洪 毅(陜西西安高新醫(yī)院輸血科，西安 710075)

新生兒溶血病(hemolytic disease of the newborn，HDN)主要是指母嬰紅細(xì)胞血型不合引起的新生兒同種免疫性溶血性疾病。胎兒紅細(xì)胞在母親妊娠期間可進(jìn)入母體，刺激母體產(chǎn)生免疫性抗體，但研究資料顯示，妊娠早期在母體血液中即可檢出胎兒紅細(xì)胞，流產(chǎn)、羊水穿刺、分娩和死胎等情況可使胎兒紅細(xì)胞進(jìn)入母體的概率大大增加。免疫刺激產(chǎn)生的抗體主要是IgG型抗體，IgG型抗體(主要是IgG1和IgG3)可穿過(guò)胎盤(pán)屏障，破壞胎兒或新生兒的紅細(xì)胞[1，2]。新生兒溶血病根據(jù)起病的血型抗體不同主要分為ABO血型新生兒溶血病和非ABO血型新生兒溶血病。本文對(duì)我院近五年診斷出的36例由不規(guī)則抗體導(dǎo)致的新生兒溶血病及其中26例進(jìn)行了換血治療，案例總結(jié)如下。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 2010～2015年臨床送檢的2 311例新生兒溶血病檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣本，樣本包含患兒和產(chǎn)婦的血樣。

1.2 儀器與試劑 Baso血庫(kù)專(zhuān)用離心機(jī)、孵育器、凝膠卡專(zhuān)用離心機(jī)[貝索企業(yè)(中國(guó))銷(xiāo)售公司]；抗球蛋白檢測(cè)凝膠卡(美國(guó)Bio-rad公司)；抗體篩選細(xì)胞(Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ)，抗-A，抗-B，抗-D，抗-C，抗-c，抗-E，抗-e，抗-M，抗-N；抗球蛋白試劑、2-Me(上海血液生物醫(yī)藥責(zé)任公司)；A，B，O標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞試劑盒(北京金豪制藥股份有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 血型鑒定：送檢樣本離心分離出血清和紅細(xì)胞，紅細(xì)胞洗滌后鑒定血型。

1.3.2 新生兒溶血病檢測(cè)：新生兒紅細(xì)胞做直接抗球蛋白試驗(yàn)(DAT)、游離試驗(yàn)和放散試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)方法和診斷依照有關(guān)規(guī)程進(jìn)行[3，4]。

1.3.3 對(duì)抗體篩選陽(yáng)性的樣本，送陜西省血液中心血型室做抗體鑒定，抗體鑒定用譜紅細(xì)胞購(gòu)自荷蘭Sanquin公司，方法采用低離子液介質(zhì)間接抗球蛋白試驗(yàn)(Liss-IAT)試管法。

1.3.4 其它資料來(lái)自臨床：其中支持治療主要包括光療、吸氧和注射白蛋白；對(duì)于符合新生兒換血指標(biāo)(臍帶血血紅蛋白<120 g/L、血清膽紅素>342 μmol/L及早期核黃疸等)則進(jìn)行換血治療。

2 結(jié)果

2.1 36例不規(guī)則抗體特異性鑒定結(jié)果及換血治療效果 在2 311例新生兒溶血病樣本中共檢出不規(guī)則抗體36例，檢出率1.56%。其中Rh血型系統(tǒng)、Lewis血型系統(tǒng)、Kidd血型系統(tǒng)、Diego血型系統(tǒng)分別檢出28例、3例、4例和1例，陽(yáng)性率分別為：77.78%，8.33%，11.11%，2.78%；在Rh血型系統(tǒng)的不規(guī)則抗體28例中，抗-D、抗-E、抗-cE、抗-C、抗-Ce分別檢出2例、8例、11例、2例、5例，各抗體所占的百分率分別為：7.14%，28.57%，39.29%，7.14%，17.86%，見(jiàn)表1。其中有26例進(jìn)行了換血治療，見(jiàn)表2。

表1 36例不規(guī)則抗體特異性鑒定結(jié)果和相關(guān)檢測(cè)

表2 換血治療效果

3 討論

目前人類(lèi)已發(fā)現(xiàn)有35個(gè)紅細(xì)胞血型系統(tǒng)，并不是所有紅細(xì)胞血型不合均可引起新生兒溶血病，盡管ABO血型新生兒溶血病最為常見(jiàn)，但由于胎兒紅細(xì)胞上的A抗原或B抗原密度較低，而血漿中存在的可溶性A或B物質(zhì)又可中和部分來(lái)自母體的IgG抗體，另外還與胎兒血液中缺乏補(bǔ)體有關(guān)，因此ABO血型系統(tǒng)雖然會(huì)引起嚴(yán)重新生兒溶血病，但大多以光療、藥物治療比如糾酸、血液治療，如白蛋白、丙種球蛋白等支持治療為主，很少進(jìn)行換血治療[7，8]。

從檢查出不規(guī)則抗體分布中，目前引起血型不合新生兒溶血病的血型以Rh血型系統(tǒng)最常見(jiàn)最為嚴(yán)重，其它血型系統(tǒng)等血型不合引起的新生兒溶血病較少見(jiàn)。而Rh血型抗體引起的新生兒溶血病往往較為嚴(yán)重，可能因?yàn)镽h抗原在新生兒的紅細(xì)胞上就能完全表達(dá)，并且在溶血機(jī)制上對(duì)補(bǔ)體有依賴(lài)性等因素，因此多數(shù)需要進(jìn)行換血治療[9]。在36例檢出Rh血型系統(tǒng)不規(guī)則抗體的病例中，有26例進(jìn)行了換血治療，取得不錯(cuò)的療效。我們注意到即使Rh血型抗體效價(jià)不高，也能引起嚴(yán)重的新生兒溶血，提示在做不規(guī)則抗體檢測(cè)時(shí)，應(yīng)采用敏感的檢測(cè)手段，避免漏檢弱抗體，造成誤診。例如liss-凝膠卡法具有靈敏度高，操作可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)，可用于大規(guī)模的篩查試驗(yàn)[5]。

在Rh血型抗體造成的新生兒溶血病例中，只有2例為Rh陰性產(chǎn)婦產(chǎn)生的抗-D引起；有19例產(chǎn)生的抗體都對(duì)E抗原有反應(yīng)(8例抗-E+11例抗-cE)，遠(yuǎn)高于抗-D的比率，這是由于RhE 陰性頻率(>50%) 遠(yuǎn)高于RhD陰性的頻率(約0.3%)，免疫原性在Rh血型系統(tǒng)中僅次于RhD，容易因輸血或妊娠等同種免疫刺激后產(chǎn)生抗E，提示給女性輸血應(yīng)盡量使Rh血型完全相合。在檢出不規(guī)則抗體的案例中，還檢出有Lewis血型系統(tǒng)、Kidd血型系統(tǒng)和Diego血型系統(tǒng)的抗體，提示在新生兒溶血病的檢測(cè)中應(yīng)注意考慮多個(gè)血型系統(tǒng)抗體，應(yīng)采用抗原譜廣泛篩查細(xì)胞和敏感的檢測(cè)技術(shù)外，及早發(fā)現(xiàn)異?？贵w，為臨床新生兒換血療法提供參考依據(jù)。

[1] Makarovska-Bojadzieva T，Blagoevska M，Kolevski P，et al．Optimal blood grouping and antibody screening for safe transfusion[J]．Prilozi，2009，30(1)：119-128．

[2] 龔君順，沈雨青，蘇奶助，等．孕婦檢測(cè)不規(guī)則抗體在非ABO新生兒溶血病中的臨床意義[J]．臨床血液學(xué)雜志，2015，28(10)：870-872．

[3] 尚 紅，王毓蘭，申子瑜．全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[S]．4版．北京：人民衛(wèi)生出版社，2015．

[4] 林 園，王 嶸．新生兒溶血病(HDN)免疫血液學(xué)試驗(yàn)推薦方案[J]．中國(guó)輸血雜志，2012，25(2)：95-100．

[5] 張印則，徐 華，周華友．紅細(xì)胞血型原理與檢測(cè)策略[M]．北京：人民衛(wèi)生出版社，2014．

[6] International Society of Blood Transfusion．Red blood immunogenetics and blood group terminology[OL]．http：//www．isbtweb．org/working-parties/red-cell-immunogenetics-and-blood-group-terminology/

[7] 杰夫·丹尼爾，朱自嚴(yán)．人類(lèi)血型[M]．北京：科學(xué)出版社，2007．

[8] 楊 麗，閻麗華，丁 偉，等．新生兒ABO血型不合溶血病臨床及實(shí)驗(yàn)室結(jié)果分析研究[J]．現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2015，30(4)：158-160．

Yang L，Yan LH，Ding W，et al．Clinical and experimental analysis about ABO hemolytic disease of the newborn in Qingdao[J]．J Mod Lab Med，2015，30(4)：158-160．

[9] 李鳳春，夏愛(ài)軍，張秋會(huì)，等．換血治療重癥Rh抗-E新生兒溶血病1例[J]．現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，27(5)：136-137．