柳 茜 ，傅 平 ，姚明久 ，高鳳芹 ，劉曉波 ，孫啟忠

（1.四川省涼山彝族自治州畜牧獸醫(yī)研究所，四川 西昌 615042；2.四川省草原工作總站，四川 成都 610041；3.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院草原研究所，內(nèi)蒙古 呼和浩特 010010）

本試驗(yàn)旨在對(duì)玉米與拉巴豆混播生產(chǎn)的青飼料的青貯品質(zhì)進(jìn)行評(píng)價(jià)，為玉米與拉巴豆混播模式的推廣提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況 試驗(yàn)在四川省涼山彝族自治州畜牧獸醫(yī)研究所的牧草試驗(yàn)地進(jìn)行。試驗(yàn)地海拔1550 m，年均溫17℃，≥10℃積溫5329.9℃，年日照時(shí)數(shù)2431h，無霜期272d。年均降水量1013mm，年均蒸發(fā)量1945mm，是降水量的1.92倍。土壤為黃壤，前作為牧草地，土壤肥力中等、一致。

1.2 供試材料及其播種方式 玉米為豫玉22號(hào)，是北京奧瑞金種業(yè)股份有限公司生產(chǎn)的玉米品種。拉巴豆為潤(rùn)高拉巴豆，百綠國(guó)際草業(yè)公司（北京）提供。玉米、拉巴豆于2013年4月25日播種，玉米行距40cm，株距30cm，種植密度為5558株/667m2；兩行玉米間套種拉巴豆，拉巴豆為撒播，播種量為2.5kg/667m2。玉米播種方式為人工穴播，播種深度為4～5cm。播前施磷酸二銨40 kg/667 m2（總氧分≥60%），拔節(jié)期施玉米專用肥15kg/667m2（總氧分≥22%，磷≥12%，鉀≥6%）。其他田間管理與普通大田種植的青貯玉米相同。在玉米乳熟后期（8月上旬）收獲，收獲時(shí)拉巴豆纏繞于玉米上。

1.3 青貯飼料制備 試驗(yàn)設(shè)兩個(gè)處理，分別為玉米與拉巴豆收獲后直接混合青貯及玉米單貯（對(duì)照1組），每處理重復(fù)3次。各處理的青貯料在鍘短至1.5～2cm后混勻，分別裝入聚乙烯真空袋（20cm×28cm）中密封保存，平均袋重300g，室溫保存60d，開封取樣分析相關(guān)指標(biāo)。另備500g的原料在室內(nèi)條件下陰干。

1.4 待測(cè)指標(biāo)與測(cè)定方法

1.4.1 感官評(píng)定 采用德國(guó)農(nóng)業(yè)協(xié)會(huì)的評(píng)分法，根據(jù)嗅覺、結(jié)構(gòu)、色澤3項(xiàng)評(píng)分。滿分為20分，16～20分為優(yōu)良，10～15 分為尚好，5～9 分為中等，0～4 分為腐敗[1]。

1.4.2 化學(xué)成分測(cè)定 試驗(yàn)前備好180 mL去離子水，打開青貯袋，稱取20g青貯料濕樣倒入去離子水中，放入4℃冰箱24h后，其浸提液用四層紗布、濾紙過濾到燒杯中，再用雷磁pHS-3C測(cè)定浸提液的pH值。取1.5mL濾液于離心管中，采用苯酚-次氯酸鈉比色法測(cè)定氨態(tài)氮含量[2]，再用105℃烘干法測(cè)定干物質(zhì)含量[3]，采用凱氏定氮法測(cè)定粗蛋白質(zhì)含量[3]；采用范氏洗滌纖維法測(cè)定中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維[4]，采用蒽酮-硫酸比色法測(cè)定可溶性碳水化合物的含量[5]。

1.4.3 發(fā)酵品質(zhì) 另取一份濾液，經(jīng)0.45μm濾膜過濾于5 mL離心管中，使用SHIMADZE-10A型高效液相色譜儀分析濾液中的乳酸、乙酸、丙酸、丁酸含量[6]。

1.4.4 微生物 在無菌操作臺(tái)上開封所取樣品，剪碎后混勻，稱取5g青貯樣品放入裝有45mL無菌水的三角瓶里。于180r/min搖床中振蕩30min，依次按10-3、10-4、10-5倍數(shù)稀釋，然后取 20μL 稀釋液滴加在乳酸菌、酵母菌（霉菌）、大腸桿菌和好氧細(xì)菌培養(yǎng)基上，并在對(duì)應(yīng)的平板上分別均勻涂布，然后在37℃恒溫培養(yǎng)箱中厭氧培養(yǎng)48h，作備用測(cè)定[7-8]。

1.5 青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)評(píng)價(jià) 采用費(fèi)氏青貯飼料評(píng)分方案進(jìn)行評(píng)價(jià)。根據(jù)青貯飼料中乳酸、乙酸、丁酸分別占總酸的含量來確定單項(xiàng)得分，3個(gè)單項(xiàng)得分相加得總分，滿分為100分。根據(jù)這個(gè)評(píng)分，可將青貯飼料品質(zhì)分為優(yōu)（80分以上）、良（61～80分）、中（41～60分）、差（ 21～40分）、劣（ 0～20分）5個(gè)等級(jí)。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析 采用Excel軟件對(duì)原料特性、感官評(píng)定及品質(zhì)評(píng)分?jǐn)?shù)據(jù)進(jìn)行整理和分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 感官評(píng)價(jià) 玉米單貯效果優(yōu)良，評(píng)為1級(jí)。玉米與拉巴豆混貯有較輕的酸味，芳香味較弱，莖葉結(jié)構(gòu)保持良好，柔軟松散，色澤為黃綠色，青貯效果尚好，評(píng)為2級(jí)（表1）。

表1 玉米與拉巴豆混貯的感官評(píng)定

2.2 營(yíng)養(yǎng)成分 成功獲得優(yōu)質(zhì)的青貯飼料不僅需要適宜的水分含量，還應(yīng)有足夠的可溶性糖及乳酸菌數(shù)。研究表明，水分含量控制在55%～65%，新鮮材料的可溶性糖含量在25～35g/kg，每克鮮草的乳酸菌數(shù)量在105個(gè)以上，是成功青貯的最低限度[9]。由表2可知，原料中玉米、玉米與拉巴豆混合樣的水分含量分別為75.15%和76.83%，玉米的可溶性糖高，玉米與拉巴豆混合樣的可溶性糖低。玉米與拉巴豆混合青貯后的粗蛋白比單貯提高63.85%，中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維分別高9.60%和24.13%，可溶性糖比玉米單貯降低了83.02%。

表2 玉米與拉巴豆混貯的營(yíng)養(yǎng)成分（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

2.3 發(fā)酵品質(zhì) 從表3可看出，玉米單貯的pH值為3.79，玉米與拉巴豆混貯的pH值為4.18；乳酸含量占總酸的比例分別為87.06%和68.43%，乙酸含量分別為12.94%和31.57%，兩處理均未產(chǎn)生丙酸和丁酸。就pH值、乳酸含量、乙酸含量而言，兩處理差異顯著（P＜0.05）；氨態(tài)氮占總氮的百分比，以玉米與拉巴豆混貯高（14.63%），比玉米單貯高 60.07%，差異顯著（P＜0.05）。

表3 玉米與拉巴豆混貯的發(fā)酵品質(zhì)

2.4 微生物 玉米與拉巴豆混合青貯后的乳酸菌、酵母菌、霉菌、好氧細(xì)菌均比玉米單貯高，玉米單貯、兩者混貯都沒有檢測(cè)到大腸桿菌，說明青貯能有效殺死各類腐敗菌，且混貯后能獲得更多的各類菌群（ 見表4）。

表4 玉米與拉巴豆混貯后的微生物測(cè)定

2.5 青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)評(píng)價(jià) 玉米單貯的總分為100分，青貯質(zhì)量為優(yōu)；玉米與拉巴豆混貯的總分為94分，質(zhì)量也為優(yōu)，與感官評(píng)定結(jié)果一致（見表5）。

表5 玉米與拉巴豆混貯發(fā)酵的品質(zhì)評(píng)分

3 分析

3.1 混貯對(duì)青貯營(yíng)養(yǎng)成分的影響 中性洗滌纖維（NDF）和酸性洗滌纖維（ADF）是反映纖維質(zhì)量好壞的最有效的指標(biāo)。ADF與動(dòng)物消化率呈負(fù)相關(guān)，其含量越低，飼草的消化率越高，飼用價(jià)值越大[10]。本試驗(yàn)中玉米和拉巴豆混貯的ADF含量比玉米單貯提高了24.13%，而NDF與原料相比差異不大。

3.2 混貯對(duì)青貯pH值及有機(jī)酸含量的影響 青貯飼料中，pH值受到不同牧草不同化學(xué)成分的影響，同時(shí)還與青貯時(shí)牧草本身的含水量有關(guān)。本試驗(yàn)中玉米單貯的pH值為3.79，與拉巴豆混貯后pH值為4.18，說明玉米與豆科牧草混貯會(huì)使pH值增高。各處理的乳酸含量均超過60%，乳酸含量占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)，因此我們認(rèn)為以同型乳酸發(fā)酵為主。混貯的乙酸含量高于玉米單貯，這可能與拉巴豆原料的特性有關(guān)，但乙酸含量的增加有利于提高青貯有氧穩(wěn)定性[11]?？扇苄蕴妓衔锸侨樗峋L(zhǎng)繁殖的底物，本試驗(yàn)中雖然拉巴豆的可溶性碳水化合物含量不足（僅有1.53%），但玉米的可溶性碳水化合物含量高（3.53%），發(fā)酵底物充足，促使青貯飼料的pH值快速降低，有效抑制了梭菌繁殖?；熨A處理未產(chǎn)生丁酸。

3.3 混貯對(duì)青貯氨態(tài)氮含量的影響 氨態(tài)氮與總氮的比值被廣泛用作衡量青貯好壞的重要指標(biāo)，比值越大，說明氨基酸和蛋白質(zhì)分解越多，青貯越差。萬里強(qiáng)等[12]指出，青貯中氨態(tài)氮含量不僅與青貯發(fā)酵過程有關(guān)，還受牧草種類及牧草成分含量的影響。

3.4 發(fā)酵品質(zhì)評(píng)價(jià) 發(fā)酵品質(zhì)好的鮮草青貯料的pH值應(yīng)低于4.2，若低于4.5則發(fā)酵品質(zhì)為中等，高于4.8則表示發(fā)酵品質(zhì)差；丁酸含量應(yīng)低于0.1%，氨態(tài)氮占總氮的比例應(yīng)低于10%。

4 結(jié)論

玉米與拉巴豆混播模式生產(chǎn)的青飼料直接用于青貯后，可以提高粗蛋白含量，其發(fā)酵效果與玉米單貯差異不顯著，而且還可以獲得好的發(fā)酵品質(zhì)，是適宜涼山地區(qū)的青貯料生產(chǎn)模式。

[1]蔡敦江，周興民，朱廉，等.苜蓿添加劑青貯、半干青貯與麥秸混貯的研究[J].草地學(xué)報(bào)，1997，5（2）:123-127.

[2]Broderica G A， Kang J H.Automated simultaneous determination of ammonia and amino acids in ruminal fluid and in vitro media[J].Journal of Dairy Science，1980，33:64-75.

[3]郭望山，孟慶翔.杜馬斯燃燒法與凱氏法測(cè)定飼料含氮量的比較研究[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2006，37（5）:464-468.

[4]Van Soest PJ， Robertson JB， Lewis BA.Methods for dietary fiber， neutral detergent fiber，and non-starch polysaccharidesin relation to animalnutrition[J].Journal of Dairy Science，1991，74:3583-3597.

[5]McDonald D，Henderson A R.Dctermination of water soluble carbohydrates in grass[J].Journal of the Science of Food and Agriculture，1964，15:395-398.

[6]許慶方.貯藏期和添加綠汁發(fā)酵液對(duì)袋裝苜蓿青貯的影響[J].草業(yè)科學(xué)，2006，14（2）:129-133.

[7]蔡義民，熊井清雄，廖芷，等.乳酸菌劑對(duì)青貯飼料發(fā)酵品質(zhì)的改善效果[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，1995，28（2）:73-82.

[8]司丙文.尖葉胡枝子青貯微生物數(shù)量變化及發(fā)酵特性[J].草業(yè)科學(xué)，2012，29（1）:650-657.

[9]王林，孫啟忠，張慧杰.苜蓿與玉米混貯質(zhì)量研究[J].草業(yè)學(xué)報(bào)，2011，20（4）:202-209.

[10]李向林，張新躍，唐一國(guó)，等.日糧中精料和牧草比例對(duì)舍飼山羊增重的影響[J].草業(yè)學(xué)報(bào)，2008，17（2）:43-47.

[11]許慶方，玉柱，李志強(qiáng)，等.苜蓿、玉米青貯飼料有氧穩(wěn)定性研究[J].草地學(xué)報(bào)，2007，15（6）:519-524.

[12]萬里強(qiáng)，李向林，何峰，等.苜蓿含水量與添加劑組分濃度對(duì)青貯效果的影響研究[J].草業(yè)學(xué)報(bào)，2007，16（2）:40-45.