基金項(xiàng)目:貴州省黔西南州重點(diǎn)科研項(xiàng)目(2011-34)。

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速率法定量檢測(cè)臍帶血葡萄糖-6-磷酸脫氫酶結(jié)果分析*

*基金項(xiàng)目:貴州省黔西南州重點(diǎn)科研項(xiàng)目(2011-34)。

盧春晟1，吳海嬰2，馮寧2△，左方財(cái)2，任勇2，夏敏2，黃春燕3

(貴州省興義市人民醫(yī)院：1.輸血科；2.醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科，貴州興義 562400；3.黔西南州人民醫(yī)院婦科，貴州興義 562400)

摘要:目的通過臍帶血葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)定量檢測(cè)，分析G6PD缺乏的發(fā)病情況及對(duì)產(chǎn)婦靜脈血G6PD進(jìn)行追蹤調(diào)查。方法應(yīng)用廣州科方生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的G6PD定量檢測(cè)試劑盒對(duì)253例健康產(chǎn)婦臍帶血進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果253例臍帶血定量檢測(cè)中，檢出G6PD缺乏癥34例，陽性率為13.44%，男性新生兒23例，占9.09%，女性新生兒11例，占4.35%，男女酶活性比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論定量檢測(cè)結(jié)果分析直觀、簡(jiǎn)便、快捷、價(jià)格低廉，利于普遍篩查及早期診斷G6PD缺乏癥。

關(guān)鍵詞:臍帶血；葡萄糖-6-磷酸脫氫酶；速率法；定量檢測(cè)

紅細(xì)胞葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G6PD)缺乏也稱蠶豆病，是華南、西南地區(qū)常見遺傳病[1]，常因?yàn)槟撤N誘因(藥物、感染、食物如蠶豆等)情況發(fā)生溶血、黃疸、貧血及新生兒高膽紅素血癥，嚴(yán)重的可導(dǎo)致核黃疸，醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展對(duì)疾病的診療預(yù)防起著重要的作用。本研究收集本院的臍帶血進(jìn)行G6PD定量測(cè)定，現(xiàn)將檢測(cè)結(jié)果匯報(bào)如下。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來源2011年1月至2014年12月本院正常生產(chǎn)的產(chǎn)婦臍帶血34例，產(chǎn)婦年齡20～38歲，無任何傳染性疾病。

1.2標(biāo)本的采集及保存新生兒出生后10 min內(nèi)取臍血2 mL，置于肝素抗凝管中30 min內(nèi)送檢。

1.3儀器與試劑日立7180生化分析儀，試劑由廣州科方生物技術(shù)有限公司提供。

1.4方法抗凝血以4 000 r/min離心5 min，避開血漿層,用加樣器準(zhǔn)確吸取壓積紅細(xì)胞20 μL，加入到1 mL溶解液中溶解，待紅細(xì)胞完全溶解后(約1～2 min)上機(jī)測(cè)定，待測(cè)時(shí)間不得超過25 min，所有參數(shù)按試劑說明書設(shè)定操作。

1.5結(jié)果判定G6PD>1 300 U/L為正常，60～1 300 U/L為中度缺乏，小于60 U/L為重度缺乏。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 13.0進(jìn)行率的統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

在253例臍血G6PD定量檢測(cè)中，檢出G6PD缺乏癥34例，陽性率為13.44%，男新生兒23例，占總例數(shù)9.09%，女新生兒11例，占例數(shù)4.35%。結(jié)果見表1。中度與重度缺乏男、女之間率的比較，二者差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1　　253例產(chǎn)婦臍血G6PD定量檢測(cè)結(jié)果

*：P<0.05，與女性組比較。

34例臍帶血G6PD缺乏與產(chǎn)婦靜脈血G6PD檢測(cè)結(jié)果一致性檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，從34例臍帶血G6PD缺乏標(biāo)本中，與產(chǎn)婦靜脈血G6PD缺乏符合數(shù)只有11例，符合率為32.35%，(95%CI為70.89%，94.83%)。

3討論

G6PD缺乏產(chǎn)生的機(jī)制，主要是紅細(xì)胞G6PD催化反應(yīng)生成的還原型輔酶Ⅱ(NADPH)是谷胱甘肽還原酶的輔酶，還原型谷胱甘肽(GSH)是保持血紅蛋白穩(wěn)定性及紅細(xì)胞膜完整性的必要條件。細(xì)胞G6PD缺乏者，在服用某些藥物(如抗瘧藥、砜類藥、伯氨喹啉、磺胺藥等)及信用蠶豆后，代謝產(chǎn)生的自由基，或與氧合血紅蛋白作用形成H2O2，使GSH氧化形成氧化型谷胱甘肽(GSSG)。由于GSH降低，血紅蛋白的巰基失去GSH的保護(hù)，被氧化形成Heinz小體。紅細(xì)胞失去巰基保護(hù)而功能受損，導(dǎo)致溶血。

本次對(duì)臍帶血G6PD定量檢測(cè)，陽性率為13.44%(34/253)，且男性多于女性，性別間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。G6PD缺乏癥目前認(rèn)為是瘧疾自然選擇的結(jié)果[2]，在中國(guó)，同一民族不同地區(qū)基因頻率有明顯差別，同一地區(qū)不同民族相差不大[3]，與此次研究結(jié)果一致，本地區(qū)各民族間臍血G6PD缺乏率無顯著差異，這可能與人口流動(dòng)性大的原因相關(guān)。G6PD基因位于X染色體長(zhǎng)臂2區(qū)8帶(Xq2.8)，基因全長(zhǎng)20 114 bp，由13個(gè)外顯子和12個(gè)內(nèi)含子組成，編碼區(qū)長(zhǎng)1 548 bp，編碼515個(gè)氨基酸。G6PD缺乏癥呈X連鎖不完全顯性遺傳，男性因只有一條X染色體，故男性半合子的臨床表現(xiàn)基本為顯著酶缺乏，一般G6PD定量法即可較準(zhǔn)確區(qū)分。

使用臍帶血G6PD缺乏與靜脈血G6PD定量檢測(cè)一致性檢驗(yàn)中，二者一致性較差，這與染色體遺傳有很大關(guān)系。新生兒男性G6PD缺乏比女性例數(shù)多，由于G6PD缺乏癥是一種不完全顯性伴性遺傳病，基因位于X染色體上，男性只有一條X染色體，一旦這唯一的染色體缺失G6PD基因，則表現(xiàn)為G6PD顯著缺乏。而女性有兩條X染色體，如果僅有1條X染色體缺失G6PD基因，則為雜合子，女性雜合子可表現(xiàn)為酶活性正常與G6PD缺乏之間。只有兩條X染色體均缺失G6PD基因，才表現(xiàn)為顯著缺乏[4]。所以男孩的發(fā)病率明顯高于女孩,女性未檢出重度缺乏者。這對(duì)G6PD缺乏癥的早期診斷提供更好的依據(jù)。

G6PD缺乏導(dǎo)致的新生兒黃疸可造成核黃疸死亡或智力低下，對(duì)提高中國(guó)人口素質(zhì)影響巨大，由于G6PD缺乏癥沒有根治的方法，開展孕婦產(chǎn)前以及新生兒疾病的篩查，以及早期預(yù)防和治療措施，具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。臍帶血可代替新生兒血做一些早期疾病篩查，其操作取血簡(jiǎn)單，家屬也易于接受[4]。

速率法是在全自動(dòng)生化分析儀上測(cè)定G6PD活性，與傳統(tǒng)方法相比，具有反應(yīng)量微、試劑用量少、樣本量小、準(zhǔn)確靈敏、低成本、易于實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化和標(biāo)準(zhǔn)化，在10 min左右出結(jié)果，適用大規(guī)模的篩查[6-7]?？梢詫?shí)現(xiàn)早期G6PD缺乏有效干預(yù)及控制。

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·臨床研究·

收稿日期：(2015-09-18)

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2015.24.043A

文章編號(hào)：1673-4130(2015)24-3612-02

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