HA、HYAL1在預(yù)測(cè)非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌的復(fù)發(fā)和肌層浸潤(rùn)中的作用

邢東亮宋東奎1康鄭軍酒濤

(鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院泌尿外科，河南鄭州450052)

摘要〔〕目的分析透明質(zhì)酸(HA)及透明質(zhì)酸酶(HYAL1)對(duì)非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌復(fù)發(fā)及肌層浸潤(rùn)的預(yù)測(cè)作用。方法將60例非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌患者3年后的隨訪資料進(jìn)行分析總結(jié)，根據(jù)3年后復(fù)發(fā)情況將患者分為22例未見腫瘤復(fù)發(fā)的未復(fù)發(fā)組及38例出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)的復(fù)發(fā)組，并將復(fù)發(fā)組患者分為未見肌層浸潤(rùn)的16例未浸潤(rùn)組及22例發(fā)生肌層浸潤(rùn)的浸潤(rùn)組。對(duì)比未復(fù)發(fā)組與復(fù)發(fā)組、未浸潤(rùn)組與浸潤(rùn)組HA及HYAL1陽(yáng)性率差異，并分析HA及HYAL1陽(yáng)性率對(duì)膀胱癌復(fù)發(fā)及肌層浸潤(rùn)的診斷價(jià)值。結(jié)果復(fù)發(fā)組HA及HYAL1陽(yáng)性率分別為68.42%及76.32%，明顯高于未復(fù)發(fā)組40.91%及50.00%(P<0.05)；浸潤(rùn)組HA及HYAL1陽(yáng)性率分別為81.82%及90.91%，則明顯高于未浸潤(rùn)組50.00%及56.25%(P<0.05)；HA及HYAL1陽(yáng)性率對(duì)膀胱癌復(fù)發(fā)無(wú)預(yù)測(cè)價(jià)值(P<0.05)，但是對(duì)復(fù)發(fā)后肌層浸潤(rùn)存在預(yù)測(cè)價(jià)值(P<0.05)。結(jié)論HA及HYAL1陽(yáng)性率對(duì)于預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)后出現(xiàn)肌層浸潤(rùn)均有著顯著的價(jià)值，可作為預(yù)測(cè)膀胱癌復(fù)發(fā)后出現(xiàn)肌層浸潤(rùn)的觀察指標(biāo)。

關(guān)鍵詞〔〕透明質(zhì)酸；透明質(zhì)酸酶；膀胱癌

中圖分類號(hào)〔〕R739〔文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼〕A〔

基金項(xiàng)目：國(guó)家自然科學(xué)

通訊作者：宋東奎(1963-)，男，主任醫(yī)師，博士，博士生導(dǎo)師，主要從事尿液修飾核苷作為膀胱腫瘤標(biāo)志物篩選鑒定及分子機(jī)制研究。

1鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科

第一作者：邢東亮(1976-)，男，博士，主要從事泌尿生殖系腫瘤研究。

膀胱癌是臨床上泌尿外科常見的惡性腫瘤，大多數(shù)為非肌層浸潤(rùn)性腫瘤，膀胱腫瘤一旦進(jìn)展為肌層浸潤(rùn)腫瘤，預(yù)后不良〔1〕。目前對(duì)于膀胱癌的治療多采用手術(shù)切除的方法，但是膀胱癌術(shù)后容易復(fù)發(fā)，復(fù)發(fā)后容易呈現(xiàn)更高的惡性程度或者侵入肌層，目前臨床上還沒有很好的預(yù)測(cè)指標(biāo)〔2〕。透明質(zhì)酸(HA)及透明質(zhì)酸酶(HYAL1)在膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展中具有重要的作用。本文擬探討HA、HYAL1作為膀胱癌復(fù)發(fā)和肌層浸潤(rùn)預(yù)測(cè)指標(biāo)的可能性。

1資料與方法

1.1一般資料將60例于2009年1月至2011年5月間在我院診斷的非肌層浸潤(rùn)性膀胱癌患者作為觀察對(duì)象，所有患者均符合本研究的入選及排除標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)3年后復(fù)發(fā)情況將患者分為22例未見腫瘤復(fù)發(fā)的未復(fù)發(fā)組及38例出現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)的復(fù)發(fā)組，并將復(fù)發(fā)組患者分為未見肌層浸潤(rùn)的16例未浸潤(rùn)組及22例發(fā)生肌層浸潤(rùn)的浸潤(rùn)組。未復(fù)發(fā)組22例，年齡33～69歲，平均(51.26±11.67)歲；復(fù)發(fā)組38例，年齡32～67歲，平均(51.17±11.66)歲，兩組年齡比較未見無(wú)顯著差異，具有可比性。未浸潤(rùn)組16例，年齡33～67歲，平均(51.36±11.21)歲；浸潤(rùn)組22例，年齡32～68歲，平均(51.27±11.22)歲，兩組間性別及年齡比較同樣未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具可比性。

入選標(biāo)準(zhǔn)：①所有患者均經(jīng)膀胱鏡檢查及病理學(xué)檢查明確診斷為膀胱癌；②具有完整的3年隨訪資料，并且于診斷3年后同意入院復(fù)診；③復(fù)診時(shí)簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他部位惡性腫瘤者；②臨床資料不完整；③存在嚴(yán)重可導(dǎo)致肝腎功能不全及心功能不全疾病者；④未簽署知情同意書。

1.2檢測(cè)方法取所有受檢者的膀胱癌活檢組織，用生理鹽水清洗干凈后，浸泡于4%多聚甲醛溶液中，石蠟包埋,制備蠟塊，厚度5μm，于42℃水浴展片，貼于載玻片上，65℃烤片2h后，經(jīng)過二甲苯Ⅰ10min，二甲苯Ⅱ10min，100%乙醇Ⅰ5min，100%乙醇Ⅱ5min，90%乙醇5min，85%乙醇5min，75%乙醇5min，梯度透明，然后枸櫞酸鈉緩沖液(10mmol/L，pH6.0)中高壓鍋內(nèi)煮沸，上氣3min后緩慢冷卻進(jìn)行抗原修復(fù)，然后使用SP免疫組化試劑盒(福州邁新生物有限公司)進(jìn)行染色?？谷薍A、HYAL-1多克隆抗體購(gòu)自北京中山金橋生物技術(shù)有限公司， 染色過程嚴(yán)格按照SP免疫組化試劑盒說明書，結(jié)果判定：光鏡下見組織切片細(xì)胞質(zhì)、胞膜出現(xiàn)棕黃色或黃色顆粒者為陽(yáng)性細(xì)胞。

1.3觀察指標(biāo)及方法所有患者均于確診3年后再次入院復(fù)診，行膀胱鏡檢查并鏡下膀胱腫瘤活檢及膀胱黏膜隨機(jī)活檢，對(duì)留取的活檢組織進(jìn)行HA及HYAL1檢查。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS19.0軟件行χ2檢驗(yàn)及ROC分析。

2結(jié)果

復(fù)發(fā)組HA及HYAL1陽(yáng)性率分別為68.42%及76.32%，明顯高于未復(fù)發(fā)組40.91%及50.00%(P<0.05)；浸潤(rùn)組HA及HYAL1陽(yáng)性率分別為81.82%及90.91%，明顯高于未浸潤(rùn)組50.00%及56.25%(P<0.05)。HA及HYAL1陽(yáng)性率對(duì)膀胱癌復(fù)發(fā)無(wú)預(yù)測(cè)價(jià)值(P>0.05)，但是對(duì)復(fù)發(fā)后肌層浸潤(rùn)存在預(yù)測(cè)價(jià)值(P<0.05)，見表1。

表1　 HA及 HYAL1對(duì)膀胱癌復(fù)發(fā)及肌層浸潤(rùn)的診斷價(jià)值

3討論

目前臨床上還沒有有效的復(fù)發(fā)和肌層浸潤(rùn)的預(yù)測(cè)因子。 很多研究顯示血管生成和基質(zhì)的破壞在腫瘤的轉(zhuǎn)移過程起關(guān)鍵作用，可能原因是腫瘤細(xì)胞在轉(zhuǎn)移過程中必須喪失黏附能力從而穿透周圍的細(xì)胞基質(zhì)，從而在體內(nèi)遠(yuǎn)處形成轉(zhuǎn)移灶，并且腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的方向與數(shù)量受血管新生的影響〔3〕。

HA可以通過抑制新生血管的生成而抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)轉(zhuǎn)移〔4〕。腫瘤細(xì)胞自身合成大量的HA,或者腫瘤細(xì)胞誘導(dǎo)周圍的間質(zhì)細(xì)胞合成HA,從而導(dǎo)致發(fā)生腫瘤浸潤(rùn)的患者HA的陽(yáng)性率高〔5〕。HA可能通過以下機(jī)制促進(jìn)腫瘤的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移：①促進(jìn)腫瘤細(xì)胞非停泊性生長(zhǎng)；②促進(jìn)膠原纖維和糖蛋白的結(jié)構(gòu)變形，有利于腫瘤細(xì)胞的移動(dòng)；③與腫瘤細(xì)胞膜表面的CD44結(jié)合，減少免疫細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的攻擊；④HA與其受體CD44結(jié)合，促進(jìn)CD44相關(guān)的酪氨酸激酶磷酸化，使細(xì)胞骨架發(fā)生改變，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的移動(dòng)〔6〕。

HYAL1位于抑癌基因3p21上，是HA的特異性降解酶，可以將HA分解為多個(gè)寡聚糖，小分子的HA可以促進(jìn)血管形成，有利于腫瘤的轉(zhuǎn)移和浸潤(rùn)〔7〕。在很多腫瘤中具有抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，但是本研究結(jié)果與以前的報(bào)道不符〔8〕，可能原因是不同組織中的HYAL1對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)具有不同的作用，在泌尿系統(tǒng)腫瘤中HYAL1具有促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的作用，可能機(jī)制是：①將HA分解為小分子寡聚糖促進(jìn)新生血管的形成，不僅為腫瘤細(xì)胞的快速增殖及物質(zhì)代謝提供物質(zhì)基礎(chǔ)，而且為腫瘤細(xì)胞進(jìn)入血液循環(huán)提供通路；②促進(jìn)腫瘤細(xì)胞通過G1期進(jìn)入S期進(jìn)行增殖，提高腫瘤細(xì)胞的增殖比率。本研究顯示HA及HYAL1通過促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移參與腫瘤細(xì)胞的基層浸潤(rùn)。

4參考文獻(xiàn)

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〔2014-03-21修回〕

(編輯李相軍)