劉素玲，侯鐵英

(廣東省人民醫(yī)院 廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院，廣東 廣州　510080)

?

泌尿生殖道分離支原體及其耐藥性

劉素玲，侯鐵英

(廣東省人民醫(yī)院 廣東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院，廣東 廣州510080)

[摘要]目的了解某地區(qū)泌尿生殖道分離支原體及其藥敏情況，為臨床合理治療提供依據(jù)。方法對2008—2014年該院57 904例門診患者泌尿生殖道標(biāo)本進行解脲脲原體(Uu)和人型支原體(Mh)培養(yǎng)、鑒定及藥敏試驗。結(jié)果57 904例泌尿生殖道感染患者,21 614例(37.33%)培養(yǎng)陽性,女性支原體分離率為42.14%(18 917/44 889)，男性為20.72%(2 697/13 015)；支原體培養(yǎng)陽性人群主要集中在21～40歲。Uu、Mh 混合感染患者中，以Uu≥104CFU/mL、Mh<104CFU/mL的感染組合占相對優(yōu)勢(69.35%)。藥敏結(jié)果顯示支原體對多西環(huán)素、交沙霉素、四環(huán)素的耐藥率較低(<10%)；Mh培養(yǎng)陽性者對多西環(huán)素、紅霉素、克拉霉素、羅紅霉素的耐藥率均高于僅Uu培養(yǎng)陽性者，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。結(jié)論門診患者中支原體感染/攜帶率女性高于男性， Uu和Mh的藥敏譜不一致，交沙霉素和多西環(huán)素可作為治療支原體感染非淋菌性尿道(宮頸)炎的首選藥物。

[關(guān)鍵詞]泌尿生殖系統(tǒng)； 感染； 支原體； 抗藥性，微生物

[Chin Infect Control，2015，14(12)：821-823,833]

解脲脲原體(Ureaplasmaurealyticum，Uu)和人型支原體(Mycoplasmahominis，Mh)是引起非淋菌性尿道(宮頸)炎(non-gonococcal urethritis，NGU)的主要病原體。近年來，隨著臨床抗菌藥物的廣泛使用，顯性或隱性的生殖道感染發(fā)生率增加，且出現(xiàn)上行感染病例，如腹腔、心臟術(shù)后支原體感染[1]，且由于檢測手段的局限性，臨床的盲目治療，導(dǎo)致耐藥性增加。本研究對本院2008—2014年57 904 份門診患者泌尿生殖道標(biāo)本分離的支原體及其藥敏結(jié)果進行統(tǒng)計，為臨床治療提供理論依據(jù)。

1對象與方法

1.1研究對象2008—2014 年本院門診就診的57 904例患者,采集標(biāo)本57 904份(重復(fù)就診患者取第1次結(jié)果)，其中男性13 015例，女性44 889例。

1.2標(biāo)本采集在抗菌藥物治療前采集樣本。標(biāo)本采集嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗操作規(guī)程》第3版進行。男性：取尿道分泌物，應(yīng)距前次排尿3 h 后取樣，盡量采集尿道的上皮細(xì)胞；女性：擴陰器擴陰后，去除子宮頸口多余黏液，取宮頸分泌物，應(yīng)避免局部用藥。

1.3試劑支原體ID2試劑盒為法國生物梅里埃公司支原體IST和江門凱琳支原體藥敏組合，抗菌藥物包括多西環(huán)素、紅霉素、環(huán)丙沙星、交沙霉素、克拉霉素、羅紅霉素、強力霉素、司帕沙星、四環(huán)素、氧氟沙星。

1.4標(biāo)本處理采集的標(biāo)本立即接種于肉湯(試劑R1)中，室溫條件下(18～25℃)必須在2 h內(nèi)接種于鑒定和藥敏板條，操作均按試劑盒說明書進行。

1.5結(jié)果觀察排除細(xì)菌和真菌污染。肉湯渾濁標(biāo)本均進行沉渣涂片檢查，若發(fā)現(xiàn)細(xì)菌和真菌生長，均重新送檢。

1.6質(zhì)量控制每周進行支原體液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基A7比對試驗，在質(zhì)控范圍之內(nèi)，如有失控立即申購新批號試劑重新進行質(zhì)量控制。

1.7統(tǒng)計方法應(yīng)用SPSS 16.0軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析，組間率比較采用χ2檢驗。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1支原體分離率57 904例泌尿生殖道感染患者,21 614例(37.33%)陽性,女性支原體分離率為42.14%(18 917/44 889)，男性為20.72%(2 697/13 015)；其中以Uu分離率最高，女性Uu分離率為41.37%(18 572例)，高于男性的20.36%(2 650例)，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1 918.62，P<0.05)。不同性別感染者支原體培養(yǎng)結(jié)果見表1。

2.2支原體培養(yǎng)陽性人群年齡分布支原體培養(yǎng)陽性人群主要集中在20～40歲。見表2。

表1不同性別感染者支原體培養(yǎng)結(jié)果

Table 1Culture results ofMycoplasmaisolated from infected patients of different genders

支原體女性(n=44889)例數(shù)構(gòu)成比(%)男性(n=13015)例數(shù)構(gòu)成比(%)Uu-Mh+3450.77470.36Uu+Mh+25385.653102.38Uu+Mh-1603435.72234017.98Uu-Mh-2597257.861031879.28

+：表示培養(yǎng)陽性；-：表示培養(yǎng)陰性

表2支原體培養(yǎng)陽性人群年齡分布(%)

Table 2Age distribution of patients withMycoplasmapositive culture(%)

年齡(歲)Uu+Mh-女性(n=16034)男性(n=2340)Uu-Mh+女性(n=345)男性(n=47)Uu+Mh+女性(n=2538)男性(n=310)15~2.141.280.872.133.351.2921~48.6744.0636.5236.1742.5140.6531~32.5742.3932.4636.1731.6839.6841~13.4010.1321.4521.2816.4315.16>503.222.148.704.266.033.23合計100.00100.00100.00100.00100.00100.00

2.3支原體菌落計數(shù)結(jié)果16 034例女性Uu感染患者中，70.99%菌落計數(shù)≥104CFU/mL；2 340例男性Uu感染患者中，72.86%者菌落計數(shù)≥104CFU/mL。345例女性Mh感染患者中，8.41%者菌落計數(shù)≥104CFU/mL；47例男性Mh感染患者中，4.26%者菌落計數(shù)≥104CFU/mL。Uu、Mh 混合感染患者中，以Uu≥104、Mh<104的感染組合占相對優(yōu)勢(69.35%)。見表3～4。

表3不同性別Mh、Uu感染者菌落計數(shù)結(jié)果(例，%)

Table 3Colony counts of Mh and Uu from infected patients of different genders (No. of cases, %)

菌落計數(shù)(CFU/mL)女性Mh+Uu+男性Mh+Uu+<104316(91.59)4652(29.01)45(95.74)635(27.14)≥10429(8.41)11382(70.99)2(4.26)1705(72.86)合計345(100.00)16034(100.00)47(100.00)2340(100.00)

2.4藥敏試驗結(jié)果Uu-Mh+組、Uu+Mh+組(Mh培養(yǎng)陽性)對阿奇霉素、紅霉素、克拉霉素、羅紅霉素、氧氟沙星的耐藥率均高于Uu+Mh-組(僅Uu培養(yǎng)陽性)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P<0.05)。Uu+Mh-組男性患者對羅紅霉素的耐藥率高于女性患者，而女性患者對司帕沙星、氧氟沙星的耐藥率高于男性患者(均P<0.05)；Uu+Mh+組女性患者對司帕沙星的耐藥率高于男性患者(P<0.05)。除環(huán)丙沙星(耐藥性>60%)和氧氟沙星(耐藥率>20%)外, Uu對其余藥物的耐藥性均相對較低；除交沙霉素、多西環(huán)素、四環(huán)素耐藥性較低外，Mh對其余藥物的耐藥性均較高。見表5。

表4不同性別支原體混合感染菌落計數(shù)結(jié)果(例，%)

Table 4Colony counts ofMycoplasmafrom mixedMycoplasma-infected patients of different genders (No.of cases，%)

菌落計數(shù)(CFU/mL)女性男性合計Uu、Mh<104469(18.48)20(6.45)489(17.17)Uu、Mh≥104326(12.84)44(14.19)370(12.99)Uu<104、Mh≥10414(0.55)0(0.00)14(0.49)Uu≥104、Mh<1041729(68.12)246(79.35)1975(69.35)合計2538(100.00)310(100.00)2848(100.00)

表5不同感染類型支原體耐藥率比較(%)

Table 5Comparison in drug resistance rates ofMycoplasmacausing different infection (%)

抗菌藥物Uu+Mh-女性(n=16034)男性(n=2340)Uu-Mh+女性(n=345)男性(n=47)Uu+Mh+女性(n=2538)男性(n=310)阿奇霉素1.651.4595.9491.4988.8190.65紅霉素 6.425.1395.9491.4989.0588.39環(huán)丙沙星69.7567.0150.4348.9489.2488.39司帕沙星10.165.6822.6117.0239.0529.35氧氟沙星25.3021.2043.1936.1763.8359.03交沙霉素0.150.090.000.003.313.23克拉霉素0.951.2096.2389.3688.2290.32羅紅霉素0.901.3294.4991.4986.4987.10多西環(huán)素3.183.630.000.004.696.13四環(huán)素 3.463.557.830.009.659.03

3討論

支原體感染是生殖道感染的主要病原體，調(diào)查分析顯示，女性Uu+Mh-組、Uu-Mh+組及Uu+Mh+組檢出率分別為35.72%、0.77%、5.65%，均高于男性患者(分別為17.98%、0.36%、2.38%)。

此外，Uu、Mh 混合感染患者中，以Uu≥104CFU/mL、Mh<104CFU/mL的感染組合占相對優(yōu)勢(69.35%)，可能與本地區(qū)支原體感染主要類型為Uu感染為主有關(guān)。Abele-Hom 等[2]報道顯示，健康人群活躍期支原體分離率男性為25%～53%，女性為40%～80%。本組結(jié)果顯示，支原體檢出率為37.33%，其中女性支原體檢出率(42.14%)高于男性(20.72%)(P<0.05)，與報道[3-4]基本一致。有些患者泌尿生殖道長期攜帶支原體，并無臨床癥狀，可能與支原體不同血清型有關(guān)，具體情況有待進一步研究。

本研究結(jié)果顯示， Uu單獨感染，喹諾酮類抗生素的耐藥率較高，特別是環(huán)丙沙星耐藥率達(dá)60%以上，大環(huán)內(nèi)酯類抗生素和四環(huán)素類較低；Mh單獨感染，四環(huán)素類抗生素耐藥率最低；Uu和Mh混合感染者，除四環(huán)素類抗生素耐藥率較低外，喹諾酮類(除司帕沙星)、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素(除交沙霉素)的耐藥率均很高。阿奇霉素可作為Uu感染的治療用藥，但是不能用于Mh感染或混合感染的治療用藥，對于Mh感染和Mh、Uu混合感染的耐藥率均>80%；交沙霉素和多西環(huán)素可作為Uu和Mh支原體感染的治療用藥，耐藥率均<7%。由于近年來，環(huán)丙沙星和氧氟沙星在臨床使用較多，Uu和Mh對其均產(chǎn)生了耐藥性，其耐藥率維持在高耐藥的穩(wěn)定狀態(tài)，環(huán)丙沙星耐藥率>50%，而混合感染對于氧氟沙星的耐藥率高達(dá)63.83%，均不適合作為支原體感染的治療用藥，耐藥機制主要為喹諾酮類的耐藥機制，即基因突變導(dǎo)致靶酶的氨基酸改變。喹諾酮類耐藥決定區(qū)(QRDR)的gyrA、parC基因突變在細(xì)菌對喹諾酮類抗菌藥物的耐藥方面起重要作用，染色體DNA促旋酶和拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ的突變導(dǎo)致全酶改變，阻止喹諾酮類抗菌藥物進入作用區(qū)[5-6]，同時也與氧氟沙星可誘導(dǎo)Mh產(chǎn)生多重耐藥及tetM基因等有關(guān)[7]。另外，對于作用于細(xì)胞壁的藥物，如β-內(nèi)酰胺酶抗生素對支原體治療均無效，因其無細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，故普遍耐藥。因此，對于支原體感染的治療，泌尿生殖道標(biāo)本支原體培養(yǎng)和藥敏檢測非常重要，而臨床經(jīng)驗用藥可推薦四環(huán)素類藥物多西環(huán)素，大環(huán)內(nèi)酯類抗生素阿奇霉素可單獨用于Uu的治療，不能用于混合感染的治療，而喹諾酮類則不推薦用于支原體感染的治療。

支原體通常不能侵入黏膜下層，除非患者使用免疫抑制劑等情況，支原體可發(fā)生血行感染及其他部位感染[8]。近年來，隨著侵入性操作增多、臨床β-內(nèi)酰胺類抗生素作用于細(xì)胞壁的抗生素增加，支原體異位感染的病例國外曾有報道，國內(nèi)開始有個案報道(我院已經(jīng)發(fā)現(xiàn)心臟術(shù)后血行和心臟瓣膜感染人型支原體1例，卵巢惡性腫瘤術(shù)后腹腔積液人型支原體感染1例，文章均待發(fā)表)，因此，人群中支原體感染和攜帶率如此高亦應(yīng)引起臨床重視，非泌尿生殖道標(biāo)本在感染診斷困難時，應(yīng)考慮是否存在支原體異位感染的可能。

[參 考 文 獻]

[1]Le Guern R, Loiez C, Loobuyck V, et al. A new case ofMycoplasmahominismediastinitis and sternal osteitis after cardiac surgery[J]. Int J Infect Dis, 2015, 31:53-55.

[2]Abele-Hom M，Wolff C，Dressel P，et al. Polymerase chain reaction versus culture for detection ofUreaplasmaurealyticumandMycoplasmahominisin the urogenital tract of adults and the respiratory tract of newborns[J]. Eur J Clin Microbiol Infect Dis，1996，15(7)：595-598.

[3]陳東科，陳麗，胡云建.泌尿生殖道支原體感染趨勢及耐藥性分析[J].中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2006, 29(2):170-172.

[4]丁志紅，呂春蘭，蘇大林. 某中醫(yī)醫(yī)院連續(xù)3年女性生殖系統(tǒng)感染解脲脲原體的耐藥性[J]. 中國感染控制雜志, 2014, 13(12): 736-738.

[5]張皎，袁定芬. 泌尿生殖道分離的324株支原體藥敏結(jié)果分析[J].復(fù)旦學(xué)報，2009，36(5)：605-608.

[6]Bebear CM, Renaudin H, Charron A, et al. In vitro activity of trovafloxacin compared to those of five antimicrobials againstMycoplasmasincludingMycoplasmahominisandUreaplasmaurealyticumfluoroquinolone-resistant isolates that have been genetically characterized [J].Antimicrob Agents Chemother, 2000, 44(9): 2557-2560.

[7]張冉，吳移謀，向斌，等. 喹諾酮類藥物誘導(dǎo)人型支原體耐藥機理研究[J]. 中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2000，23(5)：273-275.

[8]Pinna GS, Skevaki CL, Kafetzis DA. The significance ofUreaplasmaurealyticumas a pathogenic agent in the paediatric population[J]. Curr Opin Infect Dis, 2006,19(3):283-289.

(本文編輯：左雙燕)

·論著·

·論著·

Isolation and antimicrobial resistance ofMycoplasmafrom urogenital tract

LIUSu-ling,HOUTie-ying(GuangdongGeneralHospital,GuangdongAcademyofMedicalSciences,Guangzhou510080,China)

[Abstract]ObjectiveTo explore the isolation and antimicrobial susceptibility of Mycoplasma from urogenital tract, and provide the basis for rational clinical treatment.MethodsUrogenital tract specimens from 57 904 outpatients in a hospital between 2008 and 2014 were performed Ureaplasma urealyticum (Uu) and Mycoplasma hominis(Mh) culture, identification, and antimicrobial susceptibility testing.ResultsOf 57 904 patients with urogenital infection，21 614 (37.33%) had positive culture for Mycoplasma, isolation rate of Mycoplasma in female and male were 42.14% (18 917/44 889)and 20.72% (2 697/13 015)respectively; Mycoplasma was mainly isolated from population of 21-40 years old; Uu≥104CFU/mL and Mh<104CFU/mL mixed infection was common(69.35%). The resistance of Mycoplasma to doxycycline, josamycin, and tetracycline were all low(<10%); resistance rates of Mh to doxycycline, erythromycin, clarithromycin, and roxithromycin were all significantly higher than Uu (all P<0.05).ConclusionMycoplasma infection/carriage rate in female outpatients is significantly higher than male outpatients, antimicrobial profile of Uu is different from Mh, josamycin and doxycycline can be as the first choice for treatment of non-gonococcal urethritis (cervicitis) caused by Mycoplasma.

[Key words]urogenital system; infection; Mycoplasma; drug resistance, microbial

DOI:10.3969/j.issn.1671-9638.2015.12.012 10.3969/j.issn.1671-9638.2015.12.009

[通信作者]劉波E-mail:liusanbo@163.com 詹思延E-mail:siyan-zhan@bjmu.edu.cn

[作者簡介]李惠芬(1964-)，女(漢族)，江蘇省常州市人，副主任護師，主要從事醫(yī)院感染管理研究。 劉翠梅(1973-)，女(漢族)，內(nèi)蒙古呼倫貝爾市人，研究生，主要從事醫(yī)院感染管理研究。

[基金項目]江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程資助項目(JX10231802)

[收稿日期]2015-06-24 2015-03-25

[中圖分類號]R691.3

[文獻標(biāo)識碼]A

[文章編號]1671-9638(2015)12-0821-04