PIK3CA、TIEG1在老年卵巢癌組織中的表達(dá)及意義

盧建軍宋建東張林燕

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科,內(nèi)蒙古呼和浩特010050)

摘要〔〕目的比較老年卵巢癌、癌旁組織和正常卵巢組織的磷脂酰肌醇3磷激酶催化亞基α基因(PIK3CA)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-1誘導(dǎo)的早期反應(yīng)基因(TIEG1)表達(dá)差異及其與卵巢癌病理特征間的相關(guān)性。方法手術(shù)治療的40例老年宮頸癌患者手術(shù)過程中均取適量卵巢癌組織、癌旁組織和正常卵巢組織，行石蠟切片。比較三種組織的PIK3CA、TIEG1表達(dá)差異及其與卵巢癌病理特征間的相關(guān)性。結(jié)果三種組織的PIK3CA陽性表達(dá)有顯著性差異(χ2=50.76，P<0.01)，卵巢癌陽性表達(dá)最高，正常卵巢組織最低；三種組織的TIEG1陽性表達(dá)有顯著性差異(χ2=26.27，P<0.01)，其中卵巢癌最低，正常卵巢最高。卵巢癌組織的PIK3CA陽性表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)(χ2=10.72，P=0.005)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(χ2=4.191，P=0.041)均有顯著的相關(guān)性；TIEG1陽性表達(dá)率與組織學(xué)分級(jí)(χ2=9.462，P=0.009)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(χ2=9.724，P=0.002)也有顯著的相關(guān)性。結(jié)論P(yáng)IK3CA、TIEG1在卵巢癌中的表達(dá)與正常卵巢組織有顯著性差異，兩者與卵巢癌的發(fā)展、轉(zhuǎn)移有一定相關(guān)性。

關(guān)鍵詞〔〕PIK3CA；TIEG1；卵巢癌

中圖分類號(hào)〔〕R737〔

基金項(xiàng)目：內(nèi)蒙古衛(wèi)生廳2010年醫(yī)療衛(wèi)生科研計(jì)劃項(xiàng)目任務(wù)書項(xiàng)目(No.2010124)

通訊作者：宋建東(1967-)，女，副主任醫(yī)師，主要從事老年卵巢腫瘤的臨床研究。

第一作者：盧建軍(1974-)，女，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事老年卵巢腫瘤的臨床研究。

目前，普遍認(rèn)為在結(jié)腸癌、乳腺癌、腦癌、肺癌等各種實(shí)體腫瘤的發(fā)生發(fā)展中磷脂酰肌醇3磷激酶催化亞基α基因(PIK3CA)有著重要的作用〔1〕。但在卵巢癌的發(fā)生發(fā)展中PIK3CA基因的作用不顯著，尚不清楚卵巢癌中PIK3CA表達(dá)有無增強(qiáng)，與腫瘤病理的分型具有何種關(guān)系〔2〕。目前，有學(xué)者從生物學(xué)的角度認(rèn)為轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)-1誘導(dǎo)的早期反應(yīng)基因(TIEG)1相似于TGF-1，可誘導(dǎo)凋亡、對(duì)細(xì)胞增殖過程進(jìn)行有效抑制，是一種TGF-β早期誘導(dǎo)基因，其表達(dá)水平的下降與多種腫瘤(如胰腺癌、胃癌、乳腺癌等)發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)〔3〕。本研究觀察老年卵巢癌患者行手術(shù)切除的卵巢癌、癌旁組織和正常卵巢組織的PIK3CA、TIEG1表達(dá)差異，并分析其表達(dá)與卵巢癌病理特征間的相關(guān)性。

1資料與方法

1.1一般資料2010年2月至2013年5月我院接受手術(shù)治療的40例老年宮頸癌患者，年齡60～80周歲，年齡(68.1±7.1)歲,體質(zhì)指數(shù)(BMI)22.2 kg/m2,空腹血糖(10.1±2.5)mmol/L,總膽固醇6.25 mmol/L,甘油三酯1.64 mmol/L,腫瘤發(fā)現(xiàn)時(shí)間(2.1±.1)個(gè)月,手術(shù)時(shí)間120.2 min,術(shù)中出血量259.8 ml。每例患者手術(shù)過程中均取適量卵巢癌組織、癌旁組織和正常卵巢組織，行石蠟切片。

1.2研究方法組織切片常規(guī)脫蠟至水，對(duì)內(nèi)源性過氧化物酶消除活性，在室溫下孵育和抗原修復(fù)(AR)，然后將稀釋(1∶100)過的一抗和棄一抗依次注入，用pH為7.2～7.4的PBS(0.01 mol/L)沖洗3次(3 min/次)，接著注入二抗生物素標(biāo)記(經(jīng)1%的BSA-PBS 1∶100稀釋)，37℃下行30 min孵育，最后注入辣根酶(經(jīng)PBS 1∶100稀釋)對(duì)鏈霉卵白素進(jìn)行標(biāo)記，同樣37℃下行30 min孵育，共3次、5 min/次，PBS緩沖液沖洗。實(shí)施SP法，DAB顯色劑和蘇木素再次染色。依據(jù)SP試劑盒的說明書嚴(yán)格進(jìn)行操作，陽性對(duì)照為PIK3CA、TIEG1的陽性切片；陰性對(duì)照為緩沖液PBS。觀察正常的卵巢組織、卵巢癌以及癌旁組織的切片(由2名病理醫(yī)師完成)。隨機(jī)從每張切片中獲取高倍視野5個(gè)，每個(gè)需進(jìn)行不低于100個(gè)細(xì)胞數(shù)的觀察。依據(jù)鏡下染色的陽性細(xì)胞數(shù)的百分比：陽性細(xì)胞比例<30%(+)，陽性細(xì)胞比例30%～60%()，陽性細(xì)胞比例>60%()，無陽性細(xì)胞(-)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)。

2結(jié)果

2.1卵巢癌、癌旁組織及正常卵巢組織的PIK3CA、TIEG1表達(dá)比較卵巢癌、癌旁組織及正常卵巢組織標(biāo)本的PIK3CA陽性表達(dá)有顯著性差異(P<0.01)，卵巢癌陽性表達(dá)最高，正常卵巢組織最低；三種組織的TIEG1陽性表達(dá)有顯著性差異(P<0.01)，其中卵巢癌最低，正常卵巢最高。見表1。

表1　卵巢癌、癌旁組織及正常卵巢組織的

2.2卵巢癌組織PIK3CA、TIEG1陽性表達(dá)與病理特征相關(guān)性卵巢癌組織的PIK3CA、TIEG1陽性表達(dá)與組織學(xué)分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有顯著的相關(guān)性(P<0.05)。見表2。

表2　卵巢癌組織PIK3CA、TIEG1陽性表達(dá)與

3討論

本實(shí)驗(yàn)說明卵巢癌的發(fā)生中PIK3CA過度表達(dá)起著關(guān)鍵性作用〔4〕。在各種病理組織中，pAkt與PIK3CA表達(dá)呈正比例關(guān)系，此提示PI3K/Akt信號(hào)通路的活性受PIK3CA表達(dá)水平的影響，以往的研究顯示PI3K/Akt信號(hào)通路中蛋白PI3Kp110是主要成員〔5〕，因此，PI3Kp110催化活性的加強(qiáng)受PIK3Ca的表達(dá)水平升高影響，磷酸化Akt，最終使PI3K/Akt信號(hào)的傳導(dǎo)通路被激活，促使了卵巢腫瘤的發(fā)生〔6〕。由于Akt過度表達(dá)可以誘導(dǎo)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)，提供了組織轉(zhuǎn)移和侵襲所需的運(yùn)動(dòng)能力，所以pAkt在PI3K/Akt信號(hào)通路中起著調(diào)節(jié)細(xì)胞(細(xì)胞侵襲和運(yùn)動(dòng)、凋亡、增殖和生長(zhǎng))的重要作用〔7〕。卵巢癌的分化程度越低，相應(yīng)的PIK3CA陽性表達(dá)率越高，提示PIK3CA過度表達(dá)影響著癌細(xì)胞的分化程度〔8〕。而卵巢癌發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤組織的PIK3CA陽性表達(dá)率更高，提示PIK3CA與卵巢癌腫瘤組織的轉(zhuǎn)移也有著密切的關(guān)系〔9〕。

最早獲取的TIEG來自于成骨細(xì)胞，TIEG1的羧基末端有鋅指DNA結(jié)合的原件3個(gè)，可對(duì)其他基因啟動(dòng)子內(nèi)的DNA序列(富含GC)進(jìn)行直接調(diào)控，進(jìn)而參與腫瘤的形成和細(xì)胞分化、凋亡、增生的過程〔10〕。大量的研究顯示，TIEG1的過度表達(dá)可促進(jìn)磷酸化Smad2表達(dá)，阻礙Smad7的表達(dá)水平，影響著腫瘤的發(fā)生及發(fā)展〔11〕。有研究認(rèn)為，TIEG1的低表達(dá)密切影響著多種腫瘤(如胰腺癌、胃癌和乳腺癌等)的發(fā)生發(fā)展〔12〕。TIEG1和TGF-1N可聯(lián)合Stathmin啟動(dòng)子DNA的結(jié)合位點(diǎn)，阻礙啟動(dòng)子的活性，進(jìn)而對(duì)Stathmin蛋白(一種胞質(zhì)磷蛋白)進(jìn)行負(fù)性調(diào)節(jié)，從而對(duì)腫瘤增殖起一定的抑制作用〔13〕。本研究結(jié)果也發(fā)現(xiàn)卵巢癌組織中的TIEG1陽性表達(dá)明顯低于癌旁組織和正常卵巢組織，與國(guó)內(nèi)外的相關(guān)研究結(jié)果一致〔14〕。研究還發(fā)現(xiàn)卵巢癌的分化程度越低，其相應(yīng)的TIEG1表達(dá)也越低，提示了TIEG1的表達(dá)對(duì)于腫瘤的分化有著一定的影響，結(jié)果還發(fā)現(xiàn)TIEG1與腫瘤的轉(zhuǎn)移與否也有著一定的相關(guān)性〔15〕。

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〔2013-12-11修回〕

(編輯苑云杰)