MTDH、miR-26a與腫瘤關系的研究進展

楊晨晨1綜述盧曉梅2審校

(1新疆醫(yī)科大學, 烏魯木齊830011;2新疆醫(yī)科大學臨床醫(yī)學研究院, 烏魯木齊830054)

中圖分類號：R73-34文獻標識碼：A

doi:10.3969/j.issn.1009-5551.2015.01.032

目前，腫瘤相關基因的研究仍然是腫瘤研究的熱點與難點。臨床研究表明，腫瘤細胞信號通路中的特定基因的擴增/突變/表達狀態(tài)與靶向、化療藥物的有效性密切相關。腫瘤分子標記物的檢測有助于發(fā)現(xiàn)新發(fā)腫瘤，臨床上檢測特定基因的異常改變情況，能針對性地為每位患者量身定做一套最適合的治療方案，從而最大程度地提高治療的有效率，減少藥物的毒副作用，避免用藥不當貽誤治療時機。同時，分子標記物的檢測可以對相關腫瘤預后進行評價。找到1個或多個與某個腫瘤相關的基因，有助于腫瘤的早期診斷、治療方案的選擇及判斷預后。腫瘤轉移是惡性腫瘤中普遍存在的現(xiàn)象，同時也是治療失敗和導致患者死亡的主要原因之一。腫瘤的轉移是癌細胞與宿主細胞相互作用的復雜過程，由一系列復雜的基因調(diào)控系統(tǒng)所組成。因此，幾年來對于腫瘤分子生物學的研究重點逐漸轉至腫瘤轉移基因與抑制腫瘤轉移基因，并對這些基因的調(diào)控因子和轉移過程中的作用機制進行研究，期望通過揭示腫瘤轉移在基因水平的本質(zhì)，為改進腫瘤的診斷方法和治療手段提供依據(jù)。MTDH基因又稱星形細胞提升基因-1(astrocyte elevated gine-1，AEG-1)、LYRIC是2002年首次克隆出來的新基因。MTDH基因定位在人類8號染色體上(8q22)，由于其能幫助腫瘤細胞緊貼上遠距離的血管，因此對于癌癥的擴散和轉移意義重大[1]。微小RNA(MicroRNAs,miRNAs)是一類由22～23個核苷酸組成的具有調(diào)控功能的非編碼小分子RNA，miRNAs通過與mRNA的3’-UTRs結合而發(fā)揮調(diào)控作用[2]。有的miRNAs通常在腫瘤中表達下調(diào)，發(fā)揮著抑癌基因的作用，而有的miRNAs則起著癌基因的作用[3-4]。研究表明，miR-26a抑制鼻咽癌、乳腺癌、肝癌細胞的增殖[5-7]，但卻促進膠質(zhì)瘤細胞的增殖[8-9]。miR-26a可能在不同的腫瘤和不同的組織學類型中發(fā)揮著不同的作用。在Target Scan Human查到miR-26a的下游靶基因是MTDH。本文就MTDH與miR-26a在惡性腫瘤中的作用以及MTDH與miR-26a關系作一綜述。

1MTDH與在惡性腫瘤中作用的研究進展

1.1MTDH基因的結構與細胞定位MTDH最初在人胚胎初級星形膠質(zhì)細胞中被發(fā)現(xiàn)，位于與多種惡性腫瘤發(fā)生密切相關的人類8號染色體(8q22)上，其啟動區(qū)無TATA或CAAT，富含GC和多個SPI基序[10]。MTDH由 12 個外顯子和 11個內(nèi)含子組成[11]。MTDH作為一種緊密連接蛋白，其同源物在鼠體內(nèi)也被克隆，并被命名為LYRIC(3D3/Lyric)。MTDH 的cDNA，包括poly-A 尾，由3 611個堿基組成，其開放閱讀框架220～1 968 bp，編碼582個氨基酸，分子量64 ku，等電點是 9.33。MTDH在胞膜、胞質(zhì)(如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、核周)、胞核及特定區(qū)域核膜、核仁、核質(zhì)中都有分布[12-13]。MTDH的多種亞細胞定位，可能與不同條件下、不同細胞中發(fā)揮的作用不同有關[14-15]。

1.2MTDH與信號通路MTDH可激活多個致癌性的信號轉導通路，在介導MTDH的多效功能中發(fā)揮作用。

1.2.1PI3K/AKT信號通路PI3K/AKT是參與由MTDH介導的腫瘤發(fā)生的1條途徑。PI3K/AKT 信號通路不僅由MTDH 激活，而且可以調(diào)節(jié)MTDH的表達。Lee等[16]報道，MTDH表達不僅激活PI3K/AKT通路和c-Myc，其本身可激活PI3K/AKT和誘導c-Myc基因的表達，并在神經(jīng)母細胞瘤激活c-Myc基因的表達，從而導致神經(jīng)母細胞瘤的發(fā)生。人腦膠質(zhì)瘤細胞中，AKT活化是VEGF的啟動子，同時在MTDH介導的HIF1-α上調(diào)中發(fā)揮作用[17]。PI3K/AKT信號調(diào)節(jié)多種生長調(diào)節(jié)轉錄因子，如叉頭框(FOXO)蛋白和NF-κB。在前列腺癌細胞中，下調(diào)MTDH抑制AKT的活化，導致叉頭框(FOXO)3a和P27的活性增強，最終導致細胞凋亡[18]。在食管癌細胞，由MTDH激活AKT，導致細胞周期蛋白D1(cyclin D1) 的上調(diào)和 P27的下調(diào)[19]。此外，MTDH 的下調(diào)抑制NF-κB 和激活蛋白-1(AP-1)的級聯(lián)活性，而mRNA和蛋白質(zhì)表達水平的NF-κB和AP-1調(diào)節(jié)的基因 IL-6、IL-8和基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)顯著下降。 PC-3和 DU145細胞的侵襲能力也大幅降低。PI3K/AKT的激活導致與MDR1 mRNA有關的多核糖體增加而導致的化學耐藥[20]。因此，PI3K/AKT活化介導的MTDH，但是由MTDH激活該途徑的機制仍有待確定。

1.2.2MTDH 與NF-κB信號通路NF-κB信號通路是被確定的另一條激活MTDH的信號通路。在HeLa細胞和人惡性膠質(zhì)瘤細胞中，采用誘導MTDH表達的腫瘤壞死因子-α (TNF-α)進行干預，MTDH 轉至核內(nèi)表達，與NF-κB的p65亞基發(fā)生反應，并且促進NF-κB 誘導的基因表達。在人前單核細胞，LPS通過NF-κB活化MTDH的表達。另一方面，MTDH自身活化NF-κB，抑制MTDH的活性，可以抑制LPS誘導的促炎性細胞因子如TNF-α和PGE 2的產(chǎn)生。MTDH在細菌感染中發(fā)揮潛在的免疫作用，MTDH可能在腫瘤的炎癥機制中起關鍵作用[21]。Lee 等[22]報道，在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞中，MTDH 與p65 直接發(fā)生作用，充當NF-κB的共同激活物，但是TNF-α 減少了NF-κB 依賴性的EAAT2的表達。提示NF-κB可能是MTDH介導的EAAT2 抑制的1條信號通路。TNF-α介導的NF-κB抑制并不是普遍現(xiàn)象，TNF-α 還是NF-κB表達的正向調(diào)節(jié)劑，但是其機制并不是十分清楚。MTDH 作為橋梁分子可促進NF-κB與CBP之間的相互作用，因此充當共活化劑的作用，從而誘導NF-κB 依賴性的基因活化。Emdad等[23]報道，MTDH 激活NF-κB，能促進腫瘤細胞的侵襲和遷移，從而間接有助于腫瘤血管的形成。Zhang等[24]報道，MTDH通過降低Caspase 3 的裂解，激活NF-κB信號通路，增強了HeLa細胞的自噬能力，從而導致宮頸癌細胞的化療耐藥，因此MTDH可能被用作治療靶標，以克服宮頸癌的化療耐藥。

1.2.3絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)和Wnt信號通路除了NF-κB和AKT途徑，MTDH還激活MAP激酶途徑，特別是ME/ERK和p38蛋白激酶途徑，抑制任何一條路徑可導致MTDH誘導的致癌作用的終止。在肝細胞癌中，MTDH通過對激活Raf/MEK/MAPK與Wnt基因/β-catenin的途徑相關聯(lián)[25]。在人肝癌細胞HepG3細胞中，MTDH過表達能活化包括ERK 和p38的MAP激酶活性。激酶磷酸化糖原合酶激酶(GSK3β)可增加β-catenin蛋白的穩(wěn)定性及核易位。LEF-1是與β-catenin相互作用的轉錄因子，在細胞核內(nèi)表達。MTDH的過表達也增加了LEF-1的表達水平。MAPK途徑的特異性抑制劑能夠抑制致癌作用，阻礙基底膜浸潤和癌癥的錨定非依賴性生長[25]。抑制MTDH可減少磷酸化的AKT和GSK-3β，降低β-catenin、淋巴增強結合因子1(LEF1)和細胞周期素D1的水平[26]。提示MTDH可能參與Wnt/β-catenin介導的腫瘤發(fā)生。MTDH的靶向抑制可以為癌癥提供一種新的治療策略。最近一項研究表明，上調(diào)MTDH可提高彌漫性大B細胞淋巴瘤(DLBCL)細胞系中β-catenin總蛋白的表達水平，促進β-catenin直接或間接易位至胞核，MTDH的下調(diào)能減少β-catenin總蛋白及胞質(zhì)β-catenin蛋白水平，并減少胞核中β-catenin的表達，提示MTDH對DLBCL的發(fā)展中的作用是通過Wnt基因/β-catenin信號通路調(diào)節(jié)介導的[2]。

1.3MTDH的臨床意義MTDH的異常表達可以促進腫瘤的增殖、侵襲、化療抗性、血管生成和轉移，是腫瘤標記物之一，在很多腫瘤中，MTDH作為一個獨立的生物標志物與腫瘤的高度侵襲性轉移有關，同時MTDH的高表達提示該腫瘤預后較差。 MTDH蛋白在細胞核或細胞質(zhì)定位可以預測癌癥的過程和預后。

1.3.1MTDH與食管癌食管癌是世界上最普遍的惡性腫瘤之一。食管癌在全球范圍內(nèi)的發(fā)生率和死亡率分別位于惡性腫瘤的第8位和第6位[27]，是中國的四大惡性腫瘤，也是我國死亡率較高的消化道惡性腫瘤之一[28]。食管癌分為食管鱗狀細胞癌(ESCC)和腺癌(ECA)2種類型。Yu等[29]發(fā)現(xiàn)了MTDH的表達顯著上調(diào)食管癌細胞系及食管癌標本在轉錄和翻譯水平的表達。免疫組化分析顯示，47.6%68/168(47.6%)的食管癌石蠟組織中MTDH 高表達。統(tǒng)計分析表明MTDH的上調(diào)是與食管癌患者的臨床分期(P=0.001)、TNM分期(P值分別為 0.002、0.034和0.021)及組織分化程度(P=0.035)有關。而MTDH高表達的患者存活率更短(P<0.001)。多因素分析顯示，MTDH 表達可能是食管鱗狀細胞癌存活的一個獨立的預后指標。與其他研究所不同的是，該項研究顯示，男性食管癌患者MTDH的表達顯著高于女性患者，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.041)，男性特異性MTDH過表達分子機制和這一觀察結果的潛在影響仍有待進一步研究。

1.3.2MTDH與頭頸部鱗狀細胞癌頭頸部鱗狀細胞癌(HNSCC)是頭頸部惡性腫瘤最為常見的一個類型，是全球第六大常見惡性腫瘤。這類腫瘤的惡性程度高，晚期存活率較低，預后不佳。Wang等[30]報道，MTDH的高表達與區(qū)域淋巴結轉移和較差的5年生存率密切相關。HNSCC細胞系中MTDH的下調(diào)減少了HNSCC 細胞系的集落形成、遷移和侵襲能力。相對于正常組織，MTDH在HNSCC組織中高表達，miR-375在HNSCC組織中低表達(P=0.015和P=0.008)。轉染si-MTDH后，頭頸部鱗癌細胞的增殖顯著受到抑制，MTDH可能是頭頸部鱗癌的癌基因[31]。

1.3.3MTDH與乳腺癌乳腺癌是第2種最常見的癌癥，是導致美國婦女死亡的首要原因[32-33]。中國不是乳腺癌的高發(fā)國家，但不宜樂觀。Li等[34]首先提出MTDH是一種致癌的Ha-ras基因的靶基因，在含有癌細胞的原發(fā)性乳腺癌組織以及轉移性的區(qū)域中檢測到MTDH的高表達，統(tǒng)計分析表明MTDH的表達與臨床分期(P=0.001)、T分期(P=0.004)、N分期(P=0.026)和M分期有關(P=0.001)。MTDH高表達的患者總生存時間更短，而MTDH低表達者生存狀態(tài)較好。MTDH 主要在細胞質(zhì)中表達，而轉移腫瘤顯示核染色的比例很高。另有研究報道，MTDH高表達顯著與高核級、雌激素受體(ER)和孕激素受體(PR)的陰性表達、Ki67的高水平有關，同時也與低生存率(P=0.000 1)、遠處轉移低生存率相關(P=0.009)。在淋巴結陰性患者中，MTDH的高表達預后極不理想。多因素分析顯示，MTDH的表達是低生存率 (HR 3.45，95% CI為1.69～6.84，P=0.001 0)和低遠處轉移生存率(HR 2.39，95%CI為1.08～5.01，P=0.031 9)的影響因素。MTDH表達導致浸潤性乳腺癌預后不良[35]。Su等[36]采用免疫組化方法分析249例乳腺癌組織中MTDH的表達，包括29 例導管增生(UDH)、14例非典型性導管增生(ADH)、37 例原位導管癌(DCIS)、162例浸潤性導管癌和7例正常乳腺組織。在UDH、ADH、DCIS和浸潤性導管癌組織中，MTDH的陽性表達率分別為24.14%、28.57%、72.97%和55.56%。在正常乳腺組織未檢測到MTDH的過表達。MTDH在浸潤性癌的表達率高于其在原位癌中的表達率，提示MTDH可能參與導管癌的發(fā)生。在DCIS患者，MTDH的表達與ER、PR和HER2的表達沒有相關性，而與Ki-67的表達(P=0.008)與組織學分級有關(P=0.035)。 在浸潤性乳腺癌患者中，MTDH的表達與患者的年齡(P=0.042)、Ki-67狀態(tài)(P=0.036)、ER(P=0.018)、p53(P=0.001)密切相關。提示MTDH在乳腺癌不同組織類型中起到不同的作用。

1.3.4MTDH與舌鱗狀細胞癌舌鱗狀細胞癌(TSCC)是最常見的口腔癌類型，占口腔鱗癌的41%，TSCC腫瘤的細胞增殖和淋巴結轉移率很高。Ke等[37]采用免疫組織化學法(IHC)檢測93例舌鱗癌石蠟包埋組織MTDH蛋白表達，并選取4對舌鱗癌同一病人癌旁組織作為對照。免疫組化結果顯示，MTDH在舌鱗癌組織中的陽性率(48.39%，45/93)明顯高于正常舌組織(10.00%，3/30)(P<0.001)。同時，MTDH的蛋白水平與分化程度(P<0.001)、臨床分期(P<0.001)、T分期(P=0.007)和N分期(P=0.012)相關。此外，具有較高的MTDH表達的患者總生存時間更短。多變量分析(Cox回歸)結果也顯示，MTDH的表達是舌鱗癌(P=0.043)的獨立預后指標。研究結果表明，MTDH的表達與癌變舌鱗癌的發(fā)生、發(fā)展有關，可能是一種新的、有價值的預測舌鱗癌患者的預后評估指標。Deng等[38]研究報道，舌鱗狀細胞癌 Epha7和 MTDH蛋白表達陽性率分別為55.6%和60%，均明顯高于癌旁正常上皮組織[χ2(Epha7和 MTDH)分別為4.14、5.25，P均<0.05]。組織學分級Ⅰ～Ⅱ、臨床分期Ⅰ～Ⅱ期及無頸部淋巴結轉移病例Epha7和 MTDH表達陽性率明顯低于組織學分級Ⅲ～Ⅳ級、臨床分期Ⅲ～Ⅳ期及頸部淋巴結轉移病例(P<0.05或P<0.01)。提示Epha7和 MTDH表達水平在舌鱗狀細胞癌發(fā)生、發(fā)展中可能起重要作用，Epha7和 MTDH過表達者提示預后不良。

1.3.5MTDH與肝細胞癌一些研究分析了MTDH與肝癌的臨床相關性。Yoo等[39]首次發(fā)現(xiàn)MTDH在原代大鼠肝細胞和肝癌細胞系HepG3、QGY-7703、SNU-423、Hep3B、Huh7，SK-Hep-1中的表達。MTDH在原代大鼠肝細胞中的表達低于人肝癌細胞中的表達。MTDH在QGY-7703細胞的表達明顯高于在HepG3細胞的表達。這些結果由免疫組化組織芯片(TMA)證實，包括86例原發(fā)性肝癌、23例轉移性肝癌和9例癌旁正常組織。在9例癌旁正常組織中MTDH低表達，在肝癌組織中MTDH 明顯高表達。Zhu等[40]進行的免疫組化結果顯示，MTDH主要被定位于細胞膜和細胞質(zhì)。MTDH在腫瘤組織的表達顯著高于癌旁組織，MTDH的高表達率為54.2%(175/ 323)，進一步研究顯示， MTDH的表達與微血管侵犯(P<0.001)、腫瘤分化程度(P=0.002)、TNM分期(P=0.001)有關。結果表明，MTDH的表達提示有腫瘤的微血管侵犯，分化差，TNM分期Ⅱ和Ⅲ。但MTDH的表達與其他相關臨床病理特征如年齡、性別、肝硬化、血清α-甲胎蛋白、腫瘤直徑、腫瘤包膜或巴塞羅那分期(BCLC)無關。Gong等[41]研究表明，與正常組織比較，MTDH在HBV相關HCC組織中表達升高。提示在HBV肝炎向HBV相關HCC轉變中，MTDH的表達逐漸增高。此外，統(tǒng)計分析顯示，在HBV相關的HCC患者，MTDH與美國腫瘤聯(lián)合委員AJCC，第7版)分期(P=0.020)、T分期(P=0.007)、N分期(P=0.044)、血管侵犯(P=0.006)和組織分化程度(P=0.020)有關。此外，患者的高MTDH水平使患者的生存時間縮短(P=0.001)。

1.4MTDH的惡性生物學行為

1.4.1MTDH在腫瘤增殖和侵襲中的作用正常細胞向癌細胞生長經(jīng)歷控制獨立生長、永生化改造，最終獲取侵襲和轉移能力。MTDH是腫瘤的生物標記物，MTDH的病理生理作用促進細胞的生長和增殖，錨定非依賴性生長變更、遷移、侵襲、化療、血管生成和體內(nèi)腫瘤發(fā)生和轉移。在非小細胞肺癌中，下調(diào)MTDH的表達通過細胞周期停滯、抑制遷移和侵襲，體外減少錨定非依賴性和依賴性生長并進一步抑制腫瘤發(fā)生、生長和轉移。MTDH的過表達增加細胞的侵襲。MTDH表達逆轉前轉移肌動蛋白細胞骨架重構和抑制EMT，支持了MTDH對癌細胞增殖和轉移的關鍵作用[42]。Zhang等[43]采用3(4,5-二甲基-2-基-2,5-二苯基溴化(MTT)檢測MTDH對乳腺癌細胞MCF-7的增殖和侵襲的生物學作用，結果顯示MTDH的過表達促進乳腺癌細胞的增殖和侵襲能力，并上調(diào)HER2/neu基因，其提供了一種潛在的靶向乳腺癌治療的方法。

1.4.2MTDH與化療耐藥化療耐藥是侵襲性癌癥的重要標志。MTDH有助于對各種化學治療劑包括5-氟尿嘧啶(5-FU)、多柔比星、紫杉醇、順鉑和4-羥基環(huán)磷酰胺(4-HC)發(fā)生化療耐藥。在SiHa細胞、HeLa細胞、宮頸癌CasKi和C33A細胞，MTDH表達水平與順鉑的化療耐藥相關。MTDH在HeLa細胞可增加自噬，可能與其降低裂解胱天蛋白酶-3的活性和EER/ NF-κB途徑的激活有關。MTDH可能被用作治療靶標，以克服宮頸癌的化療耐藥[44]。Yoo等[45]闡明MTDH誘導耐藥的分子機制，MTDH增加多藥耐藥基因1(MDR1)蛋白表達，從而增加了外排，降低阿霉素的積累，促進阿霉素耐藥。抑制MDR1的小干擾RNA或化學試劑，或抑制MTDH的1個或2個基因的組合，顯著增加體外阿霉素的敏感性。在裸鼠移植瘤的研究中，慢病毒表達MTDH的短發(fā)夾RNA與阿霉素的聯(lián)合，較單用MTDH的短發(fā)夾RNA或阿霉素能顯著性地抑制人肝癌細胞的生長。研究盡管顯示MTDH不影響MDR1基因的轉錄，但其有利于MDR1 mRNA與核糖體關聯(lián)，從而提高翻譯。MTDH也抑制泛素化和MDR1蛋白質(zhì)的隨后的蛋白酶體介導的降解。MTDH的抑制可能更有效地利用于肝癌的化療。

1.4.3MTDH與腫瘤的轉移惡性腫瘤細胞從原發(fā)部位，經(jīng)淋巴道、血管或體腔等途徑，到達其他部位繼續(xù)生長，稱腫瘤轉移。研究表明[46]，在轉染MTDH逆轉錄病毒shRNA表達載體的骨肉瘤細胞系U2OS和SOSP-M中，轉移傾向、細胞增殖都顯著降低。轉染MTDH逆轉錄病毒shRNA后，U2OS和SOSP-M細胞的侵襲和遷移能力明顯降低。此外，下調(diào)MTDH后，上皮-間質(zhì)轉化(EMT)也減少，MTDH的過度表達顯著與骨肉瘤的轉移相關。 研究證實[47]，MTDH通過調(diào)節(jié)EMT促進骨肉瘤發(fā)生轉移。在頭頸部鱗癌中，體外實驗表明，MTDH表達可增強頭頸部鱗狀細胞的遷移和侵襲能力。MTDH誘導EMT，由2個調(diào)節(jié)形態(tài)學變化和介導的生物分子的E-鈣粘蛋白和波形蛋白的表達。此外，MTDH介導的AKT活化，所有的上述效應幾乎完全通過AKT的抑制阻斷。研究結果表明，MTDH可能通過AKT信號通路介導的EMT促進頭頸部鱗狀細胞的轉移[47]。

2miR-26a在惡性腫瘤中的作用研究進展

2.1miR-26a的結構Hsa-miR-26a(miR-26a)首先從Hela細胞克隆得到，在多種組織泛表達，其表達無組織特異性。miR-26a-1、miR-26a-2、miR-26b 是Hsa-miR-26a 家族中的3種亞型，分別位于3、12和2號染色體。miR-26a-1和miR-26a-2的成熟體miRNA 具有相同的序列，與miR-26b成熟體miRNA有2個核苷酸不同(圖1)。在一系列細胞核內(nèi)和胞漿內(nèi)酶的作用下，帶有莖-環(huán)結構miR-26被加工成成熟miR-26(圖2)[48]。成熟miR-26為21～22個核苷酸長，為6～7的種子區(qū)域核苷酸。miR-26的種子區(qū)的序列為結合靶mRNA的區(qū)域，miR-26通過與mRNA的3’-UTRs結合而發(fā)揮調(diào)控作用。由于miR-26可以抑制靶基因的翻譯和減少靶基因編碼蛋白的表達水平,所以miRNA有許多調(diào)節(jié)腫瘤發(fā)生及腫瘤的靶基因。miR-26a的表達失調(diào)參與了多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展和侵襲轉移，如肺癌、甲狀腺癌、子宮平滑肌肉瘤、乳腺癌和結腸癌等。

圖1　成熟體miR-26a的序列

A：pre-miR-26a-1;B:pre-miR-26a-2;C:pre-miR-26b

2.2miR-26a與腫瘤的關系50%以上的miRNAs定位在腫瘤相關的基因組區(qū)域(cancer associated genomic regions，CAGR)，包括LOH區(qū)、染色體擴增區(qū)及脆性位點等，其表達水平在許多腫瘤中發(fā)生改變，可能起到原癌基因或腫瘤抑制基因的作用，因此也將此類miRNA稱作oncomirs。到目前為止，已發(fā)現(xiàn)多個發(fā)揮原癌基因或腫瘤抑制基因作用的miRNAs，如let-7、miR-21、miR-17-92 cluster、miR-143、miR-145、miR-372和miR-375等，它們通過調(diào)控下游靶基因的轉錄和翻譯參與了腫瘤的演進過程。miR-26a在多種組織泛表達，無組織特異性．但對于其具體功能還知之甚少。而令人費解的是，miR-26a在不同腫瘤的發(fā)病機制中扮演了截然相反的雙重角色。在淋巴瘤、乳腺癌以及肝癌中，miR-26a在癌組織中表達降低，并發(fā)揮抑癌基因的作用；而在膠質(zhì)瘤中，miR-26a卻表達增高，扮演癌基因的角色。miR-26a抑制急性髓細胞樣白血病細胞的增殖，卻促進急性T淋巴細胞白血病細胞的增殖。這些有爭議的結論表明，miR-26a可能在不同的腫瘤和不同的組織學類型中發(fā)揮著不同的作用，其功能的復雜程度是毋庸置疑的。

2.2.1miR-26a在腫瘤中的抑癌基因作用在膀胱癌、乳腺癌、口腔鱗狀細胞癌、間變癌、伯基特淋巴瘤、肝癌和橫紋肌肉瘤中miR-26的表達降低，并且被認為是一種抑制miRNA，起到抑制腫瘤的作用，miR-26a在這些腫瘤中充當抑癌基因的角色。Zhao等[49]報道，miR-26a在前列腺癌組織和細胞中的表達低于正常前列腺組織和細胞，另外穩(wěn)定的轉染miR-26a的慢病毒能夠抑制前列腺癌細胞的增殖、轉移、上皮間質(zhì)轉化和誘導細胞阻滯在G1期。Wnt5a是miR-26a的生物信息學分析潛在的靶基因。熒光素酶檢測和Western blot分析確定了Wnt5a是miR-26a的新的直接靶基因，miR-26a可以靶向作用于Wnt5a而抑制前列腺癌。一項關于膽囊癌的研究發(fā)現(xiàn)， miR-26a在膽囊癌組織中是下調(diào)的，miR-26a的表達與腫瘤的組織學分級相關聯(lián)，miR-26a能顯著抑制膽囊癌細胞增殖[50]。此外，該研究證實了HMGA是miR-26a的直接目標。HMGA2 mRNA和miR-26a呈負相關。此外，HMGA2拮抗劑能阻礙miR-26a對膽囊癌細胞增殖的抑制，結果表明miR-26a的表達通過靶向HMGA2促進膽囊癌增殖，miR-26a可作為膽囊癌的預后因子和治療靶點。Song等[51]發(fā)現(xiàn)miR-26a在骨肉瘤組織和細胞系中的表達水平明顯低于正常對照。miR-26a的表達下調(diào)與骨肉瘤的不良臨床分期和遠處轉移有關。多因素分析表明，miR-26a的這種損失是影響骨肉瘤總生存的獨立預后因素。此外，miR-26a的表達抑制骨肉瘤細胞侵襲和遷移。miR-26a通過靶向其3'-UTR抑制Enhancer of zeste homolog 2 (EZH2)的表達。此外，EZH2上調(diào)并miR-26a的表達呈負相關。證明miR-26a的表達下調(diào)與腫瘤侵襲性和腫瘤轉移有關，miR-26a的關聯(lián)通過靶向EZH2基因在骨肉瘤抑制細胞遷移和侵襲。miR-26a的是骨肉瘤患者一個獨立的預后標志物。Jia等[52]關于舌鱗狀細胞癌的研究顯示，舌鱗狀細胞癌miR-26a和長鏈非編碼RNA(long noncoding RNA，lncRNA) MEG3基因表達較正常的舌組織中大大減少，miR-26a的低表達水平和MEG3是舌鱗癌預后差的獨立預后因素。在人舌鱗癌細胞株SCC-15和CAL27中，miR-26a的抑制可能導致MEG3的上調(diào)，減少的miR-26a和MEG3可能存在鏈接關系。此外miR-26a和MEG3的過表達抑制SCC-15和CAL27的增殖和細胞周期進程，促進細胞凋亡。miR-26a和MEG3可能在舌鱗癌發(fā)病中起重要的抗腫瘤作用。

2.2.2miR-26a在腫瘤中的癌基因作用在神經(jīng)膠質(zhì)瘤和卵巢癌中miR-26高表達，促進了腫瘤細胞的生長和增殖，充當癌基因的作用。miR-26a的過度表達促進卵巢癌增殖和克隆形成。miR-26a通過抑制ER-α的轉錄后修飾來促進卵巢癌(OC)細胞生長。此外，抑制的miR-26a阻礙了裸鼠注射OC細胞的腫瘤形成。異常表達的miR-26a可以有助于OC的發(fā)展[53]。Qian等[54]報道，miR-26a在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞中能促進腫瘤細胞的生長和細胞集落以及血管生成，而下調(diào)miR-26a的表達則起到相反的作用。在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞miR-26a直接靶向抑制素(PHB)水平，與miR-26a的表達呈負相關，并與膠質(zhì)瘤等級密切相關。該結果揭示miR-26a調(diào)節(jié)PHB，在體內(nèi)和體外促進神經(jīng)膠質(zhì)瘤的進展，為神經(jīng)膠質(zhì)瘤基礎的治療有幫助。

2.3miR-26a的下游靶基因及相互調(diào)節(jié)關系一系列研究表明，EZH2、PTEN、MCL-1 和MTDH是潛在的miR-26的下游靶基因。但miR-26與其靶基因在不同腫瘤中的作用仍然不清楚，需要進行進一步調(diào)查。

2.3.1miR-26a與MTDHZhang等[55]首次報道了miR-26a在乳腺癌標本和細胞系中下調(diào)，miR-26a的瞬時轉染促進乳腺癌細胞系MCF7細胞的細胞凋亡。MTDH和EZH2被識別為miR-26a的2個直接的靶標，MTDH和EZH2在乳腺癌顯著上調(diào)。外源性的miR-26a異種移植物MCF7細胞能減少MTDH和EZH2的表達。此外，MTDH下調(diào)導致細胞凋亡，MTDH能逆轉miR-26a在MCF7細胞凋亡的作用。研究結果表明miR-26a的功能通過靶向MTDH和EZH2的拮抗人乳腺癌的發(fā)生。

2.3.2miR-26a與MCL-1Gao等[56]研究表明，在乳腺癌細胞和臨床標本中，miR-26a可下調(diào)細胞增殖、細胞集落的形成、遷移及細胞凋亡。MCL-1是Bcl-2家族的抗凋亡成員，是miR-26a 的下游靶因。乳腺癌細胞系miR-26a與MCL-1呈負相關關系。該研究進一步探討了MCL-1參與miR-26a增加紫杉醇對乳腺癌細胞的敏感性的作用，miR-26a通過調(diào)控MCL-1對細胞增殖和乳腺癌轉移產(chǎn)生影響。

2.3.3miR-26a與PTENLiu 等[2]報道了miR-26a對肺癌細胞的轉移潛力的影響。在淋巴結轉移腫瘤組織，miR-26a的表達水平高于原發(fā)肺癌組織，miR-26a的異位表達可顯著提高肺癌細胞的遷移和侵襲能力。進一步機理研究揭示了miR-26a可增加AKT的磷酸化和NF-κB的轉錄激活，miR-26a能增強肺癌細胞轉移潛能，通過調(diào)制轉移相關基因的表達，并通過抑制PTEN基因激活AKT信號通路，表明miR-26a可能是治療轉移性肺癌的一種潛在的治療候選者。

2.3.4miR-26a與EZH2Yu等[57]一項關于鼻咽癌的研究表明， miR-26a的表達可抑制鼻咽癌細胞的遷移和侵襲能力；使用小鼠模型研究顯示miR-26a在體外抑制鼻咽癌的轉移。miR-26a降低了EZH2在體外和體內(nèi)的表達水平，提示miR-26a的鼻咽癌的抗轉移作用是通過調(diào)節(jié)EZH2介導的。Dang 等[58]研究報道，miR-26a在A549人肺癌細胞系可顯著抑制細胞增殖的表達，阻止體外G1/S期過渡，誘導細胞凋亡，并抑制細胞侵襲和轉移。用miR-26a的抑制劑轉染A549細胞后，抑制miR-26a能促進細胞遷移和侵襲。miR-26a抑制EZH2和下游靶基因，包括DAB2IP和RUNX3的增強的表達，表明EZH2是miR-26a的一個下游靶基因。miR-26a的使用可作為一種抗致癌基因在人肺癌的分子機制中起重要作用，并且可能被用于肺癌的治療。

綜上所述，MTDH、miR-26a在腫瘤的發(fā)生發(fā)展及腫瘤轉移中起到不同的作用，并且 MTDH及miR-26a在乳腺癌中存在上下游靶基因的調(diào)控關系，但是在食管癌中的存在的調(diào)控關系仍需進一步研究。

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[收稿日期:2014-09-10]

(本文編輯張巧蓮)

基金項目：新疆醫(yī)科大學創(chuàng)新基金(XJC201228)

作者簡介：李莉(1978- )，女，副教授，研究方向：醫(yī)學圖像處理及分析，從事大學生教育管理。

通信作者：爾西丁·買買提，男，教授，碩士生導師，研究方向：衛(wèi)生統(tǒng)計學理論和方法研究，E-mail: 624799002@qq.com。

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