陳　宇 ，權(quán)　毅

(瀘州醫(yī)學(xué)院，646000)

E-cadherin在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中表達(dá)的意義※

陳宇1，權(quán)毅※※

(瀘州醫(yī)學(xué)院，646000)

摘要目的探討E-cadherin在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中的意義。方法篩選浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者129例，使用免疫組化檢測(cè)其石蠟切片中E-cadherin的表達(dá)情況，并使用卡方檢驗(yàn)對(duì)其與臨床病理因素的相關(guān)性進(jìn)行檢驗(yàn)。結(jié)果E-cadherin胞膜的異常表達(dá)與患者的年齡、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)目(LN)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。但與組織學(xué)分級(jí)、腫瘤直徑、病理分期、雌激素受體表達(dá)、孕激素受體表達(dá)、Ki-67及分子亞型有關(guān)(P<0.05)。結(jié)論E-cadherin與乳腺相關(guān)臨床病理因素聯(lián)合檢測(cè)，對(duì)于判斷浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌的惡性程度及侵襲性有一定預(yù)測(cè)價(jià)值。暫不能認(rèn)為其對(duì)于遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有預(yù)測(cè)價(jià)值。

關(guān)鍵詞浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌E-cadherin相關(guān)性

通信作者陳宇(1987~)，女，漢族，籍貫：四川成都，四川瀘州醫(yī)學(xué)院在讀研究生. ※※：，Email:20783833@qq.com

*：瀘州市聯(lián)合瀘州醫(yī)學(xué)院科技計(jì)劃基金(14JC0197-LH38)

中圖分類號(hào)R737.9

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼識(shí)碼A

DOI：10.13452/j.cnki.jqmc.2015.02.011

AbstractObjectiveTo investigate the expression of E-cadherin in infiltrating ductal carcinoma(IDC)and their relationship.Methods Selecting 129 patients with invasive ductal carcinomas from January 2014 to January 2015 in our hospital. Immunohistochemistry of E-cad was performed from paraffin specimens of 129 IDC and using Chi-square to test the correlation between its expression with clinical pathological factors.Results The relationship between the abnormal expression of E-cad with the patient′s age，number of LN and M was not significant(P>0.05)in IDC.But it showed significant difference(P<0.05)in WHO，tumor size，tumor tissue pathological staging(pTNM)，ER，PR，Ki-67 and molecular subtypes.Conclusion Some predictive value for the degree of malignancy and invasiveness of IDC are shown when using both E-cad and clinical pathological factors.There is no predictive value for distant metastasis.

KeywordsInfiltrating ductal carcinomaE-cadherinRelationship

收稿日期2015-03-03

THE SIGNIFICANCE OF E-cadherin′s EXPRESSION

IN INFITRATING DUCTAL CARCINOMA

Chen Yu1，Quan Yi※※

(Luzhou University Medical College)

上皮-鈣粘蛋白(E-cadherin，E-cad)是CAMs家族中最重要的一員，是上皮細(xì)胞的主要粘附分子，E-cad分子由包膜外區(qū)、跨膜區(qū)以及包漿區(qū)組成，包膜外區(qū)部分具有結(jié)合鈣離子的能力，其胞漿區(qū)高度保守，通過(guò)鏈蛋白(α、β、γ)與肌動(dòng)蛋白纖維相連形成復(fù)合體，用以維持細(xì)胞間粘附的穩(wěn)定性和細(xì)胞極性，介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞間粘連，參與細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)，對(duì)胚胎發(fā)育中細(xì)胞的識(shí)別、遷徙和組織分化起到重要的作用[1]。一旦發(fā)生異常，上皮細(xì)胞的腫瘤則獲得具有從原發(fā)腫瘤處游離及橫穿基底膜的能力。E-cadherin與乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌的病理因素間關(guān)系尚無(wú)定論。本研究通過(guò)采用免疫組化對(duì)129例乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌E-cad的表達(dá)情況，研究其與乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌病理因素間的關(guān)系。

1資料與方法

1.1　一般資料

選擇2014年1月至2015年1月就診于瀘州醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院乳腺外科的浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌患者129例，平均年齡46.2±6.4歲。術(shù)前均未進(jìn)行過(guò)任何治療，包括化療、放療、內(nèi)分泌及靶向治療等。術(shù)后診斷為浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌。兩名病理醫(yī)師行雙盲獨(dú)立診斷。同時(shí)將雌激素(Estrogen receptor，ER)、孕激素受體(Progesterone Receptor，PR)、人表皮生長(zhǎng)因子2(Human Epidermal Growth Factor Receptor 2，HER-2 )及Ki-67表達(dá)進(jìn)行復(fù)讀[2]，Her-2(++)由FISH檢測(cè)判斷。并根據(jù)組織學(xué)分級(jí)分為WHO I、II、III級(jí)[3]。根據(jù)美國(guó)腫瘤聯(lián)合會(huì)(AJCC)病理標(biāo)準(zhǔn)[4]對(duì)腫瘤直徑(T)、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況(Lymphatic Metastasis，LN)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移(Metastasis，M)情況及病理分期情況(pTNM)進(jìn)行判定。根據(jù)St.Gallen國(guó)際乳腺大會(huì)共識(shí)將乳腺癌分為L(zhǎng)uminal A型、Luminal B型、Her-2過(guò)度表達(dá)及三陰性組[5]。

1.2　主要試劑

一抗：鈣粘附蛋白(24E10)兔源單抗，由美國(guó)cell signaling 公司提供。二抗：通用型由美國(guó)DAKO公司提供。免疫組化試劑盒及DAB顯色劑等由北京Boiss生物技術(shù)公司提供。

1.3　評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)高倍鏡視野內(nèi)陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比記分：無(wú)、<25%、26%~50%、51 %~75%、>75%分別記為0、1、2、3、4分。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞染色程度記分：無(wú)、淡黃、棕黃、棕褐分別記為0、1、2、3分。兩種記分結(jié)果相加，0~1分為陰性(-)；2~3分為弱陽(yáng)性(+)； 4~5分為中等陽(yáng)性(++)； 6~7分為強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。當(dāng)腫瘤細(xì)胞膜表達(dá)強(qiáng)度為+~++時(shí)判定為異常表達(dá)，表達(dá)強(qiáng)度為+++時(shí)為正常表達(dá)。

1.4　統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

應(yīng)用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料采用卡方檢驗(yàn)或采用Fisher精確概率法，當(dāng)P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

IDC中癌細(xì)胞呈巢狀分布且基底膜被破壞，見(jiàn)圖1。E-cad在IDC中呈現(xiàn)出不同程度的膜缺失，其中膜表達(dá)(+~++)為異常表達(dá)，見(jiàn)圖2，膜表達(dá)(3+)為正常表達(dá)，見(jiàn)圖3。

E-cad的異常表達(dá)與WHO、pTNM、ER、PR、Ki-67及腫瘤直徑、分子亞型均有關(guān)。①呈現(xiàn)出組織學(xué)分化越差，其異常表達(dá)越明顯；②當(dāng)腫瘤直徑大于2 cm后其異常表達(dá)明顯增加；③ER、PR陰性者其異常表達(dá)明顯高于ER、PR陽(yáng)性者；④Ki-67高表達(dá)者異常表達(dá)明顯高于低表達(dá)者；⑤在分子亞型中，其異常表達(dá)率Luminal A

圖1乳腺癌HE染色圖(×200)圖2E-cad(1+)圖(×400)

Figure 1HE staining of breast cancer(×200)Figure 2The expression of E-cad(1+)(×400)

圖3　E-cad(3+)(×400)

表1 E-cad在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌不同臨床病理因素中的表達(dá)情況(%)

續(xù)表：

3討論

乳腺癌起源于乳腺導(dǎo)管上皮，分為原位癌及浸潤(rùn)性癌，浸潤(rùn)性癌分為特殊類型及非特殊類型(浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌，infitrating ductal carcinoma，IDC)，其中IDC約占80%[3]。本研究將E-cad在IDC中的表達(dá)情況與其臨床病理因素相結(jié)合，為IDC的研究提供更多的理論依據(jù)。

E-cad是CAMs家族中最重要的一員，由CDH1(16q22.1)編碼的跨膜蛋白，是上皮細(xì)胞的主要黏附分子，介導(dǎo)同種上皮細(xì)胞表面同種分子間的識(shí)別和結(jié)合[1]。1989年，Y S[6]等人研究發(fā)現(xiàn)E-cad的表達(dá)減少具有介導(dǎo)上皮腫瘤的浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移，且人為增加E-cad時(shí)其浸潤(rùn)能力下降，在體內(nèi)也是如此。隨著研究的進(jìn)一步深入，已經(jīng)證實(shí)E-cad在胃癌[7]、肺癌[8]等多種惡性腫瘤中有不同程度的表達(dá)減少或缺失。Pang H[9]等人對(duì)170例乳腺癌進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)E-cad與乳腺癌組織學(xué)分級(jí)等有關(guān)，但對(duì)于乳腺癌的預(yù)后浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移沒(méi)有發(fā)現(xiàn)預(yù)測(cè)價(jià)值。且有研究者[10-11]認(rèn)為與ER、PR、HER-2及病理分期、是否為三陰性乳腺癌等均無(wú)關(guān)，僅與組織學(xué)分級(jí)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)，但是其呈現(xiàn)出低分化者的表達(dá)高于高分化者。

本研究中E-cad在細(xì)胞膜中表現(xiàn)出不同程度的丟失，其異常表達(dá)率為(+~++)58.1%(25/43)。但異常表達(dá)程度與患者的年齡、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)情況及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等無(wú)相關(guān)性(P>0.05)，尚不能認(rèn)為其與上述臨床病理因素有關(guān)。其中與年齡無(wú)顯著相關(guān)性與所有文獻(xiàn)結(jié)論一致，與腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)情況及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等的關(guān)系在眾多文獻(xiàn)中均存在爭(zhēng)議性。其異常表達(dá)與腫瘤的組織學(xué)分級(jí)、腫塊大小、病理分期和ER、PR、HER-2、Ki-67及分子亞型有差異(P<0.05)，與A .B等人研究結(jié)果不符[12]。本研究中E-cad在WHO Ⅰ及Ⅱ級(jí)中膜表達(dá)無(wú)顯著差異，但在Ⅱ級(jí)及Ⅲ級(jí)中有顯著差異，且Ⅲ級(jí)中表達(dá)異常明顯高于Ⅱ級(jí)(44%vs 87.8%，P<0.05)，腫瘤分級(jí)越高，其膜丟失越嚴(yán)重[13]。腫塊大小中，T1與T2、T3均有差異，且其異常表達(dá)率為46.7%vs 64%，46.0%vs 66.6%，P<0.05，T2與T3其異常表達(dá)無(wú)差異，腫塊大于2 cm者膜表達(dá)明顯減少[14]。在病理分期中，分期越高，膜表達(dá)丟失越多，與文獻(xiàn)結(jié)論一致[8]。而ER及PR陽(yáng)性者其膜異常表達(dá)率均低于ER及PR陰性者(31.8%vs 85.7%，25%vs 77.8%，P<0.05)與Taneja S[11]等人結(jié)論一致，但與Da Silva B[10]等人結(jié)論不一致。在進(jìn)行類似的研究[10.15]中顯示E-cad的膜表達(dá)缺失與HER-2的表達(dá)有關(guān)，陽(yáng)性者表現(xiàn)出更加強(qiáng)烈的膜丟失，但本實(shí)驗(yàn)陰性者表現(xiàn)出更加高的E-cad缺失率(64.7%vs33.3%)，可能是在樣本采集時(shí)所選擇陰性的比例更大或腫瘤異質(zhì)性所致。本研究中E-cad的異常表達(dá)與Ki-67是否過(guò)度表達(dá)有關(guān)[16]，過(guò)度表達(dá)者表現(xiàn)出更加高的異常表達(dá)率(68.75%vs 27.3%)。本研究顯示E-cad的異常表達(dá)表達(dá)強(qiáng)度LuminalA

將E-cad與乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌的病理因素聯(lián)合檢測(cè)，有可能對(duì)于乳腺的惡性程度具有檢測(cè)意義。就本研究而言，暫不能認(rèn)為其與淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)。而對(duì)于E-cad在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中的意義仍需要進(jìn)一步擴(kuò)大樣本研究。

參考文獻(xiàn)

[1]S H.Molecular aspects of adhesion-epigenetic mechanisms for inactivation of the E-Cadherin-mediated cell adhesion system in cancers[J].Verh Dtsch Ges Pathol，2000，84：28-32.

[2]No authors.Pathologists′ Guideline Recommendations for Immunohistochemical Testing of Estrogen and Progesterone Receptors in Breast Cancer[J].Breast Care，2010，5(3)：185-187.

[3]C G，B Z，B A，et al.Comparison of the prognostic value of Scarff-Bloom-Richardson and Nottingham histological grades in a series of 825 cases of breast cancer：Major importance of the mitotic count as a component of both grading systems[J].Anticancer Research，1998，18(1B)：571-576.

[4]佚名.美國(guó)《AJCC癌癥分期手冊(cè)》第6版(中文版)[J].中國(guó)腫瘤，2005，14(12)：821-821.

[5]Goldhirsch A.Personalizing the treatment of women with early breast cancer：highlights of the St Gallen International Expert Consensus on the Primary Therapy of Early Breast Cancer 2013[J].Annals of Oncology Official Journal of the European Society for Medical Oncology，2013，24(9)：2206-2223.

[6]Y S，S H，S H，et al.Cadherin cell-adhesion molecules in human epithelial tissues and carcinomas[J].Cancer Res，1989，49(8)：2128-2133.

[7]Li N，Deng W，Ma J，et al.Prognostic evaluation of Nanog，Oct4，Sox2，PCNA，Ki67 and E-cadherin expression in gastric cancer[J].Medical Oncology，2015，32(1)：1-9.

[8]Yang Y L，Chen M W，Xian L.Prognostic and Clinicopathological Significance of Downregulated E-Cadherin Expression in Patients with Non-Small Cell Lung Cancer(NSCLC)：A Meta-Analysis[J].PloS one，2014，9(6)：e99763.

[9]Pang H，Lu H，Song H，et al.Prognostic values of osteopontin-c，E-cadherin and β-catenin in breast cancer[J].Cancer epidemiology，2013，37(6)：985-992.

[10]Da Silva B B，Dos Santos A R，Pires C G，et al.E-cadherin expression in estrogen receptor-positive and negative breast carcinomas of postmenopausal women[J].Eur J Gynaecol Oncol，2010，31(1)：90-3.

[11]Taneja S，Evans A J，Rakha E A，et al.The mammographic correlations of a new immunohistochemical classification of invasive breast cancer[J].Clinical radiology，2008，63(11)：1228-1235.

[12]A B，T S，D D，et al.Evaluation of prognostic parameters of E-cadherin status in breast cancer treatment[J].Ann Agric Environ Med，2012，19(3)：541-546.

[13]Charpin C，Garcia S，Bonnier P，et al.Reduced E-cadherin immunohistochemical expression in node-negative breast carcinomas correlates with 10-year survival[J].American journal of clinical pathology，1998，109(4)：431-438.

[14]Suciu C，Cimpean A M，Muresan A M，et al.E-cadherin expression in invasive breast cancer[J].Rom J Morphol Embryol，2008，49(4)：517-523.

[15]Howard E M，Lau S K，Lyles R H，et al.Correlation and expression of p53，HER-2，vascular endothelial growth factor(VEGF)，and e-cadherin in a high-risk breast-cancer population[J].International journal of clinical oncology，2004，9(3)：154-160.

[16]羅明華，李劍，余光銀，等.乳腺癌不同分子亞型中Wnt/β-catenin信號(hào)傳導(dǎo)通路的異常表達(dá)[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2015，31(1)：2.