旋覆花配方顆粒提取工藝研究

閆炳雄，徐東婷，邱智東，王偉楠*

(長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)，長(zhǎng)春 130117)

摘要：目的優(yōu)選旋覆花中主要有效成分的最佳提取工藝。 方法采用正交試驗(yàn)法，以提取次數(shù)、提取時(shí)間、加水量為考察因素、以綠原酸含量為指標(biāo)，用HPLC法監(jiān)測(cè)提取過(guò)程中綠原酸的含量變化，以確定水煎煮的最佳工藝條件。 結(jié)果水煎煮最佳工藝為：10倍藥材量的水煎煮、提取2次，每次1 h。 結(jié)論該方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確,具有很好的重復(fù)性和穩(wěn)定性,適用于旋覆花配方顆粒的工業(yè)化生產(chǎn)。

關(guān)鍵詞：旋覆花；綠原酸；提取工藝；正交試驗(yàn)

DOI:10.13463/j.cnki.cczyy.2015.06.007

中圖分類號(hào)：R284.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：2095-6258(2015)06-1119-02

基金項(xiàng)目：吉林省科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(20130201009zy)。

作者簡(jiǎn)介：閆炳雄(1990-)，男，碩士研究生，主要從事中藥學(xué)方向研究。

收稿日期:(2015-07-11)

*通信作者：王偉楠，博士，講師，電話-15500070857，電子信箱-cnweinanwang@163.com

Extraction of Inula flowers granules

YAN Bingxiong, XU Dongting, QIU Zhidong, WANG Weinan*

(Changchun University of Chinese Medicine, Changchun 130117, China)

Abstract：Objective To optimize the extraction process of active compoundsin inula of Inula flowers granules. MethodsThe decoction process was optimized by orthogonal test using extraction times, extraction duration and solution volume as design factors and content of chlorogenic acid, which was quantified by HPLC method, as index. ResultsThe optimum decoction process was conducted in 10 times (V/W) of water for twice with each time of 1 h. ConclusionThe method is simple, accurate, repeatable and stable so that it is suitable for the industrial production of Inula flowers granules.

Keywords：Inula flowers; chlorogenic acid; extraction process; orthogonal test

旋覆花為菊科植物旋覆花InulajaponicaThunb. 或歐亞旋覆花InulabritannicaL.的頭狀花序, 是一種常用的傳統(tǒng)中草藥，具有降氣、止嘔、消痰、行水等功效[1-3]。中藥配方顆粒[4]又稱免煎中藥，主要通過(guò)一定的技術(shù)手段對(duì)單味中藥的有效成分進(jìn)行提取、加工制成中藥飲片的新劑型。中藥配方顆粒保持了中藥飲片的性味與功效，具有體積小，易于攜帶保存，臨床使用可隨證組方[5]，質(zhì)量穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)[6-7]。旋覆花配方顆粒是旋覆花飲片經(jīng)水煎煮法提取，過(guò)濾，水提物經(jīng)濃縮、干燥、制粒等工序制成的單味中藥顆粒劑。據(jù)報(bào)道[8-14],旋覆花中起抗菌消炎、抗氧化和抗腫瘤作用的物質(zhì)主要是綠原酸。本文通過(guò)采用HPLC法對(duì)旋覆花配方顆粒有效成分提取和制劑過(guò)程中綠原酸含量進(jìn)行測(cè)定[15-17],優(yōu)選旋覆花配方顆粒的最佳提取和制劑成型工藝，為旋覆花配方顆粒的工業(yè)化生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

1儀器與材料

1.1儀器Agilent 1260高效液相色譜儀(美國(guó)安捷倫公司)、TP-150 超聲波清洗機(jī)(天鵬電子新技術(shù)有限公司)、電動(dòng)恒溫水浴鍋(江蘇常熟醫(yī)療器械廠)、EL-204型電子分析天平(上海梅特勒-托利多儀器有限公司)、真空干燥箱(上海一恒實(shí)驗(yàn)儀器總廠)。1.2試劑與試藥綠原酸對(duì)照品(批號(hào)：110753-201013，由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供)；旋覆花飲片由長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)、吉林敖東藥業(yè)集團(tuán)現(xiàn)代中藥配方顆粒研究聯(lián)合實(shí)驗(yàn)室提供，飲片經(jīng)長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)姜大成教授鑒定。

2方法

2.1綠原酸含量測(cè)定2.1.1對(duì)照品溶液的制備準(zhǔn)確稱取綠原酸對(duì)照品5.4 mg于25 mL棕色容量瓶中，加50%甲醇溶解，制成每1 mL含綠原酸0.216 mg的溶液，即得。2.1.2供試品溶液的制備準(zhǔn)確稱取本品粉末約1 g，置于100 mL具塞錐形瓶中，加入50%甲醇50 mL，密塞，稱重，于超聲提取器中超聲提取30 min(150 W，40 kHz)，取出放冷后，稱量重量，用50%甲醇補(bǔ)充減失的重量，搖勻，過(guò)濾，準(zhǔn)確量取續(xù)濾液5 mL，置于25 mL干凈的棕色容量瓶中，用50%甲醇定容至刻度，搖勻，即得。2.1.3色譜條件采用Agilent TC-C18(4.6 mm×250 mm，5 μm)，流動(dòng)相乙腈-0.4%磷酸(13∶87)，柱溫25 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)327 nm，進(jìn)樣10 L，流速1 mL/min[16]。2.2提取工藝路線的確定設(shè)計(jì)提取工藝路線為：水煎煮提取→趁熱過(guò)濾→減壓濃縮→噴霧干燥→干法制?！善?。這一提取工藝路線基本上與傳統(tǒng)湯劑相一致，且工藝中采用減壓濃縮，噴霧干燥，藥液受熱時(shí)間短，效率高，減少了有效成分的破壞。能夠保留傳統(tǒng)湯劑的臨床療效以及速效的特點(diǎn)，既繼承了傳統(tǒng)用藥的經(jīng)驗(yàn)，又具備了生產(chǎn)的可行性。

3結(jié)果與分析

3.1浸泡時(shí)間及藥材吸水率的考察取旋覆花飲片適量，加12倍量水浸泡，每隔30 min觀察1次浸透的情況，直至旋覆花藥材全部浸透。試驗(yàn)結(jié)果表明，旋覆花飲片全部浸透的時(shí)間為2 h，平均吸水率397.4%。由此確定，在對(duì)旋覆花飲片進(jìn)行提取時(shí)第1次加入水量為在最低加水量的基礎(chǔ)上追加4倍，并在首次加熱提取之前先浸泡2 h。3.2水煎煮工藝條件的考察根據(jù)文獻(xiàn)資料及前期預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，選擇加水量、煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)3個(gè)影響中藥提取的主要因素，每個(gè)因素設(shè)3個(gè)水平，以綠原酸含量作為實(shí)驗(yàn)考察指標(biāo)，采用L9(34)正交表進(jìn)行試驗(yàn)。因素水平見(jiàn)表1。

表1　因素水平表

取旋覆花飲片100 g，共9分，按L9(34)正交表設(shè)計(jì)進(jìn)行試驗(yàn)，以綠原酸的含量作為考察指標(biāo)。依直觀分析和方差分析結(jié)果，并結(jié)合實(shí)際生產(chǎn)情況確定A1B2C1為最佳提取方案，即加10倍藥材量的水、煎煮2次，每次1 h，趁熱濾過(guò)，合并濾液。

3.3提取工藝的驗(yàn)證性試驗(yàn)為了驗(yàn)證正交試驗(yàn)優(yōu)選出的最佳工藝條件的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性，故進(jìn)行驗(yàn)證性試驗(yàn)。取旋覆花飲片3分，每分100 g，按正交確定的最佳提取工藝條件進(jìn)行提取，濃縮，浸膏于80 ℃減壓干燥，考察出膏率和綠原酸的含量。驗(yàn)證性試驗(yàn)結(jié)果表明，3批樣品的出膏率分別為12.4%、12.2%、13.0%，綠原酸含量分別為42.118 1、41.595 0、43.964 1 mg，其RSD分別為2.52%和0.92%，重現(xiàn)性良好，且含量指標(biāo)略高于正交設(shè)計(jì)的水平，故確定A1B2C1為最佳提取工藝。

4小結(jié)

實(shí)驗(yàn)在旋覆花提取工藝考察中通過(guò)綜合旋覆花提取物中綠原酸含量、提取率，作為工藝優(yōu)化的指標(biāo)，通過(guò)對(duì)旋覆花吸水率的考察及對(duì)正交試驗(yàn)結(jié)果的方差分析和工藝驗(yàn)證試驗(yàn)過(guò)程，最終確定了旋覆花中綠原酸的水煎煮最佳提取工藝條件為：加10倍量水、浸泡2 h、煎煮2次，每次1 h，趁熱濾過(guò)，合并濾液。該提取工藝穩(wěn)定，基本上與傳統(tǒng)湯劑一致，既繼承了中藥傳統(tǒng)用藥的經(jīng)驗(yàn)，又具備了生產(chǎn)的可行性。

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