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鎮(zhèn)驚瀉火顆粒對(duì)小鼠的鎮(zhèn)靜催眠及抗抑郁作用

奚之駿1，許麗雯1，史秀峰1，祁雯1，陶建生2

(1.上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院藥劑科，上海 200032；2.上海中醫(yī)藥大學(xué)藥物安全評(píng)價(jià)中心，上海 201203)

[關(guān)鍵詞]鎮(zhèn)驚瀉火顆粒；抗抑郁藥；催眠；小鼠

鎮(zhèn)驚瀉火方是上海市名老中醫(yī)胡建華教授(1924-2005年)所創(chuàng)，由甘麥大棗湯、百合知母湯、生鐵落飲等諸方加減而成，全方由甘草、淮小麥、大棗、鐵落、制天南星、丹參、大黃、知母、百合9味藥組成，臨床上用于治療抑郁癥、不眠、廣泛性焦慮、精神障礙等多種精神情志疾病，均具有顯著療效。由此方研發(fā)而來(lái)的鎮(zhèn)驚瀉火合劑亦在上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院應(yīng)用多年，療效好。將其開發(fā)成顆粒劑，利于攜帶和保存，以提高病人的用藥依從性。本研究初步觀察鎮(zhèn)驚瀉火顆粒抗抑郁和催眠作用。

1材料和方法

1.1藥物鎮(zhèn)驚瀉火顆粒由本院制劑室自制，批號(hào)20111226。鎮(zhèn)驚瀉火合劑由本院制劑室自制，批號(hào)1307001。鹽酸氟西汀膠囊(批號(hào)2076A，禮來(lái)公司)。地西泮注射液(批號(hào) AH121201)、氯化鈉注射液(批號(hào)WF130919)均為上海旭東海普藥業(yè)有限公司產(chǎn)品。注射用苯巴比妥鈉(批號(hào)120708，上海新亞藥業(yè)有限公司)，羧甲基纖維素鈉(CMC-Na，批號(hào)20111226，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。鎮(zhèn)驚瀉火顆粒、鎮(zhèn)驚瀉火合劑、鹽酸氟西汀、地西泮在臨用前用5%CMC-Na配成所需濃度。

1.2抗抑郁實(shí)驗(yàn)普通級(jí)昆明種小鼠160只，體重25～30 g，雌雄各半(上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司)，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK(滬)2012-0002，采用完全隨機(jī)分組法分為16組，每組10只。

采用小鼠懸尾和小鼠強(qiáng)迫游泳兩種實(shí)驗(yàn)，每種實(shí)驗(yàn)均分成4組，即1個(gè)受試藥組(鎮(zhèn)驚瀉火顆粒)、2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照組(鎮(zhèn)驚瀉火合劑和鹽酸氟西汀)和1個(gè)陰性對(duì)照組。小鼠連續(xù)灌胃7 d，于末次灌胃1 h后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.2.1懸尾實(shí)驗(yàn)將小鼠尾端2 cm處固定于水平面上，使其呈倒掛狀態(tài)，頭部離臺(tái)面約30 cm，四周以板隔離動(dòng)物視線，記錄小鼠在6 min內(nèi)的不動(dòng)時(shí)間。

1.2.2強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)將小鼠放入長(zhǎng)60 cm、寬40 cm，水深10 cm的水桶，水溫保持25 ℃，小鼠游泳2 min后，開始觀察，累計(jì)4 min內(nèi)小鼠在水中停止掙扎、呈漂浮狀態(tài)、

僅有

細(xì)小的肢體運(yùn)動(dòng)以保持頭部浮在水面的持續(xù)時(shí)間(不動(dòng)時(shí)間)[1-3]。

1.3催眠實(shí)驗(yàn)分為進(jìn)行閾下劑量苯巴比妥鈉致小鼠入睡只數(shù)影響，和對(duì)閾上劑量苯巴比妥鈉致小鼠睡眠持續(xù)時(shí)間影響兩個(gè)實(shí)驗(yàn)，每個(gè)實(shí)驗(yàn)均隨機(jī)分成4組，1個(gè)受試藥組(鎮(zhèn)驚瀉火顆粒)、2個(gè)陽(yáng)性對(duì)照組(鎮(zhèn)驚瀉火合劑和地西泮)和1個(gè)陰性對(duì)照組。小鼠連續(xù)灌胃7 d，于末次給藥前8 h禁食，前1 h禁水，灌胃給藥30 min后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

1.3.1對(duì)閾下劑量苯巴比妥鈉致小鼠入睡只數(shù)的影響小鼠于末次灌胃給藥30 min后腹腔注射苯巴比妥鈉100 mg/kg，觀察并記錄發(fā)生睡眠小鼠的只數(shù)，以注射苯巴比妥鈉15 min內(nèi)翻正反射消失達(dá)1 min以上者確定為陽(yáng)性[4,5]。

1.3.2對(duì)閾上劑量苯巴比妥鈉致小鼠睡眠持續(xù)時(shí)間的影響小鼠于末次灌胃給藥30 min后，腹腔注射苯巴比妥鈉125 mg/kg，觀察并記錄各組小鼠睡眠持續(xù)時(shí)間。

2結(jié)果

2.1抗抑郁作用小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。受試藥組、陽(yáng)性對(duì)照組的小鼠6 min內(nèi)不動(dòng)時(shí)間顯著短于陰性對(duì)照組(P<0.01)，鎮(zhèn)驚瀉火顆粒組與鹽酸氟西汀組之間無(wú)顯著差異，與鎮(zhèn)驚瀉火合劑組有顯著差異(P<0.05)。小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。受試藥組、陽(yáng)性對(duì)照組的小鼠4 min內(nèi)不動(dòng)時(shí)間顯著短于陰性對(duì)照組(P<0.01)，受試藥組與陽(yáng)性對(duì)照組之間無(wú)顯著差異。

2.2催眠作用對(duì)苯巴比妥鈉閾下劑量致小鼠入睡只數(shù)、閾上劑量致小鼠睡眠持續(xù)時(shí)間的影響結(jié)果見表2，受試藥組、陽(yáng)性對(duì)照組的小鼠入睡只數(shù)多于陰性對(duì)照組，且小鼠的睡眠持續(xù)時(shí)間顯著長(zhǎng)于陰性對(duì)照組(P<0.01)。

表1鎮(zhèn)驚瀉火顆粒對(duì)小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)和

小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)不動(dòng)時(shí)間的影響

組別劑量懸尾實(shí)驗(yàn)(t/s)強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)(t/s)鎮(zhèn)驚瀉火顆粒組58.5g/kg106.6±14.37**△70.0±15.61**鎮(zhèn)驚瀉火合劑組8ml/kg118.4±18.51**75.8±12.05**鹽酸氟西汀組0.02g/kg101.9±16.22**68.4±12.65**陰性對(duì)照組0168.8±15.0498.7±16.73

**P<0.01，與陰性對(duì)照組比較；△P<0.05，與鎮(zhèn)驚瀉火合劑組比較

表2鎮(zhèn)驚瀉火顆粒對(duì)苯巴比妥鈉致小鼠入睡

只數(shù)和睡眠持續(xù)時(shí)間的影響

組別劑量閾下劑量苯巴比妥鈉致小鼠入睡(只)閾上劑量苯巴比妥鈉致小鼠睡眠持續(xù)時(shí)間(t/min)鎮(zhèn)驚瀉火顆粒組58.5g/kg654.65±6.01**鎮(zhèn)驚瀉火合劑組8ml/kg7*52.71±2.87**地西泮組0.004g/kg7*70.98±5.82**陰性對(duì)照組0143.90±3.62

*P<0.05，**P<0.01，與陰性對(duì)照組比較

3討論

小鼠強(qiáng)迫游泳模型和懸尾模型都提供了一個(gè)無(wú)可回避的壓迫環(huán)境，實(shí)驗(yàn)中小鼠所體現(xiàn)出來(lái)的不動(dòng)狀態(tài)，體現(xiàn)了一種稱之為“行為絕望和扭曲”(behavioral despair and variant)或“對(duì)強(qiáng)壓環(huán)境適應(yīng)的失敗”(failure to adapt to stress)的狀態(tài)[3,6]。這兩種行為絕望模型對(duì)絕大多數(shù)抗抑郁藥敏感， 操作簡(jiǎn)單、 快捷， 被廣泛用于抗抑郁藥物的初篩。 作為判斷指

標(biāo)，不動(dòng)時(shí)間反映了小鼠的一種低落情緒和絕望狀態(tài)[7，8]。不動(dòng)時(shí)間可以被臨床有效的抗抑郁藥及一系列抗抑郁治療方法減少，并且不受抗焦慮藥影響，而那些已知的能導(dǎo)致人抑郁的藥物則可以增加不動(dòng)時(shí)間[6]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果經(jīng)方差分析顯示，鎮(zhèn)驚瀉火顆粒能顯著縮短懸尾及強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中小鼠的不動(dòng)時(shí)間，表明該藥具有良好的抗抑郁作用。而鎮(zhèn)驚瀉火顆粒劑組在懸尾實(shí)驗(yàn)及強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中的小鼠不動(dòng)時(shí)間均短于鎮(zhèn)驚瀉火合劑組，體現(xiàn)其在抗抑郁作用程度上優(yōu)于鎮(zhèn)驚瀉火合劑，這與顆粒劑采用優(yōu)化后的生產(chǎn)工藝有關(guān)。

催眠作用方面，鎮(zhèn)驚瀉火顆粒能夠增加閾下劑量苯巴比妥鈉所致小鼠睡眠只數(shù)。采用Fisher精確概率法檢驗(yàn)，顯示鎮(zhèn)驚瀉火顆粒組與陽(yáng)性對(duì)照組間無(wú)顯著性差異，陽(yáng)性對(duì)照組與陰性對(duì)照組間有顯著性差異(P<0.05)。鎮(zhèn)驚瀉火顆粒組的閾下劑量苯巴比妥鈉所致小鼠睡眠只數(shù)與陰性對(duì)照組相比未顯示顯著差異，但數(shù)量明顯多于陰性對(duì)照組。鎮(zhèn)驚瀉火顆?？娠@著延長(zhǎng)閾上劑量苯巴比妥鈉所致小鼠睡眠持續(xù)時(shí)間。上述結(jié)果說明鎮(zhèn)驚瀉火顆粒及合劑具有催眠作用。

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[修回日期]2015-07-23

[本文編輯]吳銘權(quán)

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·經(jīng)驗(yàn)交流·

[收稿日期]2014-11-14

作者簡(jiǎn)介奚之駿(男)，主管藥師.E-mail:xizhijun@msn.com

基金項(xiàng)目上海市衛(wèi)生局中藥新藥及院內(nèi)制劑研發(fā)項(xiàng)目(2010Y013A)

DOI：10.5428/pcar20150610

[中圖分類號(hào)]R965

[文獻(xiàn)標(biāo)志碼]B

[文章編號(hào)]1671-2838(2015)06-0431,458,480-03