，與有關(guān)研究結(jié)果一致[9]。此外，急、慢性再生障礙性貧血患者血清IL-17水平比較，差異無統(tǒng)計學意義，提示IL-17在再生障礙性貧血發(fā)生及發(fā)展過程中發(fā)揮效應(yīng)與病情急緩關(guān)系不大。

血清IL-6是由單核-吞噬細胞以及血管內(nèi)皮細胞等合成及分泌的細胞因子，它參與了免疫系統(tǒng)功能調(diào)節(jié)、骨髓組織造血功能調(diào)控等方面[10]。有研究證實，再生障礙性貧血患者的骨髓以及外周血中的IL-17水平較正常人高的同時，也通過誘導(dǎo)巨噬細胞分泌IL-6及IL-8等因子而參與再生障礙性貧血的病理發(fā)展過程[11]。本研究結(jié)果顯示，急、慢性再生障礙性貧血患者的血清IL-17、IL-6水平均高于健康對照組。提示血清IL-6確實參與了再生障礙性貧血的發(fā)生，與有關(guān)研究結(jié)果相似[12]?？赡苁且驗樵偕系K性貧血患者的造血功能低下，以致于機體代償性分泌IL-6促進造血，但IL-6長時間處于較高水平，可能會引起造血干細胞長期處于一種細胞增殖異常的過程，而缺乏必需的休整和修復(fù)的時間，以致造血干細胞的增殖功能減退，出現(xiàn)造血干及幼稚細胞的增殖活躍而外周細胞并沒有增多[13]。也有研究者認為病毒感染或者其他因素激活了單核巨噬細胞及T細胞而增加IL-6的分泌，并使正常的造血調(diào)控失衡而誘導(dǎo)發(fā)生再生障礙性貧血[14]。進一步的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)再生障礙性貧血患者的血清IL-17與IL-6水平之間呈正相關(guān)關(guān)系，r=0.672。提示IL-6在再生障礙性貧血發(fā)生機制中具有重要作用以外，同時也為Th17細胞的分化過程提供了重要的環(huán)境，從而間接誘導(dǎo)IL-17的合成和分泌，以導(dǎo)致免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)功能紊亂而發(fā)生再生障礙性貧血。當然也能用升高的IL-17能夠誘導(dǎo)巨噬細胞分泌IL-6解釋這一現(xiàn)象。

綜上所述，血清IL-17和IL-6參與了再生障礙性貧血的發(fā)生及發(fā)展過程，深入研究兩種細胞因子在再生障礙性貧血發(fā)病中的機制可為臨床治療提供重要的指導(dǎo)。

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（收稿：2015-09-11 修回：2015-11-30）

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