李巖，王彤

1.吉林省白城市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林白城137000；2.吉林省白城市實(shí)驗(yàn)高級中學(xué)，吉林白城137000

感冒丸中鹽酸麻黃堿含量的測定

李巖1，王彤2

1.吉林省白城市食品藥品檢驗(yàn)所，吉林白城137000；2.吉林省白城市實(shí)驗(yàn)高級中學(xué)，吉林白城137000

目的建立感冒丸中鹽酸麻黃堿與鹽酸偽麻黃堿的分離HPLC測定方法。方法用Agilent SB C 18(4.6 mm×250 mm 5μm)色譜柱，以乙腈-0.1%磷酸溶液(10:90)為流動相；檢測波長為207 nm。流速1.0 mL/min；柱溫：30℃進(jìn)樣量10μl，考查方法結(jié)論。結(jié)果鹽酸麻黃堿與鹽酸偽庥黃堿以乙腈-0.1%磷酸溶液(10:90)為流動相得到有效的分離，鹽酸麻黃堿含量測定的線性范圍0.0250-0.502 μg范圍內(nèi)峰面積與濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，（r=0.9999），精密度RSD=0.8%平均加樣回收率為99.84%，RSD=0.1%。結(jié)論本次試驗(yàn)方法分離度效果好、快捷、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性強(qiáng)、拖尾因子小，可為感冒丸質(zhì)量的評價提供較有效的手段。

感冒丸；HPLC；鹽酸麻黃堿；鹽酸偽麻黃堿

感冒丸由麻黃、紫蘇葉、苦杏仁、薄荷、前胡、金銀花、石膏、菊花、黃芩、甘草、桔梗、桑葉12味藥組成，功效：清熱止咳，宣肺平喘。用于感冒，頭痛發(fā)熱，鼻流清涕，咳嗽聲重，氣逆喘急[1]。麻黃為本方的君藥，所以用鹽酸麻黃堿的含量測定對該藥方的質(zhì)量進(jìn)行有效控制?！吨袊嗣窆埠蛧幍洹?010版（一部第一增補(bǔ)本）[2]使用了HPLC法來測定鹽酸麻黃堿的含量，方法快捷、準(zhǔn)確、專屬性強(qiáng)、靈敏度高、重復(fù)性強(qiáng)、所以本研究參照該方法來測定鹽酸麻黃堿的含量。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 試藥

對照品：鹽酸麻黃堿(中國藥品生物制品檢定所：批號：0714-20140123，供含量測定用)；感冒丸(甘肅河西制藥有限責(zé)任公司140207；140218；140222)；乙腈為色譜純；水為雙蒸水；膦酸等其他試劑均為分析純。氫氧化鈉：氯化鈉：

1.2 儀器

上海樂基CQX-25超聲波清洗器，塞多利斯BP110S電子天平，塞多利斯BT25S電子天平美國安捷倫1260液相。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 色譜條件及系統(tǒng)是陽性試驗(yàn)

色譜柱：Agilent SB C 18(4.6 mm×250 mm 5 μm)以乙腈-0.1%磷酸溶液(10:90)為流動相；檢測波長為207 nm。流速1.0 mL/min；柱溫：30℃進(jìn)樣量10 μL[2]。

2.2 供試品溶液的制備

取重量差異項(xiàng)下大蜜丸，剪碎，取約2 g，精密稱定，置1000 mL圓底燒瓶中，加20%氫氧化鈉溶液120 mL，搖勻，加氯化鈉7.5 g，超聲處理(功率320W，頻率40kHz)10min，蒸餾，用預(yù)先盛有0.5mol/L鹽酸溶液5 mL的100 mL量瓶收集蒸餾液近95 mL，放冷，加水至刻度，搖勻，超聲處理(功率320W，頻率40kHz)10min，濾過，取續(xù)濾液，即得[3]。

2.3 對照品溶液的制備

取鹽酸麻黃堿對照品10 mg，精密稱定，置100 mL容量瓶中，加流動相使溶解并稀釋至刻度，精密量取10 mL置100 mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，制成每1 mL含10 μg的溶液，即得。

2.4 陰性樣品溶液的制備

按照成品的制劑方法制備缺少麻黃藥材的陰性樣品制劑，取2 g參照“2.2”供試品溶液的制備方法制得陰性樣品的溶液。

3 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

按照上述色譜條件按測定鹽酸麻黃堿對照品溶液、鹽酸偽麻黃堿對照品溶液、感冒丸樣品溶液、陰性樣品溶液，測定圖譜顯示（圖1）樣品溶液中的鹽酸麻黃堿、鹽酸偽麻黃堿能夠完全分離，分離度為2.2，陰性樣品沒有檢測到鹽酸麻黃堿及鹽酸偽麻黃堿。結(jié)果表明，樣品與其他組分分離完整，陰性樣品無干擾。

圖1 對照表、樣品、陰性對照色譜圖

4 線性關(guān)系考察

精密吸取鹽酸麻黃堿對照品溶液1，2，4，10，20 μL，注入液相色譜儀，按照上述方法測定，以峰面積（y）為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量（x）為橫坐標(biāo)，鹽酸麻黃堿的回歸方程：y=25.621x-12.436（r=0.9999）結(jié)果表明鹽酸麻黃堿進(jìn)樣量在0.0250～0.502 μg范圍內(nèi)均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一批(批號140218)樣品溶液，在0、2、4、6、8、10、12、24 h分別進(jìn)樣10 μL，測定鹽酸麻黃堿峰面積，結(jié)果RSD為1.4%，證明樣品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

6 精密度實(shí)驗(yàn)

精密吸取同一批(批號140222)樣品溶液，連續(xù)進(jìn)樣8次，測定峰面積積分值。結(jié)果顯示鹽酸麻黃堿峰面積的RSD為0.8%。證明精密度良好。

7 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)

取同一批(批號為140207)樣品8份，每份約2 g，精密稱定，分別按2.2項(xiàng)下依法操作，測定含量，鹽酸麻黃堿的平均含量為0.59 mg/g，RSD為1.1%。表面該方法重復(fù)性良好。

8 加樣回收率實(shí)驗(yàn)

取已知含量同一批(批號為140207)樣品8份，每份取2 g，置1000 mL圓底燒瓶中，分別加入鹽酸麻黃堿對照品溶液0.5021 mg/mL各10 mL。見表1。

表1 加樣回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

9 討論

①我們在采用HPLC測定鹽酸麻黃堿含量參考了以下幾種流動相方法[4-17]，乙腈-0.02mol/L膦酸二氫鉀溶液（膦酸調(diào)節(jié)ph值至2.5）（24：76）；乙腈-0.035mol/L膦酸溶液（8：92）；乙腈-0.1%磷酸溶液(10:90)。在檢查中發(fā)現(xiàn)乙腈-0.1%磷酸溶液(10:90)能夠?qū)悠分宣}酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿充分分離，而且出峰時間適宜，峰形良好，分離效果較理想。

②鹽酸麻黃堿的提取方法比較多[4-17]，例如，水蒸汽蒸餾法，直接超聲提取法，加熱回流法等，由于鹽酸麻黃堿具有揮發(fā)性，能夠隨著水蒸汽蒸餾出來，所以在實(shí)驗(yàn)室的條件下，選擇水蒸汽蒸餾的方法提取樣品，此方法操作比較簡單，而且樣品雜質(zhì)相對較少，具有較好的控制性。

③本實(shí)驗(yàn)建立的HPLC方法適用于鹽酸麻黃堿的含量測定，色譜線性關(guān)系良好，分離度較高，穩(wěn)定性，精密度，重復(fù)性及加樣回收率均符合實(shí)驗(yàn)要求?？蔀楦忻巴栀|(zhì)量的評價提供較有效的手段。

[1]衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)《中藥成方制劑》[S]第二冊，1998：276

[2]《中國藥典》一部增補(bǔ)本第一部修訂品種[S].238

[3]《中國藥典》一部[S]2010版：300、301、157.

[4]《中西新藥轉(zhuǎn)正》15冊五味子丸[S]；109.

[5]《國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編內(nèi)科肺系(二)分冊》[S].259.

[6]王朋義．高效液相法測定艾芩止咳顆粒中鹽酸麻黃堿的含量[J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2012（1)：19，56.

[7]田杰．HPLC測定麻杏止咳片中鹽酸麻黃堿的含量[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2013（21)：123.

[8]王玉巧．復(fù)方止咳顆粒中鹽酸麻黃堿含量的測定[J].武漢工程大學(xué)學(xué)報(bào)，2014（33)：1.

[9]鄧志堅(jiān)．HPLC測定小兒化痰止咳顆粒中鹽酸麻黃堿的含量[J].廣西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013（13)：50.

[10]王朋義,張海嗚.HPLC測定艾芩止咳顆粒中鹽酸麻黃堿的含量[J].中國中醫(yī)藥信息雜志,2012,19(1):56-57.

[11]董自波,李超.HPLC法測定三拗片中鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量[J].西北藥學(xué)雜志,2012,26(5):329-330.

[12]呂林峰.銀黃清肺膠囊中鹽酸麻黃堿含量測定方法的改進(jìn)[J].西北藥學(xué)雜志,2012,8(26).

[13]楊秀珍.HPLC測定肺寧合劑鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿含量[J].中國中醫(yī)藥信息,2012：12.

[14]張淼.HPLC法測定麻黃浸膏中鹽酸麻黃堿與鹽酸偽麻黃堿的含量[J].中國藥事,2012（26）：6.

[15]蔣俊春.麻桂鼻炎片中鹽酸麻黃堿的含量測定[J].藥品鑒定,2012（6）：19-17.

[16]陳冠男.祛痹消痛膏中鹽酸麻黃堿和鹽酸偽麻黃堿的含量測定[J].中醫(yī)中藥,2012（10）：33.

[17]劉倩.HPLC法同時測定麻杏二陳湯煮散劑中鹽酸麻黃堿和苦杏仁苷的含量[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2013（19）：1.

The Determination of Ephedrine Hydrochloride Content in Cold Pill

LI Yan1，WANG Tong2
1.Baicheng city of jilin province food and drug inspection office,baicheng 137000 China；2.Baicheng city of jilin province experimental high school,baicheng 137000 China

ObjectiveTo establish a cold pill in the separation of ephedrine hydrochloride and pseudoephedrine hydrochloride by HPLC method.MethodsTo use Agilent SB 18 C(4.6 mm×250 mm 5 microns)chromatographic column,with acetonitrile(10:90-0.1%phosphoric acid solution as mobile phase;Detection wavelength of 207 nm.The flow rate of 1.0 ml/min;Column temperature 30℃in sample quantity 10 mu l,examination method.ResultsEphedrine hydrochloride and hydrochloric acid pseudo ho huang alkali with acetonitrile(10:90-0.1%phosphoric acid solution as mobile phase to get effective separation,linear range for the determination of ephedrine hydrochloride content within the scope of 0.0250 to 0.502 mu g peak area and concentration show good linear relationship,(r=0.9999),precision RSD=0.8%,on average,the recovery was 99.84%,RSD=99.84%.ConclusionThe test method for the isolation effect is good,fast,accurate,and strong specificity,high sensitivity,strong repeatability,trailing factor is small,can provide more effective for cold pill for quality evaluation.

Cold pill;HPLC;Ephedrine hydrochloride；Pseudoephedrine hydrochloride.

R286

A

1672-5654（2015）03（c）-0067-02

2015-01-12）

李巖（1981-），男，吉林白城人，大學(xué)本科，主管藥師，從事10多年的藥品檢驗(yàn)工作，現(xiàn)主要從事藥品檢驗(yàn)及綜合性規(guī)范的制定工作。