宋振輝 皮渤淼 王喬姬 李 春 李旋珠

云南中醫(yī)學院，云南昆明 650500

高尿酸血癥是一種常見和多發(fā)疾病。血液中尿酸飽和度為420μmol/L（7mg/dL），當人體在37℃時，血尿酸長時間持續(xù)超過這個飽和點，則稱之為高尿酸血癥［1］。近年來，高尿酸血癥患病率正逐年升高，且發(fā)病年齡趨向年輕化［2］，已成為威脅人類健康的重要疾?。?］。血尿酸水平升高與脂代謝紊亂、糖尿病及心血管疾病等密切相關(guān)。高尿酸血癥患者中有10％～20％發(fā)展為痛風，而降低血尿酸水平也是治療痛風的的關(guān)鍵因素之一，因此高尿酸血癥在臨床上更受關(guān)注。

強胰降糖膠囊是臨床應(yīng)用近20年的院內(nèi)制劑，2014年獲得發(fā)明專利1項。該制劑由黃芪、葛根、丹參、三七等純中藥制成。課題組在前期臨床和實驗研究中發(fā)現(xiàn)該制劑具有降低血糖、血尿酸、調(diào)節(jié)血脂和防治糖尿病腎病等作用［4-8］?；谇捌诘难芯砍晒?，本實驗主要觀察該制劑對高尿酸血癥鵪鶉的影響，為臨床新應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動物

迪法克種鵪鶉，雄性，體重100～120g，5周齡，由昆明市艾尼莫實驗動物中心提供。

1.2 藥物

強胰降糖膠囊由三七、葛根、丹參、黃芪等組成。每粒（0.5g）含生藥1.3g，由課題組提供，臨用時除去膠囊殼，用蒸餾水配成3個濃度：高劑量1.0g/mL，中劑量0.5g/mL，低劑量0.25g/mL。陽性藥選擇別嘌醇片（重慶青陽藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，生產(chǎn)批號140602），給藥濃度為26mg/kg［9］。酵母干粉（英國OXOID公司生產(chǎn)，批號：1214989-02），臨用時用蒸餾水配制成1g/mL溶液。

表1 強胰降糖膠囊對高尿酸血癥鵪鶉血清中尿酸水平的影響（±s，μmol/L，n=10）

表1 強胰降糖膠囊對高尿酸血癥鵪鶉血清中尿酸水平的影響（±s，μmol/L，n=10）

注：與空白組對比，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組對比，△P＜0.05，△△P＜0.01；各組間比較：模型組與空白組，1周P=0.019，2周P=0.011，3周P=0.016，4周P=0.013；別嘌醇組與模型組，1周P=0.032，2周P=0.027，3周P=0.031，4周P=0.019；QYJT低劑量組與模型組，1周P=0.055，2周P=0.039，3周P=0.047，4周P=0.041；QYJT中劑量組與模型組，1周P=0.021；2周P=0.012；3周P=0.025；4周P=0.017；QYJT高劑量組與模型組，1周P=0.030，2周P=0.034，3周P=0.041，4周P=0.039

組別 劑量（g/kg） 1周 2周 3周 4周空白對照組 0 233.53±98.67 245.79±99.32 237.55±96.30 244.51±95.85模型組 0 340.33±115.24* 389.25±123.52* 388.59±122.68* 360.90±129.53*別嘌醇組 0.026 213.59±84.15△ 256.68±83.47△ 279.89±93.68△ 269.41±99.72△QYJT低劑量組 0.7 289.49±104.95 271.17±89.38△ 309.31±101.73△ 303.72±99.25△QYJT中劑量組 1.4 240.27±80.20△ 235.68±78.66△ 265.17±80.31△ 280.62±93.71△QYJT高劑量組 2.8 299.33±106.42 298.14±93.44△ 295.34±85.75△ 300.88±103.21△F 2.295 3.100 2.415 2.358 P 0.023 0.035 0.024 0.19

1.3 試劑

尿酸（UA）臨床診斷試劑盒，批號140581；甘油三酯（TG）臨床診斷試劑盒，批號146951，均為中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)；黃嘌呤氧化酶（XOD）測試盒（南京建成生物工程研究所生產(chǎn)，生產(chǎn)批號20150327）。

1.4 儀器

Infinite M200 PRO酶標儀，瑞士Tecan公司生產(chǎn)；LG10-2.4A高速離心機，北京醫(yī)用離心機廠生產(chǎn)；HH-6數(shù)顯恒溫水浴鍋，常州國華電器有限公司生產(chǎn)；UV-4802H型紫外分光光度計，尤尼柯（上海）儀器有限公司；JJ1000型電子天平，常熟市雙杰測試儀器廠。

1.5 方法

1.5.1 動物分組 迪法克種雄性鵪鶉，根據(jù)體重大小分層后，隨機分為6組：空白對照組、模型組、陽性藥組、強胰降糖膠囊（QYJT）低、中、高劑量組，每組10只。除空白對照組正常飲食外，其余各組早上灌胃酵母干粉15g/（kg·d），晚上模型組灌胃等體積的蒸餾水，用藥組分別給予別嘌醇26mg/（kg·d）和強胰降糖膠囊低［0.7g/（kg·d）臨床2倍等效劑量］、中［1.4g/（kg·d）臨床4倍等效劑量］、高［2.8g/（kg·d）臨床8倍等效劑量］劑量灌胃。

1.5.2 檢測指標 每周監(jiān)測鵪鶉體重變化，灌胃給藥第7、14、21天，動物禁食12h，于翼根靜脈取血1mL左右，3000r/min離心10min，分離血清，用酶比色法測定血清中UA和TG含量，給藥第28天鵪鶉斷頭取血處死，同上測定血清中UA和TG含量，取肝臟組織，0～4℃環(huán)境下手工勻漿，4℃，3000r/min離心10min，取上清液按照試劑盒說明書方法用紫外分光光度計檢測肝臟中黃嘌呤氧化酶（XOD）活性。

1.6 統(tǒng)計學處理

2 結(jié)果

2.1 強胰降糖膠囊對高尿酸血癥鵪鶉血清中尿酸水平的影響

強胰降糖膠囊各劑量組均具有降低鵪鶉血尿酸的作用，其中以中劑量效果最佳，高劑量組降尿酸效果較其他兩個劑量組穩(wěn)定，見表1。

2.2 強胰降糖膠囊對高尿酸血癥鵪鶉血清中甘油三酯水平的影響

強胰降糖膠囊各劑量組均呈現(xiàn)降甘油三酯作用，以中劑量效果為最佳，見表2。

2.3 強胰降糖膠囊對高尿酸血癥鵪鶉肝臟黃嘌呤氧化酶活性的影響

各個劑量組均具有明顯的抑制鵪鶉肝臟XOD活性的作用，且其降低的程度與降尿酸的程度基本保持抑制，說明該制劑降尿酸作用與其抑制XOD活性存在著密切的聯(lián)系，見表3。

2.4 各組鵪鶉實驗過程中體重變化

整個實驗過程中，各組鵪鶉的體重無明顯變化，見表4。

表2 強胰降糖膠囊對高尿酸血癥鵪鶉血清中甘油三酯水平的影響（±s，mmol/L，n=10）

表2 強胰降糖膠囊對高尿酸血癥鵪鶉血清中甘油三酯水平的影響（±s，mmol/L，n=10）

注：與空白組對比，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組對比，△P＜0.05，△△P＜0.01。各組間比較：模型組與空白組，1周P=0.025，2周P=0.033，3周P=0.042，4周P=0.037；別嘌醇組與模型組，1周P=0.029，2周P=0.042，3周P=0.067，4周P=0.035；QYJT低劑量組與模型組，1周P=0.048，2周P=0.047，3周P=0.035，4周P=0.013；QYJT中劑量組與模型組，1周P=0.047，2周P=0.035，3周P=0.029，4周P=0.023；QYJT高劑量組與模型組，1周P=0.035，2周P=0.039，3周P=0.025，4周P=0.037

組別 劑量（g/kg） 1周 2周 3周 4周空白對照組 0 0.69±0.15 0.77±0.14 0.71±0.12 0.69±0.13模型組 0 0.88±0.23* 0.92±0.12* 0.86±0.18* 0.85±0.12*別嘌醇組 0.026 0.70±0.13 0.78±0.15△ 0.76±0.10 0.61±0.15△QYJT低劑量組 0.7 0.77±0.14 0.71±0.18△ 0.68±0.10△ 0.53±0.16△QYJT中劑量組 1.4 0.68±0.13△ 0.68±0.12△ 0.70±0.11△ 0.60±0.10△QYJT高劑量組 2.8 0.72±0.16 0.81±0.23 0.78±0.13 0.67±0.11△F 3.21 2.414 1.717 1.556 P 0.016 0.037 0.035 0.026

表3 強胰降糖膠囊對高尿酸血癥鵪鶉肝臟黃嘌呤氧化酶活性的影響（±s，U/gprot，n=10）

表3 強胰降糖膠囊對高尿酸血癥鵪鶉肝臟黃嘌呤氧化酶活性的影響（±s，U/gprot，n=10）

注：與空白組對比，*P＜0.05，**P＜0.01；與模型組對比，△P＜0.05，△△P＜0.01。各組間比較，模型與空白組：P=0.018；別嘌醇組與模型組：P=0.011；QYJT低劑量組與模型組：P=0.026；QYJT中劑量組與模型組：P=0.021；QYJT高劑量組與模型組：P=0.035

組別 劑量（g/kg） 黃嘌呤氧化酶活性空白對照組 0 7.38±2.64模型組 0 9.56±2.38*別嘌醇組 0.026 6.77±1.59△QYJT低劑量組 0.7 8.05±1.90△QYJT中劑量組 1.4 7.21±1.57△QYJT高劑量組 2.8 7.41±2.27△F 1.672 P 0.016

表4 各組鵪鶉體重的變化（±s，g/只，n=10）

表4 各組鵪鶉體重的變化（±s，g/只，n=10）

注：各組間比較無統(tǒng)計學意義

組別 劑量（g/kg） 0周 1周 2周 3周 4周空白對照組 0 118.3±7.69 120.4±6.06 119.8±7.93 123.2±7.38 122.8±7.90模型組 0 117.8±9.15 120.1±9.32 119.1±8.23 123.6±6.88 123.8±8.46別嘌醇組 0.026 119.2±6.46 119.1±5.74 121.0±6.38 122.2±5.39 123.2±6.37 QYJT低劑量組 0.7 120.4±5.27 119.7±5.74 122.5±5.44 125.8±4.76 125.2±2.53 QYJT中劑量組 1.4 117.4±8.78 117.0±9.09 118.2±9.01 121.78±8.02 123.78±9.37 QYJT高劑量組 2.8 119.3±7.62 118.4±6.35 120.0±5.58 122.6±4.90 124.31±5.83

3 討論

高尿酸血癥與痛風是由嘌呤代謝紊亂引起的疾病，尿酸結(jié)晶沉積到軟組織引起的病變稱為痛風［10］。實驗研究表明，高血糖（GLU）、高尿酸血（UA）與高甘油三酯（TG）存在著非常密切的聯(lián)系，血清Glu、UA、TG三者呈正相關(guān)關(guān)系，一個指標的紊亂會引起其他指標的紊亂［11］。高尿酸血癥可作用于血管和晶體形成，進而引發(fā)炎癥和血管內(nèi)皮損傷；能夠提高腎素活性，增加血小板黏附促進血栓形成；高水平尿酸可促進低密度脂蛋白膽固醇的氧化和加速脂質(zhì)的氧化反應(yīng)；另外高尿酸血癥還可以引發(fā)代謝紊亂［12］，因此，高尿酸血癥常常伴有高血壓、糖尿病、高血脂、冠心病、肥胖等疾病的發(fā)生。高尿酸血癥對人類健康存在極大的危害，因而日益受到學術(shù)界的關(guān)注。

大多數(shù)哺乳動物肝臟中存在尿酸酶，可將尿酸分解為更易溶解的尿囊素排出體外，而靈長類在進化過程中產(chǎn)生該酶類的基因發(fā)生突變，而缺少尿酸酶［13］。禽類與人的嘌呤代謝途徑相似，因缺乏尿酸酶都以尿酸為最終代謝產(chǎn)物排出體外，因此選擇禽類作為高尿酸血癥模型更能確切的反應(yīng)體內(nèi)嘌呤代謝水平［14］，故本實驗選擇鵪鶉作為實驗對象。

本實驗研究了強胰降糖膠囊對高尿酸血癥伴高甘油三酯血癥鵪鶉模型的作用，結(jié)果顯示強胰降糖膠囊能明顯降低鵪鶉血清中UA和TG含量，通過3個不同劑量的比較，3個劑量的強胰降糖膠囊均具有明顯的效果，其中以中劑量降尿酸效果最佳。通過對鵪鶉肝臟中黃嘌呤氧化酶活性的測定發(fā)現(xiàn)強胰降糖膠囊3個劑量均能夠明顯降低鵪鶉肝臟組織中黃嘌呤氧化酶活性，而XOD是尿酸生成過程中重要的酶類，XOD能夠連續(xù)氧化黃嘌呤、次黃嘌呤生成尿酸［15-16］。而強胰降糖膠囊能降低XOD活性，且各個劑量組降低XOD活性的程度與降低血清中尿酸的程度基本保持一致，說明其降尿酸的作用機制與其降低XOD活性存在必然的聯(lián)系。強胰降糖膠囊為復方制劑，其降尿酸和降低甘油三酯應(yīng)該是多靶點、多方面的，其降尿酸和降脂的機制值得進一步研究。

［1］陳灝珠.實用內(nèi)科學［M］.第12版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2005：2602-2609.

［2］楊雅靜，鮑龍，崔月.高尿酸血癥發(fā)病機制及治療研究［J］.中外健康文摘，2011，8（7）：142-144.

［3］拜淑萍.高尿酸血癥的現(xiàn)代研究進展［J］.中外健康文摘，2012，9（9）：88-91.

［4］李璇珠，曹東，李文軍，等.強胰降糖膠囊對高脂食料與鏈脲佐菌素誘導的大鼠糖尿病模型血脂的影響［J］.中國中醫(yī)藥科學，2005，12（2）：101.

［5］李旋珠，熊洪艷，林青.強胰降糖膠囊對糖尿病模型大鼠的影響［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2005，25（12）：1109-1111.

［6］吳榮，李旋珠，王階.強胰降糖膠囊治療2型糖尿病臨床觀察［J］.中華中醫(yī)藥學刊，2008，26（8）：1749-1751.

［7］熊凡.強胰降糖膠囊敢于實驗性糖尿病及其早期腎病的部分藥效學研究［D］.昆明：云南中醫(yī)學院，2013：35.

［8］李春.強胰降糖膠囊對2型糖尿病大鼠胰腺和腎臟保護作用的研究［D］.昆明：云南中醫(yī)學院，2015：29-32.

［9］趙恒立.六味痛風飲防治痛風性關(guān)節(jié)炎作用機理的實驗研究［D］.濟南：山東中醫(yī)藥大學，2009：26-28.

［10］趙占正，肖靜，劉長鎖.苯溴馬龍與別嘌醇治療高尿酸血癥/痛風的療效觀察［J］.中國誤診學雜志志，2005，5（2）：281-282.

［11］孫悅，張冰.菊苣提取物對高甘油三酯、高尿酸并高血糖大鼠影響的實驗研究［J］.中華中醫(yī)藥雜志，2005，20（6）：379-380.

［12］楊瑾，于曉玲.高尿酸血癥與冠心病之間的關(guān)系［J］.醫(yī)學與哲學，2014，35（2B）：53-55.

［13］Wu XW，Muzny DM，Lee CC，et al.Two indenpendent mutational events in the loss of urate oxidase during hominoid evolution［J］.Mol Evol J，1992，34：78-84.

［14］陳光亮，徐叔云.高尿酸血癥動物模型研究進展［J］.中國藥理學通報，2004，20（4）：369-373.

［15］孫悅，張冰.黃嘌呤氧化酶活性在高尿酸血癥動物模型中的變化［J］.北京中醫(yī)藥大學學報，2004，27（6）：38-40.

［16］陳代國.高尿酸血癥合并高血壓的藥物選擇探討［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)生，2014，52（35）：154-156.