羅喜東，陳鵬飛

（1.涼山州農(nóng)業(yè)學(xué)校，四川 西昌 615022；2.西南大學(xué)榮昌校區(qū)水產(chǎn)系，重慶 榮昌 402460）

目前，水產(chǎn)動物疾病大多采用抗生素類化學(xué)藥物控制，但這些化學(xué)藥物在水體中不易降解，易在養(yǎng)殖動物體內(nèi)富集并污染環(huán)境，長期使用甚至?xí)刽~類產(chǎn)生耐藥性或多重耐藥性。相對而言，中草藥是一種天然環(huán)保型綠色藥物，具有高效、毒副作用少、安全性高、殘留少等諸多優(yōu)點(diǎn)。用中草藥代替抗生素防治水產(chǎn)病害是當(dāng)前的發(fā)展趨勢。本試驗測定了貫眾、苦參、川楝子、土木香等4種中藥對鯽魚的急性毒性作用，旨在為開發(fā)利用中草藥防治水生動物原蟲性寄生蟲病提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料 方正鯽由重慶榮昌梅石壩漁場提供，體重2.0±0.2g，于水族箱內(nèi)暫養(yǎng)l周。貫眾、苦參、川楝子、土木香由重慶市全興藥品連鎖有限公司榮昌分店提供。

1.2 試驗方法 急性毒性試驗在60cm×30cm×45cm水族箱中進(jìn)行，水深30 cm左右。自來水曝氣24 h，去氯，水中pH值7.0～7.4、溶氧8～12mg/L、氨氮含量≤0.1mg/L、總硬度 6.2（德國度），水溫為 24～25℃。

中草藥水提液制備：中草藥各取25g，加入10倍蒸餾水浸泡30min，然后加熱至沸騰，控溫使其微沸，煎煮3次，每次30min，合并藥液過濾，將濾液濃縮至25mL，使其終濃度相當(dāng)于原藥1g/mL。裝瓶，高壓滅菌，置4℃冰箱保存?zhèn)溆肹1]。

按照急性毒性實驗方法先進(jìn)行預(yù)試驗[2]，確定魚全活和全死的藥物劑量范圍，再按照等對數(shù)間距法加設(shè)兩個濃度梯度進(jìn)行正式試驗（試驗設(shè)計見表1），每組3個平行，隨機(jī)放入30尾試驗魚。試驗時間96 h，試驗期間及時撈出死魚，每24h更換藥液1次，以保證試驗期間藥液濃度不變。試驗過程中觀察和記錄試驗魚中毒時的癥狀及死亡情況。試驗結(jié)束后，采用改良寇氏法計算各藥在24、48、96h的半致死質(zhì)量濃度（LC50）和安全質(zhì)量濃度（SC）。

1.3 數(shù)據(jù)處理[3-4]

式中，XM為最大質(zhì)量濃度的對數(shù)值；d為相鄰兩組的質(zhì)量濃度對數(shù)差；n為組數(shù)；ΣPi為死亡率之和；LC50為各時刻半致死濃度。

2 試驗結(jié)果

2.1 試驗魚中毒癥狀 正式試驗中，各個藥物濃度組在施藥后的一定時間內(nèi)出現(xiàn)下列中毒癥狀：魚浮出水面，靠池邊浮頭、急游、亂竄，張口呼吸，時而快速游動，欲跳出水面，時而緩慢；頭部向上，魚體在水中呈垂直狀態(tài)；打轉(zhuǎn)，失去平衡；或集群，或相互碰撞；不斷地張口擴(kuò)張鰓，前期呼吸加快，后期呼吸變慢；對外界刺激不敏感，甚至無反應(yīng)，活力變差。隨著時間的延長，平衡能力和運(yùn)動能力漸弱，最后躺臥于池底，鰓蓋張開，呼吸衰竭而死，黏液增多。

2.2 急性毒性試驗結(jié)果 從表1可以看出，4種中藥的毒性大小依次為貫眾＞川楝子＞苦參＞土木香。24h的 LC50分別為 2.254、10.239、36.363、47.539 g/L；48 h 的 LC50分別為 1.708、8.133、32.559、42.353 g/L；96 h 的 LC50分別為 1.340、5.983、29.161、36.028g/L。

表1 急性毒性試驗統(tǒng)計表

貫眾、川楝子、苦參、土木香的安全質(zhì)量濃度（SC）分別為 0.294、1.539、8.575、10.076g/L。貫眾的安全濃度最低，與苦參和土木香的差異顯著（P＜0.05），與川楝子的差異不顯著（P＞0.05）；土木香的安全濃度最高，但與苦參的差異不顯著（P＞0.05）。

3 分析

本試驗所選4種中草藥均有殺蟲的功效，可作為水產(chǎn)養(yǎng)殖中的殺蟲藥物使用。中草藥含有的生物堿類先作用于寄生蟲的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，使之興奮產(chǎn)生驚厥，進(jìn)而作用于呼吸肌神經(jīng)，使寄生蟲死于呼吸抑制，如苦參堿[5]、檳榔堿[6]等。川楝、苦楝等含有的四環(huán)三萜類成分能驅(qū)殺寄生蟲，其中含有的川楝素和苦楝油等對蟲體腸肌有興奮作用，使蟲體活動加強(qiáng)，出現(xiàn)間歇性劇烈收縮，造成能量供應(yīng)不足，附著力減弱而被驅(qū)除[7]。

4 結(jié)論

本試驗結(jié)合生產(chǎn)實踐，采用水提液浸泡法提取中藥的有效成分。結(jié)果顯示，4種中藥的毒性大小依次為貫眾＞川楝子＞苦參＞土木香，貫眾的安全濃度最低（0.294g/L），土木香的安全濃度最高（10.076g/L）。石宏武等[8]選用苦參、苦楝、貫眾等6種中草藥制成水提液對鯽魚進(jìn)行注射試驗，結(jié)果得出苦參、苦楝、貫眾的安全濃度分別為0.567、0.275、0.026g/L，與本試驗的安全濃度有明顯差別，這可能與給藥方法不同有關(guān)。本試驗提示，在鯽魚養(yǎng)殖中使用上述中藥時應(yīng)在其安全質(zhì)量濃度范圍內(nèi)給藥。

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[8] 石宏武，汪彥愔，吳靜.6種中草藥對鯉斜管蟲和指狀擬舟蟲的體外殺滅試驗[J].齊魯漁業(yè)，2008，25（10）：4-8.