張萬(wàn)林 (陜西省略陽(yáng)縣樂(lè)素河鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站724300)
趙云平 (陜西省略陽(yáng)縣白雀寺鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站724300)
淺談雞血清采集存在問(wèn)題及對(duì)策
張萬(wàn)林 (陜西省略陽(yáng)縣樂(lè)素河鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站724300)
趙云平 (陜西省略陽(yáng)縣白雀寺鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站724300)
通過(guò)近年來(lái)在禽類病原學(xué)監(jiān)測(cè)及免疫抗體檢測(cè)時(shí)采集雞血清出現(xiàn)的血清膠凍狀現(xiàn)象,分析存在的原因,通過(guò)工作實(shí)踐提出解決辦法,供畜牧獸醫(yī)人員參考。
雞血清;膠凍狀;采血方法;對(duì)策
隨著畜牧獸醫(yī)工作的不斷發(fā)展,動(dòng)物疫病監(jiān)測(cè)和免疫抗體檢測(cè)在動(dòng)物疫病防控工作中起到了重要作用。樂(lè)素河鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站在2010年~2016春季動(dòng)物防疫結(jié)束時(shí)多次采集雞血清,不斷摸索,總結(jié)出了一種較經(jīng)濟(jì)、實(shí)用、科學(xué)的雞翅靜脈采血方法,為保證各鎮(zhèn)以后雞血清送檢質(zhì)量和抗體檢測(cè)的準(zhǔn)確性,現(xiàn)就雞血清采集存在問(wèn)題、采集方法、保存方法及送檢過(guò)程介紹如下。
按照上級(jí)要求,鄉(xiāng)鎮(zhèn)獸醫(yī)站防疫工作結(jié)束時(shí),要在本鎮(zhèn)防疫區(qū)域分別采集豬、牛、羊、雞、犬血清各10頭(只)份報(bào)送縣市省畜牧獸醫(yī)行政管理部門進(jìn)行免疫抗體檢測(cè)。別的動(dòng)物血清都容易分離,雞血清每年都出現(xiàn)膠凍狀,特別在今年連續(xù)3次采血分離失敗給我們的工作帶來(lái)了很大困難,也為免疫抗體檢測(cè)工作造成障礙。
一般我們采血時(shí)間都是下午和晚上,雞剛進(jìn)舍休息,農(nóng)村都是散養(yǎng)雞,早上給飼喂大量的糧食后就讓雞自行放養(yǎng),成天都在覓食。因此,下午進(jìn)舍時(shí)正是飽食。但因我們的工作需要,白天去無(wú)法抓到雞,只能等到晚上。
農(nóng)戶零星散養(yǎng)雞,設(shè)備條件都差,基本上沒(méi)有飲水設(shè)施,雞的飲水靠自己尋覓,多數(shù)靠青綠草料中的水分供給,特別是春天,地草正在萌芽階段,氣候又干燥,雞一天食入大量精料,覓水遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了生理需要,造成體內(nèi)嚴(yán)重缺水,血液濃稠會(huì)影響血清的分離,發(fā)生血彌。
采血時(shí)血液垂直推入試管是一種錯(cuò)誤的方法,很容易造成溶血;采血消毒不嚴(yán)可能造成細(xì)菌感染也會(huì)影響血清分離,使用抗凝劑也有可能是出現(xiàn)血清膠凍狀的主要原因。
分離血清時(shí)在離心機(jī)上分離受溫度影響不太大,但自然分離時(shí),溫度的高低很重要,關(guān)系到血清分離的成敗,溫度過(guò)低很可能使血液中的纖維蛋白和膠原蛋白凝固,造成血清膠凍狀。溫度過(guò)高時(shí)造成血液水分揮發(fā),血清可能因缺水而形成膠凍狀。
經(jīng)調(diào)查和親自實(shí)踐操作若干年發(fā)現(xiàn),長(zhǎng)期飼喂精飼料,購(gòu)買配合料及顆粒飼料飼養(yǎng)的雞肥胖,血液都比較濃稠,血清不好分離,甚至分離出來(lái)的血清多數(shù)是膠凍狀。散養(yǎng)在農(nóng)村的雞,長(zhǎng)期自己覓食青草料和樹林里昆蟲,血清較好分離。另外和雞的品種也有關(guān),本地雞水土氣溫適應(yīng)性強(qiáng),出現(xiàn)的可能性極小。
為了確實(shí)解決基層站采集禽類血清普遍存在的問(wèn)題,使免疫抗體檢測(cè)和病原學(xué)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性、實(shí)用性、科學(xué)性。
一次性真空采血管或清洗干凈并消毒過(guò)青霉素小瓶,一次性采血針頭或5ml一次性注射器,止血鉗,酒精,棉球,試管,試管架,離心機(jī),記號(hào)筆,冰箱,采樣登記表。
采血雞不宜過(guò)小,以免血管小,血量少,要選擇3月齡以上,重量在1kg以上。必須是雞新城疫、禽流感免疫后21d以后的健康雞。
由飼養(yǎng)員或采血人員用一只手固定住雙腳,另一只手將雞的雙翅膀捏住固定,使雞翅內(nèi)側(cè)展露出來(lái),將雞面對(duì)術(shù)者臥在地上。
術(shù)者正對(duì)保定好雞,用左手拇指壓住雞翅內(nèi)側(cè)的靜脈血管,使血管腫脹,充分暴露,然后用酒精棉球進(jìn)行消毒,消毒液干后,用采血針頭從離血管約0.2cm的肌肉處平行進(jìn)針,進(jìn)針部位不要緊靠血管,以免止血困難,引起大失血,順血管插入0.5cm,刺入血管再進(jìn)針0.5cm,輕輕拉動(dòng)注射器活塞,有血液進(jìn)入注射器,說(shuō)明注射器進(jìn)針正確,然后開(kāi)始抽取血液。用真空管采集血液,只需將另一頭插入真空管內(nèi),血液便自動(dòng)流出,每個(gè)真空管采集3ml血液,每只雞采血量不宜過(guò)多,一般不超過(guò)10ml,以免影響雞的生長(zhǎng)發(fā)育。采血時(shí)間應(yīng)在中午12點(diǎn)至下午5點(diǎn),因此時(shí)氣溫較高,雞的血管充盈,暴露易找,采血針頭宜小不宜大,一般用7~9號(hào)針頭,以防針頭過(guò)大止血困難,接試管必須斜45°,讓血液緩緩沿試管壁流入試管,達(dá)到所需的血量后,用左手拿消毒棉球,壓住抽血部位的血管,右手迅速拔出針頭,待抽血部位血管完全止血后便可將雞放開(kāi)。
剛采集的血液在自然環(huán)境溫度下傾斜放在試管架上,靜置30~60min,此時(shí)千萬(wàn)不能震動(dòng)血液,如果沒(méi)有試管架放置血液,傾斜40~60°放置,靜置1h左右,再移到室內(nèi)12~20h,取出分離血清。
將已分離的血清用吸管或一次性注射器輕輕吸出,將血清注入干凈的小瓶子里,特別注意:千萬(wàn)不要吸入血液,以免影響血清質(zhì)量和檢測(cè)效果,每只離心管或小瓶子裝血清0.5~1ml。如靜置20h后,還沒(méi)分離出血清的就將裝有血液的試管放入離心機(jī)內(nèi),設(shè)置離心機(jī)以4000轉(zhuǎn)/min分離血清,離心機(jī)啟動(dòng)要由慢到快,結(jié)束時(shí)要慢慢減速,每次離5~10min,直至達(dá)到所需血清的質(zhì)量和數(shù)量,如真空管數(shù)量不能放滿離心機(jī)孔,需配一樣大小空管放滿孔,偶數(shù)對(duì)稱放置,以免聲響過(guò)大,激烈震動(dòng)導(dǎo)致離心機(jī)損壞。
每采足一份血液或分離一份血清,要在真空管或離心管上編號(hào),并做詳細(xì)登記,同一份血液,分離血清的離心管上的編號(hào)要與采集血液的真空管上的編號(hào)一致。編號(hào)的筆需用記號(hào)筆。
分離好的血清編號(hào)后,若來(lái)不及時(shí)送檢需及時(shí)放入冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存至送檢;血清送檢時(shí),送檢血清應(yīng)低溫運(yùn)輸,血清運(yùn)輸包裝內(nèi)時(shí)應(yīng)放置有冰袋,以免血清變質(zhì)、腐臭,影響檢測(cè)效果。
以上雞血清采集方法淺見(jiàn),希望工作在鄉(xiāng)鎮(zhèn)的廣大畜牧獸醫(yī)同事們共同參考研究,提出寶貴意見(jiàn),以免在今后雞血清采集過(guò)程中再次出現(xiàn)血清膠凍狀現(xiàn)象,使我們的免疫抗體檢測(cè)、病原學(xué)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)更加準(zhǔn)確,才能更好的為動(dòng)物防疫提供科學(xué)依據(jù),消滅或杜絕高致病性禽流感病的發(fā)生和流行。保障廣大人民群眾身體健康,促進(jìn)農(nóng)村經(jīng)濟(jì)持續(xù)、快速、健康、穩(wěn)定發(fā)展。
張萬(wàn)林 (1966-),男,漢族,助理畜牧師,長(zhǎng)期從事畜牧獸醫(yī)技術(shù)推廣工作。