王春，曾白華，楊琴

(綿陽市人民醫(yī)院檢驗科，四川 綿陽 621000)

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常見陰道炎病原體檢測及微生態(tài)狀況分析

王春，曾白華，楊琴

(綿陽市人民醫(yī)院檢驗科，四川 綿陽 621000)

目的：了解本地區(qū)女性陰道炎患者病原體感染及微生態(tài)狀況，為陰道炎的臨床診治提供依據(jù)。方法：采用陰道分泌物常規(guī)顯微鏡檢聯(lián)合需氧菌陰道炎(aerobic vaginitis,AV)/細(xì)菌性陰道病(bacterial vaginosis,BV)五項預(yù)成酶譜分析技術(shù)對21 812例婦科就診患者的陰道分泌物進(jìn)行檢測。結(jié)果：(1)21 812例陰道分泌物送檢標(biāo)本檢出假絲酵母菌陰道炎(vulvovaginal candidiasis,VVC)、BV、AV、滴蟲性陰道炎(trichomonas vaginitis,TV)單一感染及各類混合感染共計13 510例，總檢出率61.94%；13 510例感染標(biāo)本中，單一感染6 391例占47.31%，混合感染7 119例占52.69%。混合感染中，AV合并VVC 2 323例，占32.63%,構(gòu)成比最高；其次為AV合并BV 2 113例占29.68%。(2)檢測結(jié)果按4個月份段進(jìn)行統(tǒng)計分析，VVC在1～3月檢出844例(15.12%)；混合感染在7～9月檢出2 328例(42.48%)，檢出率均明顯高于其他月份段，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。(3)21 812例陰道分泌物送檢標(biāo)本中，乳酸桿菌失衡檢出率78.19%，常見陰道炎與陰道菌群失調(diào)密切相關(guān)，VVC、BV、AV、TV及混合感染菌群失調(diào)的檢出百分比分別為83.85%、95.67%、100%、96.97%、100%。結(jié)論：本地區(qū)常見陰道炎及混合感染發(fā)生率高，陰道菌群失調(diào)多見，混合性陰道炎以AV混合感染為主，VVC和混合性陰道炎的感染與季節(jié)相關(guān)。

陰道炎；感染；檢測；微生態(tài)

陰道炎是婦科的常見病和多發(fā)病，感染復(fù)發(fā)率高，嚴(yán)重影響廣大育齡婦女身心健康。如炎癥上行還可引起宮腔炎、盆腔炎、宮頸糜爛等，嚴(yán)重者可以導(dǎo)致宮頸癌，與早產(chǎn)、不孕癥等生殖道其它疾病相關(guān)[1-2]。根據(jù)感染病原體的不同，陰道炎在臨床治療上存在很大差異。如果不能明確病原體種類，則治療效果往往不明顯，還可能導(dǎo)致菌群失調(diào)或誘發(fā)耐藥性，明確陰道炎感染類型對準(zhǔn)確診斷治療及降低復(fù)發(fā)率尤為重要。實驗室檢測中，陰道分泌物常規(guī)檢查是確定女性泌尿生殖道感染與否及種類的重要指標(biāo)，近年來隨著檢驗技術(shù)不斷進(jìn)步和發(fā)展，陰道分泌物預(yù)成酶譜分析技術(shù)在臨床的應(yīng)用越來越廣泛，其功能學(xué)指標(biāo)聯(lián)合陰道分泌物常規(guī)檢測可快速、全面地反映陰道是否存在炎癥及微生態(tài)的平衡狀態(tài)，為診療陰道炎及其炎癥類型提供依據(jù)，越來越受到臨床的重視[3]。本文通過對2014年10月至2015年9月本院收治的21 812例陰道分泌物標(biāo)本的常規(guī)顯微鏡檢與需氧菌陰道炎(aerobic vaginitis,AV)/細(xì)菌性陰道病(bacterial vaginosis,BV)五項功能學(xué)指標(biāo)檢測結(jié)果進(jìn)行回顧性統(tǒng)計分析，旨在為陰道炎的疾病預(yù)防和臨床治療提供一定參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

21 812例標(biāo)本均為來源于2014年10月至2015年9月因外陰不適、陰道分泌物異常等在綿陽市人民醫(yī)院婦科就診患者，年齡12～71歲。受檢者檢查前24 h內(nèi)無性生活、盆浴、陰道灌洗及局部上藥等。標(biāo)本由婦科醫(yī)生用無菌拭子自患者陰道后穹隆處取出陰道分泌物兩份，以清晰看到棉簽上有分泌物附著為準(zhǔn)。一份用于陰道分泌物常規(guī)顯微鏡檢測，另一份用于AV/ BV五項聯(lián)合檢測。

1.2 儀器與試劑

AV/BV 五項聯(lián)合測定試劑盒、恒溫干浴器、無菌棉拭子(由北京中生金域診斷技術(shù)有限公司提供)；顯微鏡 (由日本Olympus公司生產(chǎn) )；10%KOH溶液 (自配)。

1.3 檢測方法

取其中1支拭子將陰道分泌物涂于兩張載玻片上，1張滴加生理鹽水后，直接于光鏡下檢查陰道清潔度及有無滴蟲；另l張玻片上滴入10%KOH溶液后，直接于光鏡下檢查有無菌絲或芽孢。

另1支附著有陰道分泌物的拭子用于AV/BV五項聯(lián)合測定，由檢驗科技術(shù)人員嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作：將試劑盒從2～8 ℃取出平衡到室溫開始使用，在取好陰道分泌物拭子的試管中滴加聯(lián)檢稀釋液 8～10滴，充分刷洗后用手指輕輕擠壓試管壁，使拭子吸附的液體流回試管，得到樣本液；在五聯(lián)檢卡的5個孔中每孔滴加 1滴樣本液 (約35 μL)，以沒過反應(yīng)孔 1/2 為宜，之后在“唾液酸苷酶”反應(yīng)孔中滴加1滴“顯色液 A”。將反應(yīng)裝置放在恒溫干浴器(48 ℃)中顯色 10 min后在“凝固酶”反應(yīng)孔中滴加1滴“顯色液 B”，繼續(xù)反應(yīng)3 min后判讀結(jié)果。

1.4 結(jié)果判斷

陰道清潔度、霉菌、滴蟲的常規(guī)檢驗等按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版的判斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。

聯(lián)合生化檢測結(jié)果的判讀：(1)過氧化氫：陰性紅色或紫色，陽性顯藍(lán)色，提示陰道微生態(tài)被破壞(感染期或感染治療后未恢復(fù))；(2)唾液酸苷酶：不顯色或黃色為陰性，顯紅、紫、藍(lán)色為陽性，提示BV(致病菌厭氧菌增加)；(3)白細(xì)胞酯酶：陰性不顯色；陽性顯藍(lán)色或綠色，提示有炎癥；(4)β-葡萄糖醛酸苷酶：不顯色為陰性，顯藍(lán)色或綠色為陽性；(5)凝固酶不顯色或黃色為陰性，紫紅色為陽性。β-葡萄糖醛酸苷酶、凝固酶兩者同時陽性或其中一樣陽性提示AV(致病菌菌需氧菌增加)。

1.5 統(tǒng)計學(xué)分析

采用SPSS 15.0進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析處理，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 陰道分泌物送檢標(biāo)本幾種常見陰道炎檢出情況

21 812例陰道分泌物送檢標(biāo)本檢出VVC、BV、AV、TV單一感染及各類混合感染共計13 510例，總檢出率61.94%。常見陰道炎檢出及構(gòu)成情況，見表1。

表1 13 510例常見陰道感染檢出情況

2.2 不同月份段常見陰道炎及混和感染檢出情況分析

檢測結(jié)果按1～3月、4～6月、7～9月、10～12月4個月份段進(jìn)行統(tǒng)計分析，其中VVC在1～3月檢出844例(15.12%)；混合感染在7～9月檢出2 328例(42.48%)，檢出率均明顯高于其他月份段，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；常見陰道炎與季節(jié)的相關(guān)檢測情況見表2。

表2 4個月份段陰道分泌物病原學(xué)檢測陽性率比較

*P<0.05，與其它月份段相比。

2.3 7 119例陰道炎混合感染相關(guān)情況分析

在7 119例混合感染中，以AV混合感染為主。感染構(gòu)成情況，見表3。

表3 7 119例陰道炎混合感染情況分析

2.4 乳酸桿菌失衡檢測情況分析

采用陰道炎五聯(lián)檢AV/ BV五項功能學(xué)指標(biāo)檢測方法，在21 812例陰道分泌物中檢出乳酸桿菌失衡17 054例，總檢出率78.1 9%。常見陰道炎與陰道菌群失調(diào)密切相關(guān)。相關(guān)檢測情況，見表4。

表4 21 812例陰道分泌物菌群失調(diào)檢出情況

3 討論

女性陰道為開放性腔道，正常情況下陰道內(nèi)陰道菌群以乳桿菌等優(yōu)勢菌為主，構(gòu)成微生態(tài)動態(tài)平衡體系，與宿主、環(huán)境之間相互制約、相互協(xié)調(diào)，這種協(xié)調(diào)作用和動態(tài)平衡對抑制病原微生物入侵起著決定性作用。在一些外源及內(nèi)源等多種因素影響下(如濫用抗生素、不當(dāng)?shù)年幍拦嘞?、全身性免疫低下性疾病、性交、性激素的變化、避孕藥具?，這種生態(tài)平衡可遭到破壞．從而導(dǎo)致陰道微生態(tài)失調(diào)，引起陰道炎癥。

常見陰道炎包括VVC、BV、AV、TV等，其中VVC主要由念珠菌中的白色念珠菌等感染所致，分為白色念珠菌和非白念珠菌性陰道炎。近年來，非白念珠菌(光滑念珠菌、克柔念珠菌、熱帶念珠菌、近平滑念珠菌、偽熱帶念珠菌等)所占比例有所上升。本文統(tǒng)計顯示：在13 510例感染標(biāo)本中，VVC 2 755例占20.39%，檢出率為12.63%；BV 2 310例占17.10%，檢出率10.59%。VVC檢出率高，可能與各種廣譜抗菌藥物、抗腫瘤藥物、腎上腺糖皮質(zhì)激素、免疫抑制性藥物及口服避孕藥等的廣泛應(yīng)用、糖尿病患者的增多以及性行為的開放有一定關(guān)系[5-6]。BV為陰道優(yōu)勢菌乳酸桿菌大量減少，厭氧菌群大量增生導(dǎo)致的菌群紊亂后臨床征候群。本文統(tǒng)計VVC檢出率高于BV，與肖冰冰等[7]調(diào)查顯示一致，而石曉等[8]調(diào)查顯示，BV檢出率高于VVC及TV，表明我國不同地區(qū)分布情況存在一定差異。其原因可能與調(diào)查的時間、季節(jié)、就診人群、不同地區(qū)氣候及衛(wèi)生環(huán)境等存在一定差異有關(guān)[9]。TV是由陰道毛滴蟲感染引起的生殖道炎癥，主要經(jīng)性接觸傳播，極少數(shù)由浴池、廁所間接傳播，屬性傳播感染，本研究統(tǒng)計TV明顯減少，檢出率僅為1.37%，可能是與衛(wèi)生習(xí)慣的改善及衛(wèi)生意識提高有關(guān)。AV是近年來新發(fā)現(xiàn)的一種陰道炎，為由需氧菌感染引起的一種生殖系統(tǒng)疾病，和BV有很多相似的特征，是產(chǎn)科和婦科的高風(fēng)險疾病[10-11]。當(dāng)患AV時，陰道乳酸桿菌減少，陰道壁黏膜充血、水腫，出現(xiàn)膿性分泌物，臨床以陰道異常分泌物、性交痛為主要表現(xiàn)，AV與混合型感染密切相關(guān)。

混合性陰道炎是霉菌、細(xì)菌、滴蟲等二種及以上同時感染的陰道炎，發(fā)生率近年呈上升趨勢。由于檢測方法不同，單方面從AV或BV的角度對混合型感染進(jìn)行統(tǒng)計分析的報道較多見，而將兩者放在一起進(jìn)行統(tǒng)計分析的資料相對較少。本文從這方面切入，對混合性陰道感染進(jìn)行了分析統(tǒng)計，統(tǒng)計顯示本地區(qū)陰道混合感染的發(fā)生率高，構(gòu)成比為52.69%，與國內(nèi)報告一致[12]。我國國內(nèi)報道40%～50%以上的陰道炎為混合型感染，國外報告為30%?；旌细腥局屑?xì)菌性感染占主要地位，本文統(tǒng)計顯示7 119例混合感染中以AV混合感染為多見，總計占69.06%，BV混合感染總計占30.94%。在AV混合感染中，AV與VVC的混合感染多見，占32.63 %，AV合并BV次之，類型與國外的報告一致[13-14]?；旌闲完幍栏腥緳z出率近年來明顯上升除其感染病例確實較多外，可能與檢測水平，檢測技術(shù)的提高，特別是主要引起混合感染的AV近年來的逐漸認(rèn)識及檢測有關(guān)。在工作中應(yīng)重視發(fā)現(xiàn)陰道的混合感染狀態(tài)，明確感染類型，為全面地、有效的治療及降低復(fù)發(fā)率提供依據(jù)。

為研究陰道感染與季節(jié)變化的關(guān)系，本文分4個月份段對其感染情況進(jìn)行了統(tǒng)計分析，統(tǒng)計顯示VVC在1～3月份段感染率15.12%，明顯高于其它3個月份段，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；這可能與當(dāng)?shù)?～3月氣候多雨潮濕有關(guān)；混合感染在7～9月感染率42.48%，明顯高于其它月份段，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。7～9月為氣溫最高的季節(jié)，這個月份段陰道混合感染發(fā)病率高，是否為氣溫上升導(dǎo)致AV易發(fā)生混合感染所致，需要進(jìn)一步資料證實。

陰道炎是臨床常見病多發(fā)病，復(fù)發(fā)率高。資料顯示細(xì)菌性陰道炎臨床治愈率達(dá)90%左右，容易在3個月內(nèi)復(fù)發(fā)[14]，如果反映陰道微生態(tài)平衡的指標(biāo)未恢復(fù)正常，即使陰道炎癥狀、體征及病原體消失，復(fù)發(fā)的可能性仍然很大。在正常狀態(tài)下陰道內(nèi)的乳桿菌，在維持陰道微生態(tài)平衡，防御生殖道感染方面發(fā)揮重要作用。乳酸桿菌分泌過氧化氫，陰道炎AV/ BV五項聯(lián)合檢測技術(shù)即是通過對反映正常陰道菌群生態(tài)狀況的過氧化氫的檢測作為評價陰道微生態(tài)的指標(biāo)，活性高低直接反映了陰道內(nèi)乳酸桿菌數(shù)量。統(tǒng)計顯示，在受檢的21 812例患者中，過氧化氫呈陽性，乳酸桿菌失衡17 054例，檢出率78.19%，常見陰道炎與陰道菌群失調(diào)密切相關(guān)，VVC、BV、AV、TV及混合感染菌群失調(diào)的檢出百分比分別為83.85% 、95.67%、100%、96.97%、100%。而無特殊病原菌的未被定義及分類的陰道微生態(tài)失調(diào)檢出率達(dá)49.36%，說明本地區(qū)女性陰道炎癥中陰道菌群失調(diào)癥常見，應(yīng)引起注意。

綜上所述，本地區(qū)常見陰道炎及陰道炎混合感染發(fā)生率高，在女性陰道炎的診療中實驗室通過菌群和功能檢測給臨床醫(yī)生以預(yù)見性的提案，可減少因癥狀消失但陰道微生態(tài)平衡未完全恢復(fù)而停止治療的表面治愈，也避免因有癥狀但未明確感染類型而反復(fù)持續(xù)用藥的過度治療，對降低女性陰道炎感染復(fù)發(fā)率，減少細(xì)菌耐藥至關(guān)重要。臨床對相應(yīng)的病原體在進(jìn)行抗生素或抗真菌治療的同時，使用一些生物制劑來調(diào)整或維護(hù)陰道內(nèi)環(huán)境的生態(tài)平衡，將治療理念由純粹殺菌轉(zhuǎn)向殺菌同時促菌，并合理應(yīng)用抗生素，是生殖道感染治療的必然趨勢。

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(學(xué)術(shù)編輯：趙明才)

Pathogen detection of common vaginitis and analysison micro-ecological status

WANG Chun，ZENG Bai-hua，YANG Qin

(DepartmentofClinicalLaboratory，People’sHospitalofMianyangCity,Mianyang621000,Sichuan，China)

Objective：To understand the infections of pathogens and micro-ecological status of local female patients with vaginitis,and provide evidence for clinical diagnosis and treatment of vaginitis.Methods：By using routine vaginal microscopy combined with aerobic vaginitis (AV) / bacterial vaginosis ( BV) five pre enzyme spectrum analysis of vaginal secretion in 21812 cases of gynecological patients were detected.Results：There were altogether 13 510 vaginal secretion specimens that had been detected with vulvovaginal candidiasis(VVC),bacterial vaginosis(BV),aerobic vaginitis(AV) and trichomonas vaginitis(TV) and the total detection rate was 61.94%.Among the 13 510 specimens,6 391 specimens(47.31%) were single infection and 7 119 specimens(52.69%) were mixed infection.Among the mixed infection,there were 2323 cases of AV complicated with VVC,which accounted for 32.63%,2113 cases of AV complicated with BV which accounted for 29.68%.The detected results were divided into four segments of month for statistical analysis.844 cases of VVC (15.12%) were detected 1-3 months and 2328 cases of mixed infections (42.48%) were detected 7-9 months.The detection rates were significantly higher than in other segments of month and the differences were statistically significant (P<0.05).The detection rate of lactobacilli dysbacteriosis was 78.19%.Vaginal dysbacteriosis and common vaginitis was closely related.The lactobacilli dysbacteriosis rate of VVC,BV,AV,TV and mixed infection was respectively 83.85%,95.67%,100%,96.97% and 100%.Conclusion：There is a high incidence of common vaginitis and mixed infection in local region.Common vaginitis and mixed infection rate in the region is high,vaginal flora imbalance,mixed vaginitis mixed with AV infection,VVC and mixed vaginitis infection and seasonal correlation.

Vaginitis；Infection；Detection；Micro-ecology

10.3969/j.issn.1005-3697.2016.06.028

2016-01-08

王春(1964-)，女，主管檢驗師。E-mail: 3074627509@qq.com

時間：2017-1-3 22∶01

http://www.cnki.net/kcms/detail/51.1254.R.20170103.2201.056.html

1005-3697(2016)06-0877-04

R711.3

A