鄒志勇 羅艷敏

(中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院，廣東 廣州 510080)

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一例5p部分單體合并17q部分三體的分析

鄒志勇 羅艷敏

(中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院，廣東 廣州 510080)

SNP-發(fā)現(xiàn)的微缺失微重復(fù)以及單親二倍體、染色體雜合性缺失等拷貝數(shù)正常的染色體異常，能夠檢測非整倍體和多倍體，但無法檢測平衡易位。在本研究中，我們結(jié)合高分辨G顯帶核型分析，應(yīng)用全基因組芯片技術(shù)檢測了1例小腦發(fā)育不全的胎兒攜帶的5p部分單體合并17q部分三體，分析其可能發(fā)生小腦發(fā)育不全的原因，報(bào)告如下。

1 對象和方法

1.1 患者臨床資料 胎兒父母親年齡分別為33歲和39歲，雙方否認(rèn)近親婚配，無不良家族遺傳病史及不良生育史，G2P1A0，2011年足月剖宮產(chǎn)一女嬰，現(xiàn)體健。此次懷孕為自然妊娠，停經(jīng)11周外院B超顯示宮內(nèi)妊娠10+周，就此糾正預(yù)產(chǎn)期。在外院建檔產(chǎn)檢，早孕期唐氏篩查未做，其他檢查未見明顯異常。停經(jīng)20周三維排畸B超未見明顯異常。停經(jīng)28周外院B超提示胎兒如孕28+周，右側(cè)側(cè)腦室增寬為11mm，小腦偏小，形態(tài)未見異常，臍動(dòng)脈血流頻譜未見異常。停經(jīng)28+1周本院復(fù)查B超顯示胎兒發(fā)育相當(dāng)于27+3周，胎兒肱骨和小腦發(fā)育相當(dāng)于26周，大腦中動(dòng)脈血流頻譜舒張期消失，胎盤子面血池聲像。孕婦在中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院胎兒醫(yī)學(xué)中心進(jìn)行遺傳咨詢并簽署知情同意書后，行臍帶血穿刺查胎兒染色體和基因芯片，胎兒染色體核型結(jié)果未見異常，高密度SNP-Array芯片檢測顯示胎兒存在5p末端4.516Mb的缺失合并17q區(qū)域8.520Mb的重復(fù)。解釋相應(yīng)的結(jié)果后，家屬最終選擇終止妊娠，在停經(jīng)35+4周時(shí)于當(dāng)?shù)蒯t(yī)院引產(chǎn)，隨訪得知胎兒為男性，外觀未見明顯異常，未行尸解。父母雙方拒絕抽外周血行全基因組基因芯片分析和染色體核型檢查。

1.2 方法根據(jù) Qiagen試劑盒(QIAamp DNA Blood Mini Kit)操作說明書提取樣品DNA。按照AffyCytoScanHDmetrix公司的芯片標(biāo)準(zhǔn)操作說明，DNA樣本分別進(jìn)行消化、連接、擴(kuò)增、純化、片段化、標(biāo)記、雜交、洗滌及掃描。掃描信號圖經(jīng)Affymetrix的Chas軟件分析、計(jì)算產(chǎn)生每個(gè)位點(diǎn)的基因型或信號相對強(qiáng)度，包括拷貝數(shù)變異(copy number variation，CNV)和單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)。CytoScan HD芯片含有2700000個(gè)探針，具備CNV探針和SNP探針，其中SNP檢測探針750000個(gè)、CNV檢測探針為1950000個(gè)，這些探針平均覆蓋全基因組范圍，可同時(shí)檢查染色體拷貝數(shù)異常及長片段雜合性缺失(>10Mb)。查閱文獻(xiàn)及檢索DGV(DGV, http://projects.tcag.ca/variation/)， DECIPHER (http://decipher.sanger.ac.uk/)，Online Mendelian Inheritance in Man (OMIM，http://www.Omim.org)，UCSC (http://genome.ucsc.edu/,hg19)，PubMed (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed)，和ClinGen Dosage Sensitivity Map等數(shù)據(jù)庫之后，根據(jù)參照文獻(xiàn)對SNP微陣列分析的臨床數(shù)據(jù)進(jìn)行分析[1]。

2 結(jié)果

胎兒染色體核型分析結(jié)果未見異常，為46，XY。基因組高分辨率染色體微陣列分析結(jié)果顯示胎兒在5p15.33p15.32區(qū)域存在4.516Mb的缺失，該區(qū)域缺失與貓叫綜合征相關(guān)，該區(qū)域包含2個(gè)可能與小腦發(fā)育不全相關(guān)的OMIM基因：TERT和SLC6A3。同時(shí)在17q25.1q25.3區(qū)存在8.520Mb重復(fù)，與DECIPHER數(shù)據(jù)庫個(gè)別病例報(bào)道重疊，這些患者臨床表型為智力低下，生長發(fā)育遲緩，語言發(fā)育障礙等。

3 討論

本例胎兒包含5p15.33p15.32微缺失，該區(qū)域與貓叫綜合征相關(guān)，其已報(bào)道的癥狀包括：貓叫樣啼哭，小頭畸形，圓臉，眼距寬，外眥下斜，耳位低，小下頜，腭弓高，牙錯(cuò)位咬合，生長發(fā)育遲緩和智力低下等。本研究認(rèn)為該區(qū)域的微缺失可能是導(dǎo)致胎兒小腦發(fā)育不全的遺傳學(xué)病因之一，該區(qū)域內(nèi)包含了2個(gè)可能導(dǎo)致小腦發(fā)育不全的OMIM基因：TERT(*187270)和SLC6A3(*126455)。文獻(xiàn)報(bào)道典型的貓叫綜合征與小頭畸形缺失的區(qū)域?yàn)?p15.31，5p15.3末端缺失與特殊的啼哭和語言發(fā)育落后相關(guān)[6]。已有相關(guān)的病例報(bào)道和相關(guān)研究提示，貓叫綜合征的患兒中有小腦發(fā)育不全的癥狀[2]。

在本例病例報(bào)道中胎兒雖然缺失的片段并不是經(jīng)典小頭畸形相關(guān)區(qū)域，但是該區(qū)域包含的TERT基因與維持端粒長度和細(xì)胞增殖相關(guān)，已有文獻(xiàn)報(bào)道貓叫綜合征的患兒因TERT基因表達(dá)單倍劑量不足，其端粒短于同齡兒[3]。TERT基因?qū)τ谂咛ピ缙诎l(fā)育中維持端粒長度和器官發(fā)育所需的高度細(xì)胞增殖狀態(tài)具有重要作用[4]。因此，我們認(rèn)為TERT單倍劑量不足有可能會影響胎兒生長發(fā)育，也包括胎兒小腦發(fā)育，單倍劑量不足可能會進(jìn)一步導(dǎo)致胎兒小腦發(fā)育不全。SLC6A3是編碼多巴胺受體的基因，其在大腦中高度表達(dá)，該基因缺失會影響大腦神經(jīng)遞質(zhì)的再攝取，也與嬰幼兒帕金森綜合征相關(guān)[5，6]，本研究猜想該基因的雜合性缺失也有可能影響胎兒顱腦發(fā)育，這也可能是造成這例胎兒小腦發(fā)育不全的原因之一。

Elmakky[7]對一個(gè)家系三代均存在區(qū)域5p15.33-32的5.5 Mb 微缺失的患者進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)這些患者存在小頭畸形、生長發(fā)育遲緩和特殊面容。作者認(rèn)為5p15.33-32區(qū)域雖然不是經(jīng)典區(qū)域，但也和貓叫綜合征胎兒小頭畸形相關(guān)，這和我們的猜想是一致的，在5p15.33p15.32內(nèi)可能包含了影響胎兒顱腦發(fā)育的基因，由于我們報(bào)道的胎兒數(shù)不多，已有相關(guān)的病例報(bào)道過少，因此需要進(jìn)一步的研究證實(shí)和完善我們的猜想。

已有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道17q部分三體與小頭畸形相關(guān)，本例胎兒還存在17q25.1q25.3區(qū)域存在8.520Mb重復(fù)，其與DECIPHER數(shù)據(jù)庫個(gè)別病例報(bào)道重疊，這些患者臨床表型為智力低下，生長發(fā)育遲緩，語言發(fā)育障礙等。Cordier等[8]報(bào)道了一例5p部分缺失和17q部分三體的患兒，其B超檢查等影像學(xué)提示患兒有小腦發(fā)育不全，其核型為 46,XX,der(5)t(5;17)(p15.1;q21.3) [17]/46，XX，del(5)(p15.1)，該報(bào)道的缺失和重復(fù)的區(qū)域?yàn)?5p15.2和 17q21.3-qter，和我們報(bào)道的區(qū)域不完全一致，但我們猜想5p部分單體和17q部分三體共同作用可能會導(dǎo)致胎兒小腦發(fā)育不良，可以解釋我們這例患兒的小腦發(fā)育不全的表現(xiàn)，因此，在我們這例病例中，胎兒染色體核型分析雖未發(fā)現(xiàn)異常，但是全基因組微陣列分析卻發(fā)現(xiàn)胎兒更多染色體的細(xì)微異常，在對于B超發(fā)現(xiàn)結(jié)構(gòu)異常且核型分析正常的胎兒建議同時(shí)做染色體微陣列分析，這樣可以在產(chǎn)前發(fā)現(xiàn)更多異常的胎兒。

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編輯：宋文穎

10.13470/j.cnki.cjpd.2016.03.015

R714.55

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2016-04-30)