徐佳彬，趙硯瑾，李庶心(1.江西中醫(yī)藥大學藥學院，江西南昌　330006; .軍事醫(yī)學科學院放射與輻射醫(yī)學研究所，北京　100850)

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Varlitinib的全合成*

徐佳彬1，2，趙硯瑾2，李庶心2
(1.江西中醫(yī)藥大學藥學院，江西南昌330006; 2.軍事醫(yī)學科學院放射與輻射醫(yī)學研究所，北京100850)

摘要:以2-氯-4-硝基苯酚和2-氰基-4-硝基苯胺為起始原料，經(jīng)7步反應(yīng)完成了EGFR酪氨酸激酶抑制劑Varlitinib的全合成，總收率18.2%，其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H NMR和13C NMR確證。

關(guān)鍵詞:EGFR酪氨酸激酶抑制劑; Varlitinib;藥物合成

表皮生長因子受體(EGFR)酪氨酸激酶屬于受體酪氨酸激酶的一種，在細胞的生長、增殖和分化等眾多生理過程發(fā)揮重要的作用，其功能缺失或相關(guān)信號通路中關(guān)鍵因子的活性或細胞定位異常，均會引起腫瘤、糖尿病、免疫缺陷及心血管疾病的發(fā)生［1］。臨床研究發(fā)現(xiàn)，由于EGFR及其配體的過度表達或突變所致的異常的EGFR信號轉(zhuǎn)導與實體瘤生成密切相關(guān)，EGFR在腫瘤的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。因此針對表皮生長因子受體的抗腫瘤藥物為癌癥治療提供一個新機遇［2］。

Varlitinib是一種高效選擇性EGFR和ErbB2抑制劑，IC50分別為7 nM和2 nM［3］。本課題組在研究EGFR抑制劑的過程中，全合成了Varlitinib用作藥理學實驗的陽性對照。以2-氯-4-硝基苯酚(1)和2-氰基-4-硝基苯胺(4)為起始原料，經(jīng)7步反應(yīng)合成了Varlitinib(Scheme 1)，總收率18.2%，其結(jié)構(gòu)經(jīng)1H NMR和13C NMR確證。

在Varlitinib的全合成中，對文獻［3－6］方法進行了改進，大幅度地提高了收率并簡化了操作。

1　實驗部分

1.1儀器與試劑

RY-1型數(shù)字熔點儀(溫度未校正); JNMECA-400 MHz型超導核磁共振儀(DMSO-d6為溶劑，TMS為內(nèi)標)。

所用試劑均為分析純。

1.2合成

Scheme 1

(1)3-氯-4-(噻唑-2-甲氧基)硝基苯(2)的合成在反應(yīng)瓶中依次加入1 4.44 g(26 mmol)，碳酸鉀8.85 g(64 mmol)，碘化鉀2.12 g(12 mmol)和DMF 150 mL，攪拌下于室溫反應(yīng)30 min。加入2-氯甲基噻唑3.42 g(26 mmol)，氮氣保護下于80℃反應(yīng)5 h。冷卻至室溫，攪拌下傾入水(300 mL)中，有固體析出;抽濾，濾餅用水(3×10 mL)洗滌，干燥得黃色固體2 5.75 g，產(chǎn)率81.7%，m.p.169℃～173℃;1H NMR δ:5.53(s，2H)，7.11(d，J=8.6 Hz，1H)，7.35(d，J=8.6 Hz，1H)，7.79～7.83(m，1H)，7.89(d，J=3.3 Hz，1H)，7.93(d，J=3.4 Hz，1H)。

(2)3-氯-4-(噻唑-2-甲氧基)苯胺(3)的合成

氮氣保護，在反應(yīng)瓶中加入2 5.75 g(21 mmol)，氯化銨4.54 g(84 mmol)和鐵粉9.4 g(169 mmol)，攪拌下于80℃反應(yīng)40 min。趁熱抽濾，濾餅用熱乙醇反復(fù)沖洗;合并濾液與洗液，減壓濃縮后用乙酸乙酯(3×40 mL)萃取，合并萃取液，用飽和食鹽水(2×50 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥;減壓濃縮后用乙醇重結(jié)晶得白色固體3 4.2 g，產(chǎn)率82.3%，m.p.184℃～186℃;1H NMR δ:3.89(s，2H)，5.41(s，2H)，7.06(d，J=8.1 Hz，1H)，7.33(d，J=8.2 Hz，1H)，7.46～7.54(m，1H)，7.79(d，J=3.6 Hz，1H)，7.83(d，J=3.6 Hz，1H)。

(3)N-［3-氯-4-(噻唑-2-甲氧基)苯基］-6-硝基喹唑啉-4-胺(6)的合成

在反應(yīng)瓶中依次加入4 3 g(18.6 mmol)和N，N-二甲基甲酰胺二甲縮醛(DMFA)30 mL，攪拌下回流(100℃)反應(yīng)1 h得5。減壓蒸除過量DMFA，加入3 4.2 g(15.5 mmol)和冰醋酸20 mL，回流(120℃)反應(yīng)2 h(TLC跟蹤)。用10% NaOH溶液調(diào)至pH 8～9，有黃色固體析出;過濾，濾餅用水(3×10 mL)洗滌，干燥得黃色固體6 6.3 g，產(chǎn)率98.3%，m.p.209℃～214℃;1H NMR δ:5.55(s，2H)，7.08(d，J=8.5 Hz，1H)，7.35(d，J=8.5 Hz，1H)，7.65～7.71(m，2H)，7.82(d，J=3.0 Hz，1H)，7.86(d，J=3.1 Hz，1H)，8.13(d，J=2.6 Hz，1H)，8.43(d，J=2.8 Hz，1H)，8.61(s，1H)，9.37(s，1H);13C NMR δ:175.11，166.96，165.48，153.59，152.41，146.69，145.53，143.32，142.31，133.65，129.54，120.65，119.76，116.53，116.31，112.03，111.92，76.98。

(4)N4-［3-氯-4-(噻唑-2-甲氧基)苯基］-喹唑啉-4，6-二胺(7)的合成

在反應(yīng)瓶中加入6 6.3 g(15.1 mmol)，氯化銨3.32 g(62 mmol)及鐵粉7.14 g(0.13 mol)，氮氣保護，攪拌下于80℃反應(yīng)40 min。趁熱抽濾，濾液用乙酸乙酯(3×50 mL)萃取，合并萃取液，用飽和食鹽水(3×50 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥;減壓濃縮后用乙醇重結(jié)晶得白色固體7 3.78 g，產(chǎn)率65.1%，m.p.226℃～229℃;1H NMR δ:5.39(s，2H)，7.08(d，J=8.8 Hz，1H)，7.35(d，J=8.8 Hz，1H)，7.65～7.71(m，2H)，7.82(d，J=3.3 Hz，1H)，7.86(d，J=3.2 Hz，1H)，8.08(d，J=2.3 Hz，1H)，8.33(d，J=2.0 Hz，1H)，8.59(s，1H)，9.40(s，1H)。

(5)N4-［3-氯-4-(噻唑-2-甲氧基)苯基］-N6-(2-苯氧基-N-氰基異脲)-喹唑啉-4，6-二胺(8)的合成

在反應(yīng)瓶中加入7 3.78 g(9.83 mmol)，THF 15 mL和異丙醇15 mL，攪拌使其溶解;加入二苯氧基-N-氰羰亞胺4.06 g(17.1 mmol)，回流(70 ℃)反應(yīng)6 h。旋干溶劑，加乙酸乙酯10 mL，有黃色固體析出;抽濾，濾餅干燥得黃色固體8 4.38 g，直接用于下步反應(yīng)。

(6)Varlitinib的合成

在反應(yīng)瓶中加入8 4.38 g(8.27 mmol)，THF 15 mL和異丙醇15 mL，攪拌使其溶解;加入(R)-2-氨基-1-丙醇1.83 g(24.7 mmol)，于室溫反應(yīng)6 h。減壓濃縮反應(yīng)液，殘余物用水100 mL稀釋，用乙酸乙酯(3×30 mL)萃取，合并萃取液，用無水硫酸鈉干燥;減壓濃縮得黃色油狀物，加水10 mL，有白色固體析出;過濾，濾餅干燥后用乙醇重結(jié)晶得白色固體Varlitinib 2.21 g，產(chǎn)率57.2%，m.p.201℃～203℃;1H NMR δ:1.00～1.23(m，3H)，3.39～3.41(m，1H)，3.43～3.47(m，1H)，3.95～3.98(m，1H)，5.56(s，2H)，7.07～7.09(d，J=8.4 Hz，1H)，7.34～7.36(d，J=8.8 Hz，1H)，7.68～7.76(m，2H)，7.81～7.82(d，J=3.1 Hz，1H)，7.86～7.84(d，J=3.3 Hz，1H)，8.07～8.08(d，J=2.4 Hz，1H)，8.33～8.34(d，J=2.1 Hz，1H)，8.57(s，1H)，9.40(s，1H)，9.69(s，1H);13C NMR δ:179.5，167.36，165.88，157.16，154.33，143.69，143.22，142.37，140.11，129.10，128.79，126.68，124.65，122.47，119.49，116.55，114.79，99.61，73.46，61.28，55.14，16.89。

2　結(jié)果與討論

實驗中曾參考拉帕替尼中間體的合成方法［4－6］合成6。但在比較多種合成路線后，采用了后處理簡單、環(huán)境污染小的方法。即以1為起始原料，經(jīng)取代和還原反應(yīng)得3。4與DMFA反應(yīng)制5后，再與3進行Dimroth重排合成6。

在8的合成中，文獻［3］方法(100℃反應(yīng)20 h后經(jīng)柱色譜分離)存在反應(yīng)時間長，溫度高且純化復(fù)雜等缺陷，不適于大量生產(chǎn)。本文對其進行工藝改進:(1)采用THF和異丙醇替代叔丁醇，THF和DCE，可以降低反應(yīng)溫度，減少溶劑使用量;(2)于室溫反應(yīng)6 h后用乙酸乙酯萃取，加水便析出產(chǎn)物，再用乙醇重結(jié)晶提高純度［7］。改進方法具有反應(yīng)條件溫和，方法簡便，避免了高溫長時間反應(yīng)，且不必使用柱色譜，可適用于規(guī)?；a(chǎn)等優(yōu)點。

參考文獻

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·制藥技術(shù)·

Total Synthesis of Varlitinib

XU Jia-bin1，2，ZHAO Yan-jin2，LI Shu-xin2
(1.College of Pharmacy，Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine，Nanchang 330006，China;
2.Institute of Radiation and Irradiation Medicine，Academy of Military Medical Sciences，Beijing 100850，China)

Abstract:Varlitinib was synthesized in total yield of 18.2% by a seven-step reaction，using 2-chloro-4-nitrophenol and 2-amino-4-nitrobenzonitrile as the starting materials.The structure was confirmed by1H NMR and13C NMR.Keywords:EGFR tyrosine inhibitor; Varlitinib; drug synthesis

作者簡介:徐佳彬(1991－)，男，漢族，江西撫州人，碩士研究生，主要從事藥物合成的研究。E-mail:923258923@ qq.com

基金項目:國家自然科學基金資助項目(30772628)

收稿日期:2014-04-24;

修訂日期:2015-01-06

DOI:10.15952/j.cnki.cjsc.1005－1511.2015.06.0550 *

文獻標識碼:A

中圖分類號:O629.11; R914.5

通信聯(lián)系人:李庶心，研究員，Tel.010-66932289，E-mail:lisx28@163.com