張萬林 （陜西省略陽縣樂素河鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站724300）

趙云平 （陜西省略陽縣白雀寺鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站724300）

淺談雞血清采集存在問題及對策

張萬林 （陜西省略陽縣樂素河鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站724300）

趙云平 （陜西省略陽縣白雀寺鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站724300）

通過近年來在禽類病原學(xué)監(jiān)測及免疫抗體檢測時(shí)采集雞血清出現(xiàn)的血清膠凍狀現(xiàn)象，分析存在的原因，通過工作實(shí)踐提出解決辦法，供畜牧獸醫(yī)人員參考。

雞血清；膠凍狀；采血方法；對策

隨著畜牧獸醫(yī)工作的不斷發(fā)展，動(dòng)物疫病監(jiān)測和免疫抗體檢測在動(dòng)物疫病防控工作中起到了重要作用。樂素河鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站在2010年～2016春季動(dòng)物防疫結(jié)束時(shí)多次采集雞血清，不斷摸索，總結(jié)出了一種較經(jīng)濟(jì)、實(shí)用、科學(xué)的雞翅靜脈采血方法，為保證各鎮(zhèn)以后雞血清送檢質(zhì)量和抗體檢測的準(zhǔn)確性，現(xiàn)就雞血清采集存在問題、采集方法、保存方法及送檢過程介紹如下。

1 雞血清分離容易出現(xiàn)的問題

按照上級要求，鄉(xiāng)鎮(zhèn)獸醫(yī)站防疫工作結(jié)束時(shí)，要在本鎮(zhèn)防疫區(qū)域分別采集豬、牛、羊、雞、犬血清各10頭（只）份報(bào)送縣市省畜牧獸醫(yī)行政管理部門進(jìn)行免疫抗體檢測。別的動(dòng)物血清都容易分離，雞血清每年都出現(xiàn)膠凍狀，特別在今年連續(xù)3次采血分離失敗給我們的工作帶來了很大困難，也為免疫抗體檢測工作造成障礙。

2 原因分析

2.1 進(jìn)食太飽

一般我們采血時(shí)間都是下午和晚上，雞剛進(jìn)舍休息，農(nóng)村都是散養(yǎng)雞，早上給飼喂大量的糧食后就讓雞自行放養(yǎng)，成天都在覓食。因此，下午進(jìn)舍時(shí)正是飽食。但因我們的工作需要，白天去無法抓到雞，只能等到晚上。

2.2 缺水

農(nóng)戶零星散養(yǎng)雞，設(shè)備條件都差，基本上沒有飲水設(shè)施，雞的飲水靠自己尋覓，多數(shù)靠青綠草料中的水分供給，特別是春天，地草正在萌芽階段，氣候又干燥，雞一天食入大量精料，覓水遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了生理需要，造成體內(nèi)嚴(yán)重缺水，血液濃稠會(huì)影響血清的分離，發(fā)生血彌。

2.3 采血操作程序錯(cuò)誤，出現(xiàn)溶血

采血時(shí)血液垂直推入試管是一種錯(cuò)誤的方法，很容易造成溶血；采血消毒不嚴(yán)可能造成細(xì)菌感染也會(huì)影響血清分離，使用抗凝劑也有可能是出現(xiàn)血清膠凍狀的主要原因。

2.4 溫度影響

分離血清時(shí)在離心機(jī)上分離受溫度影響不太大，但自然分離時(shí)，溫度的高低很重要，關(guān)系到血清分離的成敗，溫度過低很可能使血液中的纖維蛋白和膠原蛋白凝固，造成血清膠凍狀。溫度過高時(shí)造成血液水分揮發(fā)，血清可能因缺水而形成膠凍狀。

2.5 與飼料種類有關(guān)

經(jīng)調(diào)查和親自實(shí)踐操作若干年發(fā)現(xiàn)，長期飼喂精飼料，購買配合料及顆粒飼料飼養(yǎng)的雞肥胖，血液都比較濃稠，血清不好分離，甚至分離出來的血清多數(shù)是膠凍狀。散養(yǎng)在農(nóng)村的雞，長期自己覓食青草料和樹林里昆蟲，血清較好分離。另外和雞的品種也有關(guān)，本地雞水土氣溫適應(yīng)性強(qiáng)，出現(xiàn)的可能性極小。

3 雞的正確采血方法

為了確實(shí)解決基層站采集禽類血清普遍存在的問題，使免疫抗體檢測和病原學(xué)監(jiān)測數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性、實(shí)用性、科學(xué)性。

3.1 采血器械

一次性真空采血管或清洗干凈并消毒過青霉素小瓶，一次性采血針頭或5ml一次性注射器，止血鉗，酒精，棉球，試管，試管架，離心機(jī)，記號筆，冰箱，采樣登記表。

3.2 被采雞選擇

采血雞不宜過小，以免血管小，血量少，要選擇3月齡以上，重量在1kg以上。必須是雞新城疫、禽流感免疫后21d以后的健康雞。

3.3 雞的保定

由飼養(yǎng)員或采血人員用一只手固定住雙腳，另一只手將雞的雙翅膀捏住固定，使雞翅內(nèi)側(cè)展露出來，將雞面對術(shù)者臥在地上。

3.4 采血程序

術(shù)者正對保定好雞，用左手拇指壓住雞翅內(nèi)側(cè)的靜脈血管，使血管腫脹，充分暴露，然后用酒精棉球進(jìn)行消毒，消毒液干后，用采血針頭從離血管約0.2cm的肌肉處平行進(jìn)針，進(jìn)針部位不要緊靠血管，以免止血困難，引起大失血，順血管插入0.5cm，刺入血管再進(jìn)針0.5cm，輕輕拉動(dòng)注射器活塞，有血液進(jìn)入注射器，說明注射器進(jìn)針正確，然后開始抽取血液。用真空管采集血液，只需將另一頭插入真空管內(nèi)，血液便自動(dòng)流出，每個(gè)真空管采集3ml血液，每只雞采血量不宜過多，一般不超過10ml，以免影響雞的生長發(fā)育。采血時(shí)間應(yīng)在中午12點(diǎn)至下午5點(diǎn)，因此時(shí)氣溫較高，雞的血管充盈，暴露易找，采血針頭宜小不宜大，一般用7～9號針頭，以防針頭過大止血困難，接試管必須斜45°，讓血液緩緩沿試管壁流入試管，達(dá)到所需的血量后，用左手拿消毒棉球，壓住抽血部位的血管，右手迅速拔出針頭，待抽血部位血管完全止血后便可將雞放開。

3.5 血液的保存

剛采集的血液在自然環(huán)境溫度下傾斜放在試管架上，靜置30～60min，此時(shí)千萬不能震動(dòng)血液，如果沒有試管架放置血液，傾斜40～60°放置，靜置1h左右，再移到室內(nèi)12～20h，取出分離血清。

3.6 吸取血清

將已分離的血清用吸管或一次性注射器輕輕吸出，將血清注入干凈的小瓶子里，特別注意：千萬不要吸入血液，以免影響血清質(zhì)量和檢測效果，每只離心管或小瓶子裝血清0.5～1ml。如靜置20h后，還沒分離出血清的就將裝有血液的試管放入離心機(jī)內(nèi)，設(shè)置離心機(jī)以4000轉(zhuǎn)/min分離血清，離心機(jī)啟動(dòng)要由慢到快，結(jié)束時(shí)要慢慢減速，每次離5～10min，直至達(dá)到所需血清的質(zhì)量和數(shù)量，如真空管數(shù)量不能放滿離心機(jī)孔，需配一樣大小空管放滿孔，偶數(shù)對稱放置，以免聲響過大，激烈震動(dòng)導(dǎo)致離心機(jī)損壞。

3.7 血液、血清的編號

每采足一份血液或分離一份血清，要在真空管或離心管上編號，并做詳細(xì)登記，同一份血液，分離血清的離心管上的編號要與采集血液的真空管上的編號一致。編號的筆需用記號筆。

4 血清的保存、運(yùn)輸、送檢

分離好的血清編號后，若來不及時(shí)送檢需及時(shí)放入冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存至送檢；血清送檢時(shí)，送檢血清應(yīng)低溫運(yùn)輸，血清運(yùn)輸包裝內(nèi)時(shí)應(yīng)放置有冰袋，以免血清變質(zhì)、腐臭，影響檢測效果。

以上雞血清采集方法淺見，希望工作在鄉(xiāng)鎮(zhèn)的廣大畜牧獸醫(yī)同事們共同參考研究，提出寶貴意見，以免在今后雞血清采集過程中再次出現(xiàn)血清膠凍狀現(xiàn)象，使我們的免疫抗體檢測、病原學(xué)監(jiān)測數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確，才能更好的為動(dòng)物防疫提供科學(xué)依據(jù)，消滅或杜絕高致病性禽流感病的發(fā)生和流行。保障廣大人民群眾身體健康，促進(jìn)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)持續(xù)、快速、健康、穩(wěn)定發(fā)展。

張萬林 （1966-），男，漢族，助理畜牧師，長期從事畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣工作。