■牛志偉

(廣西大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院廣西高校水生生物健康養(yǎng)殖與營養(yǎng)調(diào)控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣西南寧 530005)

抗生素可以顯著提高水產(chǎn)動(dòng)物的存活率、飼料轉(zhuǎn) 化率和增重率，已被廣泛用于飼料添加劑而大量使用。雖然取得了一定的效果，但是近些年來，隨著抗生素的不科學(xué)使用，細(xì)菌耐藥性的增加，抗生素殘留問題的出現(xiàn)，使越來越多的學(xué)者積極探索抗生素的代替品。寡聚糖具有安全無毒、無殘留、穩(wěn)定、功能特異等特點(diǎn)，已成為學(xué)者研究的熱點(diǎn)，有望成為抗生素的替代品。目前已有大量文獻(xiàn)研究甘露寡糖對水產(chǎn)動(dòng)物生長影響的研究，但是甘露寡糖對水產(chǎn)動(dòng)物的生長是否有顯著影響，學(xué)者們的研究結(jié)論不一致。Meta分析是對多個(gè)相同研究的結(jié)果進(jìn)行合并匯總的分析方法，可以從統(tǒng)計(jì)學(xué)角度達(dá)到增大樣本量，從而提高檢驗(yàn)效能的目的，尤其當(dāng)多個(gè)研究結(jié)果不一致時(shí)，采用分析可得到更加接近真實(shí)情況的綜合分析結(jié)果。本文采用Meta分析法分析了甘露寡糖對水產(chǎn)動(dòng)物增重率和特定生長率的影響，評價(jià)甘露寡糖對水產(chǎn)動(dòng)物是否有促進(jìn)生長作用，為甘露寡糖作為促長劑提供科學(xué)的參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對象

正式發(fā)表在CNKI數(shù)據(jù)庫中的關(guān)于甘露寡糖對水產(chǎn)動(dòng)物生長影響的研究。

1.2 檢索方法

從CNKI數(shù)據(jù)庫中檢索，檢索詞為“甘露寡糖”和“生長”，檢索時(shí)間為建庫至2016年6月。

1.3 文獻(xiàn)的篩選

1.3.1 納入標(biāo)準(zhǔn)

①研究有空白對照組。②研究數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方式為“平均數(shù)+標(biāo)準(zhǔn)差”，即：“±SD”或“SE”（標(biāo)準(zhǔn)誤由revman5.3的calculator轉(zhuǎn)化成標(biāo)準(zhǔn)差）。③添加劑量為甘露寡糖，不是混合添加劑。

1.3.2 排除標(biāo)準(zhǔn)

①研究沒有對照組。②研究數(shù)據(jù)不詳或者統(tǒng)計(jì)方式不是X±SD或SE。③以商業(yè)評價(jià)為目的的文獻(xiàn)。④重復(fù)發(fā)表或者一年內(nèi)同一實(shí)驗(yàn)室或同一作者類似的研究。⑤會(huì)議文件。⑥添加劑為混合添加劑的文獻(xiàn)。

1.4 資料的提取

提取的文獻(xiàn)信息包括原文題目，作者，發(fā)表時(shí)間，研究方法，研究對象規(guī)格，研究對象種類，增重率，特定生長率，餌料系數(shù)，養(yǎng)殖周期，添加劑種類、含量、添加量等。提取原則：通過提取相關(guān)文獻(xiàn)的推薦用量對應(yīng)下的增重率、餌料系數(shù)或者特定生長率，來做分析；若作者未給出推薦用量，則提取有利于增重率、餌料系數(shù)或者特定生長率其中兩個(gè)或三個(gè)指標(biāo)的添加量下對應(yīng)的數(shù)據(jù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法

采用RevMan5.3軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。以權(quán)重偏差（MD）為生長效果分析統(tǒng)計(jì)量。指標(biāo)以95%可信區(qū)間(CI)表示。采用I2進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)，若I2＞50%，則認(rèn)為有異質(zhì)性，進(jìn)行敏感性分析，并尋找異質(zhì)性來源，若不能找出原因則采用隨機(jī)效應(yīng)模型。若I2≤50，則認(rèn)為沒有異質(zhì)性，采用固定效應(yīng)模型方法進(jìn)行分析；P＜0.05為結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)的提取

初檢出相關(guān)文獻(xiàn)39篇，經(jīng)閱讀文獻(xiàn)題目和摘要排除12篇，進(jìn)一步閱讀全文排除文獻(xiàn)12篇，最終納入16篇文獻(xiàn)。其中關(guān)于魚類的相關(guān)研究12篇，對蝦的3篇，海參的1篇(見表1)。

表1 納入的文獻(xiàn)

表1（續(xù)） 納入的文獻(xiàn)

2.2 Meta分析結(jié)果

2.2.1 對增重率的影響

魚類的納入12篇文獻(xiàn)，各研究間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性（I2=100%）,采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行分析，結(jié)果表明添加組的增重率顯著高于空白對照組的，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[MD=24.77，95%CI=（11.92,37.61）,P=0.000 2]（見圖1）。

圖1 魚增重率森林圖

對蝦的納入2篇文獻(xiàn)，各研究間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（I2=90%）,采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行分析，結(jié)果表明添加組的增重率顯著高于空白對照組，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[MD=44.52，95%CI=（7.97,81.07）,P=0.02]（圖2）。

海參納入1篇，采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行分析，結(jié)果表明添加組的增重率顯著高于空白對照組，且具有統(tǒng) 計(jì) 學(xué) 意 義 [MD=56.37，95%CI=（54.81,57.93）,P＜0.000 01]（圖3）。

圖3 海參增重率森林圖

2.2.2 對特定生長率的影響

魚類的納入5篇文獻(xiàn)，各研究間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性（I2=94%）,采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行分析，結(jié)果表明添加組的特定生長率顯著高于空白對照組，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[MD=0.10，95%CI=（0.07,0.13）,P＜0.000 01]（圖4）。

圖4 魚類特定生長率森林圖

對蝦的納入2篇文獻(xiàn)，各研究間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性（I2=0%）,采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行分析，結(jié)果表明添加組的特定生長率顯著高于空白對照組的，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[MD=0.27，95%CI=（0.18,0.36）,P＜0.000 01]（圖5）。

圖5 對蝦特定生長率森林圖

海參納入1篇，采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行分析，結(jié)果表明添加組的特定生長率顯著高于空白對照組的，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[MD=0.43，95%CI=（0.39,0.47）,P＜0.000 01]（圖6）。

圖6 海參特定生長率森林圖

2.2.3 對餌料系數(shù)的影響

魚類的納入12篇文獻(xiàn)，各研究間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性（I2=100%）,采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行分析，結(jié)果表明添加組的餌料系數(shù)顯著低于空白對照組的，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[MD=-0.16，95%CI=（-0.24，-0.08），P=0.000 1]（圖7）。

圖7 魚類餌料系數(shù)森林圖

對蝦的納入2篇文獻(xiàn)，各研究間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性（I2=95%），采用隨機(jī)效應(yīng)模型進(jìn)行分析，結(jié)果顯示添加組和空白對照組的餌料系數(shù)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[MD=-0.21，95%CI=（-0.45,0.04）,P=0.09]（圖略）。海參納入0篇。

2.3 異質(zhì)性檢測

以分類單元“目”為單位將納入文獻(xiàn)數(shù)量大于5篇相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分組分析，結(jié)果（圖1和圖7）各研究間的異質(zhì)性依然很大，但可以看出甘露寡糖對鯉形目、鱸形目、鰈形目、鲇形目的增重率和餌料系數(shù)有顯著的提高作用。

2.4 敏感分析

將納入的魚的增重率、特定生長率、餌料系數(shù)和對蝦的增重率用固定模型進(jìn)行敏感性分析；將海參的增重率、特定增長和對蝦的特定增長率用隨機(jī)模型進(jìn)行敏感性分析，得到的結(jié)果與用隨機(jī)模型分析結(jié)果一致，說明本次分析結(jié)果穩(wěn)健（圖8、圖9、表2）。

2.5 發(fā)表偏倚檢測

將納入文獻(xiàn)數(shù)量≥5的研究，用RevMan5.3做漏斗圖分析，用stata12.0做egger檢驗(yàn)，結(jié)果顯示漏斗圖左右基本對稱，P值均大于0.05。表明本次分析無發(fā)表偏倚（圖10 、11、12、13、14、15）。

圖8 魚類增重率敏感分析森林圖

圖9 魚類餌料系數(shù)敏感性分析森林圖

表2 部分敏感分析結(jié)果

圖10 魚類增重率漏斗圖

圖11 魚類餌料系數(shù)漏斗圖

圖12 魚類特定生長率漏斗圖

3 討論

寡聚糖具有安全無毒、無殘留、穩(wěn)定、功能特異等特點(diǎn)，將其作為一種新型的飼料添加劑，能夠提高水產(chǎn)動(dòng)物的生長性能，優(yōu)化其腸道菌群結(jié)構(gòu)，提高其非特異性和特異性免疫功能。小腸絨毛是動(dòng)物機(jī)體吸收營養(yǎng)物質(zhì)的主要場所，甘露寡糖通過改善小腸黏膜的形態(tài)，提高絨毛高度和絨毛密度，從而擴(kuò)大了小腸絨毛的吸收面積，有利于腸道內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)消化和吸收，從而促進(jìn)動(dòng)物的生長。

圖13 魚類增重率egger檢測結(jié)果

圖14 魚類餌料系數(shù)egger檢測結(jié)果

圖15 魚類特定生長率egger檢測結(jié)果

本文研究結(jié)果表明，甘露寡糖可以顯著提高水產(chǎn)養(yǎng)殖魚類的增重率、特定生長率，降低餌料系數(shù)，可以提高南美白對蝦和海參的增重率和特定生長率。但是文獻(xiàn)之間存在較大的異質(zhì)性，又受納入文獻(xiàn)所用的甘露寡糖含量、添加量、飼養(yǎng)周期、投喂次數(shù)、飼養(yǎng)品種的不同所限制，所以本文以分類單元“目”為單位盡可能的將營養(yǎng)需求接近養(yǎng)殖種類進(jìn)行歸類，分析其異質(zhì)性的來源，結(jié)果雖然沒找到異質(zhì)性的具體來源，但表明造成異質(zhì)性的原因不僅和魚的類別有關(guān)，還和其他眾多因素有關(guān)。

Meta分析法已廣泛的用于提供合理的結(jié)論的分析，以給實(shí)踐應(yīng)用提供合理的應(yīng)用方案。本文從文獻(xiàn)中提取的數(shù)據(jù)指標(biāo)，研究方法一致，添加劑使用方法類似，同時(shí)分析用加權(quán)均數(shù)差有助于降低絕度值大小帶來的試驗(yàn)誤差，又通過敏感分析，發(fā)表偏倚檢測確定了本文結(jié)果的穩(wěn)定性。

綜上所述，甘露寡糖可以顯著提高水產(chǎn)養(yǎng)殖魚類的增重率、特定生長率，降低餌料系數(shù)，可以提高南美白對蝦和海參的增重率和特定生長率。鑒于本研究納入的文獻(xiàn)存在的異質(zhì)性比較大，所以本次研究的結(jié)果需要更大樣本，更多試驗(yàn)添加劑量，試驗(yàn)動(dòng)物相同的試驗(yàn)來做出客觀可信的科學(xué)評價(jià)，從而為甘露寡糖作為促長劑提供可靠的依據(jù)，同時(shí)也倡議大家做實(shí)驗(yàn)時(shí)，用科學(xué)的統(tǒng)計(jì)方法統(tǒng)計(jì)結(jié)果，將試驗(yàn)數(shù)據(jù)詳細(xì)的撰寫，以方便后人分析研究，從而為水產(chǎn)動(dòng)物的健康養(yǎng)殖提供更科學(xué)的參考結(jié)果。