張景艷 榮　幸 張永旭

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腹瀉糞便中小腸結(jié)腸炎耶爾森菌檢驗(yàn)的價(jià)值分析

張景艷 榮幸 張永旭

【摘要】目的 探討腹瀉糞便中小腸結(jié)腸炎耶爾森菌檢驗(yàn)的價(jià)值。方法 對362例腹瀉的患者利用培養(yǎng)法、RT-PCR對小腸結(jié)腸炎的耶爾森菌予以檢驗(yàn)，對比檢出率。結(jié)果 RT-PCR在小腸結(jié)腸炎耶爾森菌檢驗(yàn)中的檢出率高于培養(yǎng)法（P＜0．05）。結(jié)論 腹瀉糞便中小腸結(jié)腸炎耶爾森菌采取RT-PCR檢驗(yàn)效果明顯。

【關(guān)鍵詞】培養(yǎng)法；腹瀉糞便；RT-PCR；小腸結(jié)腸炎耶爾森菌

小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌是一種在腸道中傳染的嚴(yán)重疾病，患者往往有胃腸道炎癥、腹瀉癥狀［1］，而且往往出現(xiàn)呼吸道、骨骼等方面的癥狀，由此而引發(fā)的敗血癥幾率比較高，患者通常有較多的腸道外表現(xiàn)，臨床應(yīng)給予重視。家畜、家禽、等均有可能導(dǎo)致此疾病的大范傳播［2］。眾所周知采用RT-PCR與培養(yǎng)法實(shí)施腹瀉糞便檢查，這對于小腸結(jié)腸炎耶爾森菌的臨床檢測有重要意義，而臨床中對于這兩種方法哪種更為準(zhǔn)確還未形成統(tǒng)一認(rèn)知，因此對這兩種方法展開探討、對比具有重要意義。本文選取362例腹瀉的患者，分析RT-PCR與培養(yǎng)方法對耶爾森氏菌的檢出率，報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇我院2014年1月～2015年3月362例腹瀉的患者，其中男208例，女154例，年齡6個(gè)月～73歲，平均年齡（29.2±8.7）歲，年齡小于18歲患者213例，大于18歲患者149例?；颊呔鶠榕疟愦螖?shù)增多，且每天排便次數(shù)均超過3次，糞便性狀均發(fā)生改變。

1.2 方法

均通過RT-PCR與培養(yǎng)法對患者的耶爾森菌進(jìn)行檢驗(yàn)，將糞便采集到的樣本置入Cary-Blair保存液，采集糞便0.5 g，置入生理鹽水，體積為44.5 ml，然后通過增菌液內(nèi)培養(yǎng)。通過RT-PCR法對其予以檢驗(yàn)時(shí)，樣本應(yīng)置于16℃環(huán)境下培養(yǎng)，經(jīng)持續(xù)18 h的培養(yǎng)后，將混合物取出200 μg，經(jīng)DNA提取，其擴(kuò)增長度大約為150 bp，應(yīng)于95℃環(huán)境下完成對應(yīng)的反應(yīng)。設(shè)置對照組，反應(yīng)前后熒光差值作為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行衡量。應(yīng)用培養(yǎng)法對其進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)，把標(biāo)本放在16℃條件之下培養(yǎng)，持續(xù)18 h的培養(yǎng)后，采集5 μg接種于CIN平板，然后放置到25℃環(huán)境下予以培養(yǎng)，持續(xù)24 h，能夠菌落培養(yǎng)的予以初篩，然后與標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行比對［3］。完成后依據(jù)生化檢驗(yàn)與初篩結(jié)果對陰性進(jìn)行判定。并比較兩組患者檢測結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

研究數(shù)據(jù)均采取SPSS 18.0系統(tǒng)軟件實(shí)施統(tǒng)計(jì)處理，計(jì)數(shù)資料通過率進(jìn)行數(shù)據(jù)表示，以χ2進(jìn)行檢驗(yàn)，計(jì)量資料通過（±s）表示，以t進(jìn)行檢測，P＜0.05顯示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

經(jīng)RT-PCR法檢驗(yàn)，362例中有陽性者為67例，陽性率為18.51％，陰性為295例，陰性率為81.49％；經(jīng)培養(yǎng)法檢驗(yàn)，362例中有陽性者為31例，陽性率為8.56％，陰性為331例，陰性率為91.44％。兩組檢驗(yàn)的檢出率對比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

3 討論

小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌最初是1934年時(shí)通過研究報(bào)道被提出，此疾病曾有幾次在世界范圍內(nèi)出現(xiàn)了大流行現(xiàn)象，其主要表現(xiàn)出胃腸型癥狀及腸道外感染。在臨床中，胃腸型癥狀通常表現(xiàn)出腹瀉、腹痛、惡心、嘔吐等癥狀［4-5］；腸道外感染則通常出現(xiàn)肝脾疾病、關(guān)節(jié)炎、自身免疫性病變等。若食用的豬肉、水受到了污染，人往往因此而遭受感染，有的患者極有可能導(dǎo)致醫(yī)院內(nèi)感染的發(fā)生。因?yàn)榕R床中對于耶爾森氏菌并未予以足夠重視，通過非敏感性抗生素的治療，極有可能使得腸道外并發(fā)癥更為嚴(yán)重，有的還會(huì)產(chǎn)生不良預(yù)后。而因?yàn)榛颊吲R床表現(xiàn)癥狀并特異性，而且有的患者出現(xiàn)類似于急性闌尾炎等的臨床癥狀，極易發(fā)生誤診［6］。

對此疾病予以臨床檢測時(shí)，選用RT-PCR與培養(yǎng)法進(jìn)行檢驗(yàn)在臨床中均具有一定意義。在應(yīng)用培養(yǎng)法進(jìn)行臨床檢驗(yàn)時(shí)，操作較為簡便，能夠使得人眼予以判斷的主觀性及難度降低［7］。通過RT-PCR法對疾病進(jìn)行臨床檢驗(yàn)時(shí)，其檢出率與培養(yǎng)法進(jìn)行比較提高，且操作比較簡單，整個(gè)操作過程通常只需2 d，在反應(yīng)后無需予以電泳，降低污染，有效節(jié)約時(shí)間。而且應(yīng)用RT-PCR所得檢驗(yàn)結(jié)果可予以定量分析，由此可明確了解疾病感染程度。臨床中對小腸結(jié)腸炎耶爾森菌采用RT-PCR配合培養(yǎng)法予以臨床檢驗(yàn)時(shí)，能夠使得診斷準(zhǔn)確率提高，臨床意義增加［8］。

在本文研究中，在疾病予以臨床檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)用RT-PCR的檢出陽性率高于培養(yǎng)法的檢出陽性率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。RT-PCR方法檢驗(yàn)效果更具有優(yōu)勢。由此可知，腹瀉糞便的小腸結(jié)腸炎耶爾森菌予以臨床檢驗(yàn)時(shí)，通過RT-PCR與培養(yǎng)法進(jìn)行檢驗(yàn)，其檢出率均具有積極意義，且RT-PCR檢出率更為顯著。

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Test Analysis of Coulson Bacteria in Diarrhea Feces Enterocolitis

ZHANG Jingyan RONG Xing ZHANG Yongxu Department of Clinical Laboratory，Central People's Hospital of Siping，Siping Jilin 136000，China

【Abstract】Objective To study the the value of coulson bacteria in diarrhea feces enterocolitis.Methods 362 cases of diarrhea patients using culture method and rtpcr to enterocolitis coulson bacteria inspection，contrast detection rate.Results RT-PCR in enterocolitis coulson bacteria detection rate was significantly higher than culture method of test（P＜0．05）.Conclusion Diarrhea feces enterocolitis Yale sen bacteria take rt-pcr test effect is obvious．

【Key words】Culture method，Diarrhea feces，RT-PCR，Enterocolitis coulson bacteria

【中圖分類號】R446

【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A

【文章編號】1674-9316（2016）07-0161-02

doi：10．3969/j．issn．1674-9316．2016．07．123

作者單位：吉林省四平市中心人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，吉林 四平 136000