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·中藥藥理·

桃紅四物湯對(duì)兔皮片移植模型血管生成素影響的研究

黃承宇1，孫紹裘2*，李益亮2

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué),湖南長(zhǎng)沙410208;2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院,湖南長(zhǎng)沙410005）

〔摘要〕目的通過(guò)檢測(cè)兔皮片移植后桃紅四物湯對(duì)血管生成素（angiogenin,Ang）血清含量及皮片吻合區(qū)基因表達(dá)情況的影響，探討桃紅四物湯對(duì)皮片移植中促進(jìn)血管新生的作用機(jī)制。方法將75只實(shí)驗(yàn)兔按隨機(jī)數(shù)字表法將其分為五組，即桃紅四物湯低、中、高劑量組、模型組和假手術(shù)組，每組15只。造模后分組干預(yù)，并于術(shù)后2、5、8d三個(gè)時(shí)限，從每組隨機(jī)抽取5只實(shí)驗(yàn)兔，心臟采血后予以耳緣靜脈注射空氣處死，并切取移植皮片吻合區(qū)皮片組織。通過(guò)ELISA和RT-PCR檢測(cè)血清樣品中Ang的含量及皮片吻合區(qū)基因表達(dá)情況。結(jié)果桃紅四物湯三組中移植皮片的新生血管密度明顯高于模型組及假手術(shù)組（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Ang血清含量及基因表達(dá)中桃紅四物湯三組表達(dá)量高于模型組及假手術(shù)組（P＜0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論桃紅四物湯能上調(diào)組織中血管新生促進(jìn)因子Ang的表達(dá)，促進(jìn)移植皮片成活。

〔關(guān)鍵詞〕桃紅四物湯;皮片移植;血管生成素;血管新生

Effects of Taohongsiwu Decoction on Angiogenin of Rabbit Skin Graft Models

HUANG Chengyu1, SUN Shaoqiu2*, LI Yiliang2

(1. Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, Hunan 410208, China; 2. The Second Affiliated Hospital of Hunan University of Chinese Medicine, Changsha, Hunan 410005, China)

〔Abstract〕Objective To investigate the mechanism of Taohongsiwu Decoction on promoting angiogenesis skin grafby detectingserum angiogenin (Ang) concentration and gene expression. Methods 75rabbits were randomly divided into 5groups, namely, low dose Taohongsiwu Decoction group, middle dose Taohongsiwu Decoction group, high dose Taohongsiwu Decoction group, model group and sham operation group, 15rats in each group. After grouping intervention, at the three time-points: 2d, 5d, 8d, 5rabbits were randomly selected from each group.After blood collection, the rats were executed by air injection of the ear vein, and the skin grafts anastomosed area skin tissues were cut. The Ang content in serum samples and gene expression in anastomosed area were detected by ELISA and RT -PCR. Results The microvessel density of skin grafts in Taohongsiwu Decoction groups was significantly better than the model group and operation group (P<0.05), the difference was statistically significant. Ang content in serum samples and gene expression in the Taohongsiwu Decoction groups were higher than that of the model group and operation group(P<0.05), the difference was statistically significant. Conclusion Taohongsiwu Decoction can upregulate Ang expression in the tissues to promote the survival of skin graft.

〔Keywords〕Taohongsiwu Decoction; skin graft; angiogenin; angiogenesis

皮膚是人體的主要器官之一，覆蓋著整個(gè)身體表面，不僅具有感覺(jué)、調(diào)節(jié)體溫以及分泌排泄等功能，而且還能阻止病菌或其他有害物體的入侵，防止體液、電解質(zhì)和蛋白質(zhì)等損失，保護(hù)生命和維持機(jī)體與環(huán)境相適應(yīng)。一旦皮膚發(fā)生缺損而不能及時(shí)獲得修復(fù)，就會(huì)失去正常外形與功能活動(dòng)，甚至危及生命。而皮片移植是目前臨床治療皮膚缺損最常用的方法之一，雖然它能簡(jiǎn)單快速有效封閉傷口和創(chuàng)面，修復(fù)體表完整，恢復(fù)肢體功能，但是術(shù)后容易出現(xiàn)皮片的部分壞死或全部壞死并最終導(dǎo)致手術(shù)失敗。目前學(xué)者普遍認(rèn)為術(shù)后早期重建移植皮片血運(yùn)促血管新生是皮片成活的關(guān)鍵。本研究以兔皮片移植模型為研究對(duì)象，采用桃紅四物湯干預(yù)后，檢測(cè)不同劑量桃紅四物湯對(duì)血管生成素（angiogenin, Ang）的表達(dá)情況，初步揭示其促進(jìn)移植皮片成活及血管新生的作用機(jī)制，為臨床上中醫(yī)藥治療皮膚缺損提供新思路和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康新西蘭大白兔120只，10～12月齡，雌雄各半，體質(zhì)量（2.3±0.2）kg。許可證號(hào)：SYXK(湘)2013-2005。由湖南中醫(yī)藥大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心統(tǒng)一購(gòu)買(mǎi)，并由動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供飼料進(jìn)行統(tǒng)一喂養(yǎng)。

標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)效應(yīng)原理是指標(biāo)準(zhǔn)系統(tǒng)的效應(yīng)并不是來(lái)自單個(gè)標(biāo)準(zhǔn)效應(yīng)的簡(jiǎn)單疊加，而是來(lái)自組成該系統(tǒng)的相互協(xié)同的標(biāo)準(zhǔn)集合效應(yīng)，且這個(gè)整體效應(yīng)超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)單個(gè)效應(yīng)的總和。[2]

1.1.2藥物桃紅四物湯：參考吳謙《醫(yī)宗金鑒》桃紅四物湯的配比：生地黃20g，當(dāng)歸20g，赤芍20g，川芎10g，桃仁20g，紅花10g。飲片購(gòu)自湖南中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院藥劑科，由煎藥房代煎，制成含生藥2g/mL的湯劑，并封包冷藏。

1.1.3主要試劑及儀器PCR引物設(shè)計(jì)由上海生工生物工程有限公司完成；GoTap qPCR Master Mix購(gòu)自普洛麥格（北京）生物技術(shù)有限公司；Real-Time7500型定量PCR擴(kuò)增儀（美國(guó)應(yīng)用生物系統(tǒng)公司）；ebioscience（dll4）ELISA試劑盒購(gòu)自萊茲生物科技有限公司;辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗體購(gòu)自Proteintech公司；TRIZOL試劑盒購(gòu)自Invitrogen公司；LKB-Ⅲ型AO切片機(jī)(瑞典LKB公司生產(chǎn))；BX5O型光學(xué)顯微鏡(OLYMPUS公司)；ipp6.0圖像分析軟件(Media Cybernetics公司)。

1.2方法

1.2.1分組與造模[1]將75只實(shí)驗(yàn)兔，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后稱質(zhì)量，按質(zhì)量分層進(jìn)行編號(hào)，按隨機(jī)數(shù)字表法分為五組，即桃紅四物湯低、中、高劑量組、模型組、假手術(shù)組，每組15只。造模：實(shí)驗(yàn)前6h禁食水，麻醉完成后，兔臺(tái)常規(guī)鋪無(wú)菌巾單。將實(shí)驗(yàn)兔固定在兔臺(tái)上，碘酒常規(guī)消毒手術(shù)區(qū)域后，手術(shù)剝離兔背脊柱棘突右側(cè)1cm處，從第三胸椎棘突起向兔尾長(zhǎng)6cm，寬3cm，厚度約為0.5mm大小近長(zhǎng)方形皮片，再于其腹部用手術(shù)刀取同樣大小厚度皮片，清理皮下脂肪組織，修整后移植于背部皮膚缺損區(qū)，間斷縫合固定于背部，并采用加壓打包法包扎傷口，腹部切口則直接拉攏縫合。桃紅四物湯低、中、高劑量組、模型組都按上述方法造模，假手術(shù)組只在背部及腹部的相應(yīng)區(qū)域用手術(shù)刀做同等面積、同等大小的切口，切開(kāi)皮膚，深達(dá)皮下組織，但不進(jìn)行皮下組織分離，間斷縫合手術(shù)切口。

1.2.2干預(yù)方法根據(jù)人與動(dòng)物體表面積換算公式[2]，各組實(shí)驗(yàn)兔灌藥劑量為：桃紅四物湯低、中、高劑量分別為：2.5、5、10g/kg,同時(shí)模型組和假手術(shù)組給予等體積的蒸餾水灌胃。于術(shù)后第2、5、8天3個(gè)時(shí)限，從每組隨機(jī)抽取5只實(shí)驗(yàn)兔，行心臟采血后，處死并切取移植皮片吻合區(qū)皮片組織，按常規(guī)方法制成超薄切片，病理組織電鏡下觀察，并檢測(cè)血清及皮片組織中Ang的含量及基因表達(dá)情況。

1.3觀察指標(biāo)及檢測(cè)方法

1.3.1組織病理學(xué)變化及血管密度檢測(cè)切取移植皮片吻合區(qū)皮片，以4%多聚甲醛溶液固定24h，石蠟包埋切片，然后使用平推式切片機(jī)連續(xù)切片，切片載入載玻片后予行蘇木素-伊紅（HE染色）染色，染色時(shí)間為10min左右，切片厚度約5um。光學(xué)顯微鏡下于真皮及皮下肉芽組織處隨機(jī)選取3個(gè)視野，觀察毛細(xì)血管橫斷面數(shù)量，并求其平均值。

1.3.3ELISA檢測(cè)血清中Ang含量取備用血清用ELISA法測(cè)定，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作。包被：用稀釋液（PH 9.60.05M碳酸鹽）稀釋血清至蛋白含量1～10μg/mL，每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1mL（同時(shí)設(shè)置空白孔、陰性對(duì)照孔）,放置于4℃環(huán)境過(guò)夜。洗滌：棄孔內(nèi)溶液后，用洗滌緩沖液（PH 7.4PBS 0.15M）沖洗3次，每次3min。加樣：加稀釋的待檢樣品0.1mL至反應(yīng)孔中，放于37℃環(huán)境1h，然后同上洗滌。加酶抗體：加新鮮酶標(biāo)抗體0.1mL至反應(yīng)孔中，放于37℃環(huán)境1h，然后同上洗滌。加底物液（現(xiàn)用現(xiàn)配）：加底物液TMB0.1mL于反應(yīng)孔中，放于37℃環(huán)境20min。終止反應(yīng)：加2M硫酸0.05mL，終止反應(yīng)。結(jié)果判斷：空白孔調(diào)零，測(cè)定標(biāo)本的吸收值/一組陰性標(biāo)本測(cè)定的平均值（P/N）表示，當(dāng)P/N＞2時(shí)作為抗體的效價(jià)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)均采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料用“±s”表示，采用單因素方差分析，若滿足正態(tài)性分布和方差齊性檢驗(yàn)（P>0.05），用LSD檢驗(yàn)，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；若滿足正態(tài)性分布，不滿足方差齊性，則用Dunnett’s T3檢驗(yàn)，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1各組血管密度檢測(cè)結(jié)果

桃紅四物湯三組術(shù)后2、5、8d兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=76.72，P<0.05）；模型組和假手術(shù)組術(shù)后2、5、8d兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=58.34，P<0.05）。提示桃紅四物湯低、高、中劑量組、模型組及假手術(shù)組術(shù)后2、5、8d移植皮片的血管密度是逐漸增高，均有血管新生。術(shù)后2、5、8d比較，桃紅四物湯低、中、高劑量組與模型組及假手術(shù)組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=63.48，P<0.05），桃紅四物湯低劑量組與中、高劑量組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），桃紅四物湯中劑量組與高劑量組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)果見(jiàn)表1和圖1。

表1　各組血管密度檢測(cè)結(jié)果　(±s，n=15，個(gè)）

表1　各組血管密度檢測(cè)結(jié)果　(±s，n=15，個(gè)）

注：與假手術(shù)組比較*P<0.05；與模型組比較#P<0.05；低劑量組和中劑量組、高劑量組比較△P<0.05；與術(shù)后2d比較▲★P<0.05；與術(shù)后5d比較★P<0.05。

組別假手術(shù)組模型組低劑量組中劑量組高劑量組給藥劑量（g/kg）術(shù)后2d 5.37±0.362.55±0.41* 2.83±0.24*#△3.31±0.26*#3.53±0.67*#術(shù)后5d 5.62±0.56▲4.25±0.68*▲4.80±0.74*#△▲5.88±0.42*#▲5.92±0.48*#▲術(shù)后8d 6.18±0.33★5.86±0.66*★6.03±0.40*#△★6.27±0.53*#★6.27±0.59*#★--2.5510

圖1　各組移植血管顯微光鏡圖（HE×400）

2.2各組血清Ang含量和皮片吻合區(qū)中Ang基因表達(dá)

各組血清Ang的含量及皮片吻合區(qū)中Ang的基因含量均是術(shù)后2d到5d逐漸升高，然后術(shù)后5d到8d逐漸下降的趨勢(shì)。在2、5、8d內(nèi)，桃紅四物湯低、中、高劑量組術(shù)后血清Ang的含量及皮片吻合區(qū)中Ang的基因含量均高于模型組及假手術(shù)組（P<0.05）；桃紅四物湯中、高劑量組術(shù)后血清Ang的含量及皮片吻合區(qū)中Ang的基因含量高于桃紅四物湯低劑量手術(shù)組（P<0.01）；桃紅四物湯中劑量組與桃紅四物湯高劑量組術(shù)后血清Ang的含量及皮片吻合區(qū)中Ang的基因含量無(wú)差別（P>0.05）；模型組與假手術(shù)組術(shù)后血清Ang的含量及皮片吻合區(qū)中Ang的基因含量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)果見(jiàn)表2-3和圖3。

表2　各組血清Ang的含量結(jié)果比較　(±s，n=15,ng/L）

表2　各組血清Ang的含量結(jié)果比較　(±s，n=15,ng/L）

注：與假手術(shù)組比較*P<0.05；與模型組比較#P<0.05；低劑量組和中劑量組、高劑量組比較△△P<0.01。

術(shù)后8d組　別　給藥劑量（g/kg）術(shù)后2d 術(shù)后5d 192.27±4.09181.99±8.04* 201.00±6.29*#△△211.80±5.18*#209.62±6.67*#假手術(shù)組模型組低劑量組中劑量組高劑量組--2.5510196.67±4.45190.96±4.17* 199.79±3.63*#△△211.34±4.02*#208.75±2.89*#229.02±6.52213.36±6.41* 244.20±5.56*#△△290.18±5.97*#288.10±6.31*#

3　討論

Ang是促血管新生因子之一，它最早是在人類的結(jié)腸癌細(xì)胞系HT-29細(xì)胞培養(yǎng)上清中被發(fā)現(xiàn),由123個(gè)氨基酸殘基組成，是一種分泌性單鏈堿性蛋白質(zhì)。它可以促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，參與胚胎發(fā)育和創(chuàng)傷愈合等過(guò)程中血管的新生與重建。有研究表明[3]，Ang能調(diào)控許多與血管新生相關(guān)的分子蛋白，是血管新生的重要樞紐。它能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞形成管腔樣結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)內(nèi)皮細(xì)胞與管周細(xì)胞的相互作用，促進(jìn)血管發(fā)育成熟和保持其完整性[4]。而有研究發(fā)現(xiàn)，皮片移植后血管的重建一般需要經(jīng)歷兩個(gè)過(guò)程[5]：在皮片移植后最初48h內(nèi)是血漿營(yíng)養(yǎng)期，主要是使移植皮片產(chǎn)生內(nèi)源性固定；在皮片移植48h后是血管新生與血液循環(huán)的建立期，血管芽在皮片與受區(qū)組織間活躍生長(zhǎng)，形成管腔，一般術(shù)后4-5天內(nèi)完成。

表3　各組皮片吻合區(qū)Ang的mRNA含量結(jié)果比較(±s，n=15,ng/L）

表3　各組皮片吻合區(qū)Ang的mRNA含量結(jié)果比較(±s，n=15,ng/L）

注：與假手術(shù)組比較*P<0.05；與模型組比較#P<0.05；低劑量組和中劑量組、高劑量組比較△△P<0.01。

組別假手術(shù)組模型組低劑量組中劑量組高劑量組給藥劑量（g/kg）--2.5510術(shù)后2d 0.13±0.010.09±0.00* 0.19±0.01*#△△0.23±0.01*#0.25±0.02*#術(shù)后5d 0.18±0.010.13±0.01* 0.28±0.00*#△△0.37±0.02*#0.36±0.01*#術(shù)后8d 0.12±0.010.08±0.00* 0.14±0.01*#△△0.18±0.00*#0.18±0.01*#

圖2　各組皮片吻合區(qū)Ang的mRNA含量結(jié)果表達(dá)電泳圖

皮膚缺損所造成的創(chuàng)面相當(dāng)于中醫(yī)學(xué)中的“潰瘍”、“金瘍”。中醫(yī)理論認(rèn)為各種外傷，如跌打損傷、車(chē)禍致傷、金刃所傷等，均可致使經(jīng)脈受損，氣機(jī)阻滯，從而導(dǎo)致血行不暢或脈管破損而出血，成為離經(jīng)之瘀血，“血瘀必兼氣滯”，氣滯又加重血瘀。《正體類要》指出：“肢體傷于外，則氣血傷于內(nèi)，營(yíng)衛(wèi)有所不貫，臟腑由之不和”，因此中醫(yī)中藥治療外傷，多重氣血，氣滯血瘀是外傷的病機(jī)核心，活血化瘀生新是其重要的治療原則，所以皮片移植術(shù)后，證屬氣滯血瘀，應(yīng)予以活血化瘀治療。桃紅四物湯是活血化瘀的經(jīng)典方，具有補(bǔ)血而不滯血，和血不傷血特點(diǎn)[6]。有研究發(fā)現(xiàn)[7]，桃紅四物湯能改善兔激素性股骨頭缺血性壞死模型中股骨頭局部血運(yùn)，促進(jìn)局部微血管的新生，增加微血管密度，從而達(dá)到修復(fù)壞死股骨頭目的。劉旺華[8]等證實(shí)桃紅四物湯能增加隨意皮瓣的成活面積，增加皮瓣毛細(xì)血管密度。本實(shí)驗(yàn)也通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，桃紅四物湯低、中、高組與模型組比較，血管密度明顯增高，血清中Ang的濃度及皮片中基因的表達(dá)量也增高，可以得知桃紅四物湯能促進(jìn)血管新生，初步揭示了皮片移植術(shù)后早期血管新生促進(jìn)因子Ang含量可以促進(jìn)血管新生的機(jī)制。

移植皮片成活的關(guān)鍵主要決定于皮片與受皮組織間是否建立了有效的血液循環(huán)，現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)[9]早期重建移植皮片血運(yùn)促進(jìn)血管新生是皮片成活的關(guān)鍵。血管新生是指在原有的血管基礎(chǔ)上通過(guò)血管內(nèi)皮細(xì)胞游走、增殖、血管分裂及分支，形成基底膜而構(gòu)造成新的血管網(wǎng)的過(guò)程。這個(gè)過(guò)程是由許多促進(jìn)與抑制因子控制而保持平衡，一旦此平衡被破壞，就會(huì)激活血管系統(tǒng)生成新生血管或抑制血管系統(tǒng)使血管硬化[10]。Ang并不能直接促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，而是誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞出芽形成新的血管網(wǎng)結(jié)構(gòu)，并保持血管網(wǎng)結(jié)構(gòu)的完整和穩(wěn)定。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得知，血管新生促進(jìn)因子Ang的含量在皮片移植術(shù)后是隨著時(shí)間的延長(zhǎng)逐步增高的，在術(shù)后第5d達(dá)到一個(gè)高值，到術(shù)后第8d就出現(xiàn)明顯下降的趨勢(shì)。而血管密度是隨著術(shù)后時(shí)間的延長(zhǎng)一直增高，術(shù)后第2d到術(shù)后第5d明顯增高，術(shù)后第5d到術(shù)后第8d稍有增高。這也證明了皮片移植術(shù)后早期Ang含量的增高可以促進(jìn)血管新生，增高血管密度，促進(jìn)移植皮片成活。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)桃紅四物湯干預(yù)后兔皮片移植模型血管新生促進(jìn)因子Ang影響的研究，初步揭示了桃紅四物湯促血管新生機(jī)制，證實(shí)了桃紅四物湯能夠促進(jìn)皮片移植成活，然而桃紅四物湯對(duì)皮片移植成活的影響是多方面，其作用機(jī)制還有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn):

[1]付萬(wàn)進(jìn),王暉,龐玉新,等.皮膚創(chuàng)傷模型研究進(jìn)展[J].廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào),2013,2:214-218.

[2]賀石林,王鍵,王凈凈.中醫(yī)科研設(shè)計(jì)與統(tǒng)計(jì)學(xué)[M].長(zhǎng)沙：湖南科學(xué)技術(shù)出版社,2008:48.

[3]Kishimoto K,Liu S,Tsuji T.Endogenous angiogenin in endothelial cells is a general requirement for cell proliferation and angiogenesis[J].Oncogene,2005,24(3):445.

[4]朱邵品,許迅.血管生成素與炎癥及新生血管關(guān)系的研究進(jìn)展[J].江蘇醫(yī)藥,2013,4:452-454.

[5]李倩,胡明玉,章宏偉,等.負(fù)壓創(chuàng)面治療技術(shù)對(duì)皮膚移植成活的臨床觀察及實(shí)驗(yàn)研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展,2011,11(17):3284-3289.

[6]丁艷杰,張前德.桃紅四物湯臨床與實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展[J].江蘇中醫(yī)藥, 2010,42(1):77-79.

[7]齊振熙,杜傳寶.桃紅四物湯對(duì)激素性股骨頭缺血壞死局部微血管密度的影響[J].中國(guó)中醫(yī)骨傷科雜志,2008,16(4):31-33.

[8]劉旺華,曾飛,趙海霞.桃紅四物湯對(duì)大鼠背部隨意皮瓣存活的影響[J].云南中醫(yī)中藥雜志,2012,1:57-58.

[9]劉嘉鋒,鐘文惠,張一鳴,等.重組人VEGF基因在游離組織移植中作用的實(shí)驗(yàn)研究[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué),2008,17(4):540-543.

[10]Szekanecz, Besenyei T, Paragh G, et al. New insights in synovial angiogensis[J]. Joint Bone Spine,2010,77(1):13-19.

（本文編輯楊瑛）

〔通訊作者〕*孫紹裘，男，主任醫(yī)師，E-mail：54sunshaoqiu@163.com。

〔作者簡(jiǎn)介〕黃承宇，男，碩士，主要從事中醫(yī)骨傷實(shí)驗(yàn)與臨床研究。

〔基金項(xiàng)目〕國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（項(xiàng)目編號(hào)：81373658）。

〔收稿日期〕2015-05-28

〔中圖分類號(hào)〕R285.5；R751

〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A

〔文章編號(hào)〕

doi:10.3969/j.issn.1674－070X.2015.11.002