李 樂，郝志香

（1.新鄉(xiāng)市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，河南 新鄉(xiāng) 453000；2.新鄉(xiāng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南 新鄉(xiāng) 453000）

一起豬偽狂犬病的診斷與防治

李 樂1，郝志香2

（1.新鄉(xiāng)市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，河南 新鄉(xiāng) 453000；2.新鄉(xiāng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南 新鄉(xiāng) 453000）

豬偽狂犬病是由豬偽狂犬病毒（Pseudorabiesvirus，PRV）引起的豬的急性傳染病。該病在豬呈爆發(fā)性流行。引起妊娠母豬流產(chǎn)、死胎，公豬不育，新生仔豬的大量死亡，育肥豬呼吸困難、生長(zhǎng)停滯等。本病廣泛分布于世界各地。近年來，隨著我國(guó)集約化、規(guī)?；B(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，從國(guó)外引進(jìn)種豬較多，使我國(guó)豬偽狂犬病呈多發(fā)趨勢(shì)，發(fā)病區(qū)域不斷擴(kuò)大，且病勢(shì)日益惡化，有多個(gè)省市均有報(bào)道。它以種豬的嚴(yán)重繁殖障礙、仔豬的腦脊髓炎—腹瀉、豬的呼吸道綜合征和生長(zhǎng)發(fā)育受阻等臨床形式表現(xiàn)，給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。2016年3月新鄉(xiāng)縣某豬場(chǎng)發(fā)生疑似豬偽狂犬病，通過系統(tǒng)的調(diào)查診斷，確診為豬偽狂犬病。

豬偽狂犬??；診斷；防治

1 流行病學(xué)調(diào)查

發(fā)病早期多以懷孕母豬流產(chǎn)和死胎為先兆，近三分之一的妊娠母豬在預(yù)產(chǎn)期前兩周前發(fā)生流產(chǎn)，產(chǎn)出死胎，青年母豬和空懷母豬出現(xiàn)返情而屢配不孕或不發(fā)情，飲食欲正常，體溫不高；新生仔豬第1 d表現(xiàn)正常，從第2 d開始發(fā)病，體溫升高41～41.5℃，出生3～5 d是死亡高峰期，死亡率80%以上，同時(shí)，發(fā)病仔豬表現(xiàn)出共濟(jì)失調(diào)、頭頸歪斜、轉(zhuǎn)圈運(yùn)動(dòng)等神經(jīng)癥狀，怕冷，呼吸困難，嘔吐，拉稀，一旦發(fā)病，突然死亡；兩周齡以內(nèi)的仔豬感染該病后，病情極嚴(yán)重，發(fā)病死亡率100%，仔豬突然發(fā)病，體溫上升達(dá)41℃以上，精神極度委頓，發(fā)抖，運(yùn)動(dòng)不協(xié)調(diào)，痙攣，嘔吐，腹瀉等；斷奶后的仔豬主要表現(xiàn)為呼吸困難，體溫39～41℃，主要表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀，拉稀，嘔吐等，嚴(yán)重影響豬只的發(fā)育生長(zhǎng)，發(fā)病率在30%以下，死亡率在16%以下，如果拉黃色稀糞時(shí)，常以死亡為轉(zhuǎn)歸；成年豬一般為隱性感染，出現(xiàn)咳嗽、打噴嚏等呼吸系統(tǒng)癥狀。

2 病理變化

剖解流產(chǎn)胎兒發(fā)現(xiàn)全身彌漫性出血，頭部水腫，腦膜出血，脾臟出血或壞死，膀胱出血，全身淋巴結(jié)腫大，周邊出血，肺、心外膜、腎臟有針尖狀出血點(diǎn)。死亡仔豬除上述病理變化外，腦脊液、胸腹腔液、心包液顯著增多，肝、脾表面可見大量針尖到米粒大小的灰白色病灶，胃腸黏膜卡他性或出血性炎癥，扁桃體充血、水腫，有少量出血點(diǎn)，喉頭出血，肺淤血、水腫，心肌松軟。

3 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 樣品采集與處理

采集解剖死亡豬后的組織（脾、肺、肝、腎、扁桃體及腹股溝淋巴結(jié)）樣品2份，加入少許PBS液稀釋研磨，在-70℃反復(fù)凍融3次后，4℃ 12 000 rpm離心5 min，取上清置-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>

3.2 核酸提取

核酸提取采用RNA/DAN純化試劑盒（購(gòu)自紀(jì)元亨），具體操作方法如下：取已處理樣品，加入裂解液600 μL，充分顛倒混勻，室溫靜置3～5 min；將液體吸入吸附柱中，13 000 rpm離心30 s；棄去收集管中的液體，加入600 μL洗液，13 000 rpm離心30 s，重復(fù)一次；棄去收集管中液體，13 000 rpm空柱2 min，以除去殘留液；將吸附柱移入新的1.5 mL離心管中，向中央加入洗脫液25～50 μL，室溫靜置1 min，13 000 rpm離心30 s，離心管中的液體即為病毒核酸模板。

3.3 豬偽狂犬病毒熒光PCR鑒定

豬偽狂犬病毒（PRV）熒光PCR鑒定采用豬偽狂犬病毒（PRV）核酸擴(kuò)增試劑盒（PCR-熒光探針法），購(gòu)自廣州維伯鑫生物科技有限公司，檢測(cè)方法及判定標(biāo)準(zhǔn)按照試劑說明書進(jìn)行。對(duì)兩份病料提取的模板及陽性質(zhì)控和陰性質(zhì)控進(jìn)行熒光PCR擴(kuò)增后，得到的結(jié)果見圖1。根據(jù)結(jié)果（圖1）可以看出，兩份病料均為豬偽狂犬病毒陽性。

圖1 臨床組織樣品熒光PCR鑒定PRV結(jié)果

4 結(jié)果

根據(jù)實(shí)驗(yàn)室診斷結(jié)果，可以確診該豬場(chǎng)是由豬偽狂犬病毒感染引起的發(fā)病和死亡。

5 防治

5.1 陽性豬場(chǎng)的防治

陽性豬場(chǎng)及時(shí)隔離病豬，立即對(duì)全場(chǎng)未發(fā)病豬只全部進(jìn)行基因缺失弱毒疫苗的緊急接種，提供保護(hù)，3日齡內(nèi)仔豬每頭注射1頭份，種豬每頭注射2頭份，對(duì)控制疫情起到了較好效果。

5.2 陰性豬場(chǎng)的防治

陰性豬場(chǎng)調(diào)入豬規(guī)范檢疫方可引入，為避免因引種帶入病原的風(fēng)險(xiǎn)，提倡自繁自養(yǎng)；實(shí)施封閉式管理，豬場(chǎng)大門口來往人員、車輛的嚴(yán)格控制與消毒，控制生產(chǎn)一線人員外出，嚴(yán)格細(xì)化回場(chǎng)后的消毒凈化工作，謝絕場(chǎng)外人員進(jìn)入生產(chǎn)區(qū)參觀；實(shí)行單一性飼養(yǎng)；建立健全符合本場(chǎng)實(shí)際的免疫程序，嚴(yán)格本病的免疫接種的操作規(guī)程，選用高效優(yōu)質(zhì)基因缺失滅活疫苗，使易感豬群始終得到有效保護(hù)，后備種豬基礎(chǔ)免疫后，于配種前1個(gè)月，肌肉注射1頭份，妊娠母豬產(chǎn)前4周，肌肉注射1頭份，生產(chǎn)公豬每6個(gè)月，肌肉注射1頭份，；建立健全和貫徹落實(shí)獸醫(yī)防疫規(guī)章制度；制度化檢測(cè)，逐步淘汰，建立無偽狂犬病的種豬群和豬場(chǎng)。

6 討論

豬偽狂犬病流行呈上升趨勢(shì)，控制與凈化豬偽狂犬病是需要采取綜合防制措施，其中正確地進(jìn)行免疫接種是一個(gè)最有效的方式。要規(guī)范的引種，嚴(yán)謹(jǐn)?shù)纳锇踩胧?，引種時(shí)加強(qiáng)檢疫措施，定期血清監(jiān)測(cè)與病豬的果斷淘汰，科學(xué)的免疫程序，良好的飼養(yǎng)管理以及優(yōu)質(zhì)高效的基因缺失疫苗的合理應(yīng)用等。國(guó)內(nèi)研制成功偽狂犬的常規(guī)弱毒疫苗、滅活疫苗以及基因缺失疫苗，能有效地防止狂犬病。目前基層主要注意對(duì)高致病性豬藍(lán)耳病、豬瘟、豬丹毒等傳染病的防疫，而對(duì)豬偽狂犬病的防疫有所松懈。建議根據(jù)本地疫情情況，加強(qiáng)防疫。消毒是殺滅病原、防止疫情蔓延的有效手段。

（編輯：李善祥）

S858.28

B

1006-799X(2016)22-0064-02

李 樂（1987-），男，河南新鄉(xiāng)人，助理獸醫(yī)師，主要研究方向?yàn)閯?dòng)物及動(dòng)物產(chǎn)品檢疫。