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        四種中藥對鯽魚的急性毒性試驗

        2015-12-31 12:44:04羅喜東陳鵬飛
        四川畜牧獸醫(yī) 2015年10期
        關(guān)鍵詞:苦楝川楝子土木

        羅喜東,陳鵬飛

        (1.涼山州農(nóng)業(yè)學(xué)校,四川 西昌 615022;2.西南大學(xué)榮昌校區(qū)水產(chǎn)系,重慶 榮昌 402460)

        目前,水產(chǎn)動物疾病大多采用抗生素類化學(xué)藥物控制,但這些化學(xué)藥物在水體中不易降解,易在養(yǎng)殖動物體內(nèi)富集并污染環(huán)境,長期使用甚至?xí)刽~類產(chǎn)生耐藥性或多重耐藥性。相對而言,中草藥是一種天然環(huán)保型綠色藥物,具有高效、毒副作用少、安全性高、殘留少等諸多優(yōu)點(diǎn)。用中草藥代替抗生素防治水產(chǎn)病害是當(dāng)前的發(fā)展趨勢。本試驗測定了貫眾、苦參、川楝子、土木香等4種中藥對鯽魚的急性毒性作用,旨在為開發(fā)利用中草藥防治水生動物原蟲性寄生蟲病提供參考。

        1 材料與方法

        1.1 試驗材料 方正鯽由重慶榮昌梅石壩漁場提供,體重2.0±0.2g,于水族箱內(nèi)暫養(yǎng)l周。貫眾、苦參、川楝子、土木香由重慶市全興藥品連鎖有限公司榮昌分店提供。

        1.2 試驗方法 急性毒性試驗在60cm×30cm×45cm水族箱中進(jìn)行,水深30 cm左右。自來水曝氣24 h,去氯,水中pH值7.0~7.4、溶氧8~12mg/L、氨氮含量≤0.1mg/L、總硬度 6.2(德國度),水溫為 24~25℃。

        中草藥水提液制備:中草藥各取25g,加入10倍蒸餾水浸泡30min,然后加熱至沸騰,控溫使其微沸,煎煮3次,每次30min,合并藥液過濾,將濾液濃縮至25mL,使其終濃度相當(dāng)于原藥1g/mL。裝瓶,高壓滅菌,置4℃冰箱保存?zhèn)溆肹1]。

        按照急性毒性實驗方法先進(jìn)行預(yù)試驗[2],確定魚全活和全死的藥物劑量范圍,再按照等對數(shù)間距法加設(shè)兩個濃度梯度進(jìn)行正式試驗(試驗設(shè)計見表1),每組3個平行,隨機(jī)放入30尾試驗魚。試驗時間96 h,試驗期間及時撈出死魚,每24h更換藥液1次,以保證試驗期間藥液濃度不變。試驗過程中觀察和記錄試驗魚中毒時的癥狀及死亡情況。試驗結(jié)束后,采用改良寇氏法計算各藥在24、48、96h的半致死質(zhì)量濃度(LC50)和安全質(zhì)量濃度(SC)。

        1.3 數(shù)據(jù)處理[3-4]

        式中,XM為最大質(zhì)量濃度的對數(shù)值;d為相鄰兩組的質(zhì)量濃度對數(shù)差;n為組數(shù);ΣPi為死亡率之和;LC50為各時刻半致死濃度。

        2 試驗結(jié)果

        2.1 試驗魚中毒癥狀 正式試驗中,各個藥物濃度組在施藥后的一定時間內(nèi)出現(xiàn)下列中毒癥狀:魚浮出水面,靠池邊浮頭、急游、亂竄,張口呼吸,時而快速游動,欲跳出水面,時而緩慢;頭部向上,魚體在水中呈垂直狀態(tài);打轉(zhuǎn),失去平衡;或集群,或相互碰撞;不斷地張口擴(kuò)張鰓,前期呼吸加快,后期呼吸變慢;對外界刺激不敏感,甚至無反應(yīng),活力變差。隨著時間的延長,平衡能力和運(yùn)動能力漸弱,最后躺臥于池底,鰓蓋張開,呼吸衰竭而死,黏液增多。

        2.2 急性毒性試驗結(jié)果 從表1可以看出,4種中藥的毒性大小依次為貫眾>川楝子>苦參>土木香。24h的 LC50分別為 2.254、10.239、36.363、47.539 g/L;48 h 的 LC50分別為 1.708、8.133、32.559、42.353 g/L;96 h 的 LC50分別為 1.340、5.983、29.161、36.028g/L。

        表1 急性毒性試驗統(tǒng)計表

        貫眾、川楝子、苦參、土木香的安全質(zhì)量濃度(SC)分別為 0.294、1.539、8.575、10.076g/L。貫眾的安全濃度最低,與苦參和土木香的差異顯著(P<0.05),與川楝子的差異不顯著(P>0.05);土木香的安全濃度最高,但與苦參的差異不顯著(P>0.05)。

        3 分析

        本試驗所選4種中草藥均有殺蟲的功效,可作為水產(chǎn)養(yǎng)殖中的殺蟲藥物使用。中草藥含有的生物堿類先作用于寄生蟲的中樞神經(jīng)系統(tǒng),使之興奮產(chǎn)生驚厥,進(jìn)而作用于呼吸肌神經(jīng),使寄生蟲死于呼吸抑制,如苦參堿[5]、檳榔堿[6]等。川楝、苦楝等含有的四環(huán)三萜類成分能驅(qū)殺寄生蟲,其中含有的川楝素和苦楝油等對蟲體腸肌有興奮作用,使蟲體活動加強(qiáng),出現(xiàn)間歇性劇烈收縮,造成能量供應(yīng)不足,附著力減弱而被驅(qū)除[7]。

        4 結(jié)論

        本試驗結(jié)合生產(chǎn)實踐,采用水提液浸泡法提取中藥的有效成分。結(jié)果顯示,4種中藥的毒性大小依次為貫眾>川楝子>苦參>土木香,貫眾的安全濃度最低(0.294g/L),土木香的安全濃度最高(10.076g/L)。石宏武等[8]選用苦參、苦楝、貫眾等6種中草藥制成水提液對鯽魚進(jìn)行注射試驗,結(jié)果得出苦參、苦楝、貫眾的安全濃度分別為0.567、0.275、0.026g/L,與本試驗的安全濃度有明顯差別,這可能與給藥方法不同有關(guān)。本試驗提示,在鯽魚養(yǎng)殖中使用上述中藥時應(yīng)在其安全質(zhì)量濃度范圍內(nèi)給藥。

        [1] 梁利國,邴旭文,張曉君,等.18種中草藥煎液對溫和氣單胞菌的抑、殺菌效果[J].淡水漁業(yè),2010,40(1):66-69.

        [2] 周永欣,章宗涉.水生生物毒性試驗方法[M].北京:農(nóng)業(yè)出版社,1989:19.

        [3] 丁淑荃,萬全,范文張,等.5種藥物對花魚骨魚苗的急性毒性試驗[J].淡水漁業(yè),2006,36(5):48-51.

        [4] 李春濤,李超,張其中,等.中藥免疫增強(qiáng)劑II對草魚的毒性試驗[J].中國獸醫(yī)雜志,2011,47(11):70-71.

        [5] 徐漢虹.殺蟲植物與植物性殺蟲劑[M].北京:中國農(nóng)業(yè)出版社,2000:78.

        [6] 劉松巖,向方華,鄒忠生.常見中草藥的藥理作用及其在魚病防治中的應(yīng)用[J].信陽農(nóng)業(yè)高等??茖W(xué)校學(xué)報,2001,11(3):24-25.

        [7] 郭玉娟,陳學(xué)年.我國中草藥防治水生經(jīng)濟(jì)動物病害研究進(jìn)展[J].水產(chǎn)科學(xué),2005,25(4):34-38.

        [8] 石宏武,汪彥愔,吳靜.6種中草藥對鯉斜管蟲和指狀擬舟蟲的體外殺滅試驗[J].齊魯漁業(yè),2008,25(10):4-8.

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