結(jié)腸腺癌患者術(shù)后組織中白細胞分化抗原147、突變型P53和原癌基因C-MYC的表達及意義

劉寧繆巍馬曉明王曉龍

(青海大學附屬醫(yī)院胃腸外科，青海西寧810001)

摘要〔〕目的檢測結(jié)腸腺癌術(shù)后組織中白細胞分化抗原(CD)147、突變型P53基因(TP53)和原癌基因C-MYC表達特征及其臨床意義。方法96例結(jié)腸腺癌作為觀察組，70例管狀腺瘤作為對照組，70例距腫物邊緣>5 cm癌旁的結(jié)腸黏膜組織作為正常對照組。免疫組化檢測CD147、TP53和C-MYC的表達。結(jié)果3組CD147、TP53和C-MYC表達陽性率差別顯著。觀察組CD147、TP53和C-MYC表達陽性率與腫瘤肌層浸潤深度和Ki67表達密切相關(guān)，CD147和TP53表達陽性率與腫瘤分化程度和脈管內(nèi)瘤栓相關(guān)，CD147表達陽性率與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。相關(guān)性分析顯示觀察組CD147和TP53表達呈正相關(guān)性。結(jié)論CD147、TP53和C-MYC在結(jié)腸腺癌術(shù)后組織中高表達，不僅促進腫瘤的發(fā)生，同時可以促進腫瘤進展。結(jié)腸腺癌中CD147和TP53表達可能具有協(xié)同作用。

關(guān)鍵詞〔〕結(jié)腸腺癌；白細胞分化抗原(CD147)；TP53；C-MYC；免疫組化

中圖分類號〔〕R735.3〔文獻標識碼〕A〔

第一作者：劉寧(1977-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事胃腸道腫瘤研究。

腫瘤進展時細胞異型增生明顯，并能侵及黏膜肌層和肌層，形成浸潤和轉(zhuǎn)移，機體基因調(diào)控的蛋白表達失調(diào)是重要促進因素〔1,2〕。白細胞分化抗原(CD)147是一種跨膜糖蛋白，高表達在腫瘤細胞中，不僅能促進腫瘤細胞增殖〔3〕，還能高效介導細胞間黏附失調(diào)、促進細胞外基質(zhì)降解〔4〕。突變型P53基因(TP53)是機體重要的轉(zhuǎn)錄因子，具有調(diào)控細胞周期、誘導細胞凋亡的生理功效〔5,6〕。原癌基因C-MYC是癌基因的一種，屬于信號傳導通路的下游基因，它的表達產(chǎn)物位于癌細胞內(nèi)，能與DNA結(jié)合，具有直接轉(zhuǎn)錄活性的作用，促進腫瘤發(fā)生〔7,8〕。本研究針對結(jié)腸腺癌中CD147、TP53和C-MYC的表達進行檢測，觀察其臨床表達特征及相關(guān)性。

1資料與方法

1.1一般資料2012年8月至2013年8月我科行手術(shù)治療的結(jié)腸腺癌患者臨床資料及術(shù)后蠟塊，均行病理學檢查，確診嚴格按WHO的診斷標準。共96例，男51例，女45例；年齡51～84歲，平均(62.6±5.5)歲。70例結(jié)腸管狀腺瘤組織作為對照組，男35例，女35例；年齡55～80歲，平均(61.2±5.3)歲。70例距腫物邊緣>5cm癌旁的結(jié)腸黏膜組織作為正常對照組，男35例，女35例；年齡53～76歲，平均(60.8±5.7)歲。三組年齡、性別無明顯差異。

1.2CD147、TP53和C-MYC的檢測措施CD147、TP53和C-MYC為濃縮液，進行預(yù)實驗(不同配比濃度)，選擇最理想的染色效果用于正式實驗。采用免疫組化二步法檢測CD147、TP53和C-MYC的表達、應(yīng)用DAB常規(guī)顯色劑。

1.3CD147、TP53和C-MYC結(jié)果判讀CD147和C-MYC以細胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色為陽性，P53以細胞核出現(xiàn)棕黃色為陽性，計數(shù)10個高倍視野(×400倍)，取陽性率的平均值，以<25%定為陰性，≥25%定為陽性。

1.4統(tǒng)計學方法應(yīng)用SAS9.2統(tǒng)計軟件進行χ2檢驗和線性相關(guān)性分析。

2結(jié)果

2.1三組CD147、TP53和C-MYC表達的比較正常對照組、對照組和觀察組CD147、TP53和C-MYC表達陽性率有升高趨勢(P<0.000 1)。見表1。

表1　三組 CD147、 TP53和 C- MYC陽性表達比較〔n(%)〕

2.2CD147、TP53和C-MYC在觀察組不同臨床特征中的表達觀察組中CD147、TP53和C-MYC表達的陽性率與腫瘤的浸潤深度和Ki67的表達密切相關(guān)，CD147和TP53表達的陽性率與腫瘤的分化程度和脈管內(nèi)瘤栓相關(guān)，CD147表達的陽性率淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。見表2。

2.3觀察組CD147、TP53和C-MYC的相關(guān)性CD147和TP53之間呈正相關(guān)性(r=0.43，P=0.041 8)，而其他指標間均未見明顯相關(guān)性(P>0.05)。

表2　觀察組 CD147、 TP53和 C- MYC在不同臨床

3討論

結(jié)腸腺癌形成與家族性息肉和腺瘤惡性轉(zhuǎn)變有關(guān)。病理學特征是伴有異型腺體的形成和分化，同時向肌層形成浸潤性生長〔9〕。部分患者可以分化較低或形成黏液腺癌的改變，此時患者的預(yù)后差，生存時間短〔10〕。腫瘤在進展中表現(xiàn)為侵襲性，同時有較高的增殖指數(shù)〔11〕。野生型P53基因在正常機體中可以檢測到，其為抑癌基因，但是當P53突變后，其表現(xiàn)為癌基因，即TP53，其調(diào)節(jié)途徑較多，如對于細胞增殖的促進作用、對凋亡的阻滯作用等〔12〕。也有觀點則認為TP53由于自身突變喪失了對于突變細胞的抑制作用，繼而獲得了癌基因的功能，從而促使腫瘤的發(fā)生〔13,14〕。C-MYC是細胞由G0/G1期進入S期的開關(guān)，其高表達可以引起細胞周期的改變，細胞增殖活躍，同時失去分化潛能，加速腫瘤進展〔15〕。C-MYC高表達需要激活，其途徑有外源序列的插入激活、染色體移位、基因擴增和點突變的方式〔16〕。CD147的相對分子量為58kD，可以與其他跨膜蛋白結(jié)合形成復(fù)合物〔17,18〕。也有觀點認為CD147的胞內(nèi)段在不同種屬中保守程度較高，具有細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導的作用〔19,20〕。CD147在腫瘤中表達常較高，可能對促進腫瘤的轉(zhuǎn)移有一定作用〔21〕。

本實驗結(jié)果提示CD147、TP53和C-MYC三種蛋白高表達參與腫瘤的異型增生和惡性轉(zhuǎn)變。CD147、TP53和C-MYC高表達對腫瘤的浸潤性生長有重要促進作用，使腫瘤組織對周圍組織的浸潤能力增高，同時CD147、TP53和C-MYC可以有效促進細胞的失控性增殖，使細胞具有的分裂能力增強，腫瘤性增生活躍，細胞體積增大。CD147和TP53高表達使腫瘤的分化能力減弱，由于分化是細胞由幼稚到成熟的轉(zhuǎn)變過程，因此CD147和TP53高表達使腫瘤細胞的此種轉(zhuǎn)變受到明顯阻滯。同時CD147和TP53高表達可能引起腫瘤細胞侵犯脈管，不僅使腫瘤細胞的瘤栓增加，同時使腫瘤的侵襲和沿脈管的轉(zhuǎn)移能力增強。CD147是促進腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的重要蛋白，推測CD147也可能對腫瘤間質(zhì)的淋巴管生成有一定作用。由于以上臨床指標均為判斷腫瘤生物學行為和預(yù)后的重要指標，因此CD147、TP53和C-MYC在一定程度上對判斷腫瘤的生物行為有重要價值。CD147和TP53可能具有正向協(xié)同作用。CD147和TP53雖然作用通路不在同一條上，但是二者均對細胞增殖有明顯作用，即CD147和TP53的協(xié)同作用可能與對細胞增殖的中介調(diào)節(jié)有關(guān)。CD147和P53的作用通路可能更復(fù)雜，尚需要更多實驗證實〔22,23〕。而本實驗并未發(fā)現(xiàn)C-MYC與其他兩種蛋白的協(xié)同性，因此C-MYC是獨立通路起促癌作用的。

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〔2014-05-13修回〕

(編輯苑云杰)