劉 紅王寶輝王 宇張俊毅王祥艷孫艾楠程顏彬趙李宏

（1 白求恩醫(yī)科大學(xué)制藥廠，吉林 長(zhǎng)春 130012；2 吉林省成大方圓醫(yī)藥連鎖有限公司，吉林 長(zhǎng)春 130041）

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苯環(huán)喹溴銨藥理毒理的研究進(jìn)展

劉 紅1王寶輝1王 宇1張俊毅1王祥艷1孫艾楠1程顏彬1趙李宏2

（1 白求恩醫(yī)科大學(xué)制藥廠，吉林 長(zhǎng)春 130012；2 吉林省成大方圓醫(yī)藥連鎖有限公司，吉林 長(zhǎng)春 130041）

【摘要】變應(yīng)性鼻炎和慢性阻塞性肺病是當(dāng)前兩種發(fā)病率高、發(fā)病人群廣泛、病程纏綿且危害顯著的呼吸系統(tǒng)疾病。作為有針對(duì)性的新一代治療藥物，苯環(huán)喹溴銨是我國(guó)自主研發(fā)的具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的國(guó)家一類新藥，具有廣闊的應(yīng)用前景。

【關(guān)鍵詞】苯環(huán)喹溴銨；藥理；毒理；研究進(jìn)展

變應(yīng)性鼻炎（allergic rhinitis，AR）又稱為過(guò)敏性鼻炎，是特應(yīng)性個(gè)體接觸致敏源后導(dǎo)致的，包含IgE介導(dǎo)的炎性介質(zhì)釋放和多種免疫活性細(xì)胞因子、細(xì)胞因子參與的鼻黏膜慢性反應(yīng)性疾病。主要臨床癥狀包括流涕、鼻塞、鼻癢和打噴嚏，是全球最常見(jiàn)的慢性疾病之一，既影響患者的生活質(zhì)量，又增加整個(gè)社會(huì)的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)［1］。慢性阻塞性肺?。╟hronic obstructive pulmonary disease，COPD）是一以氣流受限為特征的疾病，常呈現(xiàn)進(jìn)行性發(fā)展，與肺部對(duì)有害氣體或有毒顆粒的異常炎性反應(yīng)有關(guān)。根據(jù)WHO發(fā)布的研究成果表明，到2020年COPD將成為世界慢性疾病致病和死亡原因的第三位［2］。

作為針對(duì)上述疾病的、新一代的治療藥物，苯環(huán)喹溴銨（bencycloquidium bromide，BCQB）的化學(xué)名為3-｛（2-環(huán)戊基-2-羥基-2-苯基）乙氧基｝-1-甲基-溴化-1-氮雜雙環(huán)｛2，2，2｝辛烷［2］。它是北京嘉事聯(lián)博醫(yī)藥科技有限公司研發(fā)的具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的創(chuàng)新型化合物，其臨床上可用于慢性阻塞性肺?。?］和變應(yīng)性鼻炎［1］，屬于國(guó)家1.1類新藥［4］。本文通過(guò)查閱相關(guān)文獻(xiàn)，就新藥BCQB藥理學(xué)和毒理學(xué)部分的最新研究情況，進(jìn)行綜述。

1 藥理作用

1.1抗超敏性、變應(yīng)性鼻炎：李娟等以10%的2，4二異氰酸甲苯酯（TDI）橄欖油溶液進(jìn)行豚鼠雙側(cè)鼻腔給藥，建立豚鼠超敏性鼻炎的模型組；以橄欖油溶液代替10%的TDI橄欖油溶液進(jìn)行豚鼠雙側(cè)鼻腔給藥作為溶媒對(duì)照組；再將治療組分為BCQB大、中、小3個(gè)劑量組和硫酸阿托品組，共計(jì)6個(gè)組。2周后的結(jié)果顯示，經(jīng)鼻給予BCQB的治療組能明顯緩解超敏性鼻炎豚鼠鼻癢、噴嚏和清涕等癥狀，降低豚鼠鼻黏膜中的組胺濃度，減少鼻黏膜中的嗜酸粒細(xì)胞，對(duì)豚鼠超敏性鼻炎有明顯的治療作用［5］。在另一組實(shí)驗(yàn)中，李娟等實(shí)驗(yàn)人員以卵清白蛋白（Ova）和Al（OH）3建立大鼠變應(yīng)性鼻炎模型作為模型組；再將BCQB分為大、中、小3個(gè)劑量組，倍氯米松組以及溶媒對(duì)照組共計(jì)6個(gè)組，以大鼠的癥狀、鼻黏膜組織形態(tài)、單側(cè)鼻分泌物重量、血清和鼻分泌物中Ova特異性IgE為考察指標(biāo)進(jìn)行分析比較。2周后的結(jié)果顯示，與模型組相比，給予BCQB的各劑量組大鼠鼻炎癥狀明顯改善，大中劑量組大鼠鼻黏膜的組織形態(tài)改變明顯減輕，大劑量組大鼠血清和鼻黏膜中的Ova特異性IgE水平及鼻分泌物量均明顯降低，治療作用明顯［6］。

1.2抗炎止癢：李娟等［7］使用二甲苯誘導(dǎo)小鼠建立耳腫脹模型，使用冰醋酸誘發(fā)小鼠建立毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)模型，使用磷酸組胺誘導(dǎo)豚鼠建立致癢模型，經(jīng)鼻給予大、中、小3個(gè)劑量的BCQB，以溶媒、阿托品、氯雷他定和強(qiáng)的松龍為對(duì)照。結(jié)果顯示，BCQB能較好地抑制二甲苯所誘發(fā)的小鼠耳殼炎性腫脹程度，明顯降低冰醋酸誘發(fā)的小鼠毛細(xì)血管通透性亢進(jìn)，緩解磷酸組胺的致癢作用，而且表現(xiàn)出一定的量效關(guān)系。

1.3對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的作用：李娟等［8］將BCQB分成大、中、小3個(gè)劑量組，經(jīng)鼻黏膜給藥，考察小鼠的精神神經(jīng)活動(dòng)、激怒反應(yīng)、自主活動(dòng)、支氣管分泌和小腸蠕動(dòng)情況，同時(shí)考察記錄Beagle犬血壓、心電圖、心率、心律以及呼吸頻率和幅度。結(jié)果顯示，BCQB對(duì)小鼠的中樞神經(jīng)系統(tǒng)有一定的抑制作用（后可緩解），能減少支氣管的腺體分泌，降低小腸的蠕動(dòng)；而對(duì)麻醉的Beagle犬的血壓、心電圖、心率、心律以及呼吸頻率和幅度均無(wú)明顯的影響。

1.4選擇性拮抗乙酰膽堿受體（M受體）亞型中M1、M3受體：李娟等［9］將表達(dá)單一的M受體亞型的中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞株（CHO）：CHOM1（表達(dá)M1受體）、CHOM2（表達(dá)M2受體）、CHOM3（表達(dá)M3受體），與［3H］-二苯羥乙酸奎寧酯（［3H］-QNB）進(jìn)行飽和實(shí)驗(yàn)，以及競(jìng)爭(zhēng)性抑制藥和［3H］-QNB與M受體亞型的競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合實(shí)驗(yàn)，計(jì)算3株細(xì)胞分別與［3H］-QNB的解離平衡常數(shù)（Kd值）和抑制常數(shù)（Ki值）。再通過(guò)離體膀胱肌條實(shí)驗(yàn)，評(píng)價(jià)BCQB干預(yù)乙酰膽堿對(duì)膀胱肌條作用，計(jì)算競(jìng)爭(zhēng)性拮抗作用強(qiáng)度值（pA2值）。結(jié)果顯示，BCQB對(duì)3種細(xì)胞的抑制強(qiáng)度為CHOM3＞CHOM1＞CHOM2，對(duì)CHOM3和CHOM1的抑制能力相似，均明顯高于對(duì)CHOM2的抑制能力，即可選擇性拮抗M1和M3受體亞型；此外，BCQB還有拮抗乙酰膽堿對(duì)離體膀胱肌條的收縮作用。

1.5對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響：李娟等［10］選取雄性昆明小鼠，隨機(jī)分為溶媒組，BCQB高、中、低3個(gè)劑量組（5.86、2.93、1.47 mg/kg）及戊乙奎醚組（2.25 mg/kg），按5 μL/10 g劑量給藥，經(jīng)鼻，每天1次，持續(xù)1個(gè)月，采用Morris水迷宮和跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)作為評(píng)價(jià)方法。結(jié)果顯示，BCQB長(zhǎng)期經(jīng)鼻給藥，對(duì)小鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力沒(méi)有影響，原因可能與BCQB不能透過(guò)血腦屏障相關(guān)。

1.6對(duì)大鼠肝微粒體細(xì)胞色素P450（CYP450）酶的抑制作用：孫魯寧等［11］采用探針底物法考察了BCQB對(duì)大鼠肝微粒體CYP450酶的抑制作用。具體方法為，將CYP450酶6種亞型的7種特異性探針底物非那西?。–YP1A2）、S-美芬妥英（CYP2C11）、右美沙芬（CYP2D1/2）、甲苯磺丁脲（CYP2C6）、氯唑沙宗（CYP2E1）、咪達(dá)唑侖（CYP3A1/2）和睪酮（CYP3A1/2）分別與大鼠肝微粒體及系列濃度的BCQB溶液進(jìn)行溫孵反應(yīng)，合并處理后的微粒體溶液，采用LC-MS/MS法同時(shí)測(cè)定底物代謝產(chǎn)物的含量，計(jì)算IC50值，并用探針底物法進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果顯示，BCQB對(duì)CYP2D1/2可能有抑制作用，對(duì)其他亞型無(wú)抑制作用。

1.7對(duì)大鼠肝臟CYP450酶的誘導(dǎo)作用：孫魯寧等［4］將BCQB分為低、中、高3個(gè)劑量組（范圍1、3、9 mg/kg），對(duì)比空白組，對(duì)大鼠連續(xù)給藥后，處死取肝制備微粒體。以大鼠肝臟臟器系數(shù)、肝微粒體CYP450蛋白含量和肝微粒體CYP1A1/2、CYP3A1/2酶活性為考察指標(biāo)，采用HPLC-MS/MS法和底物法進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果顯示，BCQB3個(gè)劑量組與空白組在肝臟臟器系數(shù)、CYP450蛋白含量和CYP1A1/2酶活性上午明顯差異，而且對(duì)CYP3A1/2酶的活性也未高于空白組，即對(duì)大鼠肝臟CYP450酶均無(wú)誘導(dǎo)作用。

2 毒理作用

2.1生殖毒性：李練兵等［12］將BCQB分成低中高3個(gè)劑量組（范圍27、162、972 μg/kg，相當(dāng)于人臨床擬用劑量的6.36和216倍）和1個(gè)溶劑對(duì)照組，以大鼠一般狀況、體質(zhì)量變化、交配率、受孕率、生育率、出生存活率、著床率、吸收胎率、出生體質(zhì)量、離乳體質(zhì)量和生殖系統(tǒng)組織學(xué)檢查為指標(biāo)進(jìn)行考察。結(jié)果顯示，BCQB在27～162 μg/kg范圍內(nèi)對(duì)大鼠無(wú)明顯生殖毒性作用；但是給予972 μg/kg劑量條件下，對(duì)大鼠精子顯示出了一定的生殖毒性作用。

2.2急毒作用：李正等［13］采用將BCQB經(jīng)鼻給藥已經(jīng)禁食12 h的大鼠，給藥容量標(biāo)準(zhǔn)為0.1 μg/g，劑量范圍為163.84～500.00 mg/kg，組間劑量比為1∶0.8。給藥持續(xù)14 d，期間觀察結(jié)果顯示，給藥后1～30 min，大劑量組大鼠開(kāi)始出現(xiàn)全身肌肉痙攣、呼吸加快急促、全身無(wú)力、運(yùn)動(dòng)困難、四肢抽搐以及死亡，而且約80%的大鼠死亡時(shí)間在30 min以內(nèi)，其余存活大鼠在給藥8 h后恢復(fù)正常，2周內(nèi)再無(wú)死亡現(xiàn)象出現(xiàn)；對(duì)死亡大鼠解剖顯示，裸眼下心、肝、脾、肺、腎和腦等器官無(wú)明顯異常。

2.3慢毒作用：李正等［13］采用Bliss法求出急毒試驗(yàn)中大鼠的半數(shù)致死量（LD50），并以LD50的1/100、1/200和1/400作為BCQB的大（3.00 mg/kg）、中（1.50 mg/kg）和?。?.75 mg/kg）劑量，另設(shè)溶劑對(duì)照組，考察BCQB對(duì)大鼠的慢性毒性。結(jié)果顯示，大鼠鼻黏膜給藥的LD50為300.38 mg/kg，95%可信限為263.58～342.31 mg/kg。各劑量組連續(xù)給藥6個(gè)月，期間大鼠的一般特征、精神狀態(tài)、毛發(fā)、體質(zhì)量、臟器系數(shù)、腎功能、肝功能、血液生化、血液學(xué)、大體解剖和組織病理學(xué)檢查均未出現(xiàn)明顯的毒性作用，僅僅在大、中劑量組有一定的毒性反應(yīng)，小劑量則無(wú)明顯改變。因?yàn)樾┝恳呀?jīng)是臨床給藥劑量的167倍，所以，BCQB噴鼻劑仍然是安全的。

2.4對(duì)血糖、肌酸酐、血尿素氮和腎功能的影響：Li 等［14］選取66只beagle犬（雌雄各半），以考察BCQB的亞慢性毒性及體內(nèi)毒物代謝。采取經(jīng)鼻給藥途徑，給藥劑量分為低（2.5 mg/kg）、中（5.0 mg/kg）、高（10.0 mg/kg）3種，持續(xù)時(shí)間為91 d。結(jié)果顯示，BCQB的3個(gè)給藥劑量均能降低雄性、雌性Beagle犬的血糖水平，其中，中、高劑量組在經(jīng)歷91 d的重復(fù)給藥后，血糖水平降低更為顯著。與此相反，BCQB的中、高給藥劑量組有升高雌性Beagle犬肌酸酐的趨勢(shì)，同時(shí)，高劑量給藥組有升高雄性、雌性Beagle犬血尿素氮的趨勢(shì)。此外，相對(duì)于單劑量給藥方式，經(jīng)歷91 d的重復(fù)性給藥后，BCQB在腎臟中的濃度最高。

2.5皮膚致敏作用：李娟選取健康豚鼠來(lái)考察BCQB對(duì)局部給藥皮膚的致敏作用。將豚鼠于試驗(yàn)前24 h時(shí)，剪去背部?jī)蓚?cè)毛（范圍3 cm×3 cm），分成陽(yáng)性對(duì)照組、BCQB空白溶媒對(duì)照組和BCQB組，分別涂2% 2，4-二硝基氯苯0.5毫升/只、空白溶媒0.5毫升/只和48 mg/mLBCQB0.5毫升/只，再用油紙和紗布分別覆蓋，膠布固定6 h后，去除受試物，同樣操作分別于第7天、14天時(shí)重復(fù)。結(jié)果與陽(yáng)性對(duì)照組相比，BCQB組受試豚鼠皮膚并未出現(xiàn)紅斑、紅腫等過(guò)敏性反應(yīng)［1］。

2.6鼻黏膜刺激作用：李娟選取健康家兔來(lái)考察BCQB對(duì)鼻黏膜局部給藥皮膚的刺激作用。將家兔分成生理鹽水組、溶媒對(duì)照組和BCQB組，連續(xù)給藥1周，每天分2次給藥，確保藥物與黏膜接觸時(shí)間至少達(dá)到4 h。結(jié)果與生理鹽水組相比，BCQB組受試家兔鼻黏膜僅有輕度干燥，無(wú)其他明顯病理改變，無(wú)刺激性作用［1］。

2.7對(duì)家兔瞳孔的影響：李娟選取健康的、對(duì)光反射呈陽(yáng)性的家兔來(lái)考察BCQB給藥后，對(duì)瞳孔大小的影響。將已經(jīng)禁食12 h的家兔分成1%阿托品對(duì)照組、溶媒對(duì)照組和BCQB大、中、小3個(gè)劑量組，給藥后分別于15 min、1 h和2 h光照家兔雙側(cè)瞳孔，用游標(biāo)卡尺測(cè)量瞳孔大小。結(jié)果顯示，BCQB經(jīng)鼻給藥對(duì)家兔瞳孔大小有明顯的影響，但是持續(xù)時(shí)間較短，中小劑量組2 h后可恢復(fù)，對(duì)家兔瞳孔的對(duì)光反射無(wú)影響［1］。

3 小 結(jié)

綜合上述藥理、毒理學(xué)研究資料，可以看出苯環(huán)喹溴銨對(duì)M1、M3受體的拮抗作用具有高度的選擇性，能有效降低M1、M3受體密度［1］，發(fā)揮抗敏作用，能有效治療變應(yīng)性鼻炎和慢性阻塞性肺病，而且不良反應(yīng)和不良反應(yīng)少，安全性高。目前，苯環(huán)喹溴銨的鼻用噴霧劑正處于Ⅲ期臨床研究階段［11］，未來(lái)一定會(huì)成為臨床的一線用藥。

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［9］ 李娟，何海霞，周遠(yuǎn)大，等.苯環(huán)喹溴銨的毒蕈堿樣乙酰膽堿受體亞

中圖分類號(hào)：R9

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1671-8194（2016）04-0043-02

Research Progress of Pharmacological Effects and T oxicological Information of Bencycloquidium Bromide

LIU Hong1， WANG Bao-hui1， WANG Yu1， ZHANG Jun-yi1， WANG Xiang-yan1， SUN Ai-nan1， CHENG Yan-bin1， ZHAO Li-hong2
（1 Pharmaceutical Factory Norman Bethune University of Medical Science， Changchun 130012， China； 2 Jilin Province Chengda Fangyuan Pharmaceutical Co，Ltd.， Changchun 130041， China）

［Abstract］At present， allergic rhinitis and chronic obstructive pulmonary disease are the two kinds of respiratory diseases， with the features of high incidence， widespread population incidence， long course and remarkable harm. As a new generation of targeted therapeutic drug， bencycloquidium bromide is an independent intellectual property rights and national class of drug that would get broad application prospect.

［Key words］Bencycloquidium bromide； Pharmacological effects； Toxicological information； Research progress