■ 姜海龍 趙金波 蒙洪嬌 秦貴信

（1.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，吉林長春 130118；2.黑龍江省畜牧研究所，黑龍江齊齊哈爾 161005）

松遼黑豬是吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧分院培育的具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的適合北方飼養(yǎng)的瘦肉型品種，它以吉林本地豬為母本、丹系長白豬為第一父本、美系杜洛克為第二父本,采用三元雜交育種法進(jìn)行培育。該品種具有耐寒、耐粗飼的優(yōu)良特點(diǎn)，能夠采食大量的粗纖維類飼料[1]。郭海燕等（2007）[2]選用 63 頭試驗(yàn)?zāi)肛i，飼喂高、中、低三種水平的日糧，發(fā)現(xiàn)初產(chǎn)母豬妊娠早期血清和子宮液中胰島素樣生長因子-Ⅰ（IGF-Ⅰ）、胰島素以及生長素與采食不同營養(yǎng)水平日糧高度相關(guān)。而Geisert等（2002）[3]也發(fā)現(xiàn)母豬采食飼糧后，影響妊娠早期胚胎成活率主要通過影響血清中胰島素分泌，胰島素影響孕激素、雌激素的分泌和調(diào)節(jié)。加之，超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量兩種重要的氧化系統(tǒng)的酶類，是機(jī)體清除自由基的重要手段，超氧化物歧化酶活性的不斷增加，丙二醛含量的降低是機(jī)體清除代謝廢物良性表現(xiàn)，表明機(jī)體維持良好的穩(wěn)態(tài)，是健康的。研究苜蓿草粉對松遼母豬血清生化和抗氧化指標(biāo)對合理調(diào)控松遼黑豬繁殖性能的營養(yǎng)調(diào)控技術(shù)具有十分重要的意義，能進(jìn)一步豐富完善松遼黑豬能大量利用粗纖維飼料的理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，見表1。將10頭松遼黑母豬隨即分為兩個(gè)處理組，試驗(yàn)組和對照組，每個(gè)處理組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭，單欄飼喂，配置基礎(chǔ)日糧，兩個(gè)處理組分別在基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)上添加以苜蓿草為纖維源粗纖維水平7.2%和以小麥麩為纖維源粗纖維水平為3.8%的基礎(chǔ)對照組日糧，預(yù)飼期為7 d，試驗(yàn)期為150 d。

表1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2 試驗(yàn)日期與場地

試驗(yàn)期共計(jì)150 d，飼養(yǎng)試驗(yàn)在吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧分院原種豬場進(jìn)行。

1.3 試驗(yàn)日糧

試驗(yàn)日糧和對照日糧以玉米和豆粕為主要原料，按照《中國母豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》（2008）的各個(gè)營養(yǎng)成分和營養(yǎng)價(jià)值表配置日糧。對照組和試驗(yàn)組除了粗纖維水平不同之外，其他營養(yǎng)成分都根據(jù)飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)的要求來配置日糧。對照組不添加苜蓿草的粗纖維水平應(yīng)為3.8%，試驗(yàn)組添加以苜蓿草為粗纖維水平的應(yīng)為7.2%，詳見表2。

表2 試驗(yàn)飼糧配方及主要營養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.4 日常管理

試驗(yàn)?zāi)肛i采用單欄飼養(yǎng)，母豬采用自由飲水，免疫程序按照吉林農(nóng)業(yè)科學(xué)院原種豬場提供的程序進(jìn)行免疫，每天飼喂兩次，上午8：00一次，下午16：00一次，每次飼喂量采用分階段飼養(yǎng)模式中參考的飼喂量，妊娠早期飼喂量為2.00 kg，妊娠中期飼喂量為3.00 kg，妊娠后期飼喂量采用自由采食的方式來滿足母豬體內(nèi)胎兒的生長發(fā)育的需要。每天清糞兩次。并且每天觀察母豬的行為狀態(tài)。

2 測定指標(biāo)

2.1 血清中尿素氮含量的測定

采用二乙酰一肟法測定血清尿素氮的含量，二乙酰一肟根據(jù)雙乙酰與尿素在強(qiáng)酸條件下形成粉紅色二嗪化合物（Fearon反應(yīng)）。

2.2 血清中總蛋白含量的測定

采用雙縮脲法測定血清總蛋白的含量，尿素被加熱，則兩分子的尿素放出一分子氨而形成雙縮脲，雙縮脲在堿性環(huán)境中能與硫酸銅結(jié)合成紫色化合物。

2.3 血清中胰島素、IGF-Ⅰ及甲狀腺激素含量的測定

采用生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法測定豬胰島素的水平、IGF-Ⅰ水平及甲狀腺激素水平，基本過程：酶標(biāo)板-加入樣本—溫育—生物素標(biāo)記抗樣本抗體—鏈霉素結(jié)合—溫育和洗滌—加入底物A、B—觀察顏色。

2.4 血清丙二醛（MDA）含量的測定

MDA是過氧化脂質(zhì)的降解產(chǎn)物，它可以與硫代巴比妥（TBA）產(chǎn)生縮合反應(yīng)，反應(yīng)出現(xiàn)的現(xiàn)象是形成紅色產(chǎn)物，532 nm處有光吸收峰，丙二醛測定的方法采用硫代巴比妥酸法測定血清中丙二醛的含量。

2.5 血清超氧化物歧化酶活性的測定

測定血清中超氧化物歧化酶活性的主要方法是通過分光光度計(jì)來測量血清的吸光度，

3 試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS（17.0）軟件方差分析和相關(guān)性分析 。顯著性水平用“P＜0.05”表示。各組試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

4 結(jié)果與分析

4.1 日糧纖維對松遼母豬妊娠前期血液生化指標(biāo)的影響（見表3）

由表3可知，在本試驗(yàn)條件下，對照組與試驗(yàn)組的總蛋白含量差異不顯著（P＞0.05），在尿素氮、胰島素含量之間存在顯著性差異（P＜0.05），IGF-Ⅰ含量試驗(yàn)組則顯著高于對照組（P＜0.05），甲狀腺激素含量中，對照組高于試驗(yàn)組，存在顯著性差異（P＜0.05）。總蛋白和尿素氮含量是兩個(gè)反映機(jī)體蛋白質(zhì)代謝狀況的指標(biāo)，妊娠前期母豬在總蛋白和尿素氮含量上，對照組分別比試驗(yàn)組高4.75 g/l、2.01μg/ml。胰島素、甲狀腺素含量是兩個(gè)反映機(jī)體營養(yǎng)物質(zhì)代謝狀況以及與繁殖激素分泌相關(guān)的生化指標(biāo)，試驗(yàn)組較對照組低6.65 μg/l、28.78 ng/ml。

表3 日糧纖維對母豬妊娠前期血液生化指標(biāo)的影響

4.2 日糧纖維對松遼母豬妊娠中期血液生化指標(biāo)的影響（見表4）

表4 日糧纖維對母豬妊娠中期血液生化指標(biāo)的影響

由表4可知，在本試驗(yàn)條件下，妊娠中期飼喂的高纖維水平的松遼黑母豬在膽固醇生化指標(biāo)存在顯著差異（P＜0.05）；胰島素、IGF-Ⅰ、甲狀腺激素含量上，對照組高于試驗(yàn)組，并且存在顯著性差異（P＜0.05）。

4.3 日糧纖維對松遼母豬妊娠后期血液生化指標(biāo)的影響（見表5）

表5 日糧纖維對松遼母豬妊娠后期血液生化指標(biāo)的影響

由表5可知，在本試驗(yàn)條件下，妊娠后期飼喂高水平日糧的松遼黑母豬，試驗(yàn)組的膽固醇、甲狀腺激素的血液生化指標(biāo)顯著低于對照組日糧（P＜0.05），而試驗(yàn)組中的IGF-Ⅰ含量稍高于對照組日糧，尿素氮和總蛋白的含量上，對照組顯著高于試驗(yàn)組（P＜0.05）。

4.4 日糧纖維對松遼母豬妊娠前期血清抗氧化酶活性的影響（見表6）

由表6可知，在本試驗(yàn)條件下，妊娠前期母豬采食纖維日糧，對照組與試驗(yàn)組在血清中超氧化物歧化酶活性和丙二醛的含量之間存在顯著性差異（P＜0.05），對照組明顯高于試驗(yàn)組，分別高出6.66 U/ml、0.20 nmol/ml。

表6 日糧纖維對母豬妊娠前期血清抗氧化性能的影響

4.5 日糧纖維對松遼母豬妊娠中期血清抗氧化酶活性的影響（見表7）

表7 日糧纖維對母豬妊娠中期血清抗氧化性能的影響

由表7可得，在本試驗(yàn)條件下，在血清超氧化歧化酶活性上，對照組與試驗(yàn)組之間差異不顯著（P＞0.05），但丙二醛的含量對照組高于試驗(yàn)組，并且存在顯著性差異（P＜0.05），相比妊娠前期血清抗氧化酶的活性，對照組超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量都有下降的趨勢。

4.6 日糧纖維對松遼母豬妊娠后期血清抗氧化酶活性的影響

表8 日糧纖維對母豬妊娠后期血清抗氧化性能的影響

由表8可知，在對照組與試驗(yàn)組在血清中超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量上存在顯著性差異（P＜0.05），試驗(yàn)組明顯高于對照組，分別高6.08 U/ml、0.58 nmol/ml。對照組的妊娠后期與其妊娠前期和中期血清超氧化物歧化酶活性、丙二醛的含量有所降低。試驗(yàn)組的妊娠后期與其妊娠前期和中期的超氧化物歧化酶活性相比有所增加。

5 討論

在本試驗(yàn)條件下，研究發(fā)現(xiàn)，對照組妊娠前期、中期、后期，妊娠母豬血清超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量隨著妊娠期不斷增加，而逐漸的下降。試驗(yàn)組超氧化物歧化酶活性隨著妊娠期的不斷增加有所提高，且在妊娠后期顯著高于對照組（P＜0.05）；丙二醛含量隨妊娠期的增加而降低，但在妊娠前期和中期的含量顯著低于對照組（P＜0.05），而在妊娠后期含量顯著高于對照組（P＜0.05）。這可能由于苜蓿草粉具有改變血清中抗氧化酶活性的作用，提高機(jī)體抗氧化能力。另外，苜蓿草粉含有大量的皂角、黃酮等天然抗氧化物質(zhì)也可以影響機(jī)體抗氧化水平，提高松遼黑豬的機(jī)體的氧化還原狀態(tài)。關(guān)于松遼黑豬血清生化指標(biāo)方面的研究結(jié)果與葛德軍[4]研究結(jié)果基本一致，這樣結(jié)果表明日糧纖維具有影響機(jī)體胰島素、IGF-Ⅰ分泌水平，對不同妊娠時(shí)期，血液生化指標(biāo)影響較大，這種原因的出現(xiàn)可能是妊娠母豬所處的不同生理階段所致。