柳 茜 ，傅 平 ，姚明久 ，高鳳芹 ，劉曉波 ，孫啟忠

（1.四川省涼山彝族自治州畜牧獸醫(yī)研究所，四川 西昌 615042；2.四川省草原工作總站，四川 成都 610041；3.中國農業(yè)科學院草原研究所，內蒙古 呼和浩特 010010）

本試驗旨在對玉米與拉巴豆混播生產的青飼料的青貯品質進行評價，為玉米與拉巴豆混播模式的推廣提供依據。

1 材料與方法

1.1 試驗地概況 試驗在四川省涼山彝族自治州畜牧獸醫(yī)研究所的牧草試驗地進行。試驗地海拔1550 m，年均溫17℃，≥10℃積溫5329.9℃，年日照時數2431h，無霜期272d。年均降水量1013mm，年均蒸發(fā)量1945mm，是降水量的1.92倍。土壤為黃壤，前作為牧草地，土壤肥力中等、一致。

1.2 供試材料及其播種方式 玉米為豫玉22號，是北京奧瑞金種業(yè)股份有限公司生產的玉米品種。拉巴豆為潤高拉巴豆，百綠國際草業(yè)公司（北京）提供。玉米、拉巴豆于2013年4月25日播種，玉米行距40cm，株距30cm，種植密度為5558株/667m2；兩行玉米間套種拉巴豆，拉巴豆為撒播，播種量為2.5kg/667m2。玉米播種方式為人工穴播，播種深度為4～5cm。播前施磷酸二銨40 kg/667 m2（總氧分≥60%），拔節(jié)期施玉米專用肥15kg/667m2（總氧分≥22%，磷≥12%，鉀≥6%）。其他田間管理與普通大田種植的青貯玉米相同。在玉米乳熟后期（8月上旬）收獲，收獲時拉巴豆纏繞于玉米上。

1.3 青貯飼料制備 試驗設兩個處理，分別為玉米與拉巴豆收獲后直接混合青貯及玉米單貯（對照1組），每處理重復3次。各處理的青貯料在鍘短至1.5～2cm后混勻，分別裝入聚乙烯真空袋（20cm×28cm）中密封保存，平均袋重300g，室溫保存60d，開封取樣分析相關指標。另備500g的原料在室內條件下陰干。

1.4 待測指標與測定方法

1.4.1 感官評定 采用德國農業(yè)協會的評分法，根據嗅覺、結構、色澤3項評分。滿分為20分，16～20分為優(yōu)良，10～15 分為尚好，5～9 分為中等，0～4 分為腐敗[1]。

1.4.2 化學成分測定 試驗前備好180 mL去離子水，打開青貯袋，稱取20g青貯料濕樣倒入去離子水中，放入4℃冰箱24h后，其浸提液用四層紗布、濾紙過濾到燒杯中，再用雷磁pHS-3C測定浸提液的pH值。取1.5mL濾液于離心管中，采用苯酚-次氯酸鈉比色法測定氨態(tài)氮含量[2]，再用105℃烘干法測定干物質含量[3]，采用凱氏定氮法測定粗蛋白質含量[3]；采用范氏洗滌纖維法測定中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維[4]，采用蒽酮-硫酸比色法測定可溶性碳水化合物的含量[5]。

1.4.3 發(fā)酵品質 另取一份濾液，經0.45μm濾膜過濾于5 mL離心管中，使用SHIMADZE-10A型高效液相色譜儀分析濾液中的乳酸、乙酸、丙酸、丁酸含量[6]。

1.4.4 微生物 在無菌操作臺上開封所取樣品，剪碎后混勻，稱取5g青貯樣品放入裝有45mL無菌水的三角瓶里。于180r/min搖床中振蕩30min，依次按10-3、10-4、10-5倍數稀釋，然后取 20μL 稀釋液滴加在乳酸菌、酵母菌（霉菌）、大腸桿菌和好氧細菌培養(yǎng)基上，并在對應的平板上分別均勻涂布，然后在37℃恒溫培養(yǎng)箱中厭氧培養(yǎng)48h，作備用測定[7-8]。

1.5 青貯飼料發(fā)酵品質評價 采用費氏青貯飼料評分方案進行評價。根據青貯飼料中乳酸、乙酸、丁酸分別占總酸的含量來確定單項得分，3個單項得分相加得總分，滿分為100分。根據這個評分，可將青貯飼料品質分為優(yōu)（80分以上）、良（61～80分）、中（41～60分）、差（ 21～40分）、劣（ 0～20分）5個等級。

1.6 統計分析 采用Excel軟件對原料特性、感官評定及品質評分數據進行整理和分析。

2 結果與分析

2.1 感官評價 玉米單貯效果優(yōu)良，評為1級。玉米與拉巴豆混貯有較輕的酸味，芳香味較弱，莖葉結構保持良好，柔軟松散，色澤為黃綠色，青貯效果尚好，評為2級（表1）。

表1 玉米與拉巴豆混貯的感官評定

2.2 營養(yǎng)成分 成功獲得優(yōu)質的青貯飼料不僅需要適宜的水分含量，還應有足夠的可溶性糖及乳酸菌數。研究表明，水分含量控制在55%～65%，新鮮材料的可溶性糖含量在25～35g/kg，每克鮮草的乳酸菌數量在105個以上，是成功青貯的最低限度[9]。由表2可知，原料中玉米、玉米與拉巴豆混合樣的水分含量分別為75.15%和76.83%，玉米的可溶性糖高，玉米與拉巴豆混合樣的可溶性糖低。玉米與拉巴豆混合青貯后的粗蛋白比單貯提高63.85%，中性洗滌纖維、酸性洗滌纖維分別高9.60%和24.13%，可溶性糖比玉米單貯降低了83.02%。

表2 玉米與拉巴豆混貯的營養(yǎng)成分（干物質基礎）

2.3 發(fā)酵品質 從表3可看出，玉米單貯的pH值為3.79，玉米與拉巴豆混貯的pH值為4.18；乳酸含量占總酸的比例分別為87.06%和68.43%，乙酸含量分別為12.94%和31.57%，兩處理均未產生丙酸和丁酸。就pH值、乳酸含量、乙酸含量而言，兩處理差異顯著（P＜0.05）；氨態(tài)氮占總氮的百分比，以玉米與拉巴豆混貯高（14.63%），比玉米單貯高 60.07%，差異顯著（P＜0.05）。

表3 玉米與拉巴豆混貯的發(fā)酵品質

2.4 微生物 玉米與拉巴豆混合青貯后的乳酸菌、酵母菌、霉菌、好氧細菌均比玉米單貯高，玉米單貯、兩者混貯都沒有檢測到大腸桿菌，說明青貯能有效殺死各類腐敗菌，且混貯后能獲得更多的各類菌群（ 見表4）。

表4 玉米與拉巴豆混貯后的微生物測定

2.5 青貯飼料的發(fā)酵品質評價 玉米單貯的總分為100分，青貯質量為優(yōu)；玉米與拉巴豆混貯的總分為94分，質量也為優(yōu)，與感官評定結果一致（見表5）。

表5 玉米與拉巴豆混貯發(fā)酵的品質評分

3 分析

3.1 混貯對青貯營養(yǎng)成分的影響 中性洗滌纖維（NDF）和酸性洗滌纖維（ADF）是反映纖維質量好壞的最有效的指標。ADF與動物消化率呈負相關，其含量越低，飼草的消化率越高，飼用價值越大[10]。本試驗中玉米和拉巴豆混貯的ADF含量比玉米單貯提高了24.13%，而NDF與原料相比差異不大。

3.2 混貯對青貯pH值及有機酸含量的影響 青貯飼料中，pH值受到不同牧草不同化學成分的影響，同時還與青貯時牧草本身的含水量有關。本試驗中玉米單貯的pH值為3.79，與拉巴豆混貯后pH值為4.18，說明玉米與豆科牧草混貯會使pH值增高。各處理的乳酸含量均超過60%，乳酸含量占絕對優(yōu)勢，因此我們認為以同型乳酸發(fā)酵為主。混貯的乙酸含量高于玉米單貯，這可能與拉巴豆原料的特性有關，但乙酸含量的增加有利于提高青貯有氧穩(wěn)定性[11]。可溶性碳水化合物是乳酸菌生長繁殖的底物，本試驗中雖然拉巴豆的可溶性碳水化合物含量不足（僅有1.53%），但玉米的可溶性碳水化合物含量高（3.53%），發(fā)酵底物充足，促使青貯飼料的pH值快速降低，有效抑制了梭菌繁殖?；熨A處理未產生丁酸。

3.3 混貯對青貯氨態(tài)氮含量的影響 氨態(tài)氮與總氮的比值被廣泛用作衡量青貯好壞的重要指標，比值越大，說明氨基酸和蛋白質分解越多，青貯越差。萬里強等[12]指出，青貯中氨態(tài)氮含量不僅與青貯發(fā)酵過程有關，還受牧草種類及牧草成分含量的影響。

3.4 發(fā)酵品質評價 發(fā)酵品質好的鮮草青貯料的pH值應低于4.2，若低于4.5則發(fā)酵品質為中等，高于4.8則表示發(fā)酵品質差；丁酸含量應低于0.1%，氨態(tài)氮占總氮的比例應低于10%。

4 結論

玉米與拉巴豆混播模式生產的青飼料直接用于青貯后，可以提高粗蛋白含量，其發(fā)酵效果與玉米單貯差異不顯著，而且還可以獲得好的發(fā)酵品質，是適宜涼山地區(qū)的青貯料生產模式。

[1]蔡敦江，周興民，朱廉，等.苜蓿添加劑青貯、半干青貯與麥秸混貯的研究[J].草地學報，1997，5（2）:123-127.

[2]Broderica G A， Kang J H.Automated simultaneous determination of ammonia and amino acids in ruminal fluid and in vitro media[J].Journal of Dairy Science，1980，33:64-75.

[3]郭望山，孟慶翔.杜馬斯燃燒法與凱氏法測定飼料含氮量的比較研究[J].畜牧獸醫(yī)學報，2006，37（5）:464-468.

[4]Van Soest PJ， Robertson JB， Lewis BA.Methods for dietary fiber， neutral detergent fiber，and non-starch polysaccharidesin relation to animalnutrition[J].Journal of Dairy Science，1991，74:3583-3597.

[5]McDonald D，Henderson A R.Dctermination of water soluble carbohydrates in grass[J].Journal of the Science of Food and Agriculture，1964，15:395-398.

[6]許慶方.貯藏期和添加綠汁發(fā)酵液對袋裝苜蓿青貯的影響[J].草業(yè)科學，2006，14（2）:129-133.

[7]蔡義民，熊井清雄，廖芷，等.乳酸菌劑對青貯飼料發(fā)酵品質的改善效果[J].中國農業(yè)科學，1995，28（2）:73-82.

[8]司丙文.尖葉胡枝子青貯微生物數量變化及發(fā)酵特性[J].草業(yè)科學，2012，29（1）:650-657.

[9]王林，孫啟忠，張慧杰.苜蓿與玉米混貯質量研究[J].草業(yè)學報，2011，20（4）:202-209.

[10]李向林，張新躍，唐一國，等.日糧中精料和牧草比例對舍飼山羊增重的影響[J].草業(yè)學報，2008，17（2）:43-47.

[11]許慶方，玉柱，李志強，等.苜蓿、玉米青貯飼料有氧穩(wěn)定性研究[J].草地學報，2007，15（6）:519-524.

[12]萬里強，李向林，何峰，等.苜蓿含水量與添加劑組分濃度對青貯效果的影響研究[J].草業(yè)學報，2007，16（2）:40-45.